骨髓间充质干细胞外泌体介导miR-124-1对小胶质细胞M2型极化调控的影响

骨髓间充质干细胞外泌体介导miR-124-1对小胶质细胞M2
型极化调控的影响
郝磊;金戈;杨涌涛;王军伟;孙洋;秦翠玲;展群岭
【期刊名称】《上海交通大学学报:医学版》
【年(卷),期】2022(42)3
【摘要】目的·探讨过表达miR-124-1基因的骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMMSCs)外泌体(exosomes,Exo)对小胶质细胞(microglia,MG)M2型极化调控的影响。

方法·分离、培养鼠BMMSCs,提取其Exo(BMMSCs-Exo),并分别对BMMSCs及BMMSCs-Exo行流式细胞术、透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)与蛋白质印迹(Western blotting)检测及鉴定。

合成miR-124-1基因,构建其慢病毒载体,观测过表达miR-124-1基因的BMMSCs及其Exo的miR-124-1基因的表达变化。

将过表达miR-124-1基因的BMMSCs-Exo(BMMSCs-Exo+miR-124-1,Exo/124-1)与经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)活化的HAPI小胶质细胞株(HAPI细胞)共培养。

分别收集Exo组与Exo/124-1组细胞。

用仅含LPS培养基培养的HAPI细胞(LPS 组)与未处理的HAPI细胞(正常组)作对照。

使用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting分别检测其M1型分子[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]和M2型分子(CD206、IL-10)的mRNA及其蛋白的表达变化。

结果·成功分离、培养、鉴定了BMMSCs及BMMSCs-Exo。

Exo/124-1明显表达miR-124-1基因。

qPCR和Western blotting检测证实,BMMSCs-Exo能携带miR-124-1基因,其明显下调了HAPI细胞的IL-6(与正常组和LPS组比较,在基因水平分别下调了
55.71%、73.04%,在蛋白水平分别为52.32%、76.95%)和TNF-α(与正常组和LPS组比较,在基因水平分别下调了51.95%、68.91%,在蛋白水平分别为52.14%、77.47%)。

并且Exo/124-1上调了HAPI细胞的CD206(与正常组和LPS组比较,
在基因水平分别上调了46.90%、76.99%,在蛋白水平分别为65.13%、85.11%)和IL-10(与正常组和LPS组比较,在基因水平分别上调了43.09%、72.36%,在蛋白水平分别为55.19%、78.18%)的表达。

结论·BMMSCs-Exo可介导miR-124-1调
控HAPI细胞向M2型极化。

【总页数】8页(P323-330)
【作者】郝磊;金戈;杨涌涛;王军伟;孙洋;秦翠玲;展群岭
【作者单位】重庆市第五人民医院神经内科
【正文语种】中文
【中图分类】R392.2;R394.3
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