核酸蛋白分离层析仪

合集下载

层析工艺原理

层析工艺原理

层析工艺原理引言层析技术是一种分析和分离混合物中成分的常用方法。

它基于物质在不同相的分配行为,利用不同成分在固定相和移动相中的相对溶解性差异来实现分离。

层析技术在化学、生物、制药等领域有着广泛的应用。

本文将详细探讨层析工艺的原理、类型以及在不同领域中的应用。

原理层析技术基于物质在固定相和移动相中的分配行为。

移动相通常是液体或气体,在层析柱中流动,将混合物带过固定相。

固定相可以是固体或涂覆在固体表面上的液体。

不同物质在移动相和固定相中的相对溶解性差异导致它们以不同的速度通过层析柱,从而实现分离。

层析技术的一般步骤包括样品制备、样品加载、层析分离和分析检测。

首先,样品需要经过前处理步骤,如固相萃取、液液萃取等,以提取或纯化目标成分。

然后,样品被加载到层析柱上,样品溶液在移动相的作用下从柱上流过。

样品中的成分根据其在移动相和固定相中的相对溶解性差异,以不同的速度通过柱体。

最后,收集样品流出的不同组分,进行后续的分析检测。

类型层析技术有多种不同的类型,根据固定相和移动相的选择,可以实现不同的分离目的。

下面介绍几种常见的层析技术。

柱层析柱层析是最常用的层析技术之一,它通常使用固定相填充在柱子中。

根据固定相的性质,包括大小、孔隙度和化学特性等因素,柱层析可进一步分为吸附层析、分配层析和离子交换层析等类型。

柱层析通常用于分离复杂的混合物,如氨基酸、蛋白质和核酸等。

薄层层析薄层层析是一种简单且经济的层析技术,它将涂覆在平面衬底上的液体相和固定相进行分离。

样品通常以小点或线的方式施加在薄层板的一端,然后将其平放在层析槽中,槽中加入足够的溶剂。

样品随着溶剂的流动渐渐分离,并且可通过观察薄层板上的成分直接得出结果。

薄层层析通常用于分离小分子化合物的混合物。

气相层析气相层析是利用气体相作为移动相的层析技术。

样品挥发性较好的成分会在气相中迅速分离,通过通过气相色谱仪进行分析。

气相层析常用于分离和分析挥发性有机物。

液相层析液相层析通常使用液相作为移动相,样品溶解在液体中,通过液相色谱柱进行分离。

医学实验室分离仪器分类

医学实验室分离仪器分类

医学实验室分离仪器分类前言:医学实验室是进行生物学、化学、药学等实验和检测的重要场所。

在实验过程中,分离仪器起到了至关重要的作用,能够将样本中的各种成分进行有效分离,为后续的实验提供可靠数据支持。

本文将对医学实验室中常见的分离仪器进行分类和介绍,以帮助读者更好地了解和应用这些仪器。

一、离心机离心机是医学实验室中常见的一种分离仪器,主要通过利用离心力对样本中的悬浮液或悬浮物进行分离。

离心机按照使用方式和分离速度的不同又可以分为台式离心机和高速离心机。

1. 台式离心机台式离心机适用于常规的离心分离操作,一般分为固定角度离心机和摇床离心机。

固定角度离心机将样本装入固定的离心管中,然后以固定的角度进行分离;摇床离心机则适用于需进行混合和循环的样本。

2. 高速离心机高速离心机则适用于对分离速度和精度要求较高的实验。

它在离心分离时速度更快,离心管也需要具备更高的耐高速承受能力。

高速离心机适用于DNA/RNA提取、细胞分离等实验。

二、层析仪层析仪是一种常见的用于物质分离和纯化的仪器。

在医学实验室中,常用的层析仪有气相色谱仪(GC)、液相色谱仪(HPLC)和固相萃取仪。

1. 气相色谱仪(GC)气相色谱仪是通过气体载气将待测试的样品分离,然后通过探测器检测各个组分的相对含量。

它广泛应用于鉴定和分析有机物,如血液和尿液中的药物、环境中的有毒物质等。

2. 液相色谱仪(HPLC)液相色谱仪适用于对样品中化学成分进行分离和分析的实验。

通过与流动相的互作用来分离各种化合物,常见应用于对药物、蛋白质、核酸等的分离和纯化。

3. 固相萃取仪固相萃取是一种常用的样品前处理技术,用于富集和净化待分析物。

固相萃取仪将样品经过固相萃取柱处理,得到所需物质,并去除干扰物质。

它广泛应用于食品安全、环境监测等领域。

三、电泳仪电泳仪是通过电场作用将样品中的化学物质按照电荷和大小分离的仪器。

医学实验室中常用的电泳仪有蛋白质电泳仪和核酸电泳仪。

1. 蛋白质电泳仪蛋白质电泳仪用于对蛋白质样品进行分离和分析。

仪器原理

仪器原理

双通道PAM-100测量系统商品编码:9027500000 品牌:WALZ 型号:DUAL-PAM-100原理:利用荧光发射器发射出来的光学射线来检测植物叶片细胞内叶绿体中的荧光。

功能:单独或同步测量微藻、大藻、水生植物等的叶绿素荧光和P700。

检测对象:微藻、大藻、水生植物。

详细原理:细胞内的叶绿素分子通过直接吸收光量子或间接通过捕光色素吸收光量子得到能量后,从基态(低能态)跃迁到激发态(高能态)。

处于较高激发态的叶绿素分子很不稳定,在几百飞秒内,通过振动弛豫向周围环境辐射热量,回到最低激发态。

最低激发态的叶绿素分子可以稳定存在几纳秒,重新放出一个光子,回到基态,即产生荧光,是处于较低激发态的叶绿素分子释放能量回到稳定基态的几种途径之一。

色素分子处于氧化态和还原态时,或增加/减少亚基后,其吸收峰也会有变化。

双通道PAM-100测量系统采用独特的调制技术,检测来自于植物叶片细胞内叶绿体中的光合系统复合蛋白体的叶绿素荧光,通过测量活体叶片的叶绿素荧光和P700吸收变化来全面研究植物两个光系统(PS I和PS II)的活性变化对光合作用的影响。

双通道PAM-100测量系统相当于两台脉冲-振幅-调制叶绿素荧光仪,通过远红光LED发出的远红光来激发PS I在较短的时间内到达最高氧化态,从而测得PS I 的最大能力,通过荧光发射器来发射光照强度很低的光能,进而检测初始叶绿素荧光及其他时期的荧光,蓝色LED主要提供波峰在蓝光光区的光源,很多藻类对光能的吸收利用主要在蓝光光谱区。

双通道PAM-100测量系统既可以进行复杂的叶绿素荧光分析(PS II活性),还可以通过测量P700的吸收变化来检测PS I的活性,可用于光合作用机理研究、植物生理学、农学、林学、园艺学等领域。

全自动氨基酸分析仪商品编码:9027201900 品牌:SYKAM 型号:S-433D原理:氨基酸与分离柱上的物质进行离子交换分离,与茚三酮反应后产生不同的检测信号,进而对氨基酸进行定性定量分析。

植物病理实验室基本仪器设备及其使用

植物病理实验室基本仪器设备及其使用

植物病理实验室基本仪器设备及其使用植物病理实验室是进行植物病理学研究的重要场所,为科学家提供了进行病原菌鉴定、病害诊断和病害防治策略研究的基础。

为了开展有效的实验工作,植物病理实验室必须配备一系列基本仪器设备,本文将介绍常用的植物病理实验室基本仪器设备及其使用。

一、显微镜显微镜是植物病理实验室必备的基本仪器之一。

常见的显微镜有光学显微镜、电子显微镜等。

光学显微镜常用于观察植物组织切片、病原菌形态和病害损伤等。

使用显微镜时,需调节镜头和光源,保持适当的焦距和明亮度,确保观察效果清晰。

二、培养基制备设备培养基是植物病理实验中重要的实验材料,其制备需要一系列仪器设备。

其中,酸槽用于配制培养基溶液的酸碱平衡,电子天平用于称量精确的化学试剂,恒温培养箱用于控制培养基的温度,以及培养皿、试管等常规实验器材。

三、PCR仪PCR仪是植物病理实验室进行分子生物学研究的必备设备。

PCR(聚合酶链反应)是一种在体外合成DNA的方法,可用于病原菌DNA的扩增、基因变异的检测等。

使用PCR仪时,需设置好反应体系、温度条件和循环次数,确保PCR反应的准确性和稳定性。

四、蛋白质电泳设备蛋白质电泳设备广泛应用于研究植物病原菌产生的蛋白质,以及病害相关的蛋白质变化。

常见的蛋白质电泳设备包括蛋白质电泳槽、蛋白质电泳仪等。

使用时,需根据待测样品的特点选择合适的电泳方法、分离介质和运行条件,确保蛋白质的分离效果和稳定性。

五、纯化仪纯化仪用于纯化植物病原菌产生的蛋白质、核酸等。

常见的纯化仪包括离心机、液相层析仪等。

在使用纯化仪时,需根据待纯化物质的性质选择合适的纯化方法和纯化介质,控制离心速度和温度,确保纯化效果和样品的稳定性。

六、荧光显微镜荧光显微镜常用于观察植物病原菌与植物宿主之间的相互作用。

通过标记染色剂或荧光蛋白,观察病原菌在植物体内的侵染过程及突触结构,从而揭示病害的发生机制。

在使用荧光显微镜时,需选择合适的波长激发光源和滤光镜,以获得清晰的荧光信号。

离子层析仪的特点及适用

离子层析仪的特点及适用

离子层析仪的特点及适用一、什么是离子层析仪?离子层析技术是一种分离分子混合物的方法,它是利用不同分子在透析膜上扩散速率的差异,使混合物中某一种分子逐步从一侧透析膜透过另一侧的透析膜而得到分离的方法。

离子层析仪充分利用了这个原理,是一种专门用于分离、纯化、检测细胞或蛋白的设备。

二、离子层析仪的特点1.分离效果显著、纯化度高在离子层析的过程中,混合物中的不同分子会因为它们的形状或电荷的不同,与层析柱内填充物发生相互作用,从而导致分离效果。

这一过程可以在保持分子完整性的同时,将混合物中不同的成分分离出来,从而达到高纯化度的目的。

2.灵敏度高、解析力强离子层析精密控制离子梯度,具有极高的灵敏度和解析度,可以实现对微量物质的高灵敏度检测。

3.操作简便、快速、重复性好离子层析仪的操作流程简单,可以对样品进行快速的分离和纯化,同时具有良好的重复性,可以满足具有高通量、大规模的实验需求。

4.适用范围广离子层析技术可以应用于分离多种生物大分子,如蛋白质、核酸、多肽、糖类、生物小分子等。

三、离子层析仪的应用1.生物医学领域在生物医学领域,离子层析技术是研究蛋白质和分子的一种重要手段。

离子层析在蛋白质组学、裂解质谱学、蛋白质折叠和修饰分析等方面都发挥着重要的作用。

2.食品工业离子层析技术在食品工业中同样有广泛的应用,如欧盟对食品中亚硝酸盐的监管标准中规定的最高限量,就需要采用离子层析法检测食品中是否含有过多的亚硝酸盐。

3.环境检测离子层析技术在环境检测领域中也有较高的应用,离子层析色谱-质谱联用技术已成为水质及环境样品检测的重要方法。

4.质量控制离子层析技术可以用于产品的质量控制中,如药品的质量控制等。

在制备药品中可以用离子层析技术对药品进行纯化和分配,有助于保证药品的质量。

四、总结离子层析仪作为一种基础的分析仪器已广泛应用于生物医学领域、食品工业、环境检测、质量控制等多个领域,具有分离效果显著、灵敏度高、操作简便、快速、重复性好等优点。

快速蛋白质液相层析(FPLC)

快速蛋白质液相层析(FPLC)

快速蛋白质液相层析(FPLC)编制者:崔恒林ÄKTA purifier 100是快速分离肽、核酸和蛋白的全新液相色谱系统,全机流路采用PEEK惰性塑料,流速范围宽广,为0.01-100 ml/min。

除了操作简单,大量应用工艺和方法模板外,AKTApurifier还加进了很多尖端功能去缩短实验准备和运行所需时间,大大提高实验结果的可靠性和重复性。

仪器的主要技术参数:泵流速为0.01-100 ml/min;最大耐压为600psi ( 40bar );紫外检测范围为0.01-5AU;波长选择有254 nm和280nm;温度范围为4-60℃;电导率范围为1 us/cm-999.9 ms/cm。

系统组成:本系统由控制系统(Monitor UPC-900)、泵(Pump-901)、混合仪(Mixer M-925)、进样阀(Valve INV-907),紫外检测仪和部分收集器(Frac-920)等部件组成。

系统特点1、高压:供液压力和进样压力都很高,一般可达0-5Mpa。

2、高速:载液在色谱柱内的流速比经典液相色谱高很多,可达0-100ml/min。

3、高效:由于采用了新型的固定相,提高了分辨率。

4、高灵敏度:采用了基于光学原理具有高灵敏度的检测器,之外吸收检测,灵敏度可达到10-9g/ml数量级。

5、梯度洗脱:洗脱液的组成可以是连续变化的,增加了洗脱强度,缩短了分析时间。

使用注意事项与维护保养虽然ÄKTA purifier 100的自动化程度极高,但该仪器极易受外界因素的影响甚至损坏,使用该仪器必须严格按使用规范和操作手册进行。

1、开机。

确认将ÄKTA purifier 100主机与电脑电源连接在稳压电源输出端。

先开ÄKTA,后开电脑。

2、关机。

确认退出所有程序后,关闭电脑后关闭ÄKTA purifier 100主机电源。

3、所有流动相和样品均应用 0.22微米孔径滤膜过滤,以防堵塞纯化柱。

HD- HDHDHD-1--1 核酸蛋白检测仪说明书

HD- HDHDHD-1--1 核酸蛋白检测仪说明书

HD-1核酸蛋白检测仪是应用于液相色谱中具有紫外吸收物质(蛋白、核酸)的检测仪器,与层析柱、恒流泵、部份收集器及记录仪配套,即组成一个完整的液相色谱分离分析装置。

在柱层析分离分析过程中,洗脱液流过该仪器样品池,记录仪即可自动绘制出样品分离的图谱(吸受峰),同时可检测出所需样品在部份收集器试管中分布情况,以随时监测柱层析过程。

特别在模索实验过程中,可及时改变洗脱条件,以便迅速取得最佳实验方案。

一.主要技术指标主要技术指标::1. 检 测 波 长: 254nm;280nm2. 流动式样品池: 容积100ul;光程3mm3. 量 程: 0-100%、0-2A4. 最 大 流量: 10ml/min(特殊需要可另配)5. 配记录仪信号: 0~10mV6. 使用环境温度: 0~30℃7. 工 作 时 间: 连续8. 电 源: 220AC 20W9. 保 险 丝: 250AC 1A二.使用方法使用方法:: 1. 在仪器使用前,首先检查检测仪、记录仪、恒流泵、部份收集器的电路连接是否正确,请按各自的说明书要求将各类插头座接妥后,把各自的电源插头插入220伏电源插座上。

2. 打开记录仪“电源开关”,“电源指示灯”亮。

记录仪走纸速度,每小时2—12厘米,可根据记录仪说明书选择不同的走纸速度,用户根据需要自行掌握。

3. 将波长旋钮(在仪器的右侧)旋到所需波长刻度上,把“灵敏度”旋钮旋到“100%”档。

4. 按下“电源”开关,“显示屏”亮,然后观察光源指示灯,如果灯亮,表示光源已开始工作,整台仪器可进入工作状态。

此时记录仪指针从零点开始向右移动某一刻度,调节“光量”旋钮使指针停留在记录仪大约中间位置5mV 左右,数字显示50左右。

一般则由用户掌握,仪器开机稳定时间大约在1小时左右,待基线平直后,可加样测试。

5. 开启恒流泵,(流速选择1—10m/min,用户可根据需要自行掌握)使层析柱缓冲液流过检测仪(下端为进口)。

把“灵敏度”旋钮选择到“100%”档,调节“光量”旋钮,使记录仪指针在10mV,检测仪数字显示为100,即透光率为100%。

核酸蛋白测定仪原理

核酸蛋白测定仪原理

核酸蛋白测定仪原理核酸蛋白测定仪是一种用于快速检测和定量测定核酸和蛋白质浓度的设备。

它基于一系列生物化学和物理原理,通过分析样品中的核酸或蛋白质与试剂在特定条件下发生的染色反应来进行测定。

核酸蛋白测定仪的原理是基于比色法。

比色法是一种通过测量物质吸光度来推断其浓度的方法。

在核酸蛋白测定仪中,常用的染色试剂是Bradford试剂和BCA 试剂。

这些试剂与核酸或蛋白质发生相应的化学反应后,会导致吸光度的变化。

以Bradford试剂为例,它是一种含有染料柯替明蓝G-250的酸性溶液。

当该染料与蛋白质结合后,会导致吸光度的变化。

Bradford试剂中的染料在波长为595nm处吸收最大,而与蛋白质结合后,染料分子间的跃迁会改变吸光度,进而导致595nm处的吸光度的变化。

核酸蛋白测定仪的操作相对简单。

首先,将待测样品与染色试剂混合,使试剂充分溶于样品中。

然后,将混合溶液加入核酸蛋白测定仪的测量池中。

测量池中装有一对光源和光感应器,光源发出特定波长的光线照射到溶液中,光感应器测量溶液对光的吸光度。

核酸蛋白测定仪会检测每个样品的吸光度,并与已知浓度的标准曲线进行比较。

标准曲线是通过将已知浓度的核酸或蛋白质样品作为参照物,使用相同的染色试剂和测量条件得到的。

在比较吸光度后,核酸蛋白测定仪会计算出待测样品中核酸或蛋白质的浓度。

需要注意的是,核酸蛋白测定仪在测定核酸和蛋白质时具有不同的灵敏度。

在测定核酸时,由于核酸的碱基含量相对固定,核酸蛋白测定仪可以非常准确地测定核酸的浓度。

而在测定蛋白质时,蛋白质的氨基酸组成和结构的差异会导致测定结果的误差。

因此,在测定蛋白质时需要注意配合标准曲线来计算准确的浓度。

总之,核酸蛋白测定仪利用比色法原理来测量核酸和蛋白质的浓度。

它通过测量样品与染色试剂反应后的吸光度变化,结合已知浓度的标准曲线,来计算待测样品中核酸或蛋白质的浓度。

提取纯化蛋白实验报告

提取纯化蛋白实验报告

一、实验目的1. 掌握蛋白质提取纯化的基本原理和方法。

2. 学习蛋白质纯化过程中的操作技巧和注意事项。

3. 通过实验验证蛋白质提取纯化的效果。

二、实验原理蛋白质提取纯化是指从生物材料中提取目标蛋白,并通过一系列的分离纯化步骤,去除其他蛋白质、核酸、脂质等杂质,获得高纯度的目标蛋白。

实验中常用的提取纯化方法有:细胞破碎、抽提、沉淀、分级、除盐、浓缩等。

三、实验材料1. 生物材料:细胞、组织、血清等。

2. 试剂:盐酸、稀SDS、有机溶剂、稀碱、硫酸铵、透析袋、超滤膜、Ni柱等。

3. 仪器:匀浆机、离心机、电泳仪、凝胶层析仪等。

四、实验步骤1. 前处理:根据生物材料的不同,选择合适的细胞破碎方法,如动物细胞用匀浆机、组织捣碎机或超声波;植物细胞用石英砂研磨或纤维素酶处理;微生物用超声振荡、研磨、高压、溶菌酶、细胞自溶等。

2. 抽提:根据蛋白质的性质选择合适的抽提方法。

可溶蛋白用盐酸、脂蛋白用稀SDS或有机溶剂、不溶蛋白用稀碱进行抽提。

抽提原则为少量多次。

3. 粗提:去除糖、脂类、核酸及大部分杂蛋白,并将蛋白浓缩。

常用方法有沉淀法(核酸沉淀法、蛋白沉淀法、选择变性)、分级法(盐析或有机溶剂)。

4. 除盐和浓缩:去除蛋白质中的中性盐,常用方法有透析法、分子筛;浓缩方法有反透析、冻干、超滤等。

5. 精细分离:采用凝胶层析、亲和层析、离子交换层析等方法对蛋白质进行精细分离。

6. 鉴定:采用SDS-PAGE、Western Blot等方法鉴定蛋白质的纯度和活性。

五、实验结果与分析1. 实验结果:通过上述步骤,成功提取纯化了目标蛋白,并进行了鉴定。

2. 结果分析:根据SDS-PAGE和Western Blot结果,目标蛋白的纯度达到90%以上,活性得到验证。

六、实验讨论1. 实验过程中,选择合适的细胞破碎方法、抽提方法和分离纯化方法对蛋白质的提取纯化至关重要。

2. 实验过程中应注意操作技巧,如防止蛋白质降解、避免氧化等。

HD-2核酸蛋白检测仪使用说明

HD-2核酸蛋白检测仪使用说明

HD-2核酸蛋白检测仪使用说明1.直接观察数显窗口检测柱层析分离分析过程1)置电源开关在“ON”位置,仪器预热30分钟。

2)选定所需波长(254mm或280mm)的干涉滤光片。

从有机玻璃盒中取出干涉滤波片,插入仪器背后“滤光片”下面小长方孔内,并使其插入到底部位置。

插入时应注意使干涉滤光片侧面有一直径为3mm的半球形凹槽朝上。

(随机安装的是280nm滤光片)3)选定检测样品吸光度或透过率a.透过率:按下按键开关“T”键,“透过率T”指示灯亮。

调节“调T”旋钮,顺时针调节透过率增大。

观察数值变化至“100”(此时透过率T为100%)。

当洗脱样品流过检测仪(样品池下端为进口)时数显窗口将直接显示样品的透过率T。

b.吸光度:按下按键开关“T”键,调节“调T”旋钮,使透过率T为100%,然后按下“2A~0.05A”任何一键,“吸光度A”指示灯亮,吸光度A应为零,如果显示不为零,可调节“A调零”旋钮。

当洗脱样品流过检测仪时数显窗口将直接显示样品的吸光度A。

2.与记录仪配套绘制样品分离图谱。

1)选择系统最佳工作状态a.记录仪“记录纸速度”选择(2~6)cm/h档。

b.记录仪输入“量程”选择10mv档。

c.恒流泵流速视层析柱大小选择(1~10)mL/min。

2)连接检测仪与记录仪:用随机配套的输出线连接检测仪背后“接记录仪”的插口(此插口输出信号可同时输出给部分收集器作为控制信号)与记录仪输入插座。

输出线“黑”、“红”两个接线叉分别接在记录仪“L”、“H”两个输出插座上。

3)绘制“T—h”图谱(透过峰):调节“调T”旋钮,使记录仪记录笔在满量程位置(即T=100%),当洗脱样品流过检测仪时,记录仪即可自动绘制出透过率T随时间h变化的图谱。

4)绘制“A—h”图谱(吸收峰):按下“A调零”旋钮,使吸光度A为零作为基线。

当洗脱样品流过检测仪时,记录仪即可绘制出吸光度A随时间h变化的图谱。

5)按键开关2A至0.05A每一档均表示记录仪满量程读数。

紫外检测仪、核酸蛋白检测仪使用说明书

紫外检测仪、核酸蛋白检测仪使用说明书
四、记录仪
根据用户签订合同而定,目前我公司配备有 XWT-1044S 型台式记录仪、3057-11 型日本进口记录仪。使用时仔细参阅随机说明书。
配我公司仪器记录仪有以下几个要求: ⑴、 量程一定用 10mV。 ⑵、 走纸速度为每小时 3cm、6cm 或 12cm(可自选)
五、使用说明和操作步骤
⑴、在仪器使用前,首先检查检测器,电源和记录仪三部分电连接是否正确, 按说明书上要求将各类插头座接妥后,就把电源箱电源插头和记录仪电源插头插 入 220V 电源插座上。
0-0.02A、0-0.01A.
⑶.记录仪输出:10mV
⑷.积分仪输出:0.1A/mV
⑸.流式样品池:容积 100 微升、光程 3 毫米
微量样品池:容积70 微升、光程 3 毫米
⑹.数显模式:固定 A 量程读数(0-2.0A):可变 A 量程读数(0-2.0A、0-1.0A、
0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、HD-21C-B 型)
核酸蛋白检测仪
紫外检测仪
使 用 说 明 书
上海骥辉科学分析仪器有限公司
核酸蛋白、紫外检测仪仪器各部件示图
(正面)



⑷ ⑸⑹

⑻⑼


⑴、产品名称 ⑵、数字显示 ⑶、出样管 ⑷、光量旋钮 ⑸、仪器型号
⑹、波长旋钮 ⑺、电源开关 ⑻、量程转换器 ⑼、进样管 ⑽、A 调零
⑾、指示灯 ⑿、记录仪信号输出 ⒀、T 调零 ⒁、保险丝插座
⒂、电源插座
(背面)


⒁⒂
一.简介
核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是液相色谱仪的一1、HD–21C–A、HD–21C–B 型核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是根

疾病预防控制机构实验室主要仪器设备配置要求

疾病预防控制机构实验室主要仪器设备配置要求

疾病预防控制机构实验室主要仪器设备配置要求本文介绍了疾病预防控制机构实验室主要仪器设备的配置要求。

以下是各类仪器设备名称及要求:A类仪器设备名称包括微生物鉴定及药敏测试系统、全自动药敏试验菌液接种判读仪、微生物快速鉴定质谱仪、微生物过滤检测系统、真菌毒素浓缩器、全自动样品稀释仪、全自动荧光酶标鉴定仪、多病原快速筛查鉴定系统、致病菌分子分型和基因组数据处理终端、食源性致病菌全基因组快速鉴定及溯源系统、全自动微生物核酸检测系统、贾第鞭毛虫和隐孢子虫检测系统、酶联免疫光谱分析仪、放射免疫分析仪、实时荧光定量PCR扩增仪、PCR扩增仪、电泳系统、脉冲凝胶电泳仪、全自动电泳仪、微生物基因指纹鉴定系统、生物信息学工作站及相关软件、微生物定量检测仪、酶标仪、自动洗板机、空气微生物采样器、水中微生物膜过滤装置、超净工作台、生物安全柜、生物显微镜、生物解剖镜、倒置显微镜、荧光显微镜、暗视野显微镜、电子显微镜、超薄切片机等。

B类仪器设备名称包括微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物。

各省(自治区、直辖市)和地、县级疾病预防控制机构应当根据实际需要配备相应的仪器设备,其中A类仪器设备应当全部配备,B类仪器设备根据实际需要配备。

核酸蛋白转膜仪、紫外核酸蛋白测定仪、杂交炉、自动凝胶成像仪、核酸冷冻离心干燥仪、核酸自动提取仪、病毒载量测定装置、核酸定量检测仪、核酸测序仪、DNA转导仪、层析纯化装置、低温高速离心机、普通离心机、真空冷冻干燥机、压力蒸汽灭菌器、干热灭菌器、高精度恒温恒湿箱、恒温培养箱、生化培养箱、霉菌培养箱、CO2培养箱、厌氧培养装置、厌氧工作站、三气培养箱、恒温水浴箱、恒温摇床培养箱、全自动染色仪、涡旋振荡器、水平摇床、MDS分子检测仪、全自动微生物数码显微培养计数系统、冷封真空生物样本保藏系统、金属浴、程控定量封口机、掌上离心机、低速大容量离心机、定量采样机器人、ATP荧光检测仪、绝对定量数字PCR 仪、蛋白质测序仪、核酸质谱分析系统,这些设备都是微生物实验室必不可少的工具。

Rubisco的层析分离和电泳离心

Rubisco的层析分离和电泳离心

一、实验目的:了解凝胶过滤层析法和SDS-PAGE垂直板型电泳法的基本原理及操作技术。

学习并掌握SDS-PAGE法测定蛋白质相对分子量的技术。

二、实验原理:凝胶过滤层析法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。

层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。

也叫做分子排阻层析。

一种利用带孔凝胶珠作基质,按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。

小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。

一般是大分子先流出来,小分子后流出来。

SDS-PAGE电泳法,即十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳法,。

1.在蛋白质混合样品中各蛋白质组分的迁移率主要取决于分子大小和形状以及所带电荷多少。

2.在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量的十二烷基硫酸钠(SDS),SDS是一种阴离子表面活性剂,加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键和疏水键打开,并结合到蛋白质分子上,使各种蛋白质—SDS复合物都带上相同密度的负电荷,其数量远远超过了蛋白质分子原有的电荷量,从而掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差别。

此时,蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量大小,而其它因素对电泳迁移率的影响几乎可以忽略不计。

3. 当蛋白质的分子量在15000~200000之间时,电泳迁移率与分子量的对数值呈直线关系,符合下列方程: 1gMr =K―bmR 式中:Mr为蛋白质的分子量;K为常数;b为斜率;mR为相对迁移率。

在条件一定时,b 和K均为常数。

若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量的对数作图,可获得一条标准曲线。

未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。

三、实验步骤:总体流程:小麦幼苗叶片PBS提取离心粗酶液35%-55%(NH4)2SO4PBS溶解1ml (NH4)2SO4样品(每组1个)Sephadex G-25 脱盐脱盐样品 SDS-PAGE染色脱色计算Rubisco的大亚基、小亚基分子量详细流程:1)平衡:20ml: 10*洗脱液. 清洗胶柱。

蛋白纯化层析柱--GE 详细介绍

蛋白纯化层析柱--GE 详细介绍

蛋白纯化层析柱--GE 详细介绍蛋白纯化层析柱2021-06-15 15:19:14 易生物仪器浏览次数:1164 网友评论 0 条从个人学术性实验室到大型的医药制造企业,小型或者大规模的蛋白纯化通常都需要几种类型的液相色谱仪。

这些相关的大部分技术已应用了多年,但是新型柱料的发展为这些利用蛋白物理和化学特性进行分离的,经过时间考验的方法注入了新的力量。

其中最值得提到的就是...关键词:蛋白离子交换分离分子物质树脂从个人学术性实验室到大型的医药制造企业,小型或者大规模的蛋白纯化通常都需要几种类型的液相色谱仪。

这些相关的大部分技术已应用了多年,但是新型柱料的发展为这些利用蛋白物理和化学特性进行分离的,经过时间考验的方法注入了新的力量。

其中最值得提到的就是凝胶过滤层析技术(gel filtration,GF),离子交换层析技术(ion exchange,IEX),羟基磷灰石层析(hydroxyapatite,HAP)和疏水作用层析(hydrophobic interaction,HI),以及亲和层析和高效液相色谱方法(high-performance liquid chromatography,HPLC)。

对于一个初接触蛋白纯化的新手而言,从哪儿下手也许是令人头疼的一件事,但是幸运的是目前这些流程都已经逐步系统化了。

GE Healthcare(原Amersham Biosciences)的技术顾问Andrew Mitchell解释道,通常利用液相色谱技术进行蛋白纯化有三步:捕获――从细胞其它成份,比如DNA和RNA中分离需要的蛋白;区分――从与目的蛋白具有相近的大小,或者相似的物理/化学特征的污染物中分离蛋白;修饰――使分离得到的样品处于可使用状态。

这每一个纯化的步骤都有特定的色谱层析技术和最佳的beads大小。

第一步捕获步骤,也就是从细胞裂解物粗成份中分离蛋白,这需要一个具有高容量和高流量(flow rate)的填料。

蛋白质的分离纯化__核酸的分离纯化__分子生物学基本技术

蛋白质的分离纯化__核酸的分离纯化__分子生物学基本技术

第二节 分配层析
分配层析是利用各组分的分配系数不同而予以分离的方法。 分配系数(K)是指一种溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解 达到平衡时,该溶质在两相溶剂中的浓度比值: K=固定相中溶质的浓度/流动相中溶质的浓度 分配系数与溶剂和溶质的性质有关,同时受温度、压力的 影响。所以不同物质的分配系数不同。而在恒温恒压条件下, 某物质在确定的层析系统中的分配系数为一常数。 在分配层析中,通常用多孔性固体支持物如滤纸、硅胶等 吸着一种溶剂作为固定相,另一种与固定相溶剂互不相溶的溶 剂沿固定相流动构成流动相,某溶质在流动相的带动下流经固 定相时,会在两相间进行连续的动态分配。当样品中含有多种 分配系数各不相同的组分时,分配系数越小的组分,随流动相 迁移的越快。两个组分的分配系数差别越大,在两相中分配的 次数越多,越容易被彻底分离。
吸附层析就是通过连续的吸附和解吸附完成的。本节主 要介绍吸附柱层析和聚酰胺薄膜层析 ,薄层吸附层析将在本 章第六节介绍,气固吸附层析在第七节介绍。
一、吸附柱层析
将吸附剂填装 在玻璃或不锈钢管 中,构成层析柱, 层析时欲分离的样 品自柱顶加入,当 样品溶液全部流入 吸附层析柱后,再 加入溶剂冲洗。冲 洗的过程称为洗脱, 加入的溶剂称为洗 脱剂。
固体内部的分子所受的分子间的作用力是对称的,而固 体表面的分子所受的力是不对称的。 向内的一面受内部分子 的作用力较大,而表面向外的一面所受的作用力较小,因而 当气体分子或溶液中溶质分子在运动过程中碰到固体表面时 就会被吸引而停留在固体表面上。
吸附剂与被吸附物分子之间的相互作用是由可逆的范德 华力所引起的,故在一定的条件下,被吸附物可以离开吸附 剂表面,这称为解吸作用。
硅胶具有微酸性,适用于分离酸性和中性物质,如有 机酸、氨基酸、甾体等。

生物化学实验报告:蛋白质分子量的测定——凝胶层析法

生物化学实验报告:蛋白质分子量的测定——凝胶层析法

实验一蛋白质分子量的测定——凝胶层析法一、实验目的1.掌握凝胶层析的基本原理。

2.学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。

二、实验原理凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。

当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。

该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。

凝胶是一种不带电的具有三维空间的多孔网状结构、呈珠状颗粒的物质,每个颗粒的细微结构及筛孔的直径均匀一致,像筛子,小的分子可以进入凝胶网孔,而大的分子则排阻于颗粒之外。

当含有分子大小不一的蛋白质混合物样品加到用此类凝胶颗粒装填而成的层析柱上时,这些物质即随洗脱液的流动而发生移动。

大分子物质沿凝胶颗粒间隙随洗脱液移动,流程短,移动速率快,先被洗出层析柱;而小分子物质可通过凝胶网孔进入颗粒内部,然后再扩散出来,故流程长,移动速度慢,最后被洗出层析柱,从而使样品中不同大小的分子彼此获得分离。

若分子大小介于上述完全排阻或完全渗入凝胶的物质,则居二者之间从柱中流出。

总之,各种不同相对分子质量的蛋白质分子,最终由于它们被排阻和扩散的程度不同,在凝胶柱中所经过的路程和时间也不同,从而彼此可以分离开来。

将凝胶装在柱后,柱床体积称为“总体积”,以Vt表示。

实质上Vt是由V o,Vi与Vg三部分组成,Vo称为“孔隙体积”或“外水体积”,即存在于柱床内凝胶颗粒外面空隙之间的水相体积,相应于一般层析法中柱内流动相的体积;Vi为内体积,即凝胶颗粒内部所含水相的体积。

Vg为凝胶本身的体积。

洗脱体积(Ve)与Vo与Vi之间的关系可用下式表示:Ve=Vo+KdVi式中Ve为洗脱体积,自加入样品时算起,到组分最大浓度(峰)出现时所流出的体积;Kd为样品组分在二相间的分配系数,也可以说Kd是分子量不同的溶质在凝胶内部与外部的分配系数。

它只与被分离的物质分子的大小和凝胶颗粒孔隙的大小分布有关,而与柱的长度粗细无关,也就是说它对每一物质为常数,与柱的物理条件无关。

常用的化学分析仪器

常用的化学分析仪器

常用的化学分析仪器1. 光谱仪光谱仪是一种用于测量样品吸收、发射或散射光的仪器。

它根据不同波长的电磁辐射与物质的相互作用来分析样品的成分和结构。

常见的光谱仪包括紫外可见光谱仪、红外光谱仪和质谱仪。

1.1 紫外可见光谱仪紫外可见光谱仪广泛用于测量样品在紫外和可见光范围内的吸收光谱。

它可以用于定量分析、质量控制、催化反应研究等领域。

紫外可见光谱仪通过测量样品对可见光和紫外光的吸收来确定样品的浓度。

1.2 红外光谱仪红外光谱仪可以用于研究样品在红外光范围内的吸收、辐射和散射谱。

它可以用于物质的结构确定、成分分析、表征化学键等。

红外光谱仪通过测量样品对红外辐射的吸收来分析样品的化学组成。

1.3 质谱仪质谱仪是一种用于测量样品中各个成分的相对质量和丰度的仪器。

它通过将样品分离成离子,并测量进入质谱仪的离子的质量比,来确定各个组分的相对含量。

质谱仪在化学分析、生物医学研究、环境分析等领域具有广泛的应用。

2. 色谱仪色谱仪是一种分离和分析复杂混合物的仪器。

它根据样品中化合物在固定相和移动相之间相互作用的差异来将其分离。

常见的色谱仪包括气相色谱仪、液相色谱仪和层析仪。

2.1 气相色谱仪气相色谱仪广泛用于分析气体和挥发性物质中的化合物。

它通过将样品在固定相上发生吸附、分配、分子间作用等过程,实现挥发性化合物的分离和定量分析。

气相色谱仪在食品检测、环境监测、药物分析等领域有重要应用。

2.2 液相色谱仪液相色谱仪用于分析样品溶液中的化合物。

它将样品通过溶解于流动相中,并在固定相上发生分配、吸附、离子交换等过程来分离化合物。

液相色谱仪在药物分析、环境分析、天然产物分离等领域有广泛的应用。

2.3 层析仪层析仪是一种采用层析法进行分离和分析的仪器。

它将样品溶液在由固相和流动相组成的层析柱中进行分离。

常见的层析法包括纸层析、薄层层析、柱层析等。

层析仪在蛋白质分离、核酸分析、药物检测等领域具有重要应用。

3. 光电仪器光电仪器是一类利用光电效应进行测量的仪器。

SHQT-3自动液相色谱分离层析仪和自动液相色谱分离层析仪价格

SHQT-3自动液相色谱分离层析仪和自动液相色谱分离层析仪价格
厂家:南北分离层析仪和自动液相色谱分离层析仪价格
SHQT-3自动液相色谱分离层析仪ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
标题:SHQT-3自动液相色谱分离层析仪
型号及规格配置仪器SHQT-1 QT-58A智能核酸蛋白检测仪(254nm、280nm)LED数显,含数显恒流泵QT-80FC-LCD智能自动部份收集器N2000液相色谱数据工作站(附软件光盘)层析柱:10×300(mm)、26×500(mm)各1支中压层析柱带转换接头25×400(mm)1支SHQT-2 QT-58A智能核酸蛋白检测仪(254nm、280nm)LED数显,含数显恒流泵QT-100FC-LCD智能自动部份收集器N2000液相色谱数据工作站(附软件光盘)层析柱:10×300(mm)、26×500(mm)各1支中压层析柱带转换接头25×400(mm)1支SHQT-3 QT-58A智能紫外检测仪(220nm、254nm、280nm、340nm)LED数显,含数显恒流泵QT-80FC-LCD智能自动...
厂家:南北分离层析仪
标题:MD99-3自动核酸蛋白分离层析仪
自动核酸蛋白分离层析仪系列产品名称型号外形尺寸长×宽×高主要技术参数重量(Kg)出厂价(元)自动核酸蛋白分离层析仪MA99-1普通配置(五件套)HD-21-1核酸蛋白检测仪,BSZ-100自动部份收集器,HL-2恒流泵,HD-A电脑工作站或XWT-S台式记录仪(二选一)层析柱:ф1.0×40,ф1.6×50,ф2.6×60各一支30 22800波长:254,280nm,定时范围:1秒-24小时收集容量:12ml×100,流量:0.1-10ml/m MA99-2标准配置(五件套)HD-21-1核酸蛋白检测仪,SBS-100数控计滴自动部份收集器,DHL-A电脑数显恒流泵,HD-A电脑工作站或XWT-S台式记录仪(...

凝胶过滤层析

凝胶过滤层析

【实验目的】掌握凝胶过滤层析的原理及操作方法【实验原理】凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。

是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。

层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。

1、器材:核酸蛋白检测仪、层析柱、水浴锅、真空泵2、试剂:SephadexG-25【实验步骤】(1)凝胶的选择:在经过膜分离后,分子量<5000。

本次实验选用G-25葡聚糖凝胶(分离范围1000-5000)。

(2)柱子的选择:分子量<5000,膜分离后玉米肽中不同的小肽分子量比较接近,属于分级分离,所以选用50*1.6规格的柱子。

(3)干凝胶用量的计算:柱子体积/膨胀度,G-25膨胀度是4~6。

(4)凝胶的预处理:将干胶颗粒悬浮于5-10倍量的蒸馏水或洗脱液中充分溶胀,溶胀之后将极细的小颗粒倾泻出去。

可以用玻璃棒搅拌,但是不能剧烈,防止凝胶破裂。

多洗几次,尽量洗干净。

自然溶胀费时较长,加热可使溶胀加速,即在沸水浴中将湿凝胶浆逐渐升温至近沸,1-2小时即可达到凝胶的充分胀溶。

充分溶胀后,进行真空脱气。

(5)洗脱液的选择:本实验采用蒸馏水做洗脱液。

(6)凝胶的填充:将层析柱与地面垂直固定在架子上,然后将处理好的凝胶倒入柱子里,不能有气泡,要防止干柱。

(7)柱平衡:装柱完成后,用洗脱液来平衡柱子,直至核酸蛋白检测系统基线保持水平半个小时以上。

(8)上样:上样量在5%~10%。

(9)标准曲线的制作:本次实验用到还原型谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽、杆菌肽(氧化型谷胱甘肽(GSSG),M=612.63;还原型谷胱甘肽(GSH),M=307.33;杆菌肽M=1422.69)。

三种肽各称取0.03g 配成2ml,进行层析,在恒定流速下进行凝胶过滤层析。

AKTA

AKTA

AKTA purifier一、仪器介绍AKTA purifier 是一个快速分离肽、核酸、蛋白和天然产物的全新液相色谱系统,其配套的色谱柱和方法模板可以进行凝胶过滤、离子交换、疏水层析、反向层析和亲和层析,适合从一般科研检验到药品质检或临床分析应用。

本台仪器还配有组份收集器Fra-950,具有峰收集功能,可使用UNICORN软件控制。

AKTA purifier快速纯化系统是GE医疗集团的Amersham Biosciences公司产品,可以操作各种层析技术,适合分离和纯化各种生物分子,包括天然蛋白质,重组和融合蛋白质、肽、寡核苷酸、质粒、病毒、抗生素、生物碱等等,适合操作肽图等精确分析和小量制备应用,最适于纯化设计实验。

本实验室拥有ATKA系列以下产品: AKTA Purifier 100,AKTA Purifier 10+,AKTA Basic 10。

二、性能特点1 、流量范围: 0.01-100mL/min 。

2 、压力范围: 0-10MPa ,适于高压、中压分析及制备。

3 、混合能力:全自动双泵系统,流速粒度高,梯度重复性高,自动缓冲液配置。

4 、波长范围: 190-700nm ,可实时连续检测3个波长。

5 、实时 pH 监测器: 2-12 。

6 、实时电导监测器:1μs/cm-999.9μs/cm 。

7 、样品自动收集器。

8 、电脑及软件系统:外置电脑 Window XP 平台Unicorn 软件,真正多界面操作,内置150多种样的预制程序,自动搜索功能。

三、用途快速完成纯化生物分子蛋白质、核酸、肽等,一机完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大。

可以进行生物大分子的范例纯化 , 已知和未知蛋白质的纯化 , 蛋白质的结构动力学药物作用靶点研究 , 药物蛋白的分离 , 蛋白质工程药物的合成 , 蛋白质的定性 , 组织细胞中各种蛋白质在生物体中如何发展功能,基因表达产物的分离。

可以检测、分离、纯化多种生物样品,能够有效地针对各种样品:植物、动物、人类生物体,检测、纯化、分离特异性生物小分子。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

核酸蛋白分离层析仪/自动核酸蛋白分离层析仪/核酸蛋白分析仪/核酸蛋白检测仪/核酸蛋白测定仪价格优惠,专业生产销售厂家:郑州南北仪器设备有限公司
自动核酸蛋白分离层析仪简介:
层析谱分析分析系统由层析谱电脑采集器、电脑和分析软件组成。

实现层析分离过程中对吸光度(A)和透过率(T%)的实时采集、描谱、保存、参数计算、打印谱图等功能。

郑州南北仪器设备有限公司专业供应生产销售核酸蛋白分离层析仪,欢迎您来电咨询核酸蛋白分离层析仪的详细信息!
南北集团售后服务宗旨:
●向用户提供持续、高效、快捷的服务,构建优质服务品牌;
●建立完善的服务网络,向用户提供专业化、标准化、多元化,产品化服务;
●以用户为中心,以用户满意度作为衡量一切工作的标准;
南北集团售后服务宗旨:
●终身提供维修及维护服务,终身负责零配件的及时供应;
●终身免费提供技术咨询及技术支持服务;
●新品依照南北购销合同实行整机免费保修,
●在保修期内,不收取上门费,搬运费,人工费等,免费更换一切在正常使用情况下损坏的零配件;
●在保修期外,不收取上门费,搬运费,人工费等,仅对需更换的零配件收取成本费用;南北集团具有完善的售后服务保障体系,覆盖国内各市县区的售后服务网络,产品使用期间凡发生质量问题,只需拨打南北集团售后服务热线,后续的故障确认,技术指导,上门服务,定期回访都有我南北集团售后服务体系完成。

郑州南北仪器设备有限公司
(南北设备集团)
南北通过向客户提供领先的技术、产品,更为优异的质量和服务,更高的性价比价值体来追求核酸蛋白分离层析仪行业第一领先地位。

相关文档
最新文档