探析二维液相色谱技术在药物分析中的应用

探析二维液相色谱技术在药物分析中的
应用
【摘要】二维液相色谱联用是一项新型分析技术，该技术的特点为峰容
量大，能够对复杂性样品的基质效应和残留现象进行有效降低，可以实现样品的
自动化分析，该技术在复杂样品的分离分析中发挥着十分关键性的作用。

因此文
章对二维液相色谱原理进行了详细的分析，着重对该技术在生物样品药物分析中
的应用展开了详细阐述。

【关键词】二维液相色谱技术；药物分析；应用
在生物样品中含有各种毒物、药物和内源性物质，这些物质的定量和定性剖
析在生命科学和药物研究中发挥着十分重要的作用。

但是生物样品具有多样性和
复杂性，又具有较多的基质，另外，当生物中的物质和有关内源性物质进行比较时，其浓度方面并不具备优势，因此在对一些生物进行分析时，需要注意所使用
的方法一定要注意其灵敏度以及有关特异性和重现性都能够达到标准。

二维液相
色谱具有较大的峰容量，能够将复杂样品中的基质效应和残留现象进行有效降低，同时还可以实现对样品的自动化分析，因此二维液相色谱技术目前已经成为了生
物样品分离中的重要工具。

药物代谢动力学探究和其他药物毒物生物进行剖析时
候非常重视对筛选性强、敏锐性强的液相色谱、质谱结合技术等技术进行应用的。

总之，二维液相色谱的出现有效增强了分离效率，成为了这类样品分离测绘中十
分有效的工具。

2二维色谱原理
二维液相色谱在近些年得到了大幅发展，在技术手段和运用手法上都取得了
较大的进步，另外增加一些简单的配置在原有液相色谱上，例如在原技术上增加
了泵和六通阀，就此在线二维液相色谱形成。

色谱仪器厂家纷纷开始对整合式的
在线二维液相色谱系统进行开发。

简单来讲可以将二维液相色谱看作是不同的两
个色谱柱分别形成了各自的体系。

在对样品进行分析时会将样品和第一列进行分离，再到达切换阀的接口，切割步骤完成后再将用品进行转换。

根据切割单元来看可以将二维色具体分化为两种分别是中心切割和全二维形式，从另一个角度而言也可以将其看做是离线和在线两种类型。

一般被使用探究过程中的二维液相色谱法会被应用在在线中，具体来讲就是一维洗脱形成的物质会通过直接或者是间接的方式进到二维色谱柱中并被研究。

当采用的模式为一维色谱模式时，如果相应的峰数量超过了容量的37%时会对其分辨率产生较大的影响。

但是如果是二维色谱，其分辨率可以由一维色谱和二维色谱的分离峰的乘积进行表示，可以说有效提高了分离效率，因此该方法经常会被使用在复杂基质样和多组分样分品中。

该技术所具有的特点为能够对复杂的物质进行简化，该技术可以指定对想要进行识别的物质进行识别，而其余的物质则可以进行滤出，由此可见，正是因为该技术具有以上特点因此在进行应用时才会体现出高效率，符合了系统自动化控制生产特点，支持大批量特点，是值得推广的。

3在线接口和溶剂置换技术
一般情况下，这种溶剂系统都具有差异性，导致相容度较低，当检测物基本都处于分离状态后，会使用接口装置将检测物引到二维中，或者是采用非常规性技术进一步对样品进行处理。

该技术能够对类型的类别进行自动识别，根据具体类型进分析和取样，自动排除不在考虑范围中的溶剂，确保了结果的真实性。

在在线接口和溶剂置换技术中包含了在线接口技术、溶剂置换技术以及引入调节器等。

4D —L C 的优缺点及选择
2D—LC的优点很多：第一，集样品的净化与浓缩及分离测定于一体，能起到样品预处理的作用，分析柱受到的污染较少，而且大大减少了溶剂用量，避免大量样品的手工前处理工作，可以直接进样分析，加快了分析速度；第二，进样量大、灵敏度高，适合做大量样品的痕量分析；第三，联用降低了样品损失和遭受污染的风险，消除了水蒸气及光照的负面影响，提高方法的可靠性和重现性；第四，能从复杂的多种组分中排除干扰物质，有选择地针对感兴趣组分进行分析；
第五，容易实现自动化。

但是，2 D—LC联用，系统的复杂性增加，转化阀、环
线及检测器造成的死体积增加了峰展宽的风险性，而且方法的建立比较烦琐复杂。

比如要对LC进行选择，还要考虑溶剂是否匹配等问题。

所以尽管联用在实际分
析中比较简便而且节省时间，但是方法的建立过程比较耗时。

因此，假如单一色
谱能够解决的问题，没有必要选择2D—LC处理，除非样品复杂、数量多，或者
应用传统方法无法解决。

如土壤中杀虫剂残留分析，要求分析方法能较好的除去
杂质干扰，这时2D—LC就是一个很好的选择。

此外，对于某些痕量分析，或者
需要相对高的灵敏度和选择性的分析工作，也可以考虑2D—LC作为分析手段。

5二维液相色谱在药物分析中的应用
5.1新药发现和临床前药代动力学研究
在新药研发的最开始需要对检测药效，另外还要对药物的安全性进行检测，
当药物没有任何问题时则可以将该药物投入到下一阶段。

这样一来新药的分析速
度将会得到提升。

在线固相萃取—液质联用技术对生物样品进行自动化分析后可
以有效提高新药设计以及大量化合物成药性筛选的评价效率，临床前药代动力学
对实验中动物的药物评价、药物分布、吸收和代谢进行评价时，关系到了非常多
的物种类型，以及不同分组、不同剂量产生的血浆、组织样品等。

在线固相萃能
够有效提高样品处理效率，减少来自于生物样品带来的干扰，同时确保了灵敏度
和重现性，因此截至目前为止在线固相萃取以及成为了药代动力学研究中高通量
样品分析中非常重要的技术。

5.2药物代谢产物和代谢酶研究
代谢产物的定性和定量分析是药代动力学研究中具有挑战性的工作。

为了检
测到血、尿等杂基质中的微量未知代谢产物，有效去除内源性杂质，降低背景干
扰就尤为重要。

采用双SPE柱的串联模式，研究了维拉帕米的代谢产物。

先利用RAM柱清除样品中蛋白质等大分子基质，再用MIP柱去除小分子杂质后，样品进
入分析柱中经LC-MS进行维拉帕米及其代谢产物分离鉴定。

单RAM柱和RAM-MIP
柱串联的比较结果显示，双SPE柱串联洗脱模式能够显著降低背景杂质干扰，更
有利于代谢产物的鉴定。

5.3人体血药浓度监测
良好的治疗手段、血液药物浓度检测需要有简单、重现性好、速度快的方法，这并不复杂的方法在在线固相萃取技术中有较多的使用的。

例如，用在线固相萃
取技术实现茚达特罗在SPE柱上浓缩富集，应用液质联用仪分析检测，灵敏度达
到10ng/L，与离线SPE柱前处理比较，在线方法更快捷灵敏，可用于大批量临床
样品的分析。

所以，针对临床药品监测里的大范围的血液甚至尿样的定量探究，
二维色谱操作有助于减少样品前处理，提升探究的自动化程度。

5.4违禁药物及毒物监测
对于体内滥用药物和毒物中毒的分析监测，同样要求能够对样品进行快速检验，其中快速灵敏的在线固相萃取技术已得到广泛应用。

6结语
综上所述，现阶段2D一LC联用在复杂样品的分析工作中展现出了良好的分
析效果，被十分广泛的应用在复杂样品的分析中。

该分析法和传统分析方法相比
较而言具有更高的灵敏度和重现性，在未来具有良好的发展前景，是一项值得广
泛推广的技术。

参考文献
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