胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD28表达的临床意义

胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD28表达的临床意义
姜爱华
【摘要】目的探讨胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)CD28表达的临床意义.方法选取濮阳市人民医院收治的58例胃癌手术患者,其中未出现淋巴结转移26例,出现淋巴结转移32例,切除胃癌组织及切缘组织.检测并比较肿瘤组织及切缘组织、是否淋巴结转移患者CD8+CD28-、CD8-CD28+、CD8+CD28+水平.结果肿瘤组织与切缘组织CD8+CD28-水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤组织CD8-CD28+、CD8+CD28+水平低于切缘组织,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移与淋巴结未转移患者CD8+CD28-水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);淋巴结未转移患者CD8-CD28+、CD8+CD28+水平高于淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05).结论当胃癌患者肿瘤发生扩散、转移时,肿瘤浸润淋巴细胞CD28、CD8表达水平降低,其水平对评估患者病情、预后具有重要意义.
【期刊名称】《河南医学研究》
【年(卷),期】2018(027)007
【总页数】2页(P1216-1217)
【关键词】胃癌;CD28;肿瘤浸润淋巴细胞
【作者】姜爱华
【作者单位】濮阳市人民医院检验科河南濮阳 457000
【正文语种】中文
【中图分类】R735.2
胃癌是消化道常见的恶性肿瘤之一。

相关统计显示，全世界每年新增胃癌患者约有90万人，占全部新发癌症总数的10%，是继乳腺癌、肺癌、肠癌之后又一威胁人类健康的疾病[1]。

随着临床研究的深入，肿瘤基因、生物靶向、细胞免疫等治疗
备受关注。

肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)属于异质性细胞群体，存在于肿瘤细胞间质中，以T细胞为主。

研究发现，T淋巴细胞侵入肿瘤是机体对抗肿瘤产生免疫应答的表现，而TIL CD28在免疫应答中具有重要作用[2]。

因此本研究选取58例胃癌手术患者，探讨胃癌患者TIL CD28表达的临床意义。

1 资料与方法
1.1 一般资料选取2013年2月至2016年12月濮阳市人民医院收治的58例胃
癌手术患者，均符合《外科学》中胃癌相关诊断标准[3]。

其中男37例，女21例，年龄34～73岁，平均(55.13±8.34)岁，其中淋巴结转移32例，未转移26例；
手术时切除胃癌组织及切缘组织(距离胃癌组织≥1 cm)。

患者均知晓本研究，且签订知情同意书。

1.2 检测方法
1.2.1 标本制备用无菌剪剪去肿瘤及切缘组织周围坏死组织及脂肪后，将剩余组织剪碎，放入RPMI 1640培养基中培养成单个细胞悬浮液，用300目的尼龙网过滤，再用RPMI 1640培养基将细胞浓度调整为5×106个/ml待用。

1.2.2 TIL标记及检测将制备的100 μl单个细胞悬浮液分别倒入两支专用试管中，均加入美国BD公司生产的CD45-PerCP，并向其中一支试管内加入羊抗鼠
IgGγ1γ2-FITC/PE抗体作为对照试管，另一支试管内加入CD28-FITC作为测定试管。

常温下轻轻摇匀两支试管，置于暗处30 min后，加入0.5 ml磷酸盐缓冲液(PBS)，置于机器上用Cell Quest软件检测。

1.3 观察指标检测并比较肿瘤组织及切缘组织中CD8+CD28-、CD8-CD28+、
CD8+CD28+水平。

检测并比较是否出现淋巴结转移患者CD8+CD28-、CD8-CD28+、CD8+CD28+水平。

1.4 统计学分析选用SPSS 20.0软件处理数据，计量资料以表示，进行t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果
2.1 肿瘤组织中CD8及CD28水平肿瘤组织与切缘组织CD8+CD28-水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；肿瘤组织CD8-CD28+、CD8+CD28+水平低于切缘组织，差异有统计学意义(P<0.05)。

见表1。

表1 肿瘤组织及切缘组织中CD8、CD28水平比较组别nCD8-
CD28+CD8+CD28+CD8+CD28-切缘组织588.68±2.877.23±2.7638.42±9.43肿瘤组织
586.12±2.265.53±1.8636.43±8.35t5.3373.8901.203P0.0000.0000.231
2.2 淋巴结转移患者CD8以及CD28水平淋巴结转移与淋巴结未转移患者
CD8+CD28-水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；淋巴结未转移患者CD8-CD28+、CD8+CD28+水平高于淋巴结转移患者，差异有统计学意义(P<0.05)。

见表2。

表2 是否淋巴结转移患者CD8、CD28水平比较组别nCD8-
CD28+CD8+CD28+CD8+CD28-转移325.43±2.434.59±1.5735.12±8.35未转移268.48±2.647.86±2.5337.42±9.43t4.5335.7470.985P0.0000.0000.329
3 讨论
据统计，在我国胃癌发病率占各类恶性肿瘤之首，每年约有17万人死于胃癌，占全部恶性肿瘤病死总人数的25%，胃癌相关研究备受医学界关注[4]。

报道指出，细胞免疫是人体抵抗肿瘤入侵的主要方式，对肿瘤抗原有较强识别能力，能激活免疫T细胞，产生对抗肿瘤的免疫杀伤作用[5]。

T淋巴细胞需T细胞受体识别相容
性复合物分子(第1信号)及抗原递呈细胞(APC)共刺激分子与受体互相结合(第2信号)两个信号同时存在才能被激活。

CD28分子是T细胞活化主要膜分子，能与APC细胞上B7-1及B7-2相互结合，增强第2信号，使T细胞活化、增殖。

CD8+T细胞在免疫过程中起着重要作用。

依据CD28细胞是否表达，CD8+T细
胞分为抑制性T细胞(CD8+CD28-T)及细胞毒T细胞(CD8+CD28+T)，两者分别是淋巴细胞的免疫调节细胞及杀伤效应细胞。

其中CD8+CD28+细胞可释放大量
颗粒酶，作用于肿瘤靶细胞，使其溶解、凋亡。

本研究通过标记肿瘤浸润淋巴细胞，观察CD28表达状况，结果发现切缘组织TIL CD8-CD28+、CD8+CD28+表达水平比肿瘤组织高，肿瘤发生淋巴结转移患者TIL CD8-CD28+、CD8+CD28+表达水平比未发生淋巴结患者低(P<0.05)，说明胃癌患者随着疾病进展，肿瘤发生扩散、转移，CD28、CD8表达水平随之降低，T淋巴细胞免疫活性逐渐衰减。

临床可通过检测CD28、CD8表达水平来评估患者病情。

综上，当胃癌患者肿瘤发生扩散、转移时，肿瘤浸润淋巴细胞CD28、CD8表达
水平降低，检测其水平对评估患者病情、预后具有重要意义。

参考文献
[1] 尹红,罗保平,李春亭.胃癌患者术后细胞免疫功能及血清细胞因子变化分析[J].西南国防医药,2016,26(7):751-753.
[2] 杨希.CD28+、CD86+、CD80+T淋巴细胞及血浆IL-18在ITP患儿中的检测价值[J].中国妇幼保健,2016,31(17):3541-3542.
[3] 陈孝平,汪建平.外科学[M].第8版.北京:人民卫生出版社,2013:364-366.
[4] 张红梅,刘学杰,王婧雅,等.HIF-2、ABCG2、OCT-4与胃癌化疗耐药的关系研究[J].解放军医学杂志,2015,40(10):816-820.
[5] 刘秋莉,刘畅,杨帆,等.肝星状细胞通过诱导产生CD8+ CD28-T淋巴细胞抑制T
细胞增殖[J].中山大学学报,2016,37(6):817-821.。