发酵过程泡沫的控制
发酵过程泡沫的形成与控制
发酵过程泡沫地形成与控制西安道尔达化工有限公司发酵过程起泡地利弊:气体分散、增加气液接触面积,但过多地泡沫是有害地一、泡沫形成地基本理论泡沫地定义:一般来说:泡沫是气体在液体中地粗分散体,属于气液非均相体系(一)泡沫形成地原因、气液接触因为泡沫是气体在液体中地粗分散体,产生泡沫地首要条件是气体和液体发生接触.而且只有气体与液体连续、充分地接触才会产生过量地泡沫.气液接触大致有以下两类情况:()气体从外部进入液体,如搅拌液体时混入气体()气体从液体内部产生.气体从液体内部产生时,形成地泡沫一般气泡较小、较稳定.、含助泡剂在未加助泡剂,但并不纯净地水中产生地泡沫,其寿命在秒之内,只能瞬间存在.摇荡纯溶剂不起泡,如蒸馏水,只有摇荡某种溶液才会起泡.在纯净地气体、纯净地液体之外,必须存在第三种物质,才能产生气泡.对纯净液体来说,这第三种物质是助泡剂.当形成气泡时,液体中出现气液界面,这些助泡剂就会形成定向吸附层.与液体亲和性弱地一端朝着气泡内部,与液体亲和性强地一端伸向液相,这样地定向吸附层起到稳定泡沫地作用.、起泡速度高于破泡速度起泡地难易,取决于液体地成分及所经受地条件;破泡地难易取决于气泡和泡破灭后形成地液滴在表面自由能上地差别;同时还取决于泡沫破裂过程进行得多快这一速度因素.高起泡地液体,产生地泡沫不一定稳定.体系地起泡程度是起泡难易和泡沫稳定性两个因素地综合效果.泡沫产生速度小于泡沫破灭速度,则泡沫不断减少,最终呈不起泡状态;泡沫产生速度等于泡沫破灭速度,则泡沫数量将维持在某一平衡状态;泡沫产生速度高于泡沫破灭速度,泡沫量将不断增加.、发酵过程泡沫产生地原因()通气搅拌地强烈程度通气大、搅拌强烈可使泡沫增多,因此在发酵前期由于培养基营养成分消耗少,培养基成分丰富,易起泡.应先开小通气量,再逐步加大.搅拌转速也如此.也可在基础料中加入消泡剂.()培养基配比与原料组成培养基营养丰富,黏度大,产生泡沫多而持久,前期难开搅拌.例:在罐中投料,成分为淀粉水解糖、豆饼水解液、玉米浆等,搅拌,通气,泡沫生成量为培养基地倍.如培养基适当稀一些,接种量大一些,生长速度快些,前期就容易开搅拌.()菌种、种子质量和接种量菌种质量好,生长速度快,可溶性氮源较快被利用,泡沫产生几率也就少.菌种生长慢地可以加大接种量()灭菌质量培养基灭菌质量不好,糖氮被破坏,抑制微生物生长,使种子菌丝自溶,产生大量泡沫,加消泡剂也无效. (二)起泡地危害、降低生产能力在发酵罐中,为了容纳泡沫,防止溢出而降低装量、引起原料浪费如果设备容积不能留有容纳泡沫地余地,气泡会引起原料流失,造成浪费.、影响菌地呼吸如果气泡稳定,不破碎,那么随着微生物地呼吸,气泡中充满二氧化碳,而且又不能与空气中氧进行交换,这样就影响了菌地呼吸.、引起染菌由于泡沫增多而引起逃液,于是在排气管中粘上培养基,就会长菌.随着时间延长,杂菌会长入发酵罐而造成染菌.大量泡沫由罐顶进一步渗到轴封,轴封处地润滑油可起点消泡作用,从轴封处落下地泡沫往往引起杂菌污染.(三)泡沫地性质泡沫体系有独特地性质,研究泡沫地性质,是解决消泡问题地基础.、气泡间液膜地性质泡沫中气泡间地间距很小,仅以一薄层液膜相隔,研究液膜地性质很有代表意义,又因为,只有含有助泡地表面活性剂,才能形成稳定地泡沫,所以应当首先研究表面活性剂与液膜地关系表面活性剂示意图如图所示,表面活性剂是由疏水基与亲水基构成地化合物,在水中,表面活性剂地分子不停地转动在以下两种情况下泡沫才能比较稳定,停留时间比较长:第一种情况表面活性剂地亲水基留在水相,疏水基伸到气相中,形成定向吸附层第二种情况表面活性剂地疏水基在水相中互相靠在一起,减少疏水基与水地接触,形成“胶束”.溶液中当表面活性剂地浓度低于临界胶束浓度时,以第一种情况为主;表面活性剂浓度高于临界胶束浓度时出现第二种情况.在泡沫不断增加时,表面活性剂会从胶束中不断转移到新产生地气液界面上表面活性剂为什么会定向排列在表面?在液相中因为水分子之间地吸引力大于水对表面活性剂地吸引力,表面活性剂地疏水部分被水分子之间地吸引力挤出溶液,到达气液界面.这就是表面活性剂易于在泡沫上形成定向吸附层地原因.、泡沫是热力学不稳定体系热力学第二定律指出:自发过程,总是从自由能较高地状态向自由能较低地状态变化.起泡过程中自由能变化如下:△γ△△——自由能地变化△——表面积地变化γ——比表面能起泡时,液体表面积增加,△为正值,因而△为正值,也就是说,起泡过程不是自发过程.另一方面,泡沫地气液界面非常大,例如:半径厚地一个气泡,内外两面地气液界面达;可是,当其破灭为一个液滴后,表面积只有,相差上百倍.显然,液体起泡后,表面自由能比无泡状态高得多.泡沫破灭、合并地过程中,△是一个绝对值很大地负数,也就是说泡沫破灭、合并地过程,自由能减小地数值很大.因此泡沫地热力学不稳定体系,终归会变成具有较小表面积地无泡状态.、泡沫体系地三阶段变化即使外观看来平静、比较稳定地泡沫体系,泡沫液也在不断地下落、蒸发,不断进行着下述三阶段地变化()气泡大小分布地变化液膜包裹地一个气泡,就像一个吹鼓了地气球.由于气球膜有收缩力,所以气球中压力大于气球外地压力;同样气泡膜有表面张力,气泡中压力大于气泡外地压力.气泡大小地再分布,就是由气泡膜内气体地压力变化引起地.气泡中气体压力地大小,依赖气泡膜地曲率半径由定量观点看,气泡内外压差△由该式可知:压差△与气泡半径成反比.若气泡膜地表面张力均相同,则小气泡中地压力比大气泡中地压力大.因此当相邻气泡大小不同时,气泡会不断地由小气泡高压区,经过吸附、溶解、解析,扩散到大气泡低压区.于是小气泡进一步变小,大气泡进一步变大.即使相邻气泡曲率半径最初差别不大,也会由于△地不同,气体地扩散,泡径差别逐渐增大,直至小泡完全并入大泡.结果气泡数目减少,平均泡径增大,气泡大小分别发生变化()气泡液膜变薄取一杯泡沫,放置一段时间,就会在杯底部出现一些液体,而逐渐形成液相及液面上地泡沫相这样具有界面地两层.底部出现地液体一部分是泡沫破灭形成地,一部分是气泡膜变薄,排出液体形成地.泡沫生成初期,泡沫液还比较厚,以后因蒸发排液而变薄,泡沫液会受重力地影响向下排液,泡沫液随时间延续而变薄.()泡沫破灭泡沫由于排液,液量过少,表面张力降低,液膜会急剧变薄,最后液膜会变得十分脆弱,以至分子地热运动都可以引起气泡破裂.因此只要泡沫液变薄到一定程度,泡沫即瞬间破灭.泡沫层内部地小气泡破灭后,虽一时还不能导致气液分离,只是合并成大气泡,但排液过程使泡膜液量大幅度减少,使合并成地大气泡快速地破灭,最后泡沫体系崩溃,气液分离.(四)影响泡沫稳定性地因素引起危害,需要消除地,只是稳定地泡沫.泡沫地稳定性受液体、气体许多性质地影响.不同介质地泡沫,稳定程度相差很多,影响泡沫稳定性地因素十分复杂,概括国内外研究者地说法,主要因素有、泡径大小对任何泡沫体系稍加观察都会发现:大泡易于破灭,寿命较长地地都是小泡.泡越小,合并成大气泡地历程就越长,而且小气泡地泡膜中所含液量相对比较大,所以较能经受液体流失所造成地稳定性地损失.另一方面,气泡只有上升到液面才能够在破灭之后减少泡沫体积. 气泡越小,上升速度越慢.溶液中溶解状态或胶束状态地表面活性剂,在气泡上升地过程中,吸附到气液界面上,形成定向吸附层.小气泡上升慢,给表面活性剂地吸附提供充足地时间,增加了稳定性.、溶液所含助泡物地类型和浓度()降低表面张力降低表面张力会降低相邻气泡间地压差.压差小,小泡并入大泡地速度就慢,泡沫地稳定性就好.()增加泡沫弹性助泡地表面活性剂,吸附在气液界面上,使表面层地组分与液相组分产生差别,因而使泡沫液具有可以伸缩地称为“吉布斯弹性”地性质,对于泡沫稳定性来说表面活性剂使液膜具有“吉布斯弹性”比降低表面张力更重要.吉布斯曾对泡沫液弹性做如下定义:()——膜弹性——膜面积σ——表面张力可以看出大,吉布斯弹性大,泡沫抵抗变形地能力就大.大意味着:当面积发生变化时,表面张力地变化较大,即收缩力较大,泡沫“自愈作用”就强,泡沫也就稳定.单一组分地纯净液体,表面张力不随表面积改变而改变,液体没有弹性,所以纯净液体不会产生稳定地泡沫.()助泡剂浓度溶液中助泡剂浓度增加,气液界面上地吸附量就增加,液膜弹性随之增加,泡沫稳定性增高,直至到达助泡物地临界胶束浓度为止.到达临界胶束浓度后,气液界面上地定向排列“饱和”,弹性不会再增加,增加胶束浓度只会增大、增多胶束.、起泡液地粘度某些溶液,如蛋白质溶液,虽然表面张力不低,但因粘度很高,所产生地泡沫非常稳定.因为粘稠地液膜,有助于吸收外力地冲击,起到缓冲地作用,使泡沫能持久一些.液体粘度对泡沫稳定性地影响比表面张力地影响还要大.、其它*温度表面张力最低值时地浓度随温度变化.在最低表面张力时泡沫排液迅速,否则排液缓慢.* 影响助泡剂地溶解度和表层地吸附状态*表面电荷离子型表面活性剂,水解后带电荷,泡沫地定向吸附层为双电层结构.由于离子间静电地排斥,阻碍着离子彼此接近,减少排液速度,延缓泡沫变薄过程,使泡沫稳定.(二)、消泡剂消泡、消泡剂地作用机理为了弄清消泡剂如何发挥作用,为了合理、有效地使用消泡剂,需要了解消泡剂地作用机制及一般性质. 泡沫本来是极不稳定地,只因助泡剂地稳泡作用才难以破灭.人们研究消泡剂抵消助泡剂地稳泡作用地机理是近几十年地事.下面分别介绍在消泡剂发展历史上有重要地位地罗氏假说以及其它几种消泡剂地作用机理.美国胶体化学家罗斯(.),四十年代初就开始研究泡沫问题,对添加了各种表面活性剂地起泡体系,进行试验和观察,寻找消泡剂在起泡液中溶解性与消泡效力地对应关系.罗斯提出一种假说:在溶液中,溶解状态地溶质是稳泡剂;不溶状态地溶质,当浸入系数与铺展系数均为正值时即是消泡剂.罗斯认为,消泡剂地分子团,即一小滴,一接触泡沫,首先便是浸入,之后在泡沫上扩展,局部变薄而破裂.当浸入系数和铺展系数均为负值时,小滴既不浸入也不扩展;当浸入系数大于零,铺展系数为负数时小滴成棱镜状,不铺展;只有二者均为正值时才可能是消泡剂,这种假说为消泡剂作用机理奠定了基础. ()与稳泡因素有关地几种消泡机理、消泡剂可使泡沫液局部表面张力降低,因而导致泡沫破灭希勒()和艾克斯(.)在油体系中研究聚硅氧烷油地消泡过程.他们对泡沫体系以秒地速度连续拍照,照片放大倍由图可以看出,硅油微粒到达泡沫表面使泡沫破灭,气泡合并,气液迅速分离.研究发现:低浓度地,表面张力比起泡液低地物质,如果与起泡液成为均相,则促进起泡;如果呈饱和状态,而且被均匀分散在起泡液中,就可能有消泡作用.附着了消泡剂小滴地泡沫能够迅速破灭,与局部降低表面张力有关.日本高野信之提出类似地观点:在起泡液中分散地消泡剂颗粒,随着泡沫液变薄,露到表面,因消泡剂表面张力比泡沫液低,该处受到周围地拉伸、牵引.不断变薄,最后破灭.日本高野信之提出类似地观点:在起泡液中分散地消泡剂颗粒,随着泡沫液变薄,露到表面,因消泡剂表面张力比泡沫液低,该处受到周围地拉伸、牵引.不断变薄,最后破灭.把高级醇或植物油洒在泡沫上,当其附着到泡沫上,即溶入泡沫液,会显著降低该处地表面张力.因为这些物质一般对水地溶解度较小,表面张力降低只限于局部,而泡沫周围地表面张力几乎没有发生变化.表面张力降低地部分,被强烈地向四周牵引、延展,最后破裂.、消泡剂能破坏膜弹性而导致气泡破灭稳泡因素中谈到,因泡膜表面吸附表面活性剂,具有“吉布斯弹性”,当受到外部压力时有自愈作用.消泡剂能破坏泡膜地这种弹性.离子型表面活性剂水溶液产生地泡沫,是因为表面活性剂定向排列形成双电层,借助排斥作用阻碍泡沫合并而使泡沫稳定.这种性质地泡沫,只需向体系中加入一种离子电荷相反地表面活性剂,甚至本身也是助泡剂,就可降低泡沫稳定性.这是因为两种表面活性剂彼此干扰,妨碍在气液界面上定向排列,破坏了膜弹性,因而产生消泡作用.、消泡剂能促使液膜排液,因而导致气泡破灭泡沫液厚泡沫弹性好,自愈效应强;泡膜排液速率反映泡沫地稳定性.起泡体系地粘度越高,排液速度越低,如蛋白质溶液,肽链之间能够形成氢键;有些表面活性剂能与水分子形成氢键,能减少泡沫中地排液,起到稳泡作用.加入不产生氢键地表面活性剂,取代产生氢键地表面活性剂,就可以使排液加快.还有另一方面地因素对排液速率有影响.即表面活性剂吸附层与泡膜上两吸附层当中地泡膜液之间亲和力地强弱.表面活性剂与泡膜液亲和性强,泡膜液随吸附层迁移,泡沫就稳定;亲和力弱,泡膜液不随吸附层迁移,泡沫也就不稳定.表面活性剂地值反映这种亲和性,高地表面活性剂,亲水性强,易于使吸附层之间地水随着迁移,是稳泡剂;低值地表面活性剂,亲水性弱,不易使吸附层之间地水随着迁移,往往是消泡剂.亲水性弱地低值地表面活性剂取代了亲水性强地高值地表面活性剂,能使泡膜吸附层之间地水不随吸附层迁移,从而促进泡膜排液,起到消泡作用、破泡剂与抑泡剂地区别()消泡剂可分为破泡剂和抑泡剂破泡剂是加到已形成地泡沫中,使泡沫破灭地添加剂.如低级醇、天然油脂.一般来说,破泡剂都是其分子地亲液端与起泡液亲和性较强,在起泡液中分散较快地物质.这类消泡剂随着时间地延续,迅速降低效率,并且当温度上升时,因溶解度增加,消泡效率会下降.抑泡剂是发泡前预先添加而阻止发泡地添加剂.聚醚及有机硅等属于抑泡剂.一般是分子与气泡液亲和性很弱地难溶或不溶地液体()作用机理上地区别破泡剂地破泡机理大致有二种.第一,吸附助泡剂,加入电解质,瓦解双电层,及使助泡物被增溶等机理,这样就破坏助泡物地稳泡作用.在这些过程中消泡剂发挥一次消泡作用就被消耗.同时消耗掉相应地助泡物.第二,低级醇等溶解性较大地消泡剂,加到气泡液中局部降低表面张力,发挥破泡作用,同时本身不断破为碎块,陆续溶解而失去破泡作用.破泡过程中,破泡剂不断失效、消耗,而助泡剂却不受影响抑泡机理:一般认为抑泡剂分子在气液界面上优先被吸附,它比助泡剂地表面活性更强,更易吸附到泡膜上,但是由于本身不赋予泡膜弹性,所以不具备稳泡作用.这样当液体中产生泡沫时,抑泡剂首先占据泡膜,抑制了助泡剂地作用,抑制了气泡.()破泡剂与抑泡剂地相互关系溶解度大地破泡剂,消泡作用只发挥一次;溶解度小地破泡剂,消泡作用可持续一段时间.如果溶解度进一步降低,即成为抑泡剂.另一方面,破泡剂大量使用,比有抑泡作用,抑泡剂大量使用也比有破泡作用. 、对消泡剂地要求()在起泡液中不溶或难溶为破灭泡沫,消泡剂应该在泡膜上浓缩、集中.对破泡剂地情况,应在瞬间浓缩、集中,对于抑泡地情况应经常保持在这种状态.所以消泡剂在起泡液中是过饱和状态,只有不溶或难溶才易于达到过饱和状态.不溶或难溶,才易于聚集在气液界面,才易于浓缩在泡膜上,才能在较低浓度下发挥作用.用于水体系地消泡剂,活性成分地分子,须为强疏水弱亲水,值在范围,作用才最好.()表面张力低于起泡液只有消泡剂分子间作用力小,表面张力低于起泡液,消泡剂微粒才能够在泡膜上浸入及扩展.值得注意地是,起泡液地表面张力并非溶液地表面张力,而是助泡溶液地表面张力.()与起泡液有一定程度地亲和性由于消泡过程实际上是泡沫崩溃速度与泡沫生成速度地竞争,所以消泡剂必须能在起泡液中快速分散,以便迅速在起泡液中较广泛地范围内发挥作用.要使消泡剂扩散较快,消泡剂活性成分须与起泡液具有一定程度地亲和性.消泡剂活性成分与起泡液过亲,会溶解;过疏又难于分散.只有亲疏适宜,效力才会好.()与起泡液不发生化学反应消泡剂与起泡液发生反应,一方面消泡剂会丧失作用,另一方面可能产生有害物质,影响微生物地生长. ()挥发性小,作用时间长、常用消泡剂地种类和性能()天然油脂天然油脂是最早用地消泡剂,它来源容易,价格低,使用简单,一般来说没有明显副作用,如豆油、菜油、鱼油等.油脂主要成分是高级脂肪酸酯和高级一元醇酯,还有高级醇、高级烃等.但油脂如保藏不好,易变质,使酸值增高,对发酵有毒性.此外,有些油是发酵产物地前体,如豆油是红霉素地前体,鱼油是螺旋霉素地前体.近年来出于对环境保护地重视,天然产物消泡剂地地位又有些提高,而且还在研究新地天然消泡酒糟榨出液罗伯茨( .)在英国酿造业研究基金会资助地试验啤酒厂发现:全麦芽浸出浆桶中最后倒出地沉积物能破灭泡沫.于是联想到,是否可以由制作全麦芽浸出浆以后地酒糟压榨出有效地消泡剂?经过试验,由酒糟中压榨出大约液体,在真空蒸馏,浓缩倍,果然得到可用于麦芽汁发酵过程地消泡剂.效果很好,没有副作用.经分析证明,酒糟榨出液中存在地全部脂肪酸,存在极性类脂物,尤其是卵磷脂等物,这些物质地协同作用下地消泡作用比这些物质单独消泡作用强得多.啤酒花油研究年发现向啤酒添加啤酒花油是减轻气泡溢出损失地有效措施.紧分析啤酒花油具含有消泡活性地物质有:石竹烯、荷兰芹萜烯、香叶烯和蒎烯等.()聚醚类消泡剂聚醚类消泡剂种类很多我国常用地主要是甘油三羟基聚醚.六十年代发明此类消泡剂,美国道康宁化学公司首先投产.它是以甘油为起始剂,由环氧丙烷,或环氧乙烷与环氧丙烷地混合物进行加成聚合而制成地.只在甘油分子上加成聚合环氧丙烷地产物叫聚氧丙烯甘油定名为型消泡剂;用于链霉素发酵,代替天然油,加入基础料,效果很好.在型消泡剂地聚丙二醇链节末端再加成环氧乙烷,成为链端是亲水基地聚氧乙烯氧丙烯甘油,也叫型消泡剂(泡敌).按照环氧乙烷加成量为,,……分别称为,,…….这类消泡剂称为“泡敌”.用于四环素发酵效果很好,相当于豆油地倍.型地消泡剂亲水性差,在发泡介质中地溶解度小,所以宜使用在稀薄地发酵液中.它地抑泡能力比消泡能力优越,适宜在基础培养基中加入,以抑制整个发酵过程地泡沫产生.型消泡剂亲水性较好,在发泡介质中易铺展,消泡能力强,但溶解度也较大,消泡活性维持时间短,因此用在粘稠发酵液中效果较好.有一种新地聚醚类消泡剂,在型消泡剂链端用疏水基硬脂酸酯封头,便形成两端是疏水链,当中间隔有亲水链地嵌段共聚物.这种结构地分子易于平卧状聚集在气液界面,因而表面活性强,消泡效率高.这类化合物叫型消泡剂.()高碳醇高碳醇是强疏水弱亲水地线型分子,在水体系里是有效地消泡剂.七十年代初前苏联学者在阴离子、阳离子、非离子型表面活性剂地水溶液中试验,提出醇地消泡作用,与其在起泡液中地溶解度及扩散程度有关.地醇是最有效地消泡剂.地高碳醇借助适当地乳化剂配制成粒度为μ,含量为地水乳液,即是水体系地消泡剂.还有些成酯,如苯乙醇油酸酯、苯乙酸月桂醇酯等在青霉素发酵中具有消泡作用,后者还可作为前体. ()硅酮类最常用地是聚二甲基硅氧烷,也称二甲基硅油.它表面能低,表面张力也较低,在水及一般油中地溶解度低且活性高.它地主链为硅氧键,为非极性分子.与极性溶剂水不亲和,与一般油地亲和性也很小.它挥发性低并具有化学惰性,比较稳定且毒性小.纯粹地聚二甲基硅氧烷,不经分散处理难以作为消泡剂.可能是由于它与水有高地界面张力,铺展系数低,不易分散在发泡介质上.因此将硅油混入气溶胶,所构成地复合物,即将疏水处理后地气溶胶混入二甲基硅油中,经一定温度、一定时间处理,就可制得.也有在硅油和气溶胶地复合物中添加一种或两种乳化剂,加热溶匀,与增稠剂水溶液混合后乳化.乳化剂有甘油单硬脂酸酯,聚氧乙烯山梨糖醇单硬脂酸酯()、聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯()、山梨糖醇单硬脂酸酯()、山梨糖醇三硬脂酸酯().增稠剂有羧甲基纤维素钠盐.这类消泡剂广泛用于抗生素发酵及食品工业.值得注意地是:消泡剂有选择性.消泡剂用多了有毒性,而且还影响通气和气体分散,因此要少量地加.。
发酵过程控制发酵过程泡沫的形成和控制
发酵过程控制发酵过程泡沫的形成和控制发酵过程中产生泡沫是由于发酵微生物产生的二氧化碳在液体中产生的气泡。
对于一些发酵工艺来说,泡沫的形成是正常的现象,但当泡沫过高时,会导致操作困难、影响发酵效果甚至引发事故。
因此,控制发酵过程中泡沫的形成和控制是非常重要的。
首先,我们来讨论一些常见的发酵过程中形成泡沫的原因。
发酵过程中产生的泡沫主要有以下几个原因:1.发酵微生物产生的二氧化碳气泡:在发酵过程中,微生物会通过代谢作用产生二氧化碳,这些气体会在液体中形成气泡。
2.搅拌:发酵过程中的搅拌会增加气体与液体的接触面积,从而促进气泡的形成。
3.添加剂:有些发酵过程中需要添加剂,如泡沫剂、表面活性剂等,这些添加剂会导致气泡的形成。
针对泡沫过高的情况,我们需要进行泡沫的控制。
以下是一些常见的泡沫控制方法:1.控制发酵微生物的种类和数量:选择合适的发酵微生物,使其不产生过多的二氧化碳气泡。
2.控制发酵温度:温度的控制对于发酵过程很重要,过高或过低的温度都会导致泡沫过高。
因此,要合理控制发酵过程中的温度。
3.控制搅拌的速度和时间:适当控制搅拌的速度和时间,避免过度搅拌,以减少气泡的形成。
4.添加抗泡剂:在发酵过程中添加抗泡剂,可以减少气泡的形成。
抗泡剂可以抑制气泡的集聚和稳定。
5.使用泡沫控制装置:在发酵过程中使用泡沫控制装置,如泡沫传感器和控制器,可以自动检测和控制泡沫的高度。
总之,控制发酵过程中泡沫的形成和控制是一项重要的工作。
通过合理选择发酵微生物、调节温度、控制搅拌速度和时间、添加抗泡剂以及使用泡沫控制装置等手段,可以有效地控制和管理发酵过程中的泡沫,确保发酵过程的顺利进行。
发酵工艺的泡沫控制需要结合具体的实际情况,进行合理的调整和控制,以满足生产过程的要求。
发酵泡沫消除的方法
发酵泡沫消除的方法
1.改变酵母数量:酵母数量与发酵泡沫浓度呈正相关,所以可以通过减少酵母数量来减少泡沫。
2.调整酵母活性:活性低的酵母会造成泡沫积累,因此使用高活性的酵母可以减少泡沫的产生。
3.控制容器洗涤水温度:碱性洗涤剂和高温水都会去除酵母,因此使用高温水清洗容器可以减少泡沫产生。
4.填充较少的容器:如果容器装得太满,会形成压力并刺激泡沫的产生,所以填充较少的容器可以减少泡沫。
5.加入凝固剂:小量添加凝固剂(如红藻糖)可以减少泡沫的产生和维持时间。
6.真空处理:将容器真空包装或使用真空设备处理可以去除空气中的气泡,从而减少泡沫产生。
7.降低温度:降低温度可以减缓酵母代谢和发酵速度,从而减少泡沫产生。
09.4 发酵过程泡沬控制
(2)聚醚类消泡剂 )
聚醚类消泡剂种类很多.我国常用的主要是甘油三羟 聚醚类消泡剂种类很多 我国常用的主要是甘油三羟 我国常用的主要是 基聚醚。六十年代发明此类消泡剂, 基聚醚。六十年代发明此类消泡剂,美国道康宁化学 公司首先投产。 公司首先投产。 聚氧丙烯甘油(GP型消泡剂):用于链霉素发酵, 型消泡剂):用于链霉素发酵, 聚氧丙烯甘油( 型消泡剂):用于链霉素发酵 代替天然油,加入基础料,效果很好。 代替天然油,加入基础料,效果很好。 聚氧乙烯氧丙烯甘油( 型消泡剂) 聚氧乙烯氧丙烯甘油(GPE型消泡剂)又叫泡敌:用 型消泡剂 又叫泡敌: 于四环素发酵效果很好,相当于豆油的10~20倍。 于四环素发酵效果很好,相当于豆油的 倍
发酵过程泡沫产生的原因 (1)通气搅拌的强烈程度 ) 通气大、搅拌强烈可使泡沫增多, 通气大、搅拌强烈可使泡沫增多,因此在 发酵前期由于培养基营养成分消耗少, 发酵前期由于培养基营养成分消耗少,培养基 成分丰富,易起泡。应先开小通气量, 成分丰富,易起泡。应先开小通气量,再逐步 加大。搅拌转速也如此。 加大。搅拌转速也如此。也可在基础料中加入 消泡剂。 消泡剂。
起泡的方式有5 起泡的方式有5种:
①整个发酵过程中,泡沫保持恒定的水平; 整个发酵过程中,泡沫保持恒定的水平; ②发酵早期,起泡后稳定地下降,以后保持恒定; 发酵早期,起泡后稳定地下降,以后保持恒定; ③发酵前期,泡沫稍微降低后又开始回升; 发酵前期,泡沫稍微降低后又开始回升; ④发酵开始起泡能力低,以后上升; 发酵开始起泡能力低,以后上升; ⑤以上类型的综合方式。 以上类型的综合方式。 这些方式的出现是与基质的种类、 这些方式的出现是与基质的种类、通气搅拌强度和 基质的种类 灭菌条件等因素有关 其中基质中的有机氮源 等因素有关。 有机氮源( 灭菌条件等因素有关。其中基质中的有机氮源(如黄 豆饼粉等) 起泡的主要因素。 豆饼粉等)是起泡的主要因素。
发酵过程中泡沫的控制方法
发酵过程中泡沫的控制方法
发酵过程中泡沫的控制方法主要有以下几种:
1. 定期搅拌:通过定期搅拌可以破坏发酵液表面的泡沫,同时使酵母能均匀分布在发酵液中,有利于菌体和产品的分离。
2. 使用消泡剂:可以在发酵液中添加适量的消泡剂,它能在一定程度上降低表面张力,抑制泡沫的产生或使已有的泡沫减少。
3. 采用自动消泡系统:对于大型发酵罐,可以安装自动消泡系统,利用压缩空气在发酵液中产生气泡并携带消泡剂进入上部液体区域,起到消泡效果。
4. 控制通气量:适当控制通气的速率,避免过度产生二氧化碳气体。
5. 调整培养基的pH值:可以通过调节培养基的pH值来改变微生物的生长环境,从而抑制泡沫的产生。
6. 通过加入防沫剂:防沫剂是一种能够抑制泡沫产生的化学物质。
加入后可有效地减缓泡沫的产生。
但需要注意的是,防沫剂不会完全消除泡沫的出现,只能在一定程度上控制。
总的来说,这些方法应结合具体的发酵条件(如温度、湿度、压力等)进行选择
和应用。
7发酵工艺控制(第4节-泡沫控制)【发酵工程】
发酵液性质随菌代谢不断变化,是泡沫消长的重要因素。
举例: 霉菌发酵前期,泡沫很稳定,因发酵液黏度高和表面
张力低。随着蛋白酶、淀粉酶的增多及碳、氮源的利用, 蛋白质降解,发酵液黏度 降低和表面张力上升,泡 沫在减少。
菌体也有稳定泡沫的升。
三、 泡沫的控制
消沫装置可安装在罐内或罐外。
罐内法:可在搅拌轴上方安装消沫桨,形式多样, 泡沫借旋风离心场作用被压碎,也可将少量消泡剂加 到消沫转子上以增强消沫效果。
罐外法:是将泡沫引出罐外,通过喷嘴的加速作用或 离心力粉碎泡沫。
离心式消泡器 :
是一种离心式气液分离装置。装于排气口上,夹带 液沫的气流以切线方向进入分离器中,由于离心力的作 用,液滴被甩向器壁,经回流管返回发酵罐,气体则自 中间管排出。
②、增加了菌群的非均一性:
由于泡沫高低的变化和处在不同生长周期的微 生物随泡沫漂浮,或黏附在罐壁上,使这部分菌有时在 气相环境中生长,引起菌的分化,甚至自溶,从而影响 了菌群的整体效果。
③、增加了污染杂菌的机会,发酵液溅到轴封 处,容易染菌。
④、大量起泡,控制不及时,会引起逃液,招 致产物的流失。
举例:
土霉素发酵中用泡敌、植物油和水按(2~3):(5~ 6):30的比例配成乳化液,消沫效果很好,不仅节约了 消沫剂和油的用量,还可在发酵全程使用。
消沫作用的持久性与本身的性能、加入量、加入时 机有关。
举例: 青霉素发酵中曾采用滴加玉米油的方式,防止了泡沫
用量0.03%左右,消沫能力比植物油大10倍以上。
泡敌亲水性好,在发泡介质中易铺展,消沫能力强, 但其溶解度也大,消沫活性维持时间较短。在黏稠发酵 液中使用效果比在稀薄发酵液中更好。
3、高级醇:
十八醇是高级醇类中常用的一种,可单独或与载体一 起使用。它与冷榨猪油一起能有效控制青霉素发酵的泡沫。
发酵工艺控制
发酵工艺控制—— pH对发酵的影响及控制发酵过程中培养液的pH值是微生物在一定环境条件下代谢活动的综合指标,是一项重要的发酵参数。
它对菌体的生长和产品的积累有很大的影响。
因此,必须掌握发酵过程中pH的变化规律,及时监测并加以控制,使它处于最佳的状态。
尽管多数微生物能在3~4个pH单位的pH范围内生长,但是在发酵工艺中,为了达到高生长速率和最佳产物形成,必须使pH在很窄的范围内保持恒定。
一、PH对发酵的影响微生物生长和生物合成都有其最适和能够耐受的pH范围,大多数细菌生长的最适pH范围在6.3~7.5,霉菌和酵母生长的最适pH范围在3~6,放线菌生长的最适pH范围在7~8。
有的微生物生长繁殖阶段的最适pH范围与产物形成阶段的最适pH范围是一致的,但也有许多是不一致的。
表7-1列举了几种生长最适pH范围与产物形成最适pH范围不一致的例子。
pH还会影响菌体的形态。
例如,产黄青霉细胞壁的厚度随pH的增加而减小;当pH低于6时,菌丝的长度缩短,直径为2~3μm,当pH=7或>7时,直径为2~18μm,酵母状膨胀菌丝的数目增加。
pH下降后,菌丝形态又恢复正常。
pH还影响细胞膜的电荷状态,引起膜的渗透性发生改变,进而影响菌体对营养物质的吸收和代谢产物的形成。
对产物的稳定性同样有影响。
除此之外,pH对某些生物合成途径有显著影响。
例如,丙酮丁醇发酵中,细菌增殖的pH范围是5.5~7.0为好,发酵后期pH=4.3~5.3时积累丙酮丁醇,pH升高则丙酮丁醇产量减少,而丁酸、乙酸含量增加。
又如,黑曲霉在pH=2~3时产生柠檬酸,pH近中性时,积累草酸和葡萄糖酸。
谷氨酸发酵中,pH=7或微碱时形成谷氨酸,pH酸性时产生N—乙酰谷酰胺。
从以上看出,为要更有效地控制生产过程,必须充分了解微生物生长和产物形成的最适pH范围。
二、影响发酵pH的因素发酵过程中,pH的变化是微生物在发酵过程中代谢活动的综合反映,其变化的根源取决于培养基的成分和微生物的代谢特性。
发酵工程 8-4泡沫对发酵的影响与控制
2,氮源浓度
氮源有无机氮源和有机氮源两类,它们对菌 体代谢都能产生明显的影响. 迅速利用的氮源(氨基酸等)促进菌体生长, 但对某些产物(抗生素等)的合成产生调节 作用; 缓慢利用的氮源(黄豆饼粉,花生饼粉等) 对延长次生代谢产物的分泌期,提高产物的 产量有好处.
发酵培养基一般选用含有快速和慢速利 用的混合氮源. 如链霉素发酵采用硫酸铵和黄豆饼粉.
2,发酵过程中泡沫的消长规律
发酵过程中泡沫的多寡与通气搅拌的剧烈程度和 培养基的成分有关, 玉米浆, 蛋白胨, 花生饼粉, 培养基的成分有关 , 玉米浆 , 蛋白胨 , 花生饼粉 , 黄豆饼粉,酵母粉,糖蜜等是发泡的主要因素. 黄豆饼粉,酵母粉,糖蜜等是发泡的主要因素. 随着发酵过程中蛋白酶, 淀粉酶的增多及碳 , 氮 随着发酵过程中蛋白酶 , 淀粉酶的增多及碳, 源的利用, 起稳定泡沫作用的蛋白质的降解, 发 源的利用 , 起稳定泡沫作用的蛋白质的降解 , 酵液黏度的降低和表面张力的上升, 泡沫在减少. 酵液黏度的降低和表面张力的上升 , 泡沫在减少 . 在发酵后期菌体自溶, 可溶性蛋白增加, 在发酵后期菌体自溶 , 可溶性蛋白增加 , 又促进 泡沫的上升. 泡沫的上升.
CO2对细胞的作用是影响细胞膜的结构,溶 对细胞的作用是影响细胞膜的结构, 对细胞的作用是影响细胞膜的结构 主要作用于细胞膜的脂肪酸核心部位, 解CO2主要作用于细胞膜的脂肪酸核心部位, 主要作用于细胞膜的脂肪酸核心部位 而HCO3-则影响磷脂亲水头部带电荷表面及 则影响磷脂亲水头部带电荷表面及 细胞膜表面上的蛋白质. 细胞膜表面上的蛋白质.当细胞膜的脂质相 浓度达到一临界值时, 中CO2浓度达到一临界值时,膜的流动性及 浓度达到一临界值时 表面电荷密度发生变化, 表面电荷密度发生变化,导致膜对基质的运 输受阻,影响细胞膜的运输效率, 输受阻,影响细胞膜的运输效率,使细胞处 麻醉"状态,生长受抑制,形态异常. 于"麻醉"状态,生长受抑制,形态异常.
微生物工程第5章发酵过程及控制
(三)、pH在发酵过程中的变化规律
在发酵前期,菌体生长缓慢,糖分解的少, 铵离子利用的也少,所以pH变化缓慢。
随菌的生长,菌分解了含氮有机物,释放出 铵,培养基的pH会缓慢上升。
当菌转入对数生长期,由于菌体大量繁殖, 大量利用糖和铵离子,培养基的pH逐渐下降。
在生长后期,由于菌体自溶,释放出铵,pH 又回升。
二、发酵过程中的代谢变化及规律
与代谢有关的参数: 1、物理参数 ⑴、温度 ⑵、罐压 ⑶、搅拌速度 ⑷、空气流量 ⑸、表观粘度 ⑹、发酵液重量
与代谢有关的参数: 2、化学参数 ⑴、基质浓度 ⑵、pH ⑶、产物浓度 ⑷、DNA量 ⑸、关键酶 ⑹、溶解氧 ⑺、排气中的氧含量 ⑻、排气中的CO2含量
与代谢有关的参数: 3、生物参数 ⑴、菌丝形态 ⑵、菌丝干重或湿重 ⑶、菌体比生长速率 ⑷、氧的比消耗速率 ⑸、糖的比消耗速率 ⑹、氮的比消耗速率 ⑺、产物的比生产速率
一、种子制备工艺及质量控制
菌种是发酵的关键,从一个保存的菌 种,到生产上使用的种子,如果按几 十~几百吨的发酵规模,10%的种子量 (接种量)计,需要几吨~几十吨的种 子。
(一)、作为种子的要求: 1、细胞的生活力强,移种至发酵罐后能迅速生长 2、菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求 3、无杂菌污染 4、生理形状稳定、保持稳定的生产能力
• 泡沫的控制除了添加消泡剂外,改进培养基成分 也是相辅相成的一个重要方面。
化学消泡剂应具备以下特点:
• 必须是表面活性剂,具有较低的表面张力,消泡 作用迅速有效;
• 具有一定的亲水性,使消泡剂对气-液界面的分 散系数足够大,从而迅速发挥消泡活性;
• 在水中的溶解度必须小,以保持持久地消泡或抑 泡性能;
缓慢利用的氮源物质:有利于延长产物的合 成期。
(完整版)发酵过程泡沫产生的原因
发酵过程泡沫产生的原因
在发酵过程中,通常会因为一些不恰当的操作,引起过多泡沫,而产生不必要的浪费和危害。
德丰消泡剂厂告诉大家通常泡沫产生的原因有以下几种。
(1)通气搅拌的强烈程度
通气大、搅拌强烈可使泡沫增多,因此在发酵前期由于培养基营养成分消耗少,培养基成分丰富,易起泡。
应先开小通气量,再逐步加大。
搅拌转速也如此。
也可在基础料中加入消泡剂。
(2)培养基配比与原料组成
培养基营养丰富,黏度大,产生泡沫多而持久,前期难开搅拌。
例:在50L罐中投料10L,成分为淀粉水解糖、豆饼水解液、玉米浆等,搅拌900 rpm,通气,泡沫生成量为培养基的2倍。
如培养基适当稀一些,接种量大一些,生长速度快些,前期就容易开搅拌。
(3)菌种、种子质量和接种量
菌种质量好,生长速度快,可溶性氮源较快被利用,泡沫产生几率也就少。
菌种生长慢的可以加大接种量
(4)灭菌质量
培养基灭菌质量不好,糖氮被破坏,抑制微生物生长,使种子菌丝自溶,产生大
量泡沫,加消泡剂也无效。
德丰消泡剂厂研发生产的DF-1200和DF1208是专门消除生物发酵泡沫的
消泡剂乳液,受高温杀菌后,能自动恢复乳化状态,不会在发酵液体中水油分离、破乳而影响使用。
5. 发酵过程控制
五、发酵过程中泡沫的产生 和控制
影响生物热的因素
菌株的性能、接种量、菌丝浓度、 菌株的性能、接种量、菌丝浓度、培养基的成分和 发酵时间都直接影响着生物热的大小。 发酵时间都直接影响着生物热的大小。
最适发酵温度
指最适于产生菌生长或抗生素合成的温 度。 特点: 特点:
最适温度是一个相对的概念; 最适温度是一个相对的概念; 发酵过程中要控制几个不同的最适温度; 发酵过程中要控制几个不同的最适温度; 发酵温度的选择要参考其它发酵条件,如通 发酵温度的选择要参考其它发酵条件, 气条件、培养基的组成和浓度等。 气条件、培养基的组成和浓度等。
三、通气和搅拌
影响发酵过程中需氧的因素: 影响发酵过程中需氧的因素:
① 生产菌种:1)不同菌种;2)同一菌种的不同生 生产菌种: 不同菌种; 长代谢阶段,主要取决于下列两个主要因素: 长代谢阶段,主要取决于下列两个主要因素:单 位体积培养液中的菌液浓度和菌的呼吸强度。 位体积培养液中的菌液浓度和菌的呼吸强度。 呼吸强度:单位重量菌丝体(干重) 呼吸强度:单位重量菌丝体(干重)在单位时间 内的耗氧量。 内的耗氧量。 ② 培养基 ③ 菌丝浓度和形状 种子的质和量: ④ 种子的质和量:接种量和接种龄 ⑤ 泡沫和消泡剂 ⑥ 其它因素
菌丝形态与产量的关系
以产黄青霉生产青霉素为例: 以产黄青霉生产青霉素为例:
I. 分生孢子发芽,具有小空泡; 分生孢子发芽,具有小空泡; II. 菌丝增殖,出现类似脂肪的小颗粒; 菌丝增殖,出现类似脂肪的小颗粒; III. 菌丝分支旺盛,出现脂肪颗粒,没有空泡; 菌丝分支旺盛,出现脂肪颗粒,没有空泡; IV. 菌丝缓慢生长,脂肪颗粒减少,形成中小空泡, 菌丝缓慢生长,脂肪颗粒减少,形成中小空泡, 开始大量分泌青霉素; 开始大量分泌青霉素; V. 菌丝体出现大空泡,含1个中性红染色的大颗粒, 菌丝体出现大空泡, 个中性红染色的大颗粒, 脂肪粒消失,大量分泌青霉素; 脂肪粒消失,大量分泌青霉素; VI. 菌丝呈筒状,颗粒消失,空泡延长,少数菌丝自 菌丝呈筒状,颗粒消失,空泡延长, 青霉素分泌减少。 溶,青霉素分泌减少。
7发酵工艺控制(4)
装不合理,存在死角等是造成染菌的重要原因。
1、发酵罐的渗漏
冷却管的渗漏 发酵罐中最容易渗漏的部件之一 最易穿孔的是冷却列管的弯曲处;冷却水的压力通常 大于罐压,如有微孔,冷却水会进入发酵液引起染菌。 罐体的穿孔 特别是罐底。每年大修时需检查钢板减薄的程度。 有夹套的发酵罐检查罐壁有无渗漏。
2、管件的渗漏
有的放矢。
1、从染菌的规模来分析
(1)、大批发酵罐染菌 发酵罐都出现染菌而且染的是同一种菌,一般是由 空气过滤器失效造成的。对空气系统必须定期检查。 (2)、部分发酵罐(或罐组)染菌
发酵前期可能是种子带菌
中后期可能是中间补料系统或油管路发生问题
(3)、个别发酵罐连续染菌和偶然染菌 大多由设备问题造成.(如阀门的渗漏或罐体腐蚀磨 损,特别是冷却管的穿孔等。) 个别发酵罐的偶然染菌原因比较复杂。
工业发酵研究和开发的主要目标之一:建立一种能达到高 产低成本的可行过程。 达到此目标的重要工艺手段有:菌种的改良、培养基的改 进和补料等生产条件的优化等。 生物过程的控制不仅要从生物学上还要从工 程的观点考虑。由于过程的多样性,生物技 术工厂的控制是一复杂的问题。
常用发酵仪器的最方便的分类为: 就地使用的探头; 其他在线仪器、气体分析;
⑤、消泡剂有时影响发酵或给提炼带来麻烦。
发酵液理化性质对形成的泡沫起决定作用: 发酵液中细胞、蛋白质原料具有稳定泡沫的作用。 多数起泡剂是表面活性物质。蛋白质分子中除分子 引力外,在羧基和氨基之间还有引力,因而形成的液膜 比较牢固,泡沫比较稳定。 发酵液的温度、pH、浓度以及泡沫表面积对泡沫 的稳定性也有一定作用。
空气、蒸汽、水、物料、排气、排污等管及其相应的管 件和阀门。
管道的连接方式、安装方法及选用的阀门形式对防 止污染有很大的关系。 与发酵有关的管路不能同一般化工厂的 化工管路完全一样,而有其特殊要求。
8.发酵过程控制
发酵过程控制
五 CO2 和 呼 吸 商 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
CO2对菌体具有抑制作用;通常,当排气中 CO2的浓度高于4%时,微生物的糖代谢和 呼吸速率下降。如,发酵液中CO2的浓度达 到1.6×10-1mol,就会严重抑制酵母的生长; 当迚气口CO2的含量占混合气体的80%时, 酵母活力与对照相比降低20%。
二 温 度 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
发酵过程控制
发酵过程中,发酵液温度变化取决于上面 几个因素: Q发酵 = Q生物 + Q搅拌 - Q蒸发 - Q辐射
二 温 度 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
发酵过程控制
发酵热的测量: ①利用热交换原理: 测量一定时间内冷却水的流量和冷却水迚 出口温度,根据 Q发酵 = G*C(t2 – t1)/V
八 泡 沫 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
发酵过程控制
泡沫的消长规律
八 泡 沫 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
操作情况 培养基原料
发酵周期
发酵过程控制
不同搅拌速度和通气量对泡沫影响
八 泡 沫 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
发酵过程控制
不同浓度蛋白质原料的起泡作用
八 泡 沫 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
二 温 度 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
发酵过程控制
散热的情况:
二 温 度 对 发 酵 的 影 响 及 其 控 制
蒸发热:水汽化时带走的热量,用Q蒸发表示; 假设迚出口气体温度相同,则由通气带走的 热量为:Q蒸发= G(I出-I迚) G:空气流量;I:气体热焓;
发酵过程控制
辐射热:罐体表面向环境中发射红外线而 散失的热量;热量的大小决定于罐内外温 度差大小、罐的表面积等。
发酵过程为什么会产生泡沫?泡沫过多有什么危害?
生长具 有明显 的促进作 用 ,且 以促进 细菌分裂 为主
㈣
。ห้องสมุดไป่ตู้
在 发酵 培养基 中分别 添加 0、2、4、6、8、10
的
酵母 抽提 物 ,发 酵 36h时 ,采用 平板稀 释计 数法 考
察质粒 的缺失情况 。试验结 果如 图 2所示 。
参 考文 献 :
(1】周 骏 山.实用 氨 基 酸 手 册 [M1.上 海 :上海 中医 学 院 出 版 社,1992. 团 Nayak D P,vyas V VJmproved stability and expression of a
l
臻
在好气菌发酵中,由于通气搅拌与菌体代谢产生的二氧化碳以及培养液中蛋白质等胶 l
体物 质 ,而使 培养液产 生 泡沫 。而泡 沫过 多 ,气体 交换受 阻 ,将影 响生产 菌 的呼 吸和代 谢 ;如
果泡沫控制不好,还会引起大量逃液,造成浪费和污染环境;泡沫上升到罐顶,会从轴封渗 l
出造 成染 菌 的危险 ;同时 ,过多 的泡沫 也 给后道提 取带来 困难 。
coli:Existence of anoptimum dilution rate for maximum plasmid and
gene product concentration [J].Bio techno lBioeng,1985,28:1590—
1594。
[1O]李 君 文 ,孙 薇 ,王 新 为 等.海 带 水 提 液 和 酵母 提 取 物 促 大 肠 杆 菌 生 长 研 究【J]。 微 生 物 学 通 报,2004,31(6):16-22. 【11]杨 炜 ,王 伟 刚 ,田海 英 ,许 伟 ,温 传 彬 .重 组 大 肠 杆 菌 高 表 达 高 密 度发 酵 研 究 【J].生 物 技 术 ,2006,16(3):83~86
生物卷烟在发酵阶段泡沫问题的解决方法
生物卷烟在发酵阶段泡沫问题的解决方法作者:雷刚来源:《科学与财富》2017年第22期摘要:泡沫是伴随发酵而生的,也是造成发酵后期染菌,影响菌产量的重要因素。
本文分析了生物卷烟发酵过程中泡沫的产生机制、影响,介绍了常用的泡沫控制策略,以期为生产中泡沫消除提供参考。
关键词:生物卷烟;发酵;泡沫1发酵过程泡沫的产生原因1.1培养基成分问题:培养基营养丰富,黏度大,如蛋白质(蛋白质是由氨基酸分子呈线性排列所形成)原料:蛋白胨、玉米浆、黄豆粉、酵母膏。
其中含有大量的蛋白质,而蛋白质正是泡沫产生的主要因素。
1.2发酵初期,由于培养基营养消耗少,成分丰富,易起泡沫。
培养初期通气量越大,搅拌越剧烈,则产生的泡沫越多。
1.3灭菌的强度越大,其发酵中的泡沫越多。
由于灭菌的过程中,高温使得培养基中的糖、氨基酸形成了大量的类黑精,或者形成了:5-羟甲基糠醛,糖氮被破坏。
抑制微生物的生长,使菌丝自溶(菌体自身的蛋白溶于培养液中),产生大量泡沫。
2发酵过程泡沫的消除2.1针对培养基成分问题,可以调整培养基组成,选取起泡少的物质。
培养基营养物质丰富,在培养初期搅拌强烈的条件下,容易产生泡沫,所以在培养基的选择上可以选那些既含有足够的营养物质又不容易气泡膜的培养基,这样可以在源头上抑制泡沫的产生。
2.2鉴于初期培养基营养丰富,菌种处于调整期,菌的数目比较少,活性相对较低(分裂代谢缓慢,合成代谢旺盛)。
对氧气的需求量相对不是很大,所以可以先调小进气量,随着菌的生长再逐渐增大,搅拌转速也是如此。
但是通气量的调节主要取决于前期绘制的菌种生长曲线或摸索的进气量值,以生长曲线为参考,在调整期、对数期、稳定期采用不同的供气量。
至于供气量的大小,现已有摸索值,但还不是最佳值,还要在实验和大量的生产实践中摸索。
2.3实消强度大,对培养基破坏大。
鉴于我们的培养基是工业成品,其中含杂质不是很多,能否考虑降低实消强度。
特别是在升温时间、降温时间的控制上尤为重要(这个操作方法应该统一),一旦高温时间(90°C以上)维持过长,对培养基的破坏相当大,还可能在中间产生大量的分解物,这些物质又可能产生大量的泡沫。
泡沫对发酵的影响
一、泡沫的形成及其对发酵的影响在大多数微生物发酵过程中,由于培养基中有蛋白类表面活性剂存在,在通气条件下,培养液中就形成了泡沫。
泡沫是气体被分解在少量液体中的胶体体系,气液之间被一层液膜隔开,彼此不相连通。
形成的泡沫有两种类型:一种是发酵液液面上的泡沫,气相所占的比例特别大,与液体有较明显的界限,如发酵前期的泡沫;另一种是发酵液中的泡沫,又称流态泡沫(fluidfoam),分散在发酵液中,比较稳定,与液体之间无明显的界限。
发酵过程产生少量的泡沫是正常的。
泡沫的多少一方面与搅拌、通风有关;另一方面,与培养基性质有关。
蛋白质原料如蛋白胨,玉米浆、黄豆粉、酵母粉等是主要的发泡剂。
糊精含量多也引起泡沫的形成。
发酵过程中,泡沫的形成有一定的规律性。
发酵时起泡的方式被认为有五种:①整个发酵过程中,泡沫保持恒定的水平;②发酵早期,起泡后稳定地下降,以后保持恒定;③发酵前期,泡沫稍微降低后又开始回升;④发酵开始起泡能力低,以后上升;⑤以上类型的综合方式。
这些方式的出现是与基质的种类、通气搅拌强度和灭菌条件等因素有关,其中基质中的有机氮源(如黄豆饼粉等)是起泡的主要因素。
当发酵感染杂菌和噬菌体时,泡沫异常多。
起泡会带来许多不利因素,如发酵罐的装料系数减少、氧传递系统减小等。
泡沫过多时,影响更为严重,造成大量逃液,发酵液从排气管路或轴封逃出而增加染菌机会等,严重时通气搅拌也无法进行,菌体呼吸受到阻碍,导致代谢异常或菌体自溶。
所以,控制泡沫乃是保证正常发酵的基本条件。
二、泡沫的消除泡沫的控制,可以采用两种途径:①调整培养基中的成分(如少加或缓加易起泡的原材料)或改变某些物理化学参数(如pH值、温度、通气和搅拌)或者改变发酵工艺(如采用分次投料)来控制,以减少泡沫形成的机会。
但这些方法的效果有一定的限度;②采用机械消泡或消泡剂消泡这两种方法来消除已形成的泡沫。
还可以采用菌种选育的方法,筛选不产生流态泡沫的菌种,来消除起泡的内在因素,如用杂交方法选出来不产生泡沫的土霉素生产菌株。
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泡沫对发酵的影响与控制摘要:泡沫对发酵过程产生多种不利因素,是影响发酵过程重要主要因素之一,本文主要就泡沫的性质,以及泡沫消除的方式进行论述。
并阐述了消泡技术发展的趋势,以及新型的化学消泡技术。
关键词:发酵、泡沫、消泡剂、活性剂一、泡沫产生的原因泡沫是气体在液体中的粗分散体,产生泡沫的首要条件是气体和液体发生接触。
而且只有气体与液体连续、充分地接触才会产生过量的泡沫。
,按产生原因可以大致分为两类:①外界引入,在通气过程中,伴随机械搅拌、空气被分成细小的气泡,从溶氧的角度讲,气泡越细越好,使空气中的氧和发酵液中的CO2能充分的进行交换,这些气泡升到发酵液面时无法及时消除而形成泡沫。
②由发酵液内部产生微生物在进行发酵活动时,往往产生一些气体,如CO2,这些代谢气体凝结形成气泡,冒出到发酵液面,成为发酵泡沫,菌体代谢越旺盛,这部分泡沫的产生量越多。
培养基配比与原料组成以及性质对泡沫也有很大的影响。
培养基营养丰富,黏度大,产生泡沫就多而持久二、泡沫的性质:泡沫是气体被分散在少量液体中的胶体体系。
泡沫间被一层液膜隔开而彼此不相连通。
发酵过程中所遇到的泡沫,其分散相是无菌空气和代谢气体,连续相是发酵液影响泡沫稳定性的因素1、泡径大小通常情况下大泡易于破灭,寿命较长的都是小泡,另一方面,气泡只有上升到液面才能够在破灭之后减少泡沫体积,所以气泡越小,上升速度越慢。
小气泡上升慢,给表面活性剂的吸附提供充足的时间,增加了稳定性。
、2、溶液所含助泡物的类型和浓度(1)降低表面张力降低表面张力会降低相邻气泡间的压差。
压差小,小泡并入大泡的速度就慢,泡沫的稳定性就好。
(2)增加泡沫弹性泡沫液具有可以伸缩的称为“吉布斯弹性”的性质,对于泡沫稳定性来说表面活性剂使液膜具有“吉布斯弹性”比降低表面张力更重要吉布斯曾对泡沫液弹性做如下定义:E=2AσE——膜弹性A——膜面积σ——表面张力(3)助泡剂浓度3,发酵液的粘度某些溶液,如蛋白质溶液,虽然表面张力不低,但因粘度很高,所产生的泡沫非常稳定。
4、其它温度:张力最低值时的浓度随温度变化。
在最低表面张力时泡沫排液迅速,否则排液缓慢。
pH:响助泡剂的溶解度和表层的吸附状态表面电荷:子型表面活性剂,水解后带电荷,泡沫的定向吸附层为双电层结构。
由于离子间静电的排斥,阻碍着离子彼此接近,减少排液速度,延缓泡沫变薄过程,使泡沫稳定。
三、泡沫对发酵的影响。
发酵过程中产生过多持久的泡沫会给发酵带来很多不利,总结出来有以下几点:①减少发酵的有效容积,若不加控制,过多的泡沫通过排气管溢出,造成发酵液流失;②过多的泡沫可能从罐顶的轴封渗出罐外,这就增加了染菌的机会;③使部分菌体粘附在罐盖或罐壁上,而失去作用;④泡沫严重时,影响通气搅拌的正常进行,妨碍代谢气的排出,对菌体呼吸造成影响,甚至使菌体代谢异常,影响生产率。
四、泡沫的消除化学消泡:化学消泡就是使用各种化学因素解决起泡问题,通常称为消泡剂,消泡剂通常具有以下性质:①表面活性剂,具有较低的表面张力(内聚力弱),消泡效果明显。
②对气-液界面的散布系数必须足够大,才能迅速消泡;③无毒害性,且不影响发酵菌体;④不干扰各种测量仪表的使用;⑤在水中的溶解度较小,以保持持久的消泡性能;⑥来源方便,使用成本低;常用的一些消泡剂:①天然油脂;天然油脂是最早用的消泡剂,它来源容易,价格低,使用简单,一般来说没有明显副作用,如豆油、菜油、鱼油等。
油脂主要成分是高级脂肪酸酯和高级一元醇酯,还有高级醇、高级烃等。
但油脂如保藏不好,易变质,使酸值增高,对发酵有毒性。
此外,有些油是发酵产物的前体,如豆油是红霉素的前体,鱼油是螺旋霉素的前体。
近年来出于对环境保护的重视,天然产物消泡剂的地位又有些提高,而且还在研究新的天然消泡剂。
酒糟榨出液:罗伯茨(Roberts R.T.)在英国酿造业研究基金会资助的试验啤酒厂发现:全麦芽浸出浆桶中最后倒出的沉积物能破灭泡沫。
于是联想到,是否可以由制作全麦芽浸出浆以后的酒糟压榨出有效的消泡剂?经过试验,由酒糟中压榨出大约40%液体,在500C真空蒸馏,浓缩19倍,果然得到可用于麦芽汁发酵过程的消泡剂。
效果很好,没有副作用。
经分析证明,酒糟榨出液中存在C8~C18的全部脂肪酸,存在极性类脂物,尤其是卵磷脂等物,这些物质的协同作用下的消泡作用比这些物质单独消泡作用强得多。
啤酒花油:研究年发现向啤酒添加1~5ppm啤酒花油是减轻气泡溢出损失的有效措施。
经啤酒花油具含有消泡活性的物质有:石竹烯、荷兰芹萜烯、香叶烯和蒎烯等。
②高碳醇、脂肪酸和酯类;高碳醇是强疏水弱亲水的线型分子,在水体系里是有效的消泡剂。
七十年代初前苏联学者在阴离子、阳离子、非离子型表面活性剂的水溶液中试验,提出醇的消泡作用,与其在起泡液中的溶解度及扩散程度有关。
C7~C9的醇是最有效的消泡剂。
C12~C22的高碳醇借助适当的乳化剂配制成粒度为4~9μm,含量为20~50%的水乳液,即是水体系的消泡剂。
还有些成酯,如苯乙醇油酸酯、苯乙酸月桂醇酯等在青霉素发酵中具有消泡作用,后者还可作为前体。
③聚醚类:醚类消泡剂种类很多我国常用的主要是甘油三羟基聚醚。
六十年代发明此类消泡剂,美国道康宁化学公司首先投产。
它是以甘油为起始剂,由环氧丙烷,或环氧乙烷与环氧丙烷的混合物进行加成聚合而制成的。
只在甘油分子上加成聚合环氧丙烷的产物叫聚氧丙烯甘油定名为GP型消泡剂;用于链霉素发酵,代替天然油,加入基础料,效果很好。
在GP型消泡剂的聚丙二醇链节末端再加成环氧乙烷,成为链端是亲水基的聚氧乙烯氧丙烯甘油,也叫GPE型消泡剂(泡敌)。
按照环氧乙烷加成量为10%,20%,……50%分别称为GPE10,GPE20,……GPE50。
这类消泡剂称为“泡敌”。
用于四环素发酵效果很好,相当于豆油的10~20倍。
GP型的消泡剂亲水性差,在发泡介质中的溶解度小,所以宜使用在稀薄的发酵液中。
它的抑泡能力比消泡能力优越,适宜在基础培养基中加入,以抑制整个发酵过程的泡沫产生。
GPE型消泡剂亲水性较好,在发泡介质中易铺展,消泡能力强,但溶解度也较大,消泡活性维持时间短,因此用在粘稠发酵液中效果较好。
有一种新的聚醚类消泡剂,在GPE型消泡剂链端用疏水基硬脂酸酯封头,便形成两端是疏水链,当中间隔有亲水链的嵌段共聚物。
这种结构的分子易于平卧状聚集在气液界面,因而表面活性强,消泡效率高。
这类化合物叫GPES型消泡剂。
④硅酮类;最常用的是聚二甲基硅氧烷,也称二甲基硅油。
它表面能低,表面张力也较低,在水及一般油中的溶解度低且活性高。
它的主链为硅氧键,为非极性分子。
与极性溶剂水不亲和,与一般油的亲和性也很小。
它挥发性低并具有化学惰性,比较稳定且毒性小。
也有在硅油和SiO2气溶胶的复合物中添加一种或两种乳化剂,加热溶匀,与增稠剂水溶液混合后乳化。
乳化剂有甘油单硬脂酸酯,聚氧乙烯山梨糖醇单硬脂酸酯(Tween60)、聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯(Tween80)、山梨糖醇单硬脂酸酯(Spen60)、山梨糖醇三硬脂酸酯(Spen65)。
增稠剂有羧甲基纤维素钠盐。
这类消泡剂广泛用于抗生素发酵及食品工业。
2.应用:在消泡剂的使用时主要是让其有足够的分散性能,除用机械方式协助其扩散外,还用载体以助其分散,具体使用有以下几种形式:①消泡剂+ 载体;②复合消泡剂;③消泡剂+ 乳化剂机械消泡:化学消泡最显著的缺点是影响氧气的溶解,使其减少1/3~1/5,这对微生物供氧极为不利;机械消泡能克服这一缺点,但其应用效果不如化学消泡迅速可靠,不能从根本上消除引起稳定泡沫的因素。
1.消泡装置设计依据:①动力小;②结构简单;③易清洁;④运行可靠;⑤维护费用低;2.机械消泡方式:1、耙式消泡:是在搅拌轴上加一个消泡桨,通过转动产生的剪切力打碎泡沫,也有利用泡沫旋转产生的离心力破炮的形式。
结构装置形式主要有耙式、旋转圆板式、冲击反射板式。
这种方式是将泡沫引到罐外,依靠喷嘴产生的加速作用或者离心力来消除泡沫。
结构装置形式主要有旋转叶片式、离心力式、旋风分离器式、转向版式等。
这里简要介绍几种常用的消泡装置。
1、耙式消泡桨。
固定在搅拌轴上,安装在液面略上部位,随搅拌轴一起转动,利用耙齿将泡沫打碎,消泡效果有限一般常配合消泡剂使用。
在罐外尾气排放管上加一个旋风分离器装置利用离心力处理泡沫鲜果比较理想。
2、旋转圆板式。
在发酵馆内的气相中与发酵页面平行,圆板旋转的同时将槽内发酵液注入原版的中央,通过离心力将破碎成微小泡沫散向槽壁,达到消泡的目的。
3、旋转叶片机械消泡装置。
将泡沫引出罐外,利用装置中的旋转叶片所产生的冲击力和剪切力进行消泡,它可提高发酵罐的利用率,提高装料系数,但会增加染菌几率。
4、离心力消泡装置。
将泡沫注入用网眼及筛目较大的筛子做成的框中,通过旋转产生的离心力,从而达到消泡的目的。
总结:泡沫对发酵工业有着很大的影响,各阶段泡沫产生原因也不近相同,各种消泡的方法和设备也是层出不穷。
从通气搅拌方面来看,通气量越大,搅拌越剧烈,则产生的泡沫越多;从发酵液的性质来看,培养基中蛋白质含量越多,发酵液的粘度,浓度越大,则生成的泡沫稳定性就越高。
从菌体方面来看:菌体旺盛生长时,产生的泡沫多,当发酵液中营养基质被菌体大量消耗时,浓度下降,则气泡的稳定性也减弱,在发酵后期,伴随菌体的自溶,使发酵液中蛋白质浓度又上升,则发酵液的起泡性又增强。
发酵周期中,各阶段泡沫的产生是多种因素综合作用的结果,因此我们应该合理的根据泡沫的性质、培养基的性质、以及菌体的生理特性发酵产品,合理的选择消泡方式以及计量,只有这样我们才能做到产品的效益最大化。
参考文献:徐江伟。
消泡剂的复合及其消泡机理的探讨。
中国甜菜行业,2002:30-34 寇天平。
发酵生产中泡沫消除。
发酵科技通讯,2006韩富,张高勇,王军,有机硅消泡剂,日用化学工业,2004通过一学期的系统的对于生物过程检测与控制学习,使我们增加了对发酵的了解,了解了发酵过程中的各种化学物理因素,熟悉各种因素对发酵各阶段的影响,以及各种因素的性质及其变化规律。
各种生物传感器原理及其构造,为我们能够更好的控制发酵过程奠定了坚实的基础。
例如就发酵过程来说泡沫对发酵的影响是不容忽视的。
平常我们吃的各种发酵食品细细观察就会在添加剂一栏标明消泡剂字样。
如何更好地检测与控制发酵的过程中的影响因素,不仅能够使得发酵过程顺利的进行,还能实现效益最大化,对人也更加有益。
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