去颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5表达的影响

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细胞龄相关分子在不同月龄大鼠睾丸及附睾的表达

华中科技大学硕士学位论文细胞龄相关分子在不同月龄大鼠睾丸和附睾的表达硕士研究生段永刚导师刘子龙副教授华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉，湖北430030前言无论是人还是动物，体细胞和生殖细胞的衰老组织/细胞特征性改变和时间虽存在有差异，但作为衰老本身确有其类似规律可循。

就现在研究而言，睾丸和附睾衰老的研究远不及脑衰老研究进展迅速。

前期工作显示，老龄大鼠睾丸间质细胞tau蛋白表达上调，而微管相关蛋白（microtubule associated proteins ，MAPs）表达下调[ 1]。

证明睾丸的老化表现为tau蛋白这种老化物质在微管中发生堆积，由于微管相关蛋白的减少，而影响睾丸间质细胞的生理效应的发挥。

老人前列腺癌去势睾丸组织中雄激素受体（androgen receptor, AR）和热休克蛋白90α（heat shock protein 90α, HSP90α）表达的不一致性[2]，虽然一方面可以部分地解释由于HSP90α表达下降而导致AR表达发生遍在化，进而影响雄激素的生物学功能的发挥。

然而，在衰老睾丸，动脉硬化、组织缺血和间质细胞变性等老龄化征象，何以会引起HSP90α表达上调？附睾在衰老过程中，各段均显示出特异性的形态结构改变[3]；同时，衰老的大鼠附睾组织细胞核中老化相关基因表达上调[4]。

tau蛋白在大鼠丘脑和海马的表达呈明显地增龄性规律，且Gas7的表达水平与tau蛋白表达呈正相关（未发表资料）。

由此看来，机体的衰老机制远不是那么清晰。

故此，有必要藉助能明确反映细胞龄分子在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中特异性表达进行深入研究，力图能部分地解释这两个器官从成熟到衰老某些机制问题，进而欲求为男性衰老的发生机制提供理论依据。

本工作选取c-Kit、HIWI、波形蛋白和生长停滞特异性蛋白7（growth arrest-specific protein 7, Gas7）等细胞龄相关分子，检查它们在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中表达的差异性。

心理应激对大鼠睾丸细胞FSH 及LH 表达的影响研究[J

2005 第 10 卷第 1 期贺新红等 : 心理应激对大鼠睾丸细胞 FSH及 LH表达的影响研究 3
·15·
213 心理应激后睾丸间质 FSH、LH 阳性表达相对光密度的变化
A、B、C 三组睾丸间质 FSH、LH阳性表达产物相对光密度的检测结果见表 2
表 2 心理应激对睾丸间质 FSH、LH表达阳性产物相对光密度的影响 (X ±S)
选用成年雄性健康 SD 大鼠 15只 , 体重 180～ 200g, 随机等分成 A、B、C 3组 , 每组 5只。在同
21 结果
等条件下进行暗盒适应性训练一周后 , 依照 yanjin 等 [ 5 ]创建的心理应激模型方法 , 即使用 SD - 731 光电刺激仪于每天清晨给大鼠进行光电刺激 , 连续 6天。其中 , A 组在给予规律的电刺激 ( 015 mA , 20 m in) 前或后 , 给予无规律的闪光刺激 1 次 ; B 组在给予规律的电刺激 (条件同 A 组 ) 前 10 秒 , 给予规律的闪光刺激 1次 ; C组则给予无规律的闪光刺激 (条件同 A 组 ) 1次作对照。第 7天晨 , 各组动物按先前方式给予闪光刺激后 , 即在腹腔麻醉下开胸 , 用 4%多聚甲醛 ( PBS配制 , 011 mol, pH 712) 经左心室常规灌流固定后 , 取睾丸置于上述固定液中再固定 24小时。
HE Xin2hong , ZHANG De2xing, WU Yan2m ing, ZHANG Yu2ying, L I Zhi2hua
(Dep t. of H istology & Embryology, Guangdong College of Pharmacy, Guangzhou 510224)

膜联蛋白5对雄性SD大鼠睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响

ＬＮａ－ｉｇ，ＬＩＨａ— ａＩＣｈｉｙｎＵｉｙｎ，ＴＡＯａ — ｉｎ，Ｓｈｎｓｎ，ＬＵｎＸｉｏｑａＨＩＳａ－ｈａＲｏｇ，ＹＡＯｎＢｉｇ
（ＲｓａｃｓｔｔｏｌｉｌａｏａｏｙＭｅｉｎ，ｎｎｅｅａｏｉｌｆＮｎｎｌａｙＣｍｎ，ＰｅｅｒＩｔｕＣｉｃｂｒｔｄｃｅＮａｊｇＧｎｒｌｓｔａｊｇＭｉｔｒｏｍａｄｈｎｉｅｆｎａＬｒｉｉＨｐａｏｉｉ
００）Ｐ＜．１，．．２，００］７５
ｋ组大鼠睾丸组织Ｐ５ｅ白表达提高了３．％［０３ｇ４０ｅ蛋ｓ４２（．７±００）ｓ（．８± ．４ｙ０２
ｋ组和１ｘ／ｇ组的３ — Ｓ表达也分别增加了１．％［１５ｇ５／ｋｇｐＨＤ４７（．３±０１）／１３．Ｏ３．４±００）Ｐ＜５（．５，
林钗英，海燕，柳陶晓倩，时姗姗，路榕，姚兵
【要】目的研究注射膜联蛋白５后雄性ｓ摘Ｄ大鼠睾丸类固醇急性调节蛋白（ｔｏｏｅｉａｔｒｕｔｙｐｔｎＳｒｄｇｃｃｅｅｌｏｒｅ，ｅｉｎｕｇａｒｏｉ
００］２．％［２６０１）ｕ２３００）Ｐ＜．２；ＳＡ．１和４４（．７４．４ｓ（．４± ．５，００］而ｔＲ的表达无论在转录水平还是在蛋白水平上，－较对照组差
异均无统计学意义。结论膜联蛋白５可通过调节Ｐ５ｓｃ３一Ｓ４０ｃ与８ＨＤ的表达来调节睾酮合成。

苯并(a)芘对大鼠睾丸支持细胞连接蛋白基因表达的影响

ｍＲＮＡ表达。［结果］在ＢａＰ５０ｐｍｏｌ／Ｌ时，支持细胞活力降低（和对照组相比，Ｐ＜０．０１）；在ＢａＰ１０ｐ，ｍｏｌ／Ｌ时ｃａｓｐａｓｅ．３活性升高，连接蛋白ｃｏｎｎｅｘｉｎ４３、ｏｃｃｌｕｄｉｎ、和ｚ０１基因的ｍＲＮＡ表达降低（和对照组相比，Ｐ＜０．０５ｏ在ＢａＰ１００ｌａｎ０ｉ１／Ｌ时连接蛋白Ｎ・ｅａｄｈｅｒｉｎ基因的ｍＲＮＡ表达降低（和对照组相比，尸＜Ｏ．０５ｏ加入ｃａｓｐａｓｅ一３抑制剂后，ＢａＰ所诱导的连接蛋白基因表达下降，且随ｃａｓｐａｓｅ－３活性变化而发生改变。［结论］ＢａＰ能诱导大鼠支持细胞连接蛋白ｍＲＮＡ表达下降，ＢａＰ诱导的ｃａｓｐａｓｅ－３活性上升是调节连接蛋白ｍＲＮＡ表达下降的可能机制。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｂｅｎｚｏ（ａ）ｐｙｒｅｎｅ（ＢａＰ）ｏｎｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｊｕｎｃｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅｓ
环境与职业医学２０１３年３月第３０卷第３期文章编号：１００６ — ３６１７（２０１３）０３ — ０１６１．０６

心肌肌浆网Ca2ATP酶研究进展

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓａｒｃｏ／ＥｎｄｏｐｌａｓｍｉｅＲｅｆｉｃｕｌｕｍ
Ｃａ２＋・ＡＴＰｍ（ＳＥＲＣＡ２ａ）；Ｈｅａｒｔ
ｆａｉｌｕｒｅ；Ｈｙｐｅａｒｏ－
ｐｈｙ；Ｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
心肌肌浆网Ｃａ２＋一ＡＴＰ酶（ｓａｒｃｏ／ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ
ｔｉｃｕｌｕｍ
ｒｅ—
物干预如使用甲状腺激素类似物、３－＇肾上腺素受体
ｓｅｒｔｏｈ
ｂｙ
［７］
ＳｏｒｄｏｉｌｌｅｔＣ，ＸｈａｕｖｉｎＭＡ，ｄｅＰｅｒｅｔｔｉＥ，矗ａ／．Ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｄｉｒｅｃｔｌｙｓｔｉｍｕｌａｔｅｓｓｔｅｒｅｉｄｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｐｒｉｍａｒｙｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆｐｏｒ－
ｃｉｎｅ
ｔｈｅ
ｅｅｌｈ［Ｊ］．
李晓梅（综述），马依彤‘（审校）
（新疆医科大学第一附属医院心脏中心，乌鲁木齐８３００５４）中图分类号：１１５４１文献标识码：Ａ文章编号：１００６－２０８４（２００８）１７－２５７０－０４
挥重要作用，在心肌舒张期将
摘要：在正常心肌舒张期，心肌肌浆网Ｃａ２＋－Ａ口酶（ＳＥＲＣＡ２ａ）将ｃａ２＋从胞质中摄回肌浆
Ｒｅｓ
［２２］祝辉，沙家豪，周作民．类固醇生成因子在生殖功能中的作用［Ｊ］．生殖医学杂志，１９９７，６（４）：２４６－２４８．
ＢｉｏｃｈｅＢｉｏｐｈｙ
Ｃｏｍｍｕｎ，１９８７。１４６（２）：３８７－３９４．
收稿Ｅｔ期：２００８．０４－２８修回日期：２００８＿０７硝
心肌肌浆网Ｃａ“．ＡＴＰ酶研究进展
ｄｅｒｍａｌ卑砌ｆａｃｔｏｒ（ＥＧＦ）ｅｆｆｅｃｔ
ｍａｌＦａｎｔｏｎｉＧ，ＭｏｒｒｉｓＰＬ，Ｆｏｒｔｉｃｒｉｎｅ／ｐａｒａｃｒｉｎｅｆａｃｔｏｒｉｎｒａｔ

膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

时，睾酮水平分别升高了１％［１．８± ．０ｎｏＬｕ１．２± ．４ｎｏＬ（８（４３０３）ｍｌ／ｓ（２１０７）ｍｌ］Ｐ＜００）２％［１．５± ．７ｎｏＬ郴／．１和６（５２０４）ｍｌ／（２１０７）ｍｌＬ（００）浓度为１ｍＬＬ时，１．２± ．４ｎｏ］Ｐ＜．１；／０ｏ／睾酮水平虽也有升高趋势，无显著性差异；Ｗｅｔｎｂｏｉ但而ｓｒｌｔｎｅｔｇ结
Ｅｅｎｅｉ５ｏｓｓｒｎｓｒｉｎｘｒｓｎｏ３ｈｄｏｙｅｏｅｙｒｅａａｆｃｏａｎｘｎｔｔｔｏｅｅｅｏａｄｅｅｉｆ￣ｙｒｘｓｒｉｄｈｄｏｎｓｉｒｔｔｆｎｅｏｅｃｔｎｐｓｏｔｄｇｅｎ
Ｌｙｉｅｌｅｄｇｃｌｓ
（．ＩｓｔｔｏｌｉｌａｏａｏｙＭｅｉｎ，ａｎｅｅａＨｓｉｌｆＮｎｎｌａｙＣｍａｄ１ＰｎｔｕｉｅｆＣｉｃｂｒｔｄｃｅＮｇＧｎｒｌｏｔｎａＬｒｉｐａｏａｊｇＭｉｔｒｏｍｎ，儿４ｉｉ，Ｎｎｉ１０２ｉｎｓ，Ｃｉａ２ｉｓｎＱＨａｔ，ＤｐｒｅｔｆＪｉｔｏｉｉ，ＮｎｎｌａｙＣｍａｊｇ２００，Ｊｇｕｈｎ；．Ｄｖｉ厂ｅｌｎａｉｏｈｅａｔｎｏｎＬｇｓｃｍｏｔｓａｆｇＭｉｔｏ — ｉｉｒ
・
３４２・
医学研究生学报２１００年４月第２３卷第４期ＪＭｅｏｔａｏ．３Ｎ．生Ａｒ，Ｑ０ｄＰｓｒ，Ｖ１２一ｏ，ｐｉ２１ｇｌ

生物工程学

维普资讯
Ｑ５７
２００２４０８７７２
ｔｓｆｍｏｅｅｕｎｅｆｉｏｏｌｒｔｉｅｅ／ｉｒｃｏｐｏｔｒｓｑｅｃｓｂｓｍａｏｅｎｇｎｓ李ｏｒｐ
荧光定量Ｒ — ＣＲ检测去下颔下腺大鼠睾丸ａｎｘｎＴＰｎｅｉ５ｒｓｉｎｆｘｍＲＴｅｅｐｅｓｏｓｏ
ａｎｘｎ５ｍＲｎｅｉＮＡｎａＮＡｔＱ— — ＣＲｉｅａｄＢｘｍＲｗｉＦ — — ｈＲＴＰｔｎｈ
ｒｔｅｔｉｕｍａｄｂｌｒｌｄｒｍｏｅ／ａｓｓｔｓｂｎｉｕａａｅｖｄ王晨阳（ｔｉｗｈｇｎ南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所．南京江苏，２００）百坤 …／剖学报．０８９１．１６１０１０２，马／解一２０，（）０－３一１观察下颌下腺切除对大鼠睾丸膜联蛋白５ａｎｘ）（ｅｉ５ｎｎ和ＢｘｍＲａＮＡ表达的影响。切除大鼠下颌下腺，别于分术后１ｄ８和４ｄ、２ｄ４２处死大鼠，提取睾丸总ＲＡ反转录，Ｎ，设计特异性引物和Ｔｑｎ探针，ａｍａ荧光定量Ｒ — ＣＴＰＲ检测ａｎｘｎ５ＢｘｍＲＡ的表达。荧光定量ＰＲ结果显ｎｅｉ和ａＮＣ示，与对照组相比，切除下颔下腺１ｄ２ｄ实验组大鼠４和８后，睾丸ａｎｘｍＲＡ分别升高了３．％和５．但无显ｎｅｉ５Ｎｎ８５５％，３著性差异；实验组大鼠睾丸ＢｘＲＡ分别升高了７．ａＮｍ０６％和８．其升高具有显著性差异（ｌ．和Ｐ０；０５％，Ｊ０５Ｄ０＜＜．１切除０）下颔下腺４ｄ实验组大鼠睾丸ａｎｘ和ＢｘＲＡ２时，ｎｅｉ５ｎａＮｍ分别升高５６和２３几乎恢复到与对照组相同的水．％．％，平。下颌下腺切除后１ｄ２ｄ４和８可造成大鼠睾丸ａｎｘｎｅｉｎ５ＢｘＮ的表达升高；除后４ｄｎｅｉ５Ｂｘ和ａｍＲＡ切２，ｎｘ和ａａｎｍＲＮＡ又恢复到正常水平。图４２１表参２

促性腺激素释放激素类似物对大鼠睾丸间质细胞膜联蛋白5和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA表达的影响

摘要：目的：观察促性腺激素释放激素（ｎＨ）ＧＲ类似物对大鼠睾丸间质细胞ａｎｘｎｅｉ５和３一ＤｍＮｎ母ＨＳＲＡ表达的
影响。方法：原代培养大鼠睾丸间质细胞４，８ｈ后分别用不同终浓度的ＧＲｎＨ激动剂（ｎＨ— ｏｉ，ＧＲａＧＲａｎｓｎＨ）ｇｔ（０～ｍｌＬ１～ｍＬＬ１ｍｌＬ和ＧＲ拮抗齐（ｎＨａｔｇｎｓ，ＧＲａｔ（０ｍＬＬ１ｍＬＬ１ｏ、０／ｏ／、０ｏ）／ｎＨ０ＧＲ —ｎａｏｉｓｎＨｎ）１～ｏ／、０～ｏ／、ｔ１ｍ￣Ｌ处理细胞，０ｏ）提取细胞总ＲＡ，Ｎ反转录，设计特异性引物和Ｔｇａａｍｎ探针，光定量ＰＲ检测膜联蛋白５荧Ｃ（ｎｅｉ５和３．固醇脱氢酶（３ＨＤａｎｘ）Ｂ羟类ｎ３－Ｓ）ｍＲＡ表达的改变。结果：Ｎ荧光定量ＰＲ结果显示，Ｃ与未￣ＧＲＵｎＨ类似物的对照组相比，ＧＲａ的终浓度为１～ｍＬＬ１～ｍｏ／当ｎＨ００／、０ＬＬ时，实验组大鼠睾丸间质细胞ａｎｘｍＮｎｅｉ５ＲＡｎ分别升高了３．９和３．９，８８％５２％均具有统计学意义（００）当ＧＲａ的浓度为１～ｍｏ／Ｐ＜．５；ｎＨ０ＬＬ时，ＢＨＤｍＮ３ —ＳＲＡ
Ｍｉｔｒｏｍｎ，ａｊｇ２００ＪａｇｕＣｉ）ｌａｙＣｍａｄＮｎｎ１０２，ｉｎｓ，ｈｎｉｉａＡｓａｔＯｊｃｉ：ｏｉｖｓｇｔｔｅｅｅｔｏｅＧＲｎｌｕｎｔｅｅｐｅｓｎｆｎｅｉｂｔｃ：ｂｅｔｅＴｅｔａｅｈｆｃｆｈｎＨａａｏｅｏｘｒｓｉｓｏａｎｘ５ｒｖｎｉｆｓｔｇｈｏｎ

消渴平含药血清对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

Effects of Serum Containing Xiaokeping(消渴平)on Apoptosis of Raf Mesangial Cells Induced by High Glucose
HU Shuang, XIN Chuanwei, YANG Bo, XIA Zhongni (Zhejiang Academy of Chinese Medicine, Tongde Hospital of Zhejiang Province, Hangzhou, Zhejiang 310012) ABSTRACT Objective： To observe the effects of Xiaokeping on the apoptosis of rat' s mesangial cells induced by high glucose, and to explore the mechanism of its prevention and treatment of diabetic kidney disease. Meth ods :Rat' mesangial cells were co - cultured with different concentrations of serum containing XKP or Irbesartan and high glucose. Cell apoptosis was detected by TUNEL, Bax and Bel -2 mRNA expressions in mesangial cells of rat' s glomerulus were detected by fluorescence quantitative PCR, and protein expressions of cleaved caspase -3, Bax, Bel - 2 and cytochrome C in mesangial cells were detected by Western - blot. Results: Compared with the blank control group, cell apoptosis was significantly increased in the high - glucose group, expressions o£ cleaved caspase - 3 , Bax and cytochrome C were significantly increased ( P < 0. 01) , expression of Bel - 2 was significantly decreased ( P < 0. 01). Compared with the high - glucose group, the high - dose group o£ XKP could significantly inhibit the high - glucose - induced mesangial cell apoptosis, inhibit the expressions o£ me sangial cells cleaved caspase - 3 , Bax and cytochrome C ( P < 0. 05 ) , increase the expression of Bel - 2 (P < 0. 05 ) , with no significant difference was founded compared with the Irbesartan group ( P > 0. 05 ) . Conclusion: XKP can significantly inhibit the expression of Bax in mesangial cells, improve the expression of Bel - 2, and re duce the translocation of cytochrome C, so as to have a protective effect on the apoptosis of mesangial cells in duced by high glucose, which may be one of the mechanisms of its prevention and treatment of diabetic kidney disease. Key words Xiaokeping ； diabetic kidney disease ； glomerulus mesangial cell ； apoptosis ； serum pharmacology

211105501_NLRP3信号通路介导的睾丸固有免疫研究进展

NLRP3信号通路介导的睾丸固有免疫研究进展①刘殿龙胡素芹许亚辉胡珂郭健（北京中医药大学中医学院，北京 102488）中图分类号R697 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2023）03-0646-07［摘要］NLR家族蛋白结构域-3（NLRP3）是一种胞浆传感器，是睾丸固有免疫模式识别受体家族的重要成员，能激活含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase）和诱导IL-1β成熟。

NLRP3与睾丸固有免疫过激导致的男性不育关系密切。

因此，NLRP3有望成为极具价值的男性不育治疗靶标。

本文总结了目前对NLRP3参与睾丸固有免疫的相关机制的研究结果，描述了NLRP3在睾丸组织内的广泛分布及功能，对调节睾丸NLRP3信号通路的抑制剂进行了汇总阐述，为NLRP3相关睾丸免疫问题提供更深入的见解。

［关键词］男性不育；固有免疫；NOD样受体；NLRP3信号通路Research progress of testicular innate immunity mediated by NLRP3 signaling pathwayLIU Dianlong， HU Suqin， XU Yahui， HU Ke， GUO Jian. School of Traditional Chinese Medicine， Beijing University of Traditional Chinese Medicine， Beijing 102488， China［Abstract］NLR family protein domain-3 （NLRP3） is a cytosolic sensor and an important member of the pattern recognition re⁃ceptor family of testicular innate immunity， which can activate caspases and induce the maturation of IL-1β. NLRP3 is closely related to male autoinflammation and male infertility caused by autoimmunity. Therefore， NLRP3 is expected to become a valuable therapeutic target for male infertility. This paper summarizes the current research results on the mechanism of NLRP3 involved in testicular innate immunity， describes the wide distribution and function of NLRP3 in testicular tissue， and summarizes the inhibitors that regulate the testicular NLRP3 signaling pathway， so as to provide more in-depth insights into NLRP3-related testicular immunity.［Key words］Male infertility；Innate immunity；NOD like receptor；NLRP3 signaling pathway核苷酸结合寡聚结构域样受体（NOD-like re⁃ceptors，NLR）是一类与炎症复合物结合的胞浆传感器家族，负责睾丸固有免疫模式识别的一类代表性受体。

探析BrdU标记在大鼠睾丸支持细胞体外培养中的应用

探析BrdU标记在大鼠睾丸支持细胞体外培养中的应用摘要：目的: 探讨大鼠睾丸支持细胞原代培养溴脱氧尿苷（BrdU）的最佳标记时间、剂量。

方法: 大鼠睾丸支持细胞进行体外原代培养; 以终浓度分别为5、 10、 15、 20 μmol/L的BrdU检测睾丸支持细胞的最佳标记剂量; 在细胞培养的12、 24、 36、 48 h掺入BrdU, 使终浓度为15 μmol/L, 测定BrdU的最佳标记时间; 免疫细胞化学法跟踪观察大鼠睾丸支持细胞在体外培养中的分化发育情况和BrdU标记率。

结果: 免疫组化检查提示最终浓度为15 μmol/L和孵育36 h BrdU标记率均>90%, 并且连续传3代均可检测到。

结论: 终浓度15 μmol/L及孵育36 h为BrdU标记睾丸支持细胞的最佳剂量及时间, 表明BrdU 标记可用于睾丸支持细胞体内后的存活、生长的动态观察。

关键词：睾丸支持细胞体外培养 BrdU溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法作为一种简便、敏感、特异的检测方法, 在医学的各个领域都有广泛的应用。

BrdU掺入合成的强度可直接显示细胞增殖的能力, 同时能避免以往应用检测对细胞的放射性损害。

睾丸支持细胞缺乏有效的标记方法, 因此本实验的目的是应用BrdU体外标记原代大鼠睾丸支持细胞（sertoli cell）, 观察最佳标记时间及标记量, 从而为追踪BrdU标记的睾丸支持细胞移植入体内后的存活、生长及分化的动态变化过程打下基础。

1 材料和方法材料SD雄性大鼠（体质量约100 g, 17～22 日龄）购于第四军医大学动物试验中心; 培养基、优质胎牛血清购自Gibco公司, 胶原酶、胰酶、BrdU购自Sigma公司; 抗抗体及SABC试剂盒均购自武汉博士德公司。

方法大鼠睾丸支持细胞体外分离培养取大鼠睾丸, 剥除被膜, 收集睾丸实质于50 mL离心管中, 4℃ 900 r/min 离心4 min, 倾去上清。

增液布津汤对干燥综合征模型鼠颌下腺AQP5表达的影响

增液布津汤对干燥综合征模型鼠颌下腺AQP5表达的影响金桂兰;何慧珍【摘要】目的:以干燥综合征(SS)模型鼠颌下腺水通道蛋白-5 (AQP5)的表达为靶点,探讨增液布津汤对SS模型鼠颌下腺AQP5表达的影响.方法:利用免疫诱导法建立干燥综合征小鼠模型,以环戊硫酮为对照组,给予中药煎剂增液布津汤灌胃.镜下观察颌下腺病理变化,同时用Western blot分析模型鼠颌下腺AQP5的表达.结果:给予增液布津汤高、中、低剂量组的AQP-5表达水平与模型组比较分别升高了32.84％、12.54％、4.51％.结论:增液布津汤可能通过抑制SS模型小鼠淋巴细胞浸润的病理进程,促进AQP5的表达,改善唾液腺分泌功能,缓解SS口腔干燥症状.%Objective:to investgate the influence of Zengye Bujin Decoction for treatment of Sjogren' s syndrome (SS) in rat, consider the expression of aquaporin-5 ( AQP5 ) as the target point. Methods; Sjogren's syndrome model were induced with immune induced method. Zengye Bujin Decoction was given in the treatment group, and Anethol Trithione as control group. When experiment was finished, taking submaxillary gland, to observe pathological changes of submaxillary, as the same as the expression distribution of AQP5 in submandibular salivary glands of rat with SS was shown by Western blot analysis. Result; Compared with model group,expression of AQP5 of the low, middle、 high dosage group of that Zengye Bujin Decoction have increased 4.51%、12.54%、32. 84%. Conclusion: The results indicate that Zengye Bujin Decoction maybe stimulate the expression of AQP5 via inhibiting the submandibular gland atrophy, lymphocyte infiltration of the pathological process, improving thesecretive function of salivary glands and increasing saliva flow, so as to release the thirsty symptoms of SS.【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》【年(卷),期】2013(019)003【总页数】4页(P282-285)【关键词】干燥综合征;水通道蛋白;唾液流量;免疫印迹;增液布津汤【作者】金桂兰;何慧珍【作者单位】南京中医药大学,南京 210046【正文语种】中文【中图分类】R442.8干燥综合征(Siccasyndrome，SS)又名斯耶格伦综合征(Sjoren’S syndrome，SS)，是一种主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫性疾病。

细胞外信号激酶蛋白5在卵泡刺激素介导的卵泡颗粒细胞甾体激素生成中的作用

细胞外信号激酶蛋白5在卵泡刺激素介导的卵泡颗粒细胞甾体激素生成中的作用高小博;姚楠;马旭;陆彩玲;杨伯清;彭小忠【摘要】Objective To study the role of extracellular signal-regulated protein kinase 5 ( ERK5 ) during the biosynthesis of follicle-stimulating hormone ( FSH ) -mediated progesterone in primary granulosa cells. Methods The expressions of phophorylated and general forms of ERK5 in primary granulosa cells afterthe treatment of FSH were detected by Western blot analysis. The subcellular localization of ERK5 was observed by confocal microscopy. The effect of ERK5 on FSH-mediated progesterone biosynthesis in primary granulosa cells was analyzed using recombinant adenovirus vectors. Results ERK5 activation was induced by FSH in a time-dependent manner in primary cultured granulosa cells, although the general ERK5 protein level decreased also in a time-dependent manner. The treatment of FSH showed no remarkable effect on the subcellular distribution of endogenous ERK5, which was mainly in the cytoplasm of granulosa cells. The co-infection of Ad-caM-EK5 and Ad-wtERK5 increased the progesterone production and StAR expression in primary cultured granulosa cells, whereas inhibition of ERK5 activation suppressed the FSH-stimulated progesterone production. Conclusion ERK5 may stimulate FSH-mediated progesterone production in primary cultured granulosa cells.%目的研究细胞外信号激酶蛋白5(ERK5)在卵巢颗粒细胞甾体激素生成中的作用.方法采用Western blot检测在卵泡刺激素(FSH)刺激原代颗粒细胞甾体激素生成过程中ERK5的表达变化和激活情况,荧光共聚焦技术分析ERK5的亚细胞定位,腺病毒技术观察活化型ERK5和显性负性ERK5对颗粒细胞甾体激素生成的影响.结果Western blot检测结果表明,FSH处理颗粒细胞后ERK5的表达随处理时间延长而下调,而ERK5活性形式的表达随处理时间延长而逐渐上升.荧光共聚焦技术分析结果显示,FSH的处理并没有明显影响ERK5在颗粒细胞中的定位.腺病毒技术观察结果发现,在细胞中联合感染活化型MEK5重组腺病毒和野生型ERK5重组腺病毒能促进FSH引起的细胞内StAR的表达升高和孕酮分泌,而显性负性ERK5重组腺病毒感染细胞则出现相反的效应.结论 ERK5可能促进了FSH介导的颗粒细胞甾体激素生成.【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2011(033)006【总页数】5页(P615-619)【关键词】细胞外信号激酶蛋白5;卵泡刺激素;颗粒细胞;甾体激素;孕酮【作者】高小博;姚楠;马旭;陆彩玲;杨伯清;彭小忠【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京100005;国家人口计生委科学技术研究所遗传室,北京100081;中国医学科学院北京协和医学院医学信息研究所基层卫生与妇幼保健研究室,北京100020;国家人口计生委科学技术研究所遗传室,北京100081;国家人口计生委科学技术研究所遗传室,北京100081;国家人口计生委科学技术研究所遗传室,北京100081;中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京100005【正文语种】中文【中图分类】Q291卵泡是卵巢的基本组成单位,由卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞组成。

大鼠睾丸支持细胞的分离纯化与鉴定_曹博

第10卷第1期解剖科学进展Vol.10No.1 2004年PR OGRESS OF A NAT OM ICA L SCIENCES2004大鼠睾丸支持细胞的分离纯化与鉴定曹博,郑俊波,郭筠秋(哈尔滨医科大学组织胚胎学教研室,黑龙江哈尔滨150086)=摘要>目的简化大鼠睾丸支持细胞的分离纯化方法,通过不同方法对Sertoli细胞进行形态学观察鉴定。

方法取鼠龄16~22天的雄性Wistar大鼠睾丸,采用酶次第消化,培养过程中纯化Sertoli细胞,并用多种方法对Sertoli细胞进行鉴定。

结果大鼠睾丸支持细胞占培养细胞总数的90%以上。

HE染色,Sertoli细胞突起很多,核仁清晰,在胞质中可见吞噬物和大小不等的空泡;甲基绿-派洛宁染色,Sertoli细胞富含RNA;Feulgen染色和透射电镜,核仁周围可见卫星核小体。

结论本实验培养方法可获得更多、纯度高的Sertoli细胞,HE染色、甲基绿-派洛宁染色、Feulgen染色和透射电镜是鉴定Sertoli细胞的有效方法。

=关键词>大鼠;睾丸支持细胞;分离;纯化;鉴定=中图分类号>R335+15=文献标识码>A=文章编号>1006-2947(2004)01-0034-03Identification and Isolation and Purification of Testis Sertoli C ells in RatCAO Bo,ZH ENG Jun-bo,GUO Yun-qiu(Department of Histology and Embryology,Harbin M edical University,Hei longjiang Harbi n150086China)=Abstract>Objective T o simplify the method of purification and cultur e of t he ser toli cells of rat testis and to observ e the sertoli cells with different methods.Methods T estis are isolated fro m16~22-day old wistar rats andare subjected to sequential enzymatic treatment.T he sertoli cells were purified and identified wit h several met hods.Results M ore than90%of the sertoli cells were isolated and cultured.N ucleolus are clear,gr ains and v acuoles canbe observ ed in the cytoplasm w ith HE staining;DNA w as dyed into green,R NA was dy ed into red with M G-Pstaining.T he satellite nuclear bodys w er e observed in the nucleus w ith Feulg en staining and transmission electro nmicroscope(T EM).C onclusion M ore sertoli cells were obtained by this experiment method with high purification.HE,M G-P,Feulgen staining and T EM are useful metho ds for identiflication of t he sertoli cells.=Key words>r ats;sertoli cells;isolat ion;pur ification;identificationSertoli细胞能分泌多种物质,如各种生长因子等,同时睾丸组织是人和动物体内的天然的免疫豁免区[1],在细胞移植和器官移植中具有很广泛的应用前景[2]。

摘除颌下腺对大鼠胃粘膜DNA和蛋白质合成速率的影响

摘除颌下腺对大鼠胃粘膜DNA和蛋白质合成速率的影响
吴胜前;于吉人
【期刊名称】《北京医科大学学报》
【年(卷),期】1993(025)005
【摘要】摘除颌下腺后第３周，取胃粘膜组织进行＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３
ＨＴｄＲ）Ｔ＾３Ｈ－亮氨酸（＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ）参入实验。

结果表明，＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ的参入量均较对照组明显降低，而颌下腺摘除大鼠经口补充外源性表皮生长因子（ＥＧＦ）后，＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ的参入量均明显回升。

提示，颌下腺对维持胃粘膜ＤＮＡ和蛋白质合成速率具有重要作用，而这一作用的发挥可能与颌
【总页数】2页(P339-340)
【作者】吴胜前;于吉人
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R333.2
【相关文献】
1.齐墩果酸对肝DNA和蛋白质合成速率的影响 [J], 王晓峰;李继尧
2.颌下腺摘除对大鼠急性实验性胃粘膜损伤的影响 [J], 吴胜前;于吉人
3.7β-羟基胆固醇双琥珀酸单酯钠(RS 034)对荷瘤小鼠骨髓细胞、肝、脾的DNA、RNA和蛋白质合成及对大鼠血象的影响 [J], 潘德宝;杨志博;苏兴仁;太永善;史朝辉
4.维甲酸对大鼠胃粘膜癌变DNA含量、c-myc基因mRNA表达及细胞凋亡的影
响 [J], 陆水钧;范钰;林庚金;钱立平;李华;李文君
5.摘除大鼠颌下腺对艾灸促胃溃疡愈合的影响 [J], 朱学江;陈永昌;黄耀
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切除颌下腺对大鼠睾酮和精子顶体酶活力的影响

切除颌下腺对大鼠睾酮和精子顶体酶活力的影响
冷双英
【期刊名称】《生殖医学杂志》
【年(卷),期】1996(000)003
【摘要】本实验对大鼠切除颌下腺３０和４８天时，睾丸和附睾重量，血清睾酮
水平及精子顶体酶活力进行了观察。

结果显示：（１）切除颌下腺的实验组，睾丸和附睾重明显低于对照组，睾丸脏器系数也明显降低，但附睾脏器系数无明显降低；（２）血清睾酮水平３０天时实验组略低于对照组；４８天时为２．４１ｎｍｏｌ／Ｌ，明显低于对照组的４．４９ｎｍｏｌ／Ｌ；（３）实验组的精子顶体酶活力分别为７．１９和６．００ｍＵ／ｍｌ明显低于对照组
【总页数】1页(P158)
【作者】冷双英
【作者单位】河北医科大学;河北医科大学
【正文语种】中文
【中图分类】R698.2
【相关文献】
1.影响人精子顶体酶活力测定因素探讨 [J], 林辉;萧国兵;徐景野
2.混苯对接触男工精子顶体酶活力和副性腺功能的影响 [J], 肖国兵;林辉;周承来;
潘翠宝
3.IL-2对抗精子抗体大鼠精子顶体酶活力的影响 [J], 张大勇;张玮;温海霞;边淑玲;
倪江
4.干扰素-γ对精子顶体酶活力的影响及其作用机制初探 [J], 边淑玲;张丽敏;郝晓敏;娄延平;姜晓姝;张玮;金宏波
5.消抗提取液对抗精子抗体阳性大鼠精子顶体酶活力的影响 [J], 张辉;温海霞;边淑玲;王淑珍;倪江;张玮
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5-HT受体亚型在大鼠颌下腺的免疫组织化学定位及5-HT的功能研究

5-HT受体亚型在大鼠颌下腺的免疫组织化学定位及5-HT的功能研究吕葆真;黄威权;蒲若蕾【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2002(011)002【摘要】目的研究探讨了大鼠颌下腺中5-羟色胺受体亚型的分布以及5-HT功能.方法免疫组织化学法和免疫酶联检测法.结果大鼠颌下腺的浆液性腺泡上皮细胞、闰管、颗粒曲管、纹状管和排泄管的管壁上皮细胞均呈5-HT1AR和5-HT3R免疫反应阳性,阳性物质位于胞质中,胞核为阴性.ELISA结果显示,在一定浓度范围内,外源5-HT能刺激离体培养的颌下腺分泌神经生长因子(NGF),但是,当外源5-HT浓度大于10-7时却抑制NGF的分泌.结论提示5-HT对颌下腺NGF的分泌可能起双向调节的作用.【总页数】3页(P125-127)【作者】吕葆真;黄威权;蒲若蕾【作者单位】第四军医大学基础部组织学胚胎学教研室,陕西西安,710032;第四军医大学基础部组织学胚胎学教研室,陕西西安,710032;第四军医大学基础部组织学胚胎学教研室,陕西西安,710032【正文语种】中文【中图分类】R338.7【相关文献】1.福尔马林致痛大鼠背根节内5-HT受体亚型mRNA的表达变化 [J], 刘翔宇;武胜昔;王亚云;王文;周亮;黄静;李云庆2.胃溃疡模型大鼠颌下腺的5-HT及其受体与胃溃疡自愈的关系 [J], 王炜;黄威权;吕坤聚;苏慧慈3.5-HT受体亚型mRNAs在大鼠三叉神经节和脊髓背根节的表达——PCR法研究[J], 朱敏;武胜昔;王文;李云庆4.大鼠实验性胃溃疡自愈过程中颌下腺5-HT及其受体的免疫组织化学研究 [J], 王炜;黄威权5.5-HT受体亚型mRNAs在大鼠背根神经节和三叉神经节的表达—原位杂交组织化学法研究 [J], 武胜昔;朱敏;王亚云;王文;李云庆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

表皮生长因子、白介素2免疫反应细胞在大鼠颌下腺的定位

表皮生长因子、白介素2免疫反应细胞在大鼠颌下腺的定位胡赟;梁文妹
【期刊名称】《贵阳医学院学报》
【年(卷),期】2005(030)002
【摘要】目的:观察表皮生长因子(EGF)、白介素2(IL-2)在大鼠颌下腺的表达和定位.方法:用免疫组织化学SABC单染法、邻片单染双标法,并结合图像分析方法进行研究.结果:(1)EGF、IL-2免疫反应(immunore-active,IR)细胞主要分布于大鼠颌下腺的颗粒曲管(GCT),腺泡呈阴性反应;(2)邻片单染双标法显示EGF-IR细胞与IL-2-IR细胞定位基本相同,主要定位于GCT;(3)雌性大鼠颌下腺EGF-IR、IL-2-IR细胞的平均黑度明显低于雄性大鼠(P＜0.01).结论:颌下腺不仅有表皮生长因子的表达,而且还有细胞因子的表达,颌下腺可能是机体神经-内分泌-免疫网络的一部分.【总页数】4页(P108-110,113)
【作者】胡赟;梁文妹
【作者单位】贵阳医学院,组织学与胚胎学教研室,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院,组织学与胚胎学教研室,贵州,贵阳,550004
【正文语种】中文
【中图分类】Q45;Q959.837
【相关文献】
1.雌激素受体α在大鼠下颌下腺的组织细胞定位 [J], 于辉
2.海洛因依赖对大鼠颌下腺5-羟色胺免疫反应细胞的影响 [J], 胡赟;梁文妹
3.大鼠颌下腺细胞中降钙素的定位及含量测定 [J], 张永莉;李宝莉;李社莉;施秉银;王炎林
4.大鼠颌下腺细胞降钙素的定位研究 [J], 张永莉;李社莉;李宝莉;王炎林;施秉银;吕双燕;李亚
5.神经肽Y免疫反应神经和细胞在大鼠颌下腺的分布 [J], 贾雪梅;侯思伟;潘朝宠;齐威琴;王惠珠
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层粘连蛋白-5γ2的表达与结直肠腺癌淋巴结转移的关系研究

层粘连蛋白-5γ2的表达与结直肠腺癌淋巴结转移的关系研究贾万钧;邓飞【摘要】Objective To investigate the expression of laminin-5γ2 (LN-5γ2) in colorectal adenocarcinoma and its relationship with lymph node metastasis.Methods 180 cases of patients with colorectal adenocarcinoma in our hospital were selected,including 72 cases with lymph node metastasis and 108 cases without.The expression levels of LN-5γ2 in tissues of patients with lymph node metastasis and those without were detected.The age,histological type,degree of infiltration,depth of myometrial invasion,the expression of LN-5γ2 and other factors of patients with and without lymph node metastasis in the colorectal adenocarcinoma group were analyzed by univariate analysis.Factors with significance after univariate analysis were analyzed by multivariate Logistic regression analysis.Results The high expression rate of LN-5γ2 in colorectal adenocarcinoma tissues of patients with lymph node metastasis was significantly higher than that in those without lymph node metastasis (90.28％ vs 65.74％) (P ＜ 0.05).The age,depth of myometrialinvasion,differentiation degree,TNM stage and expression of LN-5γ2 showed significant differences between patients with lymph node metastasis and patients without metastasis (P ＜ 0.05).Multivariate Logistic regression analysis showed that high expression of LN-5γ2,infiltration degree and TNM stage were the independent risk factors for lymph node metastasis of colorectal adenocarcinoma (P ＜ 0.05).Conclusion Highexpression of LN-5γ2 in patients with colorectal a denocarcinoma can be used as an important indicator for evaluating lymph node metastasis and the prognosis.%目的探究层粘连蛋白-5γ2(LN-5γ2)在结直肠腺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法选取2014年9月至2016年9月本院收治的180例结直肠腺癌患者为研究对象,分为淋巴结转移72例(转移组)及未发生转移108例(未转移组).分析两组临床病理参数及癌组织中LN-5γ2的表达水平差异,探讨淋巴结转移与否的影响因素.结果两组年龄、浸润程度、分化程度、TNM分期、LN-5γ2表达差异均有统计学意义(均P＜0.05),其中转移组中LN-5γ2高表达率为90.28％,显著高于未转移组的65.74％(P＜ 0.05).Logistic多因素回归分析显示LN-5γ2高表达、浸润程度深及高TNM分期是结直肠腺癌淋巴结转移的独立危险因素(均P＜0.05).结论 LN-5γ2在结直肠腺癌淋巴结患者病理组织中呈显著的高表达,其高表达状态亦为结直肠腺癌淋巴结转移的独立危险因素.【期刊名称】《结直肠肛门外科》【年(卷),期】2017(023)004【总页数】4页(P444-447)【关键词】LN-5γ2;结直肠腺癌;淋巴结转移【作者】贾万钧;邓飞【作者单位】南方医科大学深圳医院病理科广东深圳 518101;南方医科大学深圳医院病理科广东深圳 518101【正文语种】中文【中图分类】R735.3直肠腺癌淋巴结转移与手术或放化疗干预后局部复发、病情恶化及死亡有关，严重影响患者生存时长与生存质量［1］。