MCM5在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

MCM5在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义
班媛媛;李道胜;李晓梅;庞宇;叶红
【摘要】目的探讨MCM5在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及与其临床病理特征的关系.方法采用免疫组织化学SP法,检测78例原发性非小细胞肺癌组织、40例正常肺组织中MCM5的表达水平.结果非小细胞肺癌组MCM5阳性率高于正常肺组织组(P＝0.000).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期非小细胞肺癌组织中MCM5阳性率比较,差异有统计学意义(P＝0.031);淋巴结转移者MCM5表达率与无淋巴结转移者比较也有统计学差异(P＝0.015).结论 MCM5可能参与了非小细胞肺癌的发生和发展过程;可能成为判断非小细胞肺癌发生发展和评价预后的有效参考指标之一,对于非小细胞肺癌的早期预测可能具有重要的临床意义.
【期刊名称】《实用癌症杂志》
【年(卷),期】2011(026)004
【总页数】3页(P362-364)
【关键词】非小细胞肺癌;MCM5蛋白;免疫组织化学
【作者】班媛媛;李道胜;李晓梅;庞宇;叶红
【作者单位】271000,泰安市中心医院老年病一科;271000,泰安市中心医院病理科;271000,泰安市中心医院病理科;271000,泰安市中心医院病理科;271000,泰安市中心医院病理科
【正文语种】中文
【中图分类】R734.2
肺癌为当前世界病死率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌所占比例高达85%。

微小染色体维持蛋白(minichromosomemaintenance proteins，MCM)家族，是一组与DNA复制和细胞增生密切相关的蛋白家族，许多研究发现它的mRNA 水平在细胞周期中呈周期性变化，只在增殖细胞中表达，在静止细胞中不表达，而且每个细胞周期只表达一次。

它的检测水平的增高不但标志着恶性细胞的增殖，而且标志着非典型细胞的增生和潜在癌性细胞的增生。

因此，MCM可以作为肿瘤有效标志物的候选因子。

我们应用免疫组化方法，对非小细胞肺癌石蜡包埋组织标本中的MCM5进行检测，观察其在病变组织中的表达，探讨了其与NSCLC临床病理特征的关系。

1 材料与方法
1.1 标本收集
收集泰安市中心医院2008年～2010年收治的、经病理检查确诊的非小细胞肺癌石蜡包埋存档组织78例，其中男性50例，女性28例。

年龄36～80岁。

组织学分类:鳞状细胞癌46例，腺癌32例，其中高分化19例，中分化39例，低分化20例。

78例中无淋巴结转移者29例，有淋巴结转移者49例;根据2002年国际抗癌联盟TNM分期:Ⅰ期20例，Ⅱ期27例，Ⅲ期31例。

所有患者术前均未经放疗及化疗，癌旁正常肺组织标本40例。

1.2 免疫组化法
每一病例蜡块连续切片1张，厚5μm。

MCM5购自北京中杉金桥生物公司，染色均采用免疫组化SP法，用微波修复抗原。

MCM5染色用从生物公司购买的阳性片作为阳性对照，以封闭血清代替一抗作为阴性对照。

1.3 结果判定
MCM5免疫反应阳性产物主要定位于细胞核，阳性物质呈黄色颗粒状，染色强时
可呈棕褐色。

采用Greenspan半定量法［1］对细胞染色强度及阳性细胞百分率
进行评分。

①根据每张切片中细胞染色强度评分:细胞内无染色为0分;浅黄色为1分;棕黄色为2分;棕褐色为3分。

②按组织切片中的阳性染色细胞数占全部肿瘤细胞百分比记分(随机取10个高倍镜视野的平均数):阳性细胞率为0，记0分，＜10%为1分，10% ～50%为2分，＞50%为3分。

③按上述两项指标的分数乘积分为:0分为阴性(－)，1～2分为弱阳性(+)，3～4分为中度阳性(++)，＞4分为强阳性(+++)。

1.4 统计学分析
采用 SPSS15.0统计软件包进行统计学分析。

MCM5蛋白阳性率的分析比较采用
卡方检验和Fisher＇s精确概率检验，以P＜0.05为有统计学意义。

2 结果
2.1 非小细胞肺癌组及正常肺组织组中的MCM5蛋白表达情况(表1)
MCM5蛋白在正常肺组织组和非小细胞肺癌组中阳性率分别为12.50%和59.97%，两组比较有显著性差异(χ2=23.27 ，P=0.000)。

2.2 MCM5表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系(表2)
MCM5阳性表达与NSCLC组织学类型及分化程度无关;淋巴结转移阳性组与阴性
组阳性表达率比较有显著统计学意义(χ2=5.907，P=0.015);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期间比较
有显著统计学意义(χ2=4.657，P=0.031)。

3 讨论
在肿瘤发生过程中，细胞周期调控异常是其内在原因，细胞增殖调控异常与肿瘤的发生关系密切，而肿瘤细胞增殖活性与肿瘤生物学行为更是密切相关，是用于反映肿瘤良恶性及恶性程度的重要指征。

研究发现，MCM蛋白与细胞周期密切相关，是启动细胞DNA复制并调控细胞由G1期进入S期的关键性蛋白，其本质是1种核蛋白复合物。

目前发现在静止/分化细胞中MCM蛋白不表达，而在增殖/肿瘤细
胞中呈高表达，是近年来发现的1种较好地反映细胞增殖活性的新指标。

大量研
究表明［2，3］MCM蛋白能够敏感而特异地反映细胞的增殖状况，在判断肿瘤
的恶性度及评估预后方面有着较重要的意义。

MCM 5是MCM蛋白复合物之一，是1种与细胞增殖密切相关的因子，它的检测可直接反映MCM蛋白的表达水平［4］。

Sirieix等［5］检测食管标本发现在食管癌中呈强阳性表达。

而在大多研
究表明，MCM5与恶性肿瘤的发生、肿瘤细胞的浸润和转移及恶性程度关系密切，可以作为预测恶性肿瘤发生发展和判断预后的生物学指标，为恶性肿瘤的临床治疗提供可靠的理论依据。

国内以往对乳腺癌［6］、食管癌［7］等进行过研究，取
得了一些进展，但对非小细胞肺癌的研究甚少，其检测在非小细胞肺癌中的表达可能具有更重要临床意义。

表1 非小细胞肺癌及正常肺组织中MCM5蛋白表达情况(例，%)组别例数阳性表达阴性表达χ2P非小细胞肺癌组 78 46(59.97)32正常肺组织组 40 5(12.50)35 23.27 0.000
表2 MCM5表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系(例，%)临床病理特征例数
阳性表达阴性表达χ2P组织学类型鳞状细胞癌 46 29(63.04) 17腺癌 32
17(53.12) 15 0.767 0.381分化程度高分化 19 10(52.63) 9中分化 39 23(58.97) 16低分化 20 13(65.00) 7 0.608 0.435淋巴结转移有49 34(69.39) 15无29
12(41.38) 17 5.907 0.015 TNM分期Ⅰ期20 8(40.00) 12Ⅱ期 27 16(59.26)
11Ⅲ期 31 22(70.97)9 4.657 0.031
本实验结果显示，MCM5在正常肺组织、非小细胞肺癌组织中均存在不同程度的
表达，且阳性率呈上升趋势，正常肺组织、非小细胞肺癌组织中其表达差异有统计学意义，这与段智［6］、赵铭等［7］在乳腺癌及食管癌中的结果基本一致。

Sirieix等［6］检测食管标本发现MCM5在食管癌中呈强阳性表达，而在大多数
正常食管黏膜中为阴性，与本实验结果一致，提示MCM5能较好地反映肿瘤细胞
的增殖特性，对肿瘤的诊断有一定意义，说明MCM5可能参与了非小细胞肺癌的发生和进展;在非小细胞肺癌中，MCM5阳性率与肿瘤分化程度无关。

MCM5阳性率与TNM分期及淋巴结的转移均有相关性。

说明MCM5作为强有力的增殖指标，它的高表达与非小细胞肺癌的发生、发展和预后密切相关。

与 Cinzia的试验结果一致［8］，本文结果提示，MCM5可能是区分非小细胞肺癌不同病理分期的有价值的分子标志物，对治疗选择及预后评估有参考意义，但有待于后继更大样本验证。

本研究表明，MCM5表达，对非小细胞肺癌的辅助诊断也具有一定的价值。

总之，MCM5蛋白可能与非小细胞肺癌发生发展密切相关，可能促进癌组织的浸润和转移，其阳性表达可能反映了非小细胞肺癌细胞的增殖活性，并能估计非小细胞肺癌发生浸润和转移的潜能。

参考文献
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［3］ Madine MA，Swietlik M，Pelizon C，et al.The roles of the MCM，ORC，and cdc6 proteins in determing the replication competence of chromatin in quiescent cells〔J〕.JStruct Biol，2000，129:198.
［4］ Guida T，Salvatore Gb，Faviana P，et al.Mitogenic effects of the upregulation of minichromo-some maintenance proteins inanaplastic thyroid carcinoma〔J〕.Clin Endocrinol Metab，2005，90(8):4703.
［5］ Sirieix PS，O＇Donovan M，Brown J，etal.Surface expression of
minichromosome maintenance proteins provides a novel method for detecting patients at risk for developing adenocarcinoma in Barrett＇s esophagus〔J〕.Clin Cancer Res，2003，9(7):2560.
［6］段智，李代强.MCM5和E2F-2在乳腺癌组织中的表达及意义〔J〕.中国现代医药杂志，2007，9(4):19.
［7］赵铭，徐克平，赵建强.食管癌内镜活检组织中Survivin和Mcm5的表达及临床意义〔J〕.临床肺科杂志，2010，15(5):687.
［8］ Cinzia S，Victoria W，Balaji M，et al.Improved screening for analneoplasia by immunocytochemical detection ofminichromos omemaintenance proteins〔J〕.Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2008，17(10):2855.。