硫酸阿托品及其制剂的分析

80°C水浴 强烈振摇20min
放冷 冰浴 定容 5min
取续滤液
供试品溶液

对照品
对照品溶液 20μl
供试品溶液 20μl

精密称定
对照品溶液
0.2mg/ml
外标法，峰面积计算
色谱条件
色谱柱：
C18柱
检测波长： 225 nm
药L/O物/G/分O 析
硫酸阿托品及其制剂的分析
阿托品（Atropine）
• 亦称消旋莨菪碱 • 从莨菪、颠茄和曼陀罗等植物中提取 • 天然生物碱
天仙子
洋金花

阿托品（Atropine）
• 莨菪烷类药物典型代表
• 最常用的M胆碱受体阻断剂
• 临床用途广泛
缓解内脏绞痛，解除痉挛
流动相：
0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH 5.0） （含0.0025mol/L庚烷磺酸钠 -乙腈(84:16))
离子对试剂，改该方法属于反相离子对色谱法。阿托品 因五元脂环上的叔胺氮原子具有碱性，在酸性的流动相 中带正电荷，反相液相色谱条件下保留较弱。庚烷磺酸 钠可离解为庚烷磺酸基而带负电荷，两者结合为电中性 的离子对化合物，可以增大待测组分在非极性固定相上 的分配与溶解度，改善其色谱保留与分离行为
Vitali鉴别反应
ü 发烟硝酸 醇制KOH
ü 无色/白色—黄色—深紫色
加醇制KOH少许，即生成 深紫色产物
酯键水解生成莨菪酸，与发烟硝酸 共热，得到黄色产物，放冷
莨菪酸

Vitali鉴别反应的原理
COOH
CHCH2OH O2N
3HNO3
COOH
CHCH2OH NO2 O2N KOH C2H5OH
ü 目的：消除溶剂或其他可能的 因素带来的误差
记录滴定液体积
高氯酸滴定液 (0.l mol/L) 滴定至溶液显 纯蓝色
空白试验

硫酸阿托品制剂
有多种剂型：片剂、注射液、眼用制剂（软膏，凝胶）

含量测定-硫酸阿托品片
ü 药理活性较强 ü 临床使用剂量较小
药物名称
含量测定方法
方法说明
硫酸阿托品原料药 硫酸阿托品片/注射液
硫酸阿托品眼膏
非水溶液滴定法 酸性染料比色法
HPLC
容量分析法，准确度高 样品用量少、灵敏度高 专属性好、灵敏度高
含量测定选择方法的侧重点不同： ü 原料药的含量测定侧重方法的准确度 ü 制剂的含量测定侧重方法的专属性和灵敏度，以便尽
COOH
CCH2OH
NO2 O2N KOH
HCOOH CCH2OH
NO2
莨菪酸
NO2
黄色
N
HO
O
N
KO
O
共轭增多，颜色变深
托烷生物碱类的鉴别

含量测定-硫酸阿托品原料药
非水溶液滴定法 —非水碱量法
BH+A- + HClO4
有机碱的盐类 强酸
BH+ClO-4 + HA
加水振摇 使溶解
50mL
对照品约25mg
精密称定
精密量取 5ml
25mL
100mL
对照品 溶液
供试品溶液
2ml
CHCl3
溴甲酚绿
10ml
2.0ml
对照品溶液 2ml
CHCl3
10ml
溴甲酚绿
2.0ml
420nm波长

结果计算
• 硫酸阿托品片中（C17H23NO3）2·H2SO4·H2O的标示量百分含量： 标示量百分含量 Ax AS CS 50 1.027 W 100% m 标示量
0.3 mg
专属、灵敏
B + H+
碱性 药物
H In
酸性 染料
在适当pH的水溶液中，
B H+ (BH+·In-)水相
H+ + In-
(BH+·In-)有机相

离子对
阿托品
染料空白

溴甲酚绿-阿托品离子对紫外-可见分光光谱图

阿托品
总结
Ø 药物的理化性质是分析方法建立的基础 Ø 阿托品具有水解性、碱性和紫外吸收特性
分析方法
性质
Vitali鉴别反应
水解性
非水滴定法
碱性
酸性染料比色法
碱性
HPLC
紫外吸收特性

总结
Ø 阿托品原料药与制剂的含量测定方法不同
可能排除杂质及附加剂的干扰，有效测定制剂的含量 Ø 制剂的含量测定需结合过滤、提取等前处理方法排除干扰 Ø 制剂组成不同，样品前处理条件有所差异

眼科应用，扩张瞳孔
麻醉前给药，预防吸入性肺炎
第三号抢救药

硫酸阿托品结构及理化性质
1. 水解性
*
ü 手性碳 •
•
*
ü 酯键
硫酸阿托品 (Atropine Sulfate)

莨菪醇
莨菪酸
2. 旋光性
Ø 含有不对称碳原子 Ø 但为外消旋体，无旋光性
酸性染料比色法影响因素
酸性染料的选择及 其浓度
水相最佳pH值 的选择
有机溶剂的选择
酸性染料中 有色杂质

有机相中水分的影响
硫酸阿托品片 （ChP2015）
取供试品20片
精密称定
研细
精密称取适量 （约相当于硫酸阿托品2.5mg）
取续滤液
供试品溶液

• Ax、AS分别为供试品和对照品溶液的吸光度 • CS为对照品溶液的浓度（mg/ml） • m为样品质量（g） • W为平均片重（g） • 1.027为（C17H23NO3）2·H2SO4·H2O与（C17H23NO3）2·H2SO4的质量换算系数 • 50为供试品溶液的稀释倍数

硫酸阿托品注射液 （ChP2015）
Ø 酸性染料比色法 Ø 只在供试品溶液配制略有差异 Ø 直接稀释，方法简单
精密量取 约相当于2.5mg
50mL
供试品溶液

硫酸阿托品眼膏 （ChP2015）
—专属性强的HPLC
取本品适量 约相当于10mg
加水适量
精密称定
50mL
被置换出的弱酸
(BH+)2SO42- + HClO4
硫酸阿托品
BH+ClO-4 + (BH+)HSO-4
1：2

1：1
•
•
硫酸阿托品
硫酸阿托品（ChP2015）
取供试品约0.5g 精密称定
1~2
加冰醋酸与醋酐 各10ml
加 结 晶 紫 指 示 液
滴
ü 不加供试品或以等量溶剂替代 供试液的情况下，同法操作
片剂注射液眼用制剂软膏凝胶wwwthemegallerycom专属灵敏含量测定硫酸阿托品片临床使用剂量较小03mgbh碱性药物酸性染料bh有机相在适当ph的水溶液中wwwthemegallerycom溴甲酚绿阿托品离子对紫外可见分光光谱图离子对染料空白阿托品wwwthemegallerycom酸性染料比色法影响因素有机溶剂的选择有机相中水分的影响水相最佳ph值的选择酸性染料的选择及其浓度酸性染料中有色杂质wwwthemegallerycom硫酸阿托品片chp201550ml精密称定精密称取适量约相当于硫酸阿托品25mg供试品溶液加水振摇使溶解取续滤液wwwthemegallerycom25ml精密量取5ml精密称定对照品约25mg100ml对照品溶液420nm波长供试品溶液2ml对照品溶液2mlchcl10ml溴甲酚绿20mlchcl10ml溴甲酚绿20mlwwwthemegallerycom硫酸阿托品片中c17o的标示量百分含量
硫酸阿托品结构及理化性质
ü 叔胺氮原子
•
•
ü 硫酸盐
3. 碱性
Ø 碱性较强，pKb1为4.35 Ø 可与硫酸成盐 Ø 硫酸盐在(Atropine Sulfate)

4.紫外吸收特征
鉴别试验 ——对药物真伪的辨识
化学鉴别：简便、快速、现象明显，是药物鉴别的基本方法