国际血涂片复审标准及其实施原则

国际血涂片复审41条规则
10条与WBC报警 15条与CBC参数 2条与网织红细胞 7条与LDC参数（包含绝对值） 7条与仪器报警（包含RBC、PLT）
1 新生儿 首次检测标本 涂片镜检 2 WBC、RBC、HGB、PLT、Ret 超过检测线性 稀释标本重测 3 WBC、PLT低于实验室确认的仪器线性范围 按实验室SOP进行 4 WBC、RBC、HGB、PLT 无结果 A检查标本是否有凝块;
国际血涂片复审标准 及其实施原则
王昌富 湖北荆州 434020
引言
1981年 NCCLS制定 H20P
我国也制定了相应指南
上世纪九十年代， CBC、LDC自动化 检测结果已被广泛 接受
涂片复审会降低血液 实验室的工作效率和 增加劳动强度，费用 较大。
合理、明智地结合效 率、费用和新型仪器 导则，优化患者服务 程序。
4、存在Dohle小体或 中毒性颗粒或空泡变
7、嗜碱粒细胞＞1%
性的粒细胞＞10% 8、有核红细胞≥1%
5、发现血液寄生虫及 9、浆细胞 ≥1%
其它异常细胞。
10、单核细胞＞8%
术语
①涂片镜检(slide review) 指将血涂片进行瑞氏染 色后，用显微镜镜检观察各种血细胞形态,尤其是 CBC自动计数的报警阳性细胞，但无需分类计数；
C.涂片镜检是否有异常形态的红细胞 30 PLT聚集报警 任何计数结果 A.检查标本是否有凝块;B.涂
片镜检估计PLT数;C如PLT仍聚集，按实验室SOP进行 31 PLT报警 除PLT聚集外的PLT和MPV报警 涂片镜检 32 IG报警 首次结果出现阳性报警 涂片镜检 33 IG报警 WBC的Delta值超上限, 有以前确认的阳性报警结
假 阴性
复审率
12.68% 4.50% 23.02%
02. WBC<3.0或>30.0:1.42%; 03. PLT<70或>1000:2.92% 22. 出现IG阳性报警:5.59%; 24. 不典型和/或变异报警:5.34% 25. 出现Blasts阳性报警: 2.09%
镜检2.巨大血小板:1.33%; 镜检3.血小板聚集:1.50%; 镜检11.嗜碱细胞:2.00%;
真阳性11.20% 假阳性18.60% 真阴性67.30% 假阴性2.90%， 即血涂片复审率为29.80%（复审率=真阳性% + 假
阳性%），有2.90%的标本漏检。
讨论
血涂片复审41条国际规则发布的同时， 在该论文中阐明了规则产生的思路和原 理，为各实验室制定血涂片复审规则提 供了理论和和实践依据，具有普遍的指 导和推广意义。
（一）血涂片复审标准的制定原则
1、所用仪器不同，标准也可不同 2、复审范围要涵盖仪器的所有参数 3、在保证筛选质量的基础上，尽量使复审率降低 4、“假阴性”是关键参数。 5、在较低假阴性率的前提下降低假阳性率。
（二）值得注意的的问题
临床医生提出阅片的标本必须镜检，白 血病患者（不论初诊还是复诊）血细胞 分析标本必须镜检。
对于血细胞分析的 每一个参数进行深入 讨论，共同商议提出 83条规则，并在15个 实验室初步验证。
比较血涂片复审与仪器法血细胞分析结果所 触及的规则条例：
如果某条例被涉及而血涂片复审发现异常即为 真阳性，未发现异常即为假阳性；
如果条例未被涉及而血涂片复审发现异常即为 假阴性，未发现异常即为真阴性。
提出根据信息分类，或作筛查，或仔细复审。 建立了自动CDC和DC复审规则的流程 自动化血液学实验室中人工血涂片复审规则优化研
究。 有学者提出了“validate（验证）”概念。
参与机构的人工血涂片复审率
美国病理学家学会问卷调查计划 （ｎ＝263）
类别
平均值
百分位数值（%）
10
25
50
75
镜检阳性的标准(国际协作组)
1、红细胞体积异常和/或不均一性、染色异常＞ 1+以上，特征性红细胞改变＞5%以上，或发现 有核红细胞及经红细胞包涵物等。
2、发现原始细胞或早幼粒细胞。 3、幼稚细胞（中幼粒+晚幼粒；幼淋；幼单等）
＞1%。 4、杆状核粒细胞＞10%并出现幼稚粒细胞 5、异常淋巴细胞＞1% 6、发现血液寄生虫及其它异常细胞。
9 HGB（g/L）首次结果<70或>其年龄和性别参考范围上限20 1.涂片镜 检；2. 确认标本是否符合要求
10 MCV (fl) 24h内标本的首次结果<75或>105(成人) 涂片镜检 11 MCV (fl) 24小时以上的成人标本>105 A.涂片镜检观察大红细胞相
关变化; B. 如无大红细胞相关变化，要求重送新鲜血标本;C.如无新鲜 血标本，报告中注明 12 MCV 24h内标本的Delta值超限的任何结果 确认标本是否符合要求 13 MCHC (g/L) 参考范围上限20 检查标本是否有脂血、溶血、RBC凝 集及球形红细胞 14 MCHC (g/L) <300，同时，MCV正常或增高 寻找可能因静脉输液污 染或其他标本原因 15 RDW-CV (%) 首次结果>22 涂片镜检
16 无DC结果或DC结果不全 人工分类和涂片镜检 17 Neut# (109/L) 首次结果<1.0或>20.0 涂片镜检 18 Lym# (109/L) 首次结果>5.0(成人)或>7.0(<12岁）涂片
镜检 19 Mono# (109/L) 首次结果>1.5(成人)或>3.0(<12岁) 涂片
90
涂片镜检
11.1
0.8
3.2
9.1 16.0 23.6
人工分类
17.6
3.2
7.8
14.7 25.0 35.8
血涂片复审 28.7
9.9
18.5 26.7 39.1 50.0
国内，目前对仪器法血细胞分析结果 实际镜检率在0～15%
研究方法
Berend Houwen在2002年春天邀请了来自6 个国家17个实验室共20位专家举行了一次研 讨会。
5.59%； 21.除PLT聚集外的PLT和MPV报警占
5.09%; 22.出现IG阳性报警:5.59%; 24.不典型和/或变异报警:5.34%
镜检2.巨大血小板:0.50% 镜检3.血小板聚集:1.33% 镜检11.嗜碱细胞:1.67%；
1、某血细胞分析仪血涂片复审规则调整后验证
假 阳性
阳性报警 涂片镜检 25 怀疑性报警 首次儿童结果出现阳性报警 涂片镜检 26 WBC结果不可靠报警 阳性报警 A.确认标本是否符合要
求并重测标本;B如出现同样报警提示，检查仪器;C.如需要, 进行人工分类 27 RBC碎片 阳性报警 涂片镜检 28 双形RBC 首次结果出现阳性报警 涂片镜检
29 难溶性RBC 阳性报警 A.检查WBC直方/散点图;B.根据实 验室SOP证实Ret计数是否正确
②人工分类(manual differential) 指将血涂片进行 瑞氏染色后,用显微镜进行人工分类100或200个有 核细胞,并计算各类有核细胞所占百分率。
实验结果
样本总数：13298
研究时间：2002-2005
发表论文：自动化全血细胞计数和白细胞分群分
析后行为的建议规则 Barnes PW, McFadden SL, Machin SJ etal.The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential b Hematol.2005,11:83.
警结果 按实验室SOP进行 39 原始细胞报警 WBC的Delta值超上限, 有以前确认的阳性报警结果
涂片镜检 40 NRBC报警 阳性报 A.涂片镜检; B.如发现NRBC，计数NRBC，重
新计算WBC结果 41 Ret 散点/直方图异常 A.检查仪器状态是否正常;B如吸样有问题，
重测标本; C.如结果维持不变，涂片镜检
对于仪器法定量分析的项目是否适合以 镜检“验证” ？
观察者的技术水平的不同和涂片中细胞 分布的差异。
（三）案例 1、某血细胞分析仪血涂片复审规则初次验证
假 阳性
假 阴性
复审率
24.94% 3.84% 37.03%
2.WBC<4.0或>30.0占 5.50%； 16.Ret#首次结果>0.10占8.92%； 20.任何计数结果伴PLT聚集报警占
果 涂片镜检 34 左移报警 阳性报警 按实验室SOP进行
35 不典型和/或变异Lym 首次结果出现阳性报警 涂片镜检 36 不典型和/或变异Lym WBC的Delta值超上限, 有以前确认的阳性
报警结果 涂片镜检 37 原始细胞报警 首次结果出现阳性报警 涂片镜检 38原始细胞报警 3-7日内WBC的Delta值通过, 有以前确认的阳性报
镜检 20 Eos# (109/L) 首次结果>2.0 涂片镜检 21 Baso# (109/L) 首次结果>0.5 涂片镜检 22 NRBC# 首次出现任何结果 涂片镜检
23 Ret# (109/L) 首次结果>0.10 涂片镜检 24 怀疑性报警(IG/Band报警提示除外4) 首次成人结果出现
B.重测标本;C.如结果维持不变，用替代方法计数 5 WBC（109/L）首次结果<4.0或>30.0 涂片镜检 6 WBC（109/L） 3天内Delta值超限3,并<4.0或>30.0 涂片镜检 7 PLT（109/L）首次结果<100或>1000 涂片镜检 8 PLT（109/L）Delta值超限的任何结果 涂片镜检
镜检阳性的标准(国内专家组)
1、红细胞体积异常和 1、原始细胞≥1%
/或不均一性、染色异 2、早幼/中幼/幼稚≥1%
常＞30%，特征性红 3、晚幼粒2%。
细胞改变＞5%以上 4、杆状核粒细胞＞5%
2、大血小板＞15% 5、异常淋巴细胞＞5%
3、见到血小板聚集 6、嗜酸粒细胞＞5%
未成熟粒细胞示警 .WBC<3.0 PLT<80
假 阴性 1.95%
复审率
29.3510% 单核细胞：>12%
3、调整仪器阈值
3 5
4 6
Complexity (NC)
Size
2、某血细胞分析仪血涂片复审规则初次验证
假 阳性
17.75%
未成熟粒细胞示警 .WBC<4.0 PLT<100
假 阴性 15.36%
复审率
30.97%
镜检嗜碱细胞：>1% 镜检嗜酸细胞：>5% 单核细胞：>8%
2、某血细胞分析仪血涂片复审规则调整后验证
假 阳性
12.81%