2019年-环境毒理学(董国日)05-2 致癌试验和致畸试验00-PPT精选文档-PPT精选文档
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同时应设阴性(溶剂或赋形剂)对照组。必要时可设阳性对照 组，阳性致癌物最好与受试物的化学结构相近。
3、染毒途径 尽可能模拟人体可能的暴露途径，主要途径有经
口、经皮和吸入三种，应根据受试物的理化性质和 接触方式选择确定。
4、试验期限 一般情况下，试验期限小鼠和仓鼠应为18个月，
大鼠为24个月；然而对于某些生命期较长或自发肿 瘤率低的动物品系，小鼠和仓鼠可持续24个月，大 鼠可持续30个月。
第五节 环境化学物的致癌作用 及其评价
一、环境致癌与化学致癌
癌症的发生80－90％由环境因素引起，包括物理因素、生 物因素和化学因素。其中主要是化学因素。在环境因素引起 的肿瘤中，80％以上由化学因素引起。
化学致癌(chemical carcinogenesis)是指化学物质引起正常 细胞发生恶性转化并发展成肿瘤的过程，具有这种作用的化 学物质称为化学致癌物(chemical carcinogen)。在此，“癌” 的含义包括上皮的恶性变(癌)，也包括间质的恶性变(肉瘤)及 良性肿瘤。
2、剂量设置 致癌试验一般设三个试验组。
高剂量组：最大耐受剂量(MTD)是由90天毒性试验来确定的 ，此剂量应使动物体重减轻不超过对照组的10％，并且不引 起死亡及导致缩短寿命的中毒症状或病理损伤。 低剂量组：一般不低于高剂量的10％。应不影响动物的正常 生长、发育和寿命，即不产生任何毒性效应。 中剂量组：介于高、低剂量之间，如有可能按受试物的毒物 动力学性质来确定。 对照组除不给受试物外，其他条件均与试验组相同。
灵敏性指受试物在致突变试验中的阳性比例。 特异性指受试物在致突变试验中的阴性比例。
美国环境保护局(EPA)遗传毒理学计划(GeneTox)及美国国立环境 卫生研究所(NIEHS)国家毒理学规划(NTP)对几个常用致突变试验 灵敏性及特异性的分析结果。
试验
Ames试验 小鼠淋巴瘤细胞基因突变试验
CHO细胞HGPRT基因突变试验 V79细胞基因突变试验
具有引发作用的化学物称为引发剂。引发剂本身有致癌性 ，大多数是致突变物，没有可检测的阈剂量，引发作用是不 可逆的并且是累积性的。但并非所有的引发细胞都将构成肿 瘤，因其中大多数将经历程序性细胞死亡(凋亡)。引发细胞 不具有生长自主性，因此不是肿瘤细胞。
（2）促长阶段：促长阶段是引发细胞增殖成为癌前病变或良 性肿瘤的过程。促长剂单独使用不具致癌性，必须在引发剂后 使用才发挥促长作用.促长剂通常是非致突变物,影响引发细胞 的增殖，导致局部增殖并引起良性局灶性病理损害如乳头瘤、 结节或息肉。这些病损很多会消退，仅少数细胞发生进一步突 变引成恶性肿瘤。
二、化学致癌的机制 尚未彻底阐明，大体可分为遗传机制学说和非遗
传机制学说。
（一）化学致癌的遗传机制学说
该学说认为，化学致癌物进入细胞后作用于遗传 物质，通过引起细胞基因的改变而发挥致癌作用。 有关学说最主要的是多阶段学说和癌基因学说。
1、化学致癌的多阶段学说 （1）引发阶段：化学致癌的第一阶段，是化学致癌物本身或 其活性代谢物作用于DNA，诱发体细胞突变的过程，可能涉及 原癌基因的活化和肿瘤抑制基因的失活。
（5） 免疫抑制剂：主要对病毒诱导的恶性转化起增 强作用。
（6） 固态物质：物理状态是关键性因素，可能涉及 细胞毒性。如塑料、石棉等。
（7）助癌物：本身无致癌性，在致癌物之前或同时 应用助癌物可显著增加癌症的发生。
助癌作用的机制可涉及增加致癌物的吸收、增加 活化的致癌物的比例、耗尽内源性结合反应底物、 抑制DNA修复、促进DNA损伤固定为突变等。
NTP 20／44(45) 66／119(54) 31／44(70)
-
4／18(22) 24／44(55) 9／15(60) 31／44(70) 10／15(67) 6／30(20)
特异性(％) GeneTox
29／47(62)
0／5(0) 1／1(100)
3／3(100) 9／16(60) 2／6(33)
2、化学致癌的癌基因学说 调控细胞增殖和分化的基因发生异常，可导
致细胞持续增殖，不能及时分化和凋亡，形成 肿瘤。与细胞恶性转化有关的基因主要有癌基 因和肿瘤抑制基因。
癌基因：能引起细胞恶性转化及癌变的基因。通常以原癌基 因的形式存在正常动物细胞的基因组中。 原癌基因：最早在1968年Duesberg发现Rous肉瘤病毒致癌是 由于携带能致癌的基因片段，称为病毒癌基因（V－onc）， 后来发现在正常细胞中也存在与病毒癌基因高度相似的DNA 序列，称为原癌基因（C-onc）。正常细胞中的原癌基因表达 并不引起恶性病变，其表达受到严格控制，通常与机体的生 长和发育有关。原癌基因必须经过激活才能导致细胞的恶性 转化。原癌基因是一种显性基因，当其两个等位基因之一发 生突变，即可被激活。
组4，对人类可能是非致癌物。指证据指示对人类和动物 不具有致癌性。
四、环境化学物致癌物的评价 (一)哺乳动物致癌试验
哺乳动物致癌试验是鉴定化学致癌物的标准体 内试验。哺乳动物致癌试验用来确定受试物对试验 动物的致癌性、剂量—反应关系及诱发肿瘤的靶器 官。
1、实验动物 物种和品系：要求用两种实验动物，常规选用大鼠和小鼠， 也可用仓鼠。在选择品系时应选择较敏感、自发肿瘤率低、 生活力强及寿命较长的品系。 性别：应使用同等数量的雌雄两种性别的动物。 年龄：使用刚离乳的动物，以保证有足够长的染毒和发生癌 症的时间，而且幼年动物解毒酶及免疫系统尚未完善，对致 癌作用比较敏感。
组2B，对人类是可能(possible)致癌物，指对人类致癌性证 据有限，对实验动物致癌性证据并不充分；或指对人类致癌 性证据不足，对实验动物致癌性证据充分。
组3，对人类的致癌性尚不能确定。指对人类致癌性证据 不充分，对实验动物致癌性也不充分或有限。或人类致癌 性证据不充分，对实验动物致癌性证据足够，但有强有力 的证据表明动物致癌机制不适用人体。
5、观察指标 （1）一般观察：每天观察受试动物一次，主要观察其外表、 活动、摄食情况等。在实验最初三个月每周称体重一次，以 后每两周称体重一次。经饲料或饮水给以受试物时，应记录 食物消耗量或饮水量，以计算受试物的摄人量。观察时要注 意有无肿瘤出现、肿瘤出现时间及死亡时间。 （2）肿瘤发生情况：记录肉眼可见或可触及肿瘤出现的时间 、部位、大小、外形、发展状况并记录动物死亡时间。 （3）病理检查：动物自然死亡或处死后必须及时进行病理检 查，包括肉眼和组织切片检查。
（3）无机致癌物 放射性元素和重金属。有些可能是亲电子剂，但有
些是通过选择性改变DNA复制保真性，导致DNA的 改变，如金属镍、铬。
2. 非遗传毒性致癌物(non-genotoxic carcinogens) 非遗传毒性致癌物不与DNA反应，可能间接地影
响DNA并改变基因组导致细胞癌变，或者通过促长 作用、增强作用导致癌为遗传毒性致癌物和非遗传毒性致癌物两类。 1、遗传毒性致癌物 （1)直接致癌物：不需代谢活化直接与亲核分子共价结合形 成加合物。这类化合物为亲电子剂，大多数为合成有机物。
（2）前致癌物： 多数有机致癌物需代谢活化才具有致癌活性，称为间接致癌
物。间接致癌物的原型称为前致癌物。前致癌物经代谢活化形 成的之间代谢产物——近致癌物（半致癌物），有一定致癌作 用但必须再一次激活——终致癌物（前致癌物经代谢活动形成 的具有致癌作用的代谢物和不需代谢活化的致癌物）。
致癌试验阳性的判定标准为WHO提出的标准。WHO(1969) 提出机体可以对致癌物有下列一种或多种反应：
(1) 对于对照组也出现的一种或数种肿瘤，试验组肿瘤发生 率增加；
(2) 试验组发生对照组没有的肿瘤类型； (3) 试验组肿瘤发生早于对照组； (4) 与对照组比较，试验组每个动物的平均肿瘤数增加。
肿瘤抑制基因：即抗癌基因。抗癌基因可能是编码抑制生殖、 促进分化的基因，也可能是某些基因的负控制调节基因，并 是维持基因组织定性的某些基因。
抗癌基因可抑制肿瘤细胞的肿瘤性状的表达，只有当自己 不能表达或其基因产物去活化才容许肿瘤性状的表达。染色 体缺失而诱发肿瘤的基因都可能是肿瘤抑制基因。属隐形基 因，必须一对等位基因丢失或突变后失活，才能对细胞的恶 性转化起作用。
（1）促长剂：本身无致癌性，在给以遗传毒性致癌 物之后再给以促长剂可增强遗传毒性致癌物的致癌 作用，也可促进“自发性”转化细胞发展成癌。
（2）激素调控剂：主要改变内分泌系统平衡及细胞 正常分化，常起促长剂作用。
（3）细胞毒剂：可能引起细胞死亡，导致细胞增殖 活跃及癌发展。
（4）过氧化物酶体增殖剂：过氧化物酶体增殖可导 致细胞内氧自由基过量生成。
（二）化学致癌的非遗传机制学说 一部分致癌物用目前的致突变试验不能检出其致突变性。
这些非遗传毒性致癌物促进细胞分裂增殖的机制多种多样：
具有细胞毒性的致癌剂可引起细胞变性坏死，细胞释放出的 物质具有刺激细胞分裂增殖的作用。
激素失调导致肿瘤发生，与通过细胞内相应的受体刺激细 胞分裂有关
免疫抑制剂可降低机体对癌前细胞的监视和清除能力
癌细胞的生物学特点： 1、持续性增殖，分化不良，体外培养无接触性抑制。永生 性。 2、浸润性生长：可侵入其他组织，并发生转移 3、过分旺盛地合成核酸和氨基酸 4、强烈的有氧酵解：在供氧充分时，仍能将葡萄糖转化为 乳酸，大量的乳酸使pH下降，影响细胞酶活力，破坏内稳 态的维持。 5、可将上述特征遗传给子代细胞
使细胞由促长阶段进入进展阶段的化学物称为进展剂 (progressor)。进展剂可引起染色体畸变，但不一定具有引发 活性。
引发、促长及进展都可自发发生。有些化学致癌物可同时具 有引发、促长及进展的作用，称为完全致癌物。
化学致癌是长期的、复杂的多阶段过程，至少涉及引发、 促长和进展三个阶段。 在引发阶段主要是细胞原癌基因和肿瘤抑制基因的突变 在促长阶段主要是遗传外机制 在进展阶段主要是核型不稳定性。 正常细胞经过遗传学改变的积累才能转变为癌细胞。
6、结果分析 主要分析指标有肿瘤发生率、肿瘤潜伏期及肿瘤多发性。 肿瘤发生率(％)=(实验结束时患肿瘤动物总数／有效动物总 数)×100％ 式中，有效动物总数指最早发现肿瘤时存活动物总数。 肿瘤潜伏期即从摄人受试物起到发现肿瘤的时间，因为内脏 肿瘤不易觉察，通常将肿瘤引起该动物死亡的时间定为发生 肿瘤的时间。 肿瘤多发性指一个动物出现多个器官的肿瘤或一个器官出现 多个肿瘤。
果蝇伴性隐性致死突变试验 体外染色体畸变试验 体内染色体畸变试验 体外SCE试验 体内SCE试验 肝细胞UDS试验
灵敏性(％) GeneTox 175／ 223(78)
45／54(87) 40／4l(98)
84／104(81) 77／106(73)
40/54(74) 8／9(89) 100／ 101(99) 2l／21(100) 19／22(86)
特点： 历时较长，早期有可逆性，晚期为不可逆的
对生理因素调节的敏感性，衰老、饮食和激素可 影响促长作用。
（3）进展阶段：进展阶段是从引发细胞群(癌前病变、良性 肿瘤)转变成恶性肿瘤的过程。在进展期肿瘤获得生长加快、 侵袭、转移和抗药性等特征。这些特征是由于在进展阶段的 核型不稳定性。肿瘤的染色体发生断裂、断片易位和非整倍 体。
（二）按致癌作用证据分类
组1，对人类是致癌物。对人类致癌性证据充分者属于本组。 对人的致癌性证据尚不充分，但对实验动物的致癌证据足够， 并且具有可通过相关致癌机制对人体发挥作用的强有力证据， 可归为此类。
组2，对人类是很可能或可能致癌物。又分为两组，即组2A 和组2B。
组2A，对人类很可能(probably)是致癌物。指对人类致癌性 证据有限，对实验动物致癌性证据充分。
在进行试验的两个物种两种性别动物中，有一种结果为阳 性，即认为该受试物有致癌性。两个物种两种性别动物试验结 果均为阴性时，方能认为未观察到致癌作用。
（二）致突变试验用于致癌物筛选
预测致癌性的理想致突变试验应能灵敏地预测 出受试物的致癌性，也能特异地预测出受试物的 非致癌性，即要有高的灵敏性和特异性。
3、染毒途径 尽可能模拟人体可能的暴露途径，主要途径有经
口、经皮和吸入三种，应根据受试物的理化性质和 接触方式选择确定。
4、试验期限 一般情况下，试验期限小鼠和仓鼠应为18个月，
大鼠为24个月；然而对于某些生命期较长或自发肿 瘤率低的动物品系，小鼠和仓鼠可持续24个月，大 鼠可持续30个月。
第五节 环境化学物的致癌作用 及其评价
一、环境致癌与化学致癌
癌症的发生80－90％由环境因素引起，包括物理因素、生 物因素和化学因素。其中主要是化学因素。在环境因素引起 的肿瘤中，80％以上由化学因素引起。
化学致癌(chemical carcinogenesis)是指化学物质引起正常 细胞发生恶性转化并发展成肿瘤的过程，具有这种作用的化 学物质称为化学致癌物(chemical carcinogen)。在此，“癌” 的含义包括上皮的恶性变(癌)，也包括间质的恶性变(肉瘤)及 良性肿瘤。
2、剂量设置 致癌试验一般设三个试验组。
高剂量组：最大耐受剂量(MTD)是由90天毒性试验来确定的 ，此剂量应使动物体重减轻不超过对照组的10％，并且不引 起死亡及导致缩短寿命的中毒症状或病理损伤。 低剂量组：一般不低于高剂量的10％。应不影响动物的正常 生长、发育和寿命，即不产生任何毒性效应。 中剂量组：介于高、低剂量之间，如有可能按受试物的毒物 动力学性质来确定。 对照组除不给受试物外，其他条件均与试验组相同。
灵敏性指受试物在致突变试验中的阳性比例。 特异性指受试物在致突变试验中的阴性比例。
美国环境保护局(EPA)遗传毒理学计划(GeneTox)及美国国立环境 卫生研究所(NIEHS)国家毒理学规划(NTP)对几个常用致突变试验 灵敏性及特异性的分析结果。
试验
Ames试验 小鼠淋巴瘤细胞基因突变试验
CHO细胞HGPRT基因突变试验 V79细胞基因突变试验
具有引发作用的化学物称为引发剂。引发剂本身有致癌性 ，大多数是致突变物，没有可检测的阈剂量，引发作用是不 可逆的并且是累积性的。但并非所有的引发细胞都将构成肿 瘤，因其中大多数将经历程序性细胞死亡(凋亡)。引发细胞 不具有生长自主性，因此不是肿瘤细胞。
（2）促长阶段：促长阶段是引发细胞增殖成为癌前病变或良 性肿瘤的过程。促长剂单独使用不具致癌性，必须在引发剂后 使用才发挥促长作用.促长剂通常是非致突变物,影响引发细胞 的增殖，导致局部增殖并引起良性局灶性病理损害如乳头瘤、 结节或息肉。这些病损很多会消退，仅少数细胞发生进一步突 变引成恶性肿瘤。
二、化学致癌的机制 尚未彻底阐明，大体可分为遗传机制学说和非遗
传机制学说。
（一）化学致癌的遗传机制学说
该学说认为，化学致癌物进入细胞后作用于遗传 物质，通过引起细胞基因的改变而发挥致癌作用。 有关学说最主要的是多阶段学说和癌基因学说。
1、化学致癌的多阶段学说 （1）引发阶段：化学致癌的第一阶段，是化学致癌物本身或 其活性代谢物作用于DNA，诱发体细胞突变的过程，可能涉及 原癌基因的活化和肿瘤抑制基因的失活。
（5） 免疫抑制剂：主要对病毒诱导的恶性转化起增 强作用。
（6） 固态物质：物理状态是关键性因素，可能涉及 细胞毒性。如塑料、石棉等。
（7）助癌物：本身无致癌性，在致癌物之前或同时 应用助癌物可显著增加癌症的发生。
助癌作用的机制可涉及增加致癌物的吸收、增加 活化的致癌物的比例、耗尽内源性结合反应底物、 抑制DNA修复、促进DNA损伤固定为突变等。
NTP 20／44(45) 66／119(54) 31／44(70)
-
4／18(22) 24／44(55) 9／15(60) 31／44(70) 10／15(67) 6／30(20)
特异性(％) GeneTox
29／47(62)
0／5(0) 1／1(100)
3／3(100) 9／16(60) 2／6(33)
2、化学致癌的癌基因学说 调控细胞增殖和分化的基因发生异常，可导
致细胞持续增殖，不能及时分化和凋亡，形成 肿瘤。与细胞恶性转化有关的基因主要有癌基 因和肿瘤抑制基因。
癌基因：能引起细胞恶性转化及癌变的基因。通常以原癌基 因的形式存在正常动物细胞的基因组中。 原癌基因：最早在1968年Duesberg发现Rous肉瘤病毒致癌是 由于携带能致癌的基因片段，称为病毒癌基因（V－onc）， 后来发现在正常细胞中也存在与病毒癌基因高度相似的DNA 序列，称为原癌基因（C-onc）。正常细胞中的原癌基因表达 并不引起恶性病变，其表达受到严格控制，通常与机体的生 长和发育有关。原癌基因必须经过激活才能导致细胞的恶性 转化。原癌基因是一种显性基因，当其两个等位基因之一发 生突变，即可被激活。
组4，对人类可能是非致癌物。指证据指示对人类和动物 不具有致癌性。
四、环境化学物致癌物的评价 (一)哺乳动物致癌试验
哺乳动物致癌试验是鉴定化学致癌物的标准体 内试验。哺乳动物致癌试验用来确定受试物对试验 动物的致癌性、剂量—反应关系及诱发肿瘤的靶器 官。
1、实验动物 物种和品系：要求用两种实验动物，常规选用大鼠和小鼠， 也可用仓鼠。在选择品系时应选择较敏感、自发肿瘤率低、 生活力强及寿命较长的品系。 性别：应使用同等数量的雌雄两种性别的动物。 年龄：使用刚离乳的动物，以保证有足够长的染毒和发生癌 症的时间，而且幼年动物解毒酶及免疫系统尚未完善，对致 癌作用比较敏感。
组2B，对人类是可能(possible)致癌物，指对人类致癌性证 据有限，对实验动物致癌性证据并不充分；或指对人类致癌 性证据不足，对实验动物致癌性证据充分。
组3，对人类的致癌性尚不能确定。指对人类致癌性证据 不充分，对实验动物致癌性也不充分或有限。或人类致癌 性证据不充分，对实验动物致癌性证据足够，但有强有力 的证据表明动物致癌机制不适用人体。
5、观察指标 （1）一般观察：每天观察受试动物一次，主要观察其外表、 活动、摄食情况等。在实验最初三个月每周称体重一次，以 后每两周称体重一次。经饲料或饮水给以受试物时，应记录 食物消耗量或饮水量，以计算受试物的摄人量。观察时要注 意有无肿瘤出现、肿瘤出现时间及死亡时间。 （2）肿瘤发生情况：记录肉眼可见或可触及肿瘤出现的时间 、部位、大小、外形、发展状况并记录动物死亡时间。 （3）病理检查：动物自然死亡或处死后必须及时进行病理检 查，包括肉眼和组织切片检查。
（3）无机致癌物 放射性元素和重金属。有些可能是亲电子剂，但有
些是通过选择性改变DNA复制保真性，导致DNA的 改变，如金属镍、铬。
2. 非遗传毒性致癌物(non-genotoxic carcinogens) 非遗传毒性致癌物不与DNA反应，可能间接地影
响DNA并改变基因组导致细胞癌变，或者通过促长 作用、增强作用导致癌为遗传毒性致癌物和非遗传毒性致癌物两类。 1、遗传毒性致癌物 （1)直接致癌物：不需代谢活化直接与亲核分子共价结合形 成加合物。这类化合物为亲电子剂，大多数为合成有机物。
（2）前致癌物： 多数有机致癌物需代谢活化才具有致癌活性，称为间接致癌
物。间接致癌物的原型称为前致癌物。前致癌物经代谢活化形 成的之间代谢产物——近致癌物（半致癌物），有一定致癌作 用但必须再一次激活——终致癌物（前致癌物经代谢活动形成 的具有致癌作用的代谢物和不需代谢活化的致癌物）。
致癌试验阳性的判定标准为WHO提出的标准。WHO(1969) 提出机体可以对致癌物有下列一种或多种反应：
(1) 对于对照组也出现的一种或数种肿瘤，试验组肿瘤发生 率增加；
(2) 试验组发生对照组没有的肿瘤类型； (3) 试验组肿瘤发生早于对照组； (4) 与对照组比较，试验组每个动物的平均肿瘤数增加。
肿瘤抑制基因：即抗癌基因。抗癌基因可能是编码抑制生殖、 促进分化的基因，也可能是某些基因的负控制调节基因，并 是维持基因组织定性的某些基因。
抗癌基因可抑制肿瘤细胞的肿瘤性状的表达，只有当自己 不能表达或其基因产物去活化才容许肿瘤性状的表达。染色 体缺失而诱发肿瘤的基因都可能是肿瘤抑制基因。属隐形基 因，必须一对等位基因丢失或突变后失活，才能对细胞的恶 性转化起作用。
（1）促长剂：本身无致癌性，在给以遗传毒性致癌 物之后再给以促长剂可增强遗传毒性致癌物的致癌 作用，也可促进“自发性”转化细胞发展成癌。
（2）激素调控剂：主要改变内分泌系统平衡及细胞 正常分化，常起促长剂作用。
（3）细胞毒剂：可能引起细胞死亡，导致细胞增殖 活跃及癌发展。
（4）过氧化物酶体增殖剂：过氧化物酶体增殖可导 致细胞内氧自由基过量生成。
（二）化学致癌的非遗传机制学说 一部分致癌物用目前的致突变试验不能检出其致突变性。
这些非遗传毒性致癌物促进细胞分裂增殖的机制多种多样：
具有细胞毒性的致癌剂可引起细胞变性坏死，细胞释放出的 物质具有刺激细胞分裂增殖的作用。
激素失调导致肿瘤发生，与通过细胞内相应的受体刺激细 胞分裂有关
免疫抑制剂可降低机体对癌前细胞的监视和清除能力
癌细胞的生物学特点： 1、持续性增殖，分化不良，体外培养无接触性抑制。永生 性。 2、浸润性生长：可侵入其他组织，并发生转移 3、过分旺盛地合成核酸和氨基酸 4、强烈的有氧酵解：在供氧充分时，仍能将葡萄糖转化为 乳酸，大量的乳酸使pH下降，影响细胞酶活力，破坏内稳 态的维持。 5、可将上述特征遗传给子代细胞
使细胞由促长阶段进入进展阶段的化学物称为进展剂 (progressor)。进展剂可引起染色体畸变，但不一定具有引发 活性。
引发、促长及进展都可自发发生。有些化学致癌物可同时具 有引发、促长及进展的作用，称为完全致癌物。
化学致癌是长期的、复杂的多阶段过程，至少涉及引发、 促长和进展三个阶段。 在引发阶段主要是细胞原癌基因和肿瘤抑制基因的突变 在促长阶段主要是遗传外机制 在进展阶段主要是核型不稳定性。 正常细胞经过遗传学改变的积累才能转变为癌细胞。
6、结果分析 主要分析指标有肿瘤发生率、肿瘤潜伏期及肿瘤多发性。 肿瘤发生率(％)=(实验结束时患肿瘤动物总数／有效动物总 数)×100％ 式中，有效动物总数指最早发现肿瘤时存活动物总数。 肿瘤潜伏期即从摄人受试物起到发现肿瘤的时间，因为内脏 肿瘤不易觉察，通常将肿瘤引起该动物死亡的时间定为发生 肿瘤的时间。 肿瘤多发性指一个动物出现多个器官的肿瘤或一个器官出现 多个肿瘤。
果蝇伴性隐性致死突变试验 体外染色体畸变试验 体内染色体畸变试验 体外SCE试验 体内SCE试验 肝细胞UDS试验
灵敏性(％) GeneTox 175／ 223(78)
45／54(87) 40／4l(98)
84／104(81) 77／106(73)
40/54(74) 8／9(89) 100／ 101(99) 2l／21(100) 19／22(86)
特点： 历时较长，早期有可逆性，晚期为不可逆的
对生理因素调节的敏感性，衰老、饮食和激素可 影响促长作用。
（3）进展阶段：进展阶段是从引发细胞群(癌前病变、良性 肿瘤)转变成恶性肿瘤的过程。在进展期肿瘤获得生长加快、 侵袭、转移和抗药性等特征。这些特征是由于在进展阶段的 核型不稳定性。肿瘤的染色体发生断裂、断片易位和非整倍 体。
（二）按致癌作用证据分类
组1，对人类是致癌物。对人类致癌性证据充分者属于本组。 对人的致癌性证据尚不充分，但对实验动物的致癌证据足够， 并且具有可通过相关致癌机制对人体发挥作用的强有力证据， 可归为此类。
组2，对人类是很可能或可能致癌物。又分为两组，即组2A 和组2B。
组2A，对人类很可能(probably)是致癌物。指对人类致癌性 证据有限，对实验动物致癌性证据充分。
在进行试验的两个物种两种性别动物中，有一种结果为阳 性，即认为该受试物有致癌性。两个物种两种性别动物试验结 果均为阴性时，方能认为未观察到致癌作用。
（二）致突变试验用于致癌物筛选
预测致癌性的理想致突变试验应能灵敏地预测 出受试物的致癌性，也能特异地预测出受试物的 非致癌性，即要有高的灵敏性和特异性。