有机碳库测定方法
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土壤活性有机碳
(1)土壤活性有机碳测定:称量处理过约含15 mg 有机碳的土样,放在塑料瓶(100 ml) 内,用333 mmol/ L KMnO4 溶液25 ml 震荡处理1 h,震荡后离心5min (4 000 r/ min) ,取上清液,用去离子水按1∶250 比例稀释,然后用分光光度计565nm 比色测定,根据KMnO4 浓度的变化计算活性有机碳含量,单位mg C/ g (即每1 g 干土中含活性有机碳量) 。
计算公式
碳库指数(CPI) = 农田土壤有机碳/参考农田土壤有机碳;
碳库活度(A) = 活性碳/稳态碳;
碳库活度指数(AI) = 农田碳库活度/参考土壤碳库活度;
碳库管理指数(CPMI) = 碳库指数×碳库活度指数×100 。
(2)土壤易氧化碳含量测定方法为称取含15~30mg 碳的土样置100mL 塑料瓶内,加入浓度为333mmol/ L的KMnO4 溶液25mL 振荡1h (同时进行空白试验) 后,以4000r/ min转速离心5min ,取其上清液用去离子水按1∶250 稀释后于565nm 波长处进行比色(其标准液浓度一定要包
括1mgC) ,根据KMnO4 的消耗量求出土壤易氧化碳含量。(在分光光度计565 nm 下测定稀释样品的吸光率, 由不加土壤的空白与土壤样品的吸光率之差, 计算出高锰酸钾浓度的变化, 并进而计算出氧化的碳量(氧化过程中1 mmol MnO4 -消耗0.75 mmol 或9 mg 碳)。
C 库管理指数( CPMI) 计算式为:
CPMI = CPI ×A I ×100 (1)
式中, CPI 为C 库指数, A I 为C 库活度指数。
CPI = 样品全C/ 对照土壤全C (2)
A I = 样品C 库活度/ 对照土壤C 库活度(3)
A = C A / C UA (4)
C T = C A + C UA (5)
式中, C T 为有机碳, C A 为易氧化碳, C UA为稳态碳。
(3)重铬酸钾水合热法称取过0.25mm 筛风干土1.5000~2.0000g,放入500ml 三角瓶中,准确加入0.5 mol·L-1 K2Cr2O7水溶液10mL,轻轻转动,使土粒分散。用量筒将20ml 浓H2SO4迅速直接注入土壤悬浊液,立即小心地转动三角瓶,使土壤与试剂充分混匀1min。把三角瓶静放在石棉网上30min,然后注入水约200ml,加3~4滴邻啡罗啉指示剂,用0.25mol·L-1 FeSO4标准溶液滴定过量的K2Cr2O7。同时,以不加土壤的试剂进行空白测定。(作为首选方法)
土壤碳库指数的计算
碳库活度(A)=活性碳(g·kg-1)÷稳态碳(g·kg-1)
碳库活度指数(AI)=农田碳库活度÷参考土壤碳库活度
碳库指数(CPI)=农田土壤有机碳(g·kg-1)÷参考农田土壤有机碳(g·kg-1)
碳库管理指数(CPMI)=碳库指数×碳库活度指数×100%
土壤矿化碳测定方法
土壤可矿化碳(MNC) 通过室内培养法进行估算,即称取土样12. 5 g(风干土质量) 放入广口瓶中,将土壤样品平铺于瓶底,用蒸馏水调至最大田间持水量的60 %,在25 ℃的培养箱内培养,每个处理3 次重复。培养过程中所释放的CO2 用10 ml 1 mol/ LNaOH 溶液吸收,在培养过程中,每隔3 d 用H2SO4溶液滴定法计算累积矿化量,所用指示剂为酚酞。每个处理设两个空白
土壤微生物量碳的测定
称取20.00g左右已经处理好的土样 6 份置于150ml 三角瓶中,加入0.5MK2SO4 溶液40ml 于其中,同时称取土样在105℃下烘干作水分,向其中三个三角瓶加入1mlCHCl3,并立即塞上瓶塞,将三角瓶放置于振荡机(恒温),在25℃下以200 转/min 振荡1h,然后用定量滤纸(中速)过滤,将滤液放置于通风处过夜,吸取滤液10ml于30cm 长硬质试管中,向其中加入10ml 0.018M K2Cr2O7- H2SO4 溶液(其中浓H2SO4 保持12M),在170-180℃H3PO4 浴中消煮10min 取出试管擦去表面H3PO4,冷却后将试管内物质全部转入三角瓶,冲洗试管及漏斗,加2~3 滴邻啡罗啉指示剂,用0.05M FeSO4 标准液滴定至终点。空白试验仅仅是没有加入土样,其余的步骤与前面的相同。
未熏蒸样品提取液中的有机碳被称之为K2SO4 浸提的未熏蒸有机碳,熏蒸样品提取液中的有机碳被称之为K2SO4 浸提的熏蒸有机碳,熏蒸样品提取液与未熏蒸样品提取液中有机碳的差值除以系数0.38 得到微生物量有机碳。
高锰酸钾氧化比色法。称取3-5g待测样品(含有15~30mg有机碳)装入50ml离心管内,加浓度为333mmol/L的高锰酸钾溶液20ml,加盖,在250r/min下震荡1小时,同时作三个空白样。震荡后的样品以4000r/min离心8min,之后取上清液用去离子水按1:625的液水比例稀释(吸取2ml,稀释至50ml,再从稀释液中吸取2ml,稀释定容至50ml)。稀释液在565nm的分光光度计上比色。根据高锰酸钾的消耗量计算易氧化碳的含量(高锰酸钾每减少1mmol,代表碳减少量为9mg)。
1 稀释比例不会有影响,因为稀释的时候已经反应结束了。
2高锰酸钾减少量的单位是物质的量
3计算易氧化有机碳:测定的浓度有两种,一是加了土样处理的高锰酸钾的浓度,表示反应后剩余的高锰酸钾的浓度C1,二是不含样品的空白液里高锰酸钾的浓度C2,C2-C1的差就是土壤反应消耗的高锰酸钾浓度,然后乘以加入高锰酸钾的体积,得到高锰酸钾消耗的物质的量也就是毫摩尔数;高锰酸钾与有机碳之间有一定的系数,就是你们也知道的那个系数,将系数与上面计算得到的高锰酸钾消耗的毫摩尔数相乘,就是称取的这部分土里含有的有机碳量,除以土壤质量就得到了土壤有机碳含量