东北小鲵内脏中脂肪酸组成分析

2010年5月第31卷第5期食品研究与开发2000[J],Trends in Analytical Chemistry 2006,25(10):1006-1015[4]K Z Brainina,N A Malakhova,N Y Stojko,Stripping voltammetry in environmental and food analysis [J].Fresenius.Anal.Chem.,2000,368:307-325[5]J Wang.Stripping analysis at bismuth electrodes:A review [J].Electroanalysis,2005,17:1341-1346[6]S B Hocevar,B Ogorevc,J Wang,B Pihlar,A study on operational parameters for advanced use of bismuth film electrode in anodicstripping voltammetry [J].Electroanalysis,2002,14:1707-1712[7]S A A Elsuccary.I ?vancara,R Metelka,et al.Application of bismuth film plated carbon paste electrode in highly alkaline media [J].Sci.Pap.Univ.Pardubiee,Ser,A,2003,9:5-17[8]关皓.加压法速生豆芽品质好产量增[J].当代蔬菜，2004,7:29收稿日期：2010-03-18东北小鲵（Hynobius leachii ），属于两栖纲（Amphibia ）滑体亚纲（Lissamphibia ）有尾目（Caudata ）小鲵科（Hynobiidae ），该物种已被列入中国国家林业局2000年8月1日发布的《国家保护的有益的或者有重要经济、科学研究价值的陆生野生动物名录》[1-2]。

目前发现其主要分布在朝鲜半岛，在我国黑龙江、辽宁、吉林等地区也有发现，东北小鲵一般生活于海拔200m~800m 的群山密林山沟里。

刘坤、彭仁海等于2008年已对豫南小鲵、商城小鲵进行了脂肪酸的组成分析[3-4]，但对于东北小鲵的研究仅仅限于繁殖生态、细胞结构及环境温度对其生长方面的研究[6-9]，赵金星[5]等对东北小鲵肌肉生化成分做了分析，而关于其体内脂肪酸组成方面的研究目前少见报道。

本试验对其内脏中脂肪酸组成及相对含量进行研究分析，可为进一步开发东北小鲵经济资源提供参考。

1材料与方法1.1仪器及试剂材料1.1.1仪器GC-MS 联用仪HP6980/5973型：美国惠普公司；东北小鲵内脏中脂肪酸组成分析曹坦1，2，辛广1，2，*，张博2，李书倩1,2（1.沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳110000；2.鞍山师范学院，辽宁鞍山114005）摘要：粗脂肪经索氏提取方法提取后，甲酯化处理，通过气相色谱-质谱方法测定其脂肪酸的组成及相对含量。

结果共鉴定出15种脂肪酸成分，包括：6种不饱和脂肪酸和9种饱和脂肪酸。

不饱和脂肪酸相对含量占约62.43%，其中，油酸、亚油酸、棕榈酸含量最多，分别达到了34.27%、11.84%、12.98%。

关键词：东北小鲵；脂肪酸；气相色谱-质谱（GC－MS ）Composition Analysis of Fatty Acid in Visceral of Hynobius LeachiiCAO Tan 1,2,XIN Guang 1，2，*,ZHANG Bo 2,LI Shu-qian 1,2（1.Food I nstitute of S henyang A griculture U niversity ，Shenyang 110000，Liaoning ，China ；2.Anshan NormalUniversity ，Anshan 114005,Liaoning ，China ）Abstract :The Rude Hynobius oil was obtained by the method of Soxhle Extraction,then methyl-esterfied with KOH-CH 3OH,and its composition was analyzed by GC-MS.The results show that 15kinds of fatty acids were identified,6kinds of unsaturated fatty acid and 9kinds of saturated fatty acid,of which unsaturated fatty acids accounted for about 62.43%,the content of Oleic acid,Linoleic acid,Palmitic acid each reached 34.27%,11.84%,12.98%.Key words :Hynobius leachii ;fatty acid;Gas chromatography/mass spectrometry 作者简介：曹坦(1982—)，男（汉），硕士，研究方向：食品生物技术研究。

*通讯作者!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!检测分析1462010年5月第31卷第5期食品研究与开发相对含量0.520.672.102.342.3212.981.630.821.0811.8434.275.538.123.584.89表1东北小鲵内脏中脂肪酸含量测定结果Table 1The results of types and contents of fatty acid invisceral of Hynobius leachi 出峰号123456789101112131415保留时间/min 8.959.8611.7612.6114.1114.3614.9115.1415.5816.4116.4716.5416.7418.2718.66脂肪酸（甲酯）癸酸十三烷酸十四烷酸9-甲基十四酸棕榈油酸棕榈酸邻苯二甲酸二丁酯14-甲基棕榈酸十七烷酸10，13-十八碳二烯酸10-十八碳烯酸8-十八碳烯酸十八烷酸5，8，11，14-二十碳四烯酸9-十八碳烯酸分子式C 11H 22O 2C 14H 28O C 15H 30O 2C 16H 32O 2C 17H 32O 2C 17H 34O 2C 16H 22O 4C 18H 36O 2C 18H 36O 2C 19H 34O 2C 19H 36O 2C 19H 36O 2C 19H 38O 2C 22H 36O 2C 19H 36O 2注：脂肪酸均为脂肪酸甲酯；质谱数据匹配度为80%以上。

旋转蒸发仪：赛多利斯科学仪器；电子天平：上海亚泰生化仪器厂。

1.1.2材料东北小鲵：2009年5月1日采集于辽宁丹东凤城龙山地区东北小鲵养殖基地。

1.1.3试剂石油醚（60～90）、正己烷、甲醇等均为AR 级试剂：均为天津市光复精细化工研究所购买。

1.2小鲵油提取及其脂肪酸甲酯化1.2.1小鲵油提取及其脂肪酸甲酯化将东北小鲵在纯净水中饲养24h ，尽量排除体内废物，取其全部内脏，风干水分至恒重，研碎，称2g 放入250mL 索氏提取器中，加入100mL 石油醚，水浴回流5h ～6h ，分出石油醚层后再用40mL 石油醚提取,合并提取液，分别用饱和NaCl 溶液和蒸馏水各洗涤1次，再用无水Na 2SO 4干燥过夜。

用旋转蒸发仪蒸去溶剂，得到淡黄色的小鲵油。

分别用移液管吸取小鲵油0.2mL ，置于10mL 容量瓶中，加入乙醚-正己烷（2∶1，体积比）1.0mL 、甲醇1.0mL 、0.8mol/L KOH-CH 3OH 1.0mL ，摇匀，静置5min ，加蒸馏水至刻度，待萃取分层后，吸取上层脂肪酸甲脂。

1.2.2GC-MS 条件色谱条件：HP-5弹性石英毛细管色谱柱30m ×0.25mm ×0.25μm ；程序升温100℃（8℃/min ）→250℃（10min ），进样口温度280℃；分流比20∶1；氦气为载气，载气流量为1mL/min ；接口温度230℃；进样量0.2μL 。

质谱条件：离子源为EI 源；电离电压为70eV ，离子源温度280℃，倍增器电压1482eV ，发射电流34.6mA ；扫描范围30amu ～500amu 。

2结果与分析东北小鲵油组分的GC-MS 总离子流图见图1。

图1表明，通过GC-MS 分析在东北小鲵内脏中共测定出15种脂肪酸。

主要为：棕榈酸、棕榈油酸、十四烷酸、十八烷酸、油酸（十八碳烯酸）、亚油酸（十八碳二烯酸）、花生四烯酸（二十碳四烯酸）,利用面积归一化法对各组分含量进行计算。

其中，不饱和脂肪酸相对含量占全部脂肪酸的62.43%，油酸、亚油酸和棕榈酸的含量最高，分别达到34.27%、11.84%和12.98%。

东北小鲵内脏中脂肪酸含量见表1。

3结论东北小鲵内脏中含有丰富的脂肪酸达到15种，棕榈油酸、油酸、亚油酸、花生四烯酸等不饱和脂肪酸占到了60%以上。

近些年的一些研究证明：脂肪酸，特别是不饱和脂肪酸具有降低胆固醇、降血脂、抗癌、提高记忆力、治疗前列腺及防脑疲劳等功效[12-16]。

例如，花生四烯酸是大多数前列腺素的前体，前列腺素是能调节细胞功能的激素样物质。

另外，在婴儿奶粉中添加花生四烯酸能显著提高婴儿解决问题能力和学习语言能力；亚油酸具有抗癌抗氧化作用，能降低血液中的胆固醇含量，并可作为生长促进因子，亚油酸也是人类自身不能合成的必需脂肪酸。

所以，东北小鲵可作为一种很好的滋补保健佳品，合理开发东北地区东北小鲵资源，将具有广阔的市场前景和社会效益。

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