大鼠药代动力学实验操作细则
非那西丁在大鼠体内的药代动力学
回收率
精密度
关键技术 实践难点
讨论
关键技术 与实践难点
研究方案可行性—给药途径
灌胃？（乙醇）
72% 28%
静注？（尾静脉or股静脉）
研究方案可行性—取血途径
眼眶静脉丛取血？
72% 28%
断尾取血？ 尾静脉取血？
采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠 或大鼠的颈部（大鼠采血需带上纱手套），应 防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻 压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。右 手持续接7号针头的1ml注射器或长颈（3～ 4cm）硬质玻璃滴管（毛细管内径0.51.0mm），使采血器与鼠面成45℃的夹角， 由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再 转180度使斜面对着眼眶后界。刺入约4～ 5mm。当感到有阻力时即停止推进，同时， 将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽。若穿刺 适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的 血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采 血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。若技术熟 练，用本法短期内可重复采血均无多大困难。 左右两眼轮换更好。 /v_show/id_XNjUyNzk
色谱条件
系统组成
HPLC 系统一般由输液泵、进样器、 色谱柱、检测器、数据记录及处理 装置等组成。其中输液泵、色谱柱、 检测器是关键部件。
1
2 4
自动进样序列表及数据文件的设置 样品测定与数据报告 关机 每次分析样品之前必须用已知含量 的参照样对仪器进行校验 , 当实测与 标值的相对偏差<0.3% 注意事项及维护
Pharmacokinetic of intravenous phenacetin in rats
导师： 答辩：
1
关于非那西丁
2
方法设计
药代动力学实验流程
下面是一般药代动力学实验的流程：
1. 实验设计：确定研究目的、选择合适的动物模型、设计给药方案（包括剂量、途径和时间）以及采样时间点。
2. 动物准备：选择合适的动物种类和性别，根据实验要求对动物进行分组，并在实验前适应环境。
3. 给药：按照设计的给药方案给动物施以药物，可以通过口服、静脉注射、皮下注射等方式进行。
4. 样品采集：在设定的时间点采集血液、尿液、粪便等生物样本，用于分析药物的浓度。
5. 样品处理：将采集的生物样本进行处理，如离心、萃取、净化等，以准备进行药物浓度分析。
6. 药物浓度分析：采用适当的分析方法，如高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、质谱法（MS）等，测定生物样本中的药物浓度。
7. 数据分析：将测得的药物浓度数据进行处理和分析，计算药物的药代动力学参数，如消除半衰期、血药浓度-时间曲线下面积（AUC）、清除率等。
8. 结果解释：根据药代动力学参数，评估药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程，以及药物的有效性和安全性。
9. 报告撰写：撰写实验报告，包括实验目的、方法、结果、结论等内容，并对实验结果进行讨论和解释。
型的不同而有所调整。
在进行实验前，应仔细设计实验方案，并确保实验操作的科学性和准确性。
大鼠药代动力学实验操作细则
大鼠药代动力学实验操作细则1.实验前的材料准备采血EP管准备，需标号、肝素化，按老鼠采血的时间点排好，建议使用1.5-2ml的EP 管；时间安排表制备，内容包括，动物的体重、每只动物的各个时间点、给药剂量、给药方式；准备一个数显带秒的电子表，最好是比较大的那种，方便观察；眼眶采血使用的毛细玻璃管，建议保留每根毛细管的平口的两端，准备好医用脱脂棉球或卫生纸，方便每次采血完毕后给动物止血。
2.实验前动物的准备实验前一天需要给动物禁食不禁水10h以上，在给药前准确称量动物的体重，保证给药剂量的准确，如实验需要才药前的空白血，建议最好在实验前一天取，减少实验当天动物的失血量。
3．具体实验过程中注意事项不同的给药方式，在实验中所注意的点不同，针对你的实验是口服给药，采血时间点在前面可以不用很密集，具体设计根据你的实验设计和参考相关文献的设计；正式实验中最好需要2-3各人操作人员，一个专门负责看时间，需对着时间表的安排看时间，这个角色在整个实验中非常重要，关系着实验的采血时间的准确性和完整性，其它的具体操作人员均需要受，观察时间的调配，至关重要。
例如，一只动物给药完毕后，需立即计时，即给药零时，其后每个时间均是加上给药零时的时间，当动物数量较多时，肯定会出现不同动物不同时间点重合问题，这个时候不要乱，以稍后给药动物稍前的点为先采血。
一般每个时间点的采血量不易过多，HPLC用量建议取血不超过0.5ml这样会使动物过早地死亡，取血完毕后，应立即按压止血，减少不必要的血流失；装入EP管中的血要上下颠倒两次，保证抗凝，方便离心取血浆使用玻璃毛细管向眼眶采血，建议用拇指和食指捻进玻璃管，这样容易取血；如果实验设计在2h内动物取血量超过5ml，在两小时后每100体重给生理盐水1ml，以补充大量的体液流失；实验设计，动物需要长时间点的采血，在第一天实验完成后就给正常饮食。
有些东西可能没有提到，具体在遇到什么问题，在电话给我，我们自讨论。
大鼠体内快速药代动力学方法筛选潜在化合物
掌握最新的疾病进程和药物作用知识,有了这些知识准备,药师能传授给病人有关疾病状况以及新旧药物的治疗作用,这种教育可使病人更好地依从药物治疗方案,并带来更佳的治疗效果。
大鼠体内快速药代动力学方法筛选潜在化合物于波涛1,刘文胜2编译蒋学华2审校(1.成都军区总医院,四川成都610083; 2.华西医科大学药学院,四川成都610041)摘要:在治疗领域开发一种供口服的药物,候选药物口服给药后的体内药代动力学特征对其评价成败至关重要。
通过检测给药后不同时间的药物血浆浓度并计算AUC,可获得药代动力学特征。
本文报道了一种通过确定AUC估算值的药物筛选新方案,这种方法可快速评价大量的化合物,并为在进一步研究中化合物的优先考虑与否提供一个AUC估算值的排列顺序。
关键词:药代动力学;筛选药物;AUC中图分类号:R969.1文献标识码:A文章编号:1001-0971(2001)03-0152-03随着合成方法如组合化学及平行合成的发展,许多具有潜在前途的候选药物被合成,因而需要在样品分析中提高新化合物体内药代动力学研究速度。
质谱在药代动力学样品分析中是一种强有力的分析方法。
采用高效液相色谱法联用常压离子化和串联双台质谱仪(HPLC-API-MS/MS)技术在寻找新药过程中为研究药物代谢过程提供了新的手段。
HPLC-API-MS/MS优点之一就是它能够进行多重分析(即在一次色谱检测中能同时测定多个化合物),目前该技术已用于多药研究,即在同一个实验动物身上同时给予多个化合物的研究。
这些研究亦被称之为组合式药代动力学研究、盒式给药或几合一给药研究。
这种多药研究的优点是能够在短时间内,在较少的动物身上施用更多的化合物而使样品分析效率更高。
但药物间的相互作用能导致药代动力学结果的偏差,一种使药-药间相互作用最小化的方法是降低给药剂量。
新近的一种方法是给药剂量为10/n mg#kg-1,其中n表示被给予药物的个数。
多药研究的另一个缺点是方法建立和数据处理所需的时间将超过普通单剂量或单个药物的研究,而且,代谢物鉴别对于多药研究也是不切实际的。
药物代谢动物实验基本操作注意事项
粪便温孵法 肠菌酶法
单一菌种温孵法
肝微粒体的制备
差速离心法
通过高速离心 使微粒体与其他成 分分离，操作简单， 无需其他试剂辅助， 但需要的时间长， 对设备的整体要求 高。
CaCl2沉淀法 制备肝微粒体， 即在离心前额外加入 CaCl2 ， 促 进 微 粒 体 的聚集和沉降。这种 方法对设备要求降低， 而且缩短了实验所需 的时间，是研究药物 体外代谢，制备微粒 体的常用方法。
要从尾部下四分之一处进针,血管表浅,好扎,而且如果 万一没打进,还可以向上找位置再打
进针后, 有没有回血很重要,回血肯定扎进了,如果没 有自动回血的话,轻轻回抽下,有回血的话就注射,扎进 血管,注射通畅,没有阻力。如果很难推进，一般是没 扎进，就不要再推了，打到组织里面会水肿，然后整 个血管就看不清了，无法注射。自己觉得没回血最好 别注射，换位置，一般是没进。 注射完毕一定要止血，不然药物可能随血流出来，给 药量不准了。
胆管插管
将麻醉大鼠仰位固定于手术板
沿腹白线用粗剪刀剖开腹腔2-3cm
沿十二指肠降部肠系膜找到白色透 明具有韧性的胆总管
在接近十二指肠开口处，向肝脏方 向剪“V”形口
将胆汁引流管插入胆总管，引出腹 壁，结扎固定
胆管插管
胆管插管注意事项： 腹腔解剖的开口越小越好 分离胆管和插管的过程中，注意不要弄破管周围 的小血管，避免刺激胰腺组织，以免影响胰腺分 泌 收集胆汁过程中注意给大鼠保存体温,操作板放在 水浴锅上，给大鼠盖上纱布。
动物的排泄物对动物的生长影响很大，所以每2-3天要 换垫料，具体视情况而定。一定要换新笼具，换垫料。 不可偷懒将旧的垫料倒掉，不洗盒子直接加新垫料，或 者直接在盒子里再铺一层新垫料。这样不仅影响自己的 实验，而且同在一起饲养的动物也会受到影响。 每天要给动物换水，同时清理饮水瓶,金属嘴和胶塞， 时间久了不换，瓶内和胶塞可能会被微生物污染而长苔。 水不要装太满，太满了可能滴不出来，动物喝不到。更 规范的操作还要对饮水用具和实验工具进行高温灭菌。
药代动力学实验指导2
药代动力学实验指导2实习指导生物药剂学与药物动力学实验实验一药物在体小肠吸收实验一、实验目的1．以磺胺嘧啶为模型药物，掌握大鼠在体肠道灌流法的基本操作和实验方法。
2．掌握药物肠道吸收的机理及吸收速度常数（k a）与吸收半衰期[t1/2(a)]的计算方法。
二、实验原理药物消化道吸收实验方法可分为体外法（in vitro）、在体法（in situ）和体内法（in v ivo）。
在体法由于不切断血管和神经，药物透过上皮细胞后即被血液运走，能避免胃内容物排出及消化道固有运动等生理影响，是一种较好的研究吸收的方法。
但本法一般只限于溶解状态药物，并有可能将其他因素引起药物浓度的变化误认为吸收。
消化道药物吸收的主要方式为被动扩散。
药物服用后，胃肠液中高浓度的药物向细胞内透过，又以相似的方式扩散转运到血液中。
这种形式的吸收不消耗能量，扩散的动力来源于膜两侧的浓度差。
药物转运的速度可用Fick's（注：最后一稿校，全书一致）扩散定律描述：式中，为扩散速度；D为扩散系数；A为扩散表面积；k为分配系数；h为膜厚度，C GI为胃肠道中药物浓度；C为血药浓度。
在某一药物给予某一个体的吸收过程中，其D、A、h、k均为定值，可用透过系数P来表示，即。
当药物口服后，吸收进入血液循环中的药物，随血液迅速地分布于全身。
故胃肠道中的药物浓度（C GI）远大于血中药物浓度（C），则上式可简化为：上式表明药物被动转运（简单扩散）透过细胞膜的速度与吸收部位药物浓度的一次方成正比，表明被动转运速度符合表观一级速度过程。
若以消化液中药量（X a）的变化速度（）表示透过速度，则：式中，k a为药物的表观一级吸收速度常数。
对上式积分后两边取对数：式中，X a为t时间消化液中药量；X0为零时间消化液中药量。
以lg X a对t作图可得一直线，由此直线斜率即可求出药物的吸收速度常数，并可计算吸收半衰期：本实验以磺胺嘧啶为模型药物，进行大鼠在体小肠吸收试验。
药代动力学实验指导2
实习指导生物药剂学与药物动力学实验实验一药物在体小肠吸收实验一、实验目的1．以磺胺嘧啶为模型药物，掌握大鼠在体肠道灌流法的基本操作和实验方法。
2．掌握药物肠道吸收的机理及吸收速度常数（k a）与吸收半衰期[t1/2(a)]的计算方法。
二、实验原理药物消化道吸收实验方法可分为体外法（in vitro）、在体法（in situ）和体内法（in v ivo）。
在体法由于不切断血管和神经，药物透过上皮细胞后即被血液运走，能避免胃内容物排出及消化道固有运动等生理影响，是一种较好的研究吸收的方法。
但本法一般只限于溶解状态药物，并有可能将其他因素引起药物浓度的变化误认为吸收。
消化道药物吸收的主要方式为被动扩散。
药物服用后，胃肠液中高浓度的药物向细胞内透过，又以相似的方式扩散转运到血液中。
这种形式的吸收不消耗能量，扩散的动力来源于膜两侧的浓度差。
药物转运的速度可用Fick's（注：最后一稿校，全书一致）扩散定律描述：式中，为扩散速度；D为扩散系数；A为扩散表面积；k为分配系数；h为膜厚度，C GI为胃肠道中药物浓度；C为血药浓度。
在某一药物给予某一个体的吸收过程中，其D、A、h、k均为定值，可用透过系数P来表示，即。
当药物口服后，吸收进入血液循环中的药物，随血液迅速地分布于全身。
故胃肠道中的药物浓度（C GI）远大于血中药物浓度（C），则上式可简化为：上式表明药物被动转运（简单扩散）透过细胞膜的速度与吸收部位药物浓度的一次方成正比，表明被动转运速度符合表观一级速度过程。
若以消化液中药量（X a）的变化速度（）表示透过速度，则：式中，k a为药物的表观一级吸收速度常数。
对上式积分后两边取对数：式中，X a为t时间消化液中药量；X0为零时间消化液中药量。
以lg X a对t作图可得一直线，由此直线斜率即可求出药物的吸收速度常数，并可计算吸收半衰期：本实验以磺胺嘧啶为模型药物，进行大鼠在体小肠吸收试验。
三、仪器与材料仪器：蠕动泵、紫外-可见分光光度计、恒温水浴、离心机、注射器、眼科剪刀、眼科镊子、手术刀片等。
龙胆苦苷在大鼠体内药代动力学研究实验设计
龙胆苦苷在大鼠体内的药代动力学研究实验设计一、实验目的龙胆苦苷属环烯醚萜苷类化合物，是常用中药秦艽和龙胆中的主要成分，具有抗炎、保肝、清热等作用。
关于其药效学研究已有报道，而对其单一成分的药代动力学研究却不多。
本实验欲采用固相萃取(SPE)和高效液相色谱（HPLC）联用法，测定大鼠以不同剂量耳静脉注射从秦艽中提取分离得到的纯度达到95%的龙胆苦苷不同时刻的血药浓度，并获得有关药物动力学参数，从而了解其在大鼠体内吸收、分布、代谢、排泄等药动学特征。
二、实验材料2.1 动物清洁级SD大鼠30只，雌雄各半，体重200±20g。
2.2 试剂与药物龙胆苦苷对照品，流动相及对照品溶液所用水为超纯水，其他试剂均为分析纯，其他用水均为蒸馏水。
2.3仪器日本HIT ACHI 高效液相色谱系统，配置：L7420 型可变波长紫外检测器；L7110 型泵；N2000 色谱工作站；色谱柱为YWG ODS C18柱；50 μL 微量进样器；SPE小柱( 规格1 mL) ; 微量移液器( 50, 100, 500 μL 各1 支)；BP211D 电子天平；2001 紫外分光光度计( HITACHI 产品) 。
三、实验预处理3.1空白血清样品的制备用一次性采血器从健康大鼠股动脉采血，置于具塞离心管中，静置10 min后，3000r/min离心10 min，分离血清，储存于冰箱备用。
3.2 含药血清样品的制备大鼠分别按80，40，20mg·kg-13种剂量（容量为1.00 mL·kg-1）耳静脉注射药物（30 s内推注完毕），药后系列时间点股动脉采血置于具塞离心管中，静置10 min，3000r/min 离心10 min，分离血清，储存于冰箱备用。
3.3对照品溶液的制备分别精密称取减压干燥后的龙胆苦苷对照品5 mg 置10, 100, 1000 mL 容量瓶内, 以超纯水准确定容得对照品溶液a, b, c, 密封带密封后, 低温避光无NH3环境保存。
大鼠药代动力学实验流程
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药代动力学实验
应用添加剂，成为离子对、离子抑制方法
高配速制冷 一冻系离列心浓机度–：的应配标平样用、，十其添字中交加加叉有、内剂样标品样，选择成为离子对、离子抑制方法
• 常用固定相： 灵敏度的要求有多高?
其他精密仪器操作标准操作规程(SOP)要点 不能吃的就提醒人们注意。
– 碳十八、碳八、胺基等基团 液-固萃取 / 液-液萃取
那时候，人们经常因乱吃东西而生病，甚至丧命。
取分血析时 时间要• 了解洗哪方脱面的次情况？序：一般为反相，即极性高的先被洗脱
以硅胶为基质，通过化学键合方式把碳十八、碳八、胺基等基团联在基质上，作为固定相。
• 常用的流动相： 定量下限和标准曲线范围
柱温箱的温度
– 有机溶剂如甲醇、乙腈，水 同上，一般在溶剂抽滤的同时，也有脱气的效果
离子抑制色谱
• 离子型化合物在反相色谱柱上不保留 • 改变流动相的pH值，抑制样品离子的电离 • 适用于弱酸性化合物的分离
– 降低流动相的pH值，使样品降低离子化 – 使用硅胶基质C18填料
• 使用条件应在填料基质的范围内
– 硅胶柱的pH在2-8（较保险值3-7）内
常用缓冲液及其pH值
离子抑制色谱实例
柱号 8082693.
键合相色谱柱
• 以硅胶为基质，通过化学键合方式把碳十八、碳 八、胺基等基团联在基质上，作为固定相。
• 优点∶
– 固定相稳定，不易流失 – 应用广泛，可使用多种溶剂 – 消除硅羟基的不良影响
• 缺点∶
– pH值不能小于3 – 同样填料，各种牌号色谱柱不尽相同
反相C18色谱柱的活化
Minutes
标准曲线
50
100
150
200
药理实验报告大鼠
一、实验目的本实验旨在研究某新型药物在大鼠体内的药代动力学和药效学特性，为该药物的临床应用提供实验依据。
二、实验材料1. 实验动物：清洁级雄性SD大鼠，体重200-220g，共20只。
2. 药物：某新型药物（以下称药物A），纯度≥98%，由某制药公司提供。
3. 试剂与仪器：生理盐水、注射器、电子天平、离心机、分光光度计、恒温箱等。
三、实验方法1. 动物分组：将20只大鼠随机分为两组，每组10只，分别为实验组（药物A组）和对照组（生理盐水组）。
2. 给药方法：实验组大鼠按照体重计算药物剂量，对照组大鼠给予等体积生理盐水。
采用尾静脉注射给药，注射速度为0.5ml/min。
3. 样本采集：给药后0.5、1、2、4、8、12、24、48小时，每组大鼠随机选取5只，眼眶取血，分离血清。
4. 药代动力学分析：采用高效液相色谱法测定血清中药物A的浓度，计算药代动力学参数，如峰浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）、半衰期（t1/2）、AUC0-t、AUC0-∞等。
5. 药效学分析：观察大鼠的一般行为变化，记录死亡率、体重变化等指标。
四、实验结果1. 药代动力学分析：- 实验组大鼠血清中药物A的Cmax、Tmax、t1/2、AUC0-t、AUC0-∞等药代动力学参数与对照组相比，均有显著差异（P<0.05）。
- 药物A在大鼠体内的药代动力学过程符合二室模型，具有明显的首过效应。
2. 药效学分析：- 实验组大鼠在给药后0.5小时出现轻微的兴奋症状，随后逐渐恢复正常。
- 对照组大鼠在给药后无明显行为变化。
- 实验组大鼠死亡率、体重变化等指标与对照组相比，无显著差异（P>0.05）。
五、讨论1. 本实验结果表明，药物A在大鼠体内具有明显的药代动力学和药效学特性。
2. 药物A在大鼠体内的Cmax、Tmax、t1/2等药代动力学参数符合预期，表明该药物具有较好的生物利用度。
3. 药物A在大鼠体内的药效学实验结果显示，该药物具有良好的安全性，无明显不良反应。
药物代谢动物实验基本操作注意事项
动物实验的基本操作
订实验动物 一般计划要做药理实验后，先订动物，饲养中心送动物 过来需要时间，如果动物供应紧张的时候，很可能等的
粪便温孵法 肠菌酶法
单一菌种温孵法
肝微粒体的制备
差速离心法
通过高速离心 使微粒体与其他成 分分离，操作简单， 无需其他试剂辅助， 但需要的时间长， 对设备的整体要求 高。
CaCl2沉淀法 制备肝微粒体， 即在离心前额外加入 CaCl2 ， 促 进 微 粒 体 的聚集和沉降。这种 方法对设备要求降低， 而且缩短了实验所需 的时间，是研究药物 体外代谢，制备微粒 体的常用方法。
药物代谢-生物转化
一相代谢
氧化，还原，水解反应； CYP450酶
二相代谢
内源性物质结合反应； UGTs，SULTs, NAT, GST, MT
药物代谢研究方法
体内代谢法 综合地考虑各种体内 因素对药物的影响,能 够真实全面地反映药 物代谢的体内整体特 征 药物在生物体内的分 布比较广，加上代谢 转化的器官和酶系的 多样性，使药物及其 代谢产物在体内的浓 度低，代谢产物的检 测具有一定的难度
要从尾部下四分之一处进针,血管表浅,好扎,而且如果 万一没打进,还可以向上找位置再打
进针后, 有没有回血很重要,回血肯定扎进了,如果没 有自动回血的话,轻轻回抽下,有回血的话就注射,扎进 血管,注射通畅,没有阻力。如果很难推进，一般是没 扎进，就不要再推了，打到组织里面会水肿，然后整 个血管就看不清了，无法注射。自己觉得没回血最好 别注射，换位置，一般是没进。 注射完毕一定要止血，不然药物可能随血流出来，给 药量不准了。
大鼠血浆处理操作规范
摘要目的：规范大鼠血浆处理的操作过程。
适用范围：大鼠体内药代动力学实验。
1仪器试剂1.1仪器涡旋仪，20ul、200ul、1000ul移液枪，高速离心机，氮吹仪1.2试剂甲醇、乙腈（色谱纯）或乙酸乙酯（分析纯）2操作规程2.1大鼠取全血3.5或4.5ml，放置40min左右，4000r/10min离心。
2.2向1.5ml EP管中依次加入20ul内标液、A中血浆100或150ul，涡旋30s，置-20℃冻存至样品处理。
2.3取大鼠血浆体积100或150ul(先放置4℃融化再拿至室温)，涡旋30秒，加入沉淀剂（甲醇：乙腈=1:3）400或600ul或萃取剂(乙酸乙酯)800或1200ul,涡旋1.5min，14000r/10min离心。
2.4取上清液加入1.5ml EP管：沉淀剂时为450或 __ul;萃取剂时为__或__ul。
2.5氮气吹干30-45℃（吹干时间沉淀剂为45min左右，萃取剂为30min左右）。
2.6用100ul甲醇复溶，涡旋2min，14000r/10min离心。
2.7进样瓶处理：先加入100ul甲醇，放入内插管。
2.8取上层液体90ul加入进样瓶内插管中,将瓶盖用保鲜膜包裹后盖上放入4℃至进样。
2.9用液相进样时体积为10或20ul。
3 注意事项3.1实验过程中所使用的耗材都为进口级（EP管，枪头等），除取全血时EP管使用国产。
3.2需要血浆量根据实验结果制定选择100或150ul。
3.3加入血浆及20ul内标液时一定要认真，细心, 加药过程严格按照移液枪操作规程，保证结果的准确度、精密度。
3.4实验过程样品处理时EP 管标号一定要清楚、仔细，操作过程做好有一个人在旁边检查或处理完一个换一个位置。
3.5实验样品处理一定要一套一套处理（一只鼠的样品一次处理完毕），以减小结果误差，同时样品不容易混淆、出错。
药代动力学实验指导2文件.doc
8．酚红浓度测定中空白对照液为0.2mol/LNaOH。
五、实验结果
1．计算SD和酚红的标准曲线回归方程和相关系数。
2．根据SD和酚红的标准曲线，分别计算出规定时间样品的SD和酚红浓度，记录于
表19-1中。并按表中公式计算循环液体积及剩余药量；式中Cn表示第n次取样时SD的浓
乙二胺）2ml，摇匀，5min后于紫外-可见分光光度计，在540nm处测定吸收度；空白
对照以2ml蒸馏水替代组织上清液，其他操作同样品处理。
（二）组织分布实验
取大鼠4只称重，按100mg/kg的剂量尾静脉注射10%磺胺噻唑钠注射液，于给药后5、
20、60、120min时，处死大鼠，收集血液至肝素化离心管中，并立即取出肝脏、肾脏及脑
织，用生理盐水冲洗干净后立即用滤纸吸干，精确称量组织重量，按1:6加生理盐水（脑组
织按1:3）置玻璃匀浆器中进行研磨，研磨后将匀浆液倒入离心管中，以3000r/min离心1
0min，取上清液1ml按1:1加20%三氯醋酸沉淀蛋白，3000r/min离心10min，取上清
液待用，血液经3000r/min离心10min后取上层血浆待测。
的药物Байду номын сангаас度（CGI）远大于血中药物浓度（C），则上式可简化为：
上式表明药物被动转运（简单扩散）透过细胞膜的速度与吸收部位药物浓度的一次方成
正比，表明被动转运速度符合表观一级速度过程。若以消化液中药量（Xa）的变化速度
（）表示透过速度，则：
式中，ka为药物的表观一级吸收速度常数。对上式积分后两边取对数：
ivo）。在体法由于不切断血管和神经，药物透过上皮细胞后即被血液运走，能避免胃内容
大鼠给药实验报告(3篇)
第1篇实验目的：本研究旨在探讨某药物在大鼠体内的药代动力学特征，包括吸收、分布、代谢和排泄等过程，为该药物的临床应用提供科学依据。
实验材料：1. 实验动物：健康SD大鼠，体重180-220g，雌雄各半。
2. 药物：某药物片剂，纯度≥98%。
3. 仪器：分析天平、紫外分光光度计、离心机、冰箱、恒温恒湿箱等。
4. 试剂：生理盐水、蒸馏水、氯仿、正己烷等。
实验方法：1. 实验分组：将大鼠随机分为四组，每组6只，分别为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。
2. 给药方法：将药物片剂研磨成粉末，以生理盐水溶解，制成不同浓度的溶液。
低剂量组给予0.5mg/kg，中剂量组给予1mg/kg，高剂量组给予2mg/kg，对照组给予等体积的生理盐水。
3. 血样采集：给药后0、0.5、1、2、4、6、8、12、24小时，每组随机选取3只大鼠，心脏采血，分离血浆。
4. 药物含量测定：采用紫外分光光度法测定血浆中药物含量。
5. 数据处理：采用SPSS软件进行统计分析，比较各组药物浓度变化。
实验结果：1. 血药浓度-时间曲线：各剂量组大鼠血药浓度-时间曲线均呈现双峰特征，表明药物在大鼠体内存在吸收和再分布过程。
2. 药代动力学参数：低、中、高剂量组的药物半衰期分别为（1.5±0.3）、（2.0±0.4）、（2.5±0.5）小时，表明药物在大鼠体内的消除速率随剂量增加而减慢。
3. 分布：药物在大鼠体内的分布广泛，主要分布于肝脏、肾脏、心脏等器官。
4. 代谢：药物在大鼠体内主要通过肝脏代谢，代谢产物主要为代谢物A和代谢物B。
5. 排泄：药物在大鼠体内的排泄途径主要为肾脏排泄，少量通过粪便排泄。
讨论：本研究结果表明，某药物在大鼠体内具有良好的吸收、分布、代谢和排泄特征，符合临床应用要求。
低、中、高剂量组的药物半衰期随剂量增加而延长，提示该药物在大鼠体内可能存在蓄积现象，需谨慎使用。
药物在大鼠体内的代谢途径主要为肝脏代谢，提示临床应用时需关注肝脏毒性。
医学研究中药物代谢动力学分析技术的使用教程
医学研究中药物代谢动力学分析技术的使用教程引言近年来，随着中药研究的不断发展，对中药的药理学、毒理学以及代谢动力学等方面的研究也备受关注。
中药物代谢动力学研究可以揭示中药在人体内的代谢过程和消除途径，为中药的合理应用提供技术支持。
本文将介绍医学研究中药物代谢动力学分析技术的使用教程，包括实验设计、样品制备、分析方法及数据处理等内容。
一、实验设计在进行中药物代谢动力学研究前，合理的实验设计非常重要。
不同的药物代谢动力学实验设计方式有所差异，但基本步骤如下：1. 确定实验动物：根据研究目的，选择适宜的实验动物进行试验。
常用的实验动物包括小鼠、大鼠、猪、狗等。
2. 药物剂量选择：根据药物的理化性质和给药途径等因素，确定最佳的药物剂量，以保证代谢产物的测定准确和动力学分析的可行性。
3. 给药途径选择：根据药物的特性和研究目的，选择适当的给药途径。
常见的给药途径包括静脉注射、口服、皮下注射等。
4. 给药方案制定：根据上述因素，制定合理的给药方案，包括给药时间点、给药间隔等。
二、样品制备样品制备是医学研究中药物代谢动力学研究的关键步骤之一，样品制备的质量将直接影响后续分析的准确性和可靠性。
1. 收集样品：根据给药方案，收集血漏、尿液、粪便等样品。
收集时间点的选择应考虑药物的代谢和消除过程，达到最佳的代表性。
2. 样品处理：根据不同样品的特点，进行相应的处理。
血液样品需要离心分离血清/血浆，尿液和粪便样品需要适当稀释或提取。
3. 样品保存：样品制备后，必须遵循严格的保存规范，以保证样品在分析之前的稳定性。
常用的保存方法包括低温保存、添加保存剂等。
三、分析方法选择合适的分析方法是医学研究中药物代谢动力学分析的关键环节。
目前常用的分析方法包括高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）、气相色谱-质谱法（GC-MS）等。
1. HPLC-MS/MS：HPLC-MS/MS技术结合了高效液相色谱和质谱的优点，可以实现对中药物及其代谢产物的定性和定量分析。
药代动力学的试验流程
药代动力学的试验流程一、生物样本的接收与保管1.生物样本的交接：与Ⅰ期病房交接时应填写交接单，检查生物样本的数量、外观（是否溶血、有无乳糜血等现象）、样本量的多少等信息在交接单上进行标记清楚，确定无误后双方签字，保存交接单。
2.生物样本的运输：将接收的生物样本放在保温箱内（内部放干冰或冰块）确保运输过程中生物样本处于-20C0环境中。
3.生物样本的存储：生物样本到实验室后转存放在-80C0冰箱保存，备用检测。
二、生物样本的检测1. 生物样本检测方法的确定：色谱法、免疫法和微生物法的选择2. 生物样本检测方法学考察的内容：专属性（特异性）、标准曲线与线性范围、精密度与准确性、灵敏度（最低检测限），提取回收率、样品稳定性以及质量控制。
3. 生物样本的测定：1）生物样本的处理2）生物样本的检测3）质控样本测定4）对可疑值进行复测4. 生物样本的检测数据复查以及核对，确定最终检测数据并对其电子版本进行保存（不经相关人员的允许，其他人员不允许私下改动）。
三、生物样本的检测数据的统计分析1. 首先核查检测数据的准确性2. 应用DAS软件进行统计分析。
3. 统计结果的复查，确定统计无误，将结果进行保存备用。
4. 统计结果转交给撰写实验报告人员，不经本室相关人员允许不许将实验结果泄露給与本试验无关人员。
四、实验报告的撰写1．按实验方案要求进行实验报告的撰写内容。
2. 将实验结果进行统计分析，阐述出现问题的可能原因。
3. 校准完成后实验报告交到报告审核人手中，进行检测和对，并签字。
4. 将实验报告和实验图谱单位盖章后移交给厂家，并进行交接登记。
5. 将最终的实验数据和实验报告纸质版交到资料室保管、电子版交给实验室主任和资料管理员分别进行保管同时加密，不经本室相关人员允许其他人员无权查看和修改，违者要承担相关责任。
药代动力学的试验过程中可能出现的问题1.生物样本采集时存在的问题：如血浆样本出现溶血、乳糜血等可能会影响到检测结果。
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大鼠药代动力学实验操作细则
1.实验前的材料准备
采血EP管准备，需标号、肝素化，按老鼠采血的时间点排好，建议使用1.5-2ml的EP 管；
时间安排表制备，内容包括，动物的体重、每只动物的各个时间点、给药剂量、给药方式；
准备一个数显带秒的电子表，最好是比较大的那种，方便观察；眼眶采血使用的毛细玻璃管，建议保留每根毛细管的平口的两端，准备好医用脱脂棉球或卫生纸，方便每次采血完毕后给动物止血。
2.实验前动物的准备
实验前一天需要给动物禁食不禁水10h以上，在给药前准确称量动物的体重，保证给药剂量的准确，如实验需要才药前的空白血，建议最好在实验前一天取，减少实验当天动物的失血量。
3．具体实验过程中注意事项
不同的给药方式，在实验中所注意的点不同，针对你的实验是口服给药，采血时间点在前面可以不用很密集，具体设计根据你的实验设计和参考相关文献的设计；
正式实验中最好需要2-3各人操作人员，一个专门负责看时间，需对着时间表的安排看时间，这个角色在整个实验中非常重要，关系着实验的采血时间的准确性和完整性，其它的具体操作人员均需要受，观察时间的调配，至关重要。
例如，一只动物给药完毕后，需立即计时，即给药零时，其后每个时间均是加上给药零时的时间，当动物数量较多时，肯定会出现不同动物不同时间点重合问题，这个时候不要乱，以稍后给药动物稍前的点为先采血。
一般每个时间点的采血量不易过多，HPLC用量建议取血不超过0.5ml这样会使动物过早地死亡，取血完毕后，应立即按压止血，减少不必要的血流失；装入EP管中的血要上下颠倒两次，保证抗凝，方便离心取血浆
使用玻璃毛细管向眼眶采血，建议用拇指和食指捻进玻璃管，这样容易取血；
如果实验设计在2h内动物取血量超过5ml，在两小时后每100体重给生理盐水1ml，以补充大量的体液流失；
实验设计，动物需要长时间点的采血，在第一天实验完成后就给正常饮食。
有些东西可能没有提到，具体在遇到什么问题，在电话给我，我们自讨论。
希望能帮到你啊!。