病毒感染的实验诊断

病毒感染的实验诊断
病毒感染的实验诊断（一）
● 考点
病毒的生物学性状病毒的实验室检查方法常见病毒的感染 [
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【内容讲解】
第一节概述
一类非细胞型微生物，个体极小，可通过细菌滤器，需用电子显微镜观察。

仅含一种核酸作为遗传物质，外被蛋白质衣壳或还有包膜。

病毒只能在活细胞内寄生，以复制的方式进行增殖。

在临床微生物感染中，近75%的传染病是由病毒引起的。

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一、病毒的基本性状（一）形态结构 1.大小和形状：
大小：测量单位用纳米表示，一般在20-300nm之间。

形态大致可分为：球形或近似球形、杆状、弹形、砖形、蝌蚪形等。

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2.结构
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（二）病毒的增殖病毒必须依赖宿主细胞，
以特殊的自我复制方式进行增殖。

病毒的复制周期：
吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装与成熟、释放6个阶段。

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异常增殖：
顿挫感染：病毒进入细胞后的环境不利于它的复制，不能合成本身的成分或不能组装
和释放有感染性的病毒颗粒。

缺陷病毒：由于病毒基因组不完整或基因位点改变而不
能进行正常增殖的病毒。

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干扰现象：当两种不同的病毒或两株性质不同的同种病毒，同时或先后感染同一细胞
或机体时，可发生一种病毒抑制另一种
（三）噬菌体
以细菌、真菌等为宿主，能引起细菌等裂解的病毒。

噬菌体特异性识别细菌表面受体，可用于进行细菌的鉴定与分型。

噬菌体感染细
菌后产生两种后果：溶菌周期和溶源性周期。

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（四）非寻常病毒
比病毒更小更简单的致病因子，又称为亚病毒因子，包括类病毒、卫星病毒和朊粒等。

朊粒致中枢神经系统退化性病变，引起牛海绵状脑病（疯牛病）。

克雅病（CJD）和Kuru病被认为与朊粒感染有关。

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讲义编号NODE70103300270100000108：针对本讲义提问]
朊粒个体微小，不含核酸，其主要成分是一种蛋白酶抗性蛋白，对各种理化作用的抵
抗力强，具有传染性，是引起传染性海
二、病毒的分类与命名
科、属、种3级或科、亚科、属、种4级。

DNA病毒、RNA病毒、DNA和RNA逆转录病毒三大类。

按传播途径可分为呼吸道病毒、胃肠炎病毒、经性传播感染的病毒等。

按感染部
位与症状特征可分为肝炎病毒、出血性热病毒、疱疹病毒等。

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第二节病毒感染的实验诊断
病毒学实验室诊断有三个方面：①直接检测和分离鉴定；②检测病毒蛋白抗原
成分和核酸；③检测抗体。

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讲义编号NODE70103300270100000110：针对本讲义提问]
一、标本采集、运送及处理（一）标本采集
1.采样时机：应在病人急性期或发病初期采集标本。

2.标本种类：
根据不同病毒感染采集不同标本，如鼻咽分泌物、脑脊液、血液、粪便等。

（二）标本的运送及保存
快速传递，立即处理和接种。

采集和运送过程注意冷藏。

如不能立即处理和接种，可在4℃保存数小时，长时间保存需置-70℃。

[讲义编号NODE70103300270100000111：
针对本讲义提问] （三）标本处理凝固的血液需先离心，得到的血清可以用于病毒
分离。

肝素抗凝全血、脑脊液、胸腔液、水痘液以及尿液均可直接用于病毒分离培养。

有些标本如粪便等,常需粗提、提纯和浓缩等复杂处理过程。

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NODE70103300270100000112：针对本讲义提问] 二、分离培养与鉴定（一）分离培
养 1.组织培养包括器官培养、组织块培养和细胞培养。

目前常用的方法是细胞培养；常用细胞：①原代和次代细胞培养；②二倍体细胞株；③传代细胞系。

[讲义
编号NODE70103300270100000113：针对本讲义提问] 2.鸡胚接种一般选用9-12日龄鸡胚。

鸡胚中的部位卵黄囊羊膜腔尿囊腔绒毛尿囊膜脑内 3.动物接种实验室
常用新生小鼠或乳鼠进行病毒分离。

[讲义编号NODE70103300270100000114：针对本讲义提问] 适宜病毒嗜神经病毒，如乙型脑炎病毒流感病毒流感病毒、腮腺炎病毒，还可
制备疫苗和大量病毒抗原天花病毒、单纯疱疹病毒狂犬病病毒（二）病毒鉴定 1.
初步鉴定根据临床症状、流行病学特点、标本来源、易感动物范围、细胞病变特征及生
物学特征、理化性质可初步判断分子生物学方法也在病毒鉴定方面得到应用。

[讲义编号NODE70103300270100000115：针对本讲义提问] 2.最终鉴定在初步鉴定的基础上，选
择适当的血清学方法对病毒分离株进行最后鉴定，常用中和试验、补体结合试验、血初
步鉴定（举例）：细胞病变效应（CPE）：细胞形态变化细胞圆缩，分散，不聚集，
全部细胞被破坏细胞肿大，颗粒增多，病变细胞聚集呈葡萄状细胞融合成多核细胞空
泡状，多核巨细胞脂溶剂敏感实验：有包膜（+），无包膜（-）；耐酸实验：肠
道病毒（R），鼻病毒（S）。

[讲义编号NODE70103300270100000116：针对本讲义提问] 病毒肠道病毒腺病毒副粘病毒，麻疹病毒三、病毒感染的诊断（一）显微镜检
查 1.用光学显微镜直接检查病毒包涵体。

可作为病毒感染的辅助诊断，不是特异性试验。

核内包涵体：常见DNA病毒。

如巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒
和腺病毒等。

胞浆内包涵体：常见RNA病毒。

如呼吸道合胞病毒、狂犬病病毒和痘类
病毒等。

胞质内和胞核内包涵体：麻疹病毒等。

2.用电子显微镜直接检查病毒颗粒。

数小时即可从病毒形态上作出明确的鉴别诊断。

应用免疫电镜灵敏度更高。

[讲义编
号NODE70103300270100000117：针对本讲义提问] （二）病毒抗原检查利用特异性
免疫血清检测标本中的病毒抗原。

常用方法有：免疫荧光技术、酶免疫技术、放射免
疫法、反相间接血凝和对流免疫电泳等方法。

对于一些血清型别不多或在一般细胞培
养系统中尚不能成功增殖的病毒，直接检测病毒抗原是快速而实用的方法。

[讲义编号NODE70103300270100000118：针对本讲义提问] （三）病毒抗体检查利用特异性抗
原检测病毒感染者血清中的IgM和IgG抗体。

常用的方法有中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验及免疫扩散等，还可以利用放射免疫法及酶联免疫吸附法。

IgM抗体出现在病毒感染的早期，所以标本采集时间对检测结果的影响很大。

（四）病毒核酸检测
利用核酸杂交和PCR技术检测病毒特异基因片段。

检出病毒核酸并不等于检出具有传
染性的病毒颗粒。

[讲义编号NODE70103300270100000119：针对本讲义提问] 病毒感染的实验诊断（二） IgG抗体检测需采集感染急性期与恢复期双份血清，恢复期IgG效价必须比急性期增高4倍或4倍以上时，才有诊断意义。

感谢您的阅读，祝您生活愉快。