云南白药对LPS诱导小鼠头颅骨炎症模型NF-κB和NFATc1的影响

LIU Jun，HE Hong-bing，REN Xiao-bin （Dept. of Periodontics，Stomatology Hospital of Kunming Medical University，Kunming Y unnan 650500，
China）
［Abstract］ Objective To establish a model of LPS-induced skull inflammation in mice and evaluate the effects of Yunnan Baiyao on the expression of NF-κB and NFATc1．Methods A total of 90 healthy male Kunming mice were randomly divided into three groups: normal group （30 rats）， model group （30 rats）， and Yunnan Baiyao group （30 rats） ．The model group and Yunnan Baiyao group were given lipopolysaccharide （LPS） to induce skull inflammation model. Yunnan Baiyao group was given Yunnan Baiyao on the day of modeling， and 10 rats were killed in 3 groups，5 days and 8 days.The mouse skull was collected and TRAP staining was used to detect the number of osteoclasts and Western Blot was used to detect NF-κB and NFATc1．Results TRAP staining results showed that Yunnan Baiyao significantly inhibited the formation of osteoclasts.Western-bolt assay showed that the expression levels of NF-κB and NFATc1 in the model group were higher than those in the normal group （ < 0.05） and Yunnan Baiyao group （ < 0.05）， and the expression level of NF-κB in Yunnan Baiyao group only on the 8th day were．Higher than the normal group （ < 0.05） ．Conclusion Yunnan Baiyao can significantly inhibit the formation of osteoclasts induced by LPS and the expression of NF-kB and NFATc1 in osteoclast formation.
［关键词］ 云南白药；炎症模型；NF-κB；NFATc1 ［中图分类号］ R961 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 2095－610X （2019） 07－0007－08
Effect of Yunnan Baiyao on NF-κB and NFATc1 in LPS-Induced Cerebral Inflammation Micቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ Model
昆明医科大学学报 2019，40（7）：7耀 14 Journal of Kunming Medical University
云南白药对 LPS 诱导小鼠头颅骨炎症模型 NF-κB 和 NFATc1 的影响
CN 53 - 1221 R
刘 俊，和红兵，任晓斌 （昆明医科大学附属口腔医院牙周病科，云南 昆明 650500）
［Key words］ Yunnan baiyao；Inflammation model；NF-κB；NFATc1
［收稿日期］ 2018－09－16 收稿 ［基金项目］ 国家自然科学基金资助项目 （81660184） ［作者简介］ 刘俊 （1991～），女，河北景县人，在读硕士研究生，主要从事牙周病临床工作。 ［通信作者］ 和红兵，E-Mail:1320058043@qq.com
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昆明医科大学学报
第 40 卷
牙周炎 （Periodontitis） 作为一种多因素的疾 病，细菌及其代谢产物是牙周病发病的始动因子， 包 括 细 菌 的 抗 原 成 分、 各 种 酶 、 毒 素 （脂 多 糖 （lipopolysaccharide，LPS） 及许多代谢产物，它们 可直接刺激和破坏牙周组织，或引起牙周组织局部 的免疫反应，造成软硬组织的损伤，最终由于牙槽 骨的破坏吸收导致牙齿的松动和脱落。破骨细胞 （osteoclast，OC） 在这一病理过程中起关键作用， 研究表明牙周炎发生发展时 OC 活性明显增加[1]。 活化 T 细胞核因子 c1 （nuclear factor of activated T cells cytoplasmic 1，NFATc1） 是最初在 T 细胞中鉴 定的转录因子，它存在于成骨细胞和破骨细胞中， 其对破骨细胞分化起关键调解作用。一些研究证实 了核因子 -κB （nuclear factor kappa B，NF-κB） 活化参与促炎因子如 TNF-α，IL-1β 和 IL-6 的 表达，核因子 -κB 受体活化因子配体 （receptor activator of nuclear factor-κB ligand， RANKL） /RANK （ receptor activator of nuclear factor-κB， RANK） /NF-κB 通路刺激的早期破骨细胞生成信 号传导，激活 NFATc1，促进破骨细胞分化[2]。课 题组此前的 研究 显示 云 南白 药 可以 下调 RANKL mRNA 在小鼠颅骨炎症模型中的表达，抑制破骨细 胞 的 形 成 ， 从 而 抑 制 炎 症 骨 组 织 的 破 坏 和 吸 收 [3]。 但云南白药作为一种复方制剂，对于炎症性骨破坏 调控机制尚未不清楚，本研究拟在前期研究基础 上，通过建立小鼠头颅骨炎症模型，进一步了解云 南白药对破骨细胞分化过程中 NF-κB 和 NFATc1 表达的影响，从而探讨云南白药抑制炎性骨破坏可 能的机制。
［摘要］ 目的 建立 LPS 诱导小鼠头颅骨炎症模型，评价云南白药对 NF-κB 和 NFATc1 表达的影响作用。 方法 选用健康雄性昆明小鼠 90 只，随机分成 3 组：正常组 （30 只）、模型组 （30 只）、云南白药组 （30 只）。 模型组和云南白药组脂多糖 （LPS） 诱导头颅骨炎症模型，云南白药组在建模的当天开始给予云南白药灌胃，于 3 d、5 d、8 d 各分组处死 10 只。收集小鼠头颅骨行 TRAP 染色检测破骨细胞的数量以及 Western Blot 检测 NF-κB 和 NFATc1。结果 TRAP 染色结果显示云南白药能明显抑制破骨细胞的形成。Western-bolt 检测结果显示在各个 时间点模型组 NF-κB 和 NFATc1 表达水平均高于正常组 （ < 0.05） 和云南白药组 （ < 0.05），仅在第 8 天云南 白药组 NF-κB 表达水平高于正常组 （ < 0.05）。结论 云南白药可以明显抑制 LPS 诱导的炎症中破骨细胞形成， 以及破骨细胞的形成相关因子 NF-κB、和 NFATc1 的表达。