益气养阴方对动脉粥样硬化大鼠免疫炎症因子hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1影响的实验研究

益气养阴方对动脉粥样硬化大鼠免疫炎症因子hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1影响的实验研究
谢心;吴坚;竺春玲;邵筱宏;丁亚琴
【摘要】目的：通过观察益气养阴方对动脉粥样硬化大鼠治疗前后免疫炎症因子
之超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血管内皮细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞
间黏附分子-1(sICAM-1)的变化水平，来观察益气养阴法的疗效。

方法：采用随机对照方法，将40只SD大鼠随机分为4组：正常对照组、模型组、中药组和西药组。

正常对照组予基础饲料喂养，其余各组动物采用VitD3+高脂饲料喂养，中药组给予益气养阴方，西药组给予普伐他汀钠。

给药4周后腹主动脉取血，留作标本，检测hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1水平。

结果：中药组大鼠血清hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1明显低于模型组， sVCAM和hsCRP明显低于西药组。

结论：益气养阴方对动脉粥样硬化大鼠免疫炎症因子hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1有明显改善作用，为对动脉粥样硬化患者干预治疗提供了一个研究方向。

【期刊名称】《江苏中医药》
【年(卷),期】2013(000)003
【总页数】2页(P73-74)
【关键词】动脉粥样硬化;益气养阴方;免疫炎症因子;实验研究
【作者】谢心;吴坚;竺春玲;邵筱宏;丁亚琴
【作者单位】上海市中西医结合医院，上海200082;上海市中西医结合医院，上海200082;上海市中西医结合医院，上海200082;上海市中西医结合医院，上海200082;上海市中西医结合医院，上海200082
【正文语种】中文
【中图分类】R543.120.5
动脉粥样硬化是目前危害人类健康的主要疾病，具有很高的致死率和致残率，其发病率呈逐年上升趋势。

许多学者认为，动脉粥样硬化的发生与低水平慢性炎症状态密切相关[1-2]。

目前，与动脉硬化发病关系最密切、研究最多的炎症因子是超敏C反应蛋白（hs-CRP）、可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）和血管内皮细胞黏附分子-1（sVCAM-1）。

本研究通过观察益气养阴方对动脉粥样硬化大鼠免疫炎症因子hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1的影响，挖掘干预动脉粥样硬化免疫损伤的有效中药复方，为中医药防治动脉粥样硬化提供一个研究思路。

1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物中国科学院上海斯莱克实验动物公司提供的SD雄性大鼠46只，4周龄，体重（200±10）g，清洁级，许可证号SCXK（沪）2003-0003。

饲养地点：上海中医药大学动物实验中心。

1.1.2 实验药物益气养阴方（黄芪15g、党参20g、麦冬15g、五味子6g、枸杞子15g、桑寄生15g）由上海中医药大学中药制剂室制作，配成3g生药/mL溶液备用。

普伐他汀钠，20mg/片，由上海三共制药有限公司生产。

1.2 实验方法
1.2.1动物分组大鼠适应性饲养后，根据体重随机分组编号。

将46只SD大鼠随
机分成4组：正常对照组10只，模型组12只，中药组12只，西药组12只。

1.2.2造模方法采用VitD3+高脂饲料喂养：将150g维生素D3（VitD3，每克含VitD31×105IU）溶解于375mL蒸馏水中，配制成0.4g/mL，即4×104IU/mL
的溶液。

高脂饲料85kg，配方：80.3%大鼠标准饲料、2%胆固醇、2%鱼粉、0.5%胆酸钠、
10%猪油、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白砂糖（中国科学院上海斯莱克实验动物有限责任公司加工）。

按7×105IU/kg的总剂量灌胃给予VitD3，分3d给完，之后每天喂高脂饲料15g，喂养8周。

1.2.3 动物饲养与给药正常对照组只给予基础饲料；其余各组动物以VitD3灌胃
3d，并每天喂高脂饲料15g，喂养8周。

8周后，除正常对照组外，其余各组随
机取出2只杀死，解剖颈动脉、胸主动脉确定造模成功与否。

在确定造模成功的
前提下，以上各组在原有饲料喂养下，正常对照组、模型组给予同等剂量的生理盐水灌胃，中药组给予益气养阴方，西药组给予普伐他汀钠。

药物剂量参照药典，按动物与成人的等效剂量换算。

继续喂养4周。

所有动物自由饮水。

1.2.4 中药血清的制备喂养满4周结束时将大鼠麻醉，腹主动脉取血，放入15mL
离心管中，留作标本，静置1h后。

3000r/min，离心0.5h，取上清，56℃水浴
1h。

用0.2μm滤器将各组血清分别注入1.5mLEppendorf管中，-20℃冰箱保存。

1.2.5 检测指标超敏C反应蛋白（hs-CRP）采用乳胶免疫增强比浊法试剂盒，sVCAM-1、sICAM-1采用酶联免疫法（ELISA）检测。

试剂盒购自上海达安生物
技术公司。

以美国Bio-Rad公司的全自动酶免分析仪检测。

1.3 统计学方法采用SPSS13.0统计软件包进行数据统计。

结果用（±s）表示。

采用单因素方差分析，方差齐者用SNK法，方差不齐用Dunnett’s T3法。

2 实验结果
2.1 一般情况整个实验期间，各组动物反应灵敏，皮毛色白、致密有光泽，进食
活跃，活动良好，体重增长。

实验过程中正常对照组、模型组、中药组及西药组大鼠均无死亡。

2.2 各组大鼠治疗后血清sVCAM，sICAM-1及hsCRP含量情况结果显示，与模型组比较，益气养阴方能明显降低动脉粥样硬化大鼠hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1指标水平（P＜0.01）；与西药组比较，在降低模型大鼠sVCAM和hsCRP方面亦具有一定优势（P＜0.05）。

见表1。

表1 各组大鼠治疗后血清sVCAM、sICAM-1及hsCRP水平组别动物数（只）sVCAM（ng/L）sICAM-1（ng/L） hsCRP（mg/L）正常对照组
109.78±2.245.58±2.74 1.79±0.41模型组 10
24.57±5.49△44.16±11.63△15.60±2.94△中药组 10
11.29±2.79*##12.28±9.43*##3.26±1.76*##西药组 10
15.86±4.41*13.47±7.69*7.75±2.84*
3 讨论
益气养阴方是在经典名方生脉散基础上加减化裁而来，由黄芪、党参、麦冬、五味子、枸杞、桑寄生等6味中药组合而成。

方中黄芪益气帅血，党参补中益气为君；麦冬、五味子滋阴养心；桑寄生、枸杞子滋补肝肾以培阴精之本。

诸药合用，切中脉痹病机，药专力宏，共奏益气养阴之功。

反映中医辨证论治的临床特色，抓住动脉粥样硬化“本虚标实”的病机特点[3]，体现治病必求本，益气养阴为先的特色。

超敏CRP是最广泛应用的炎症标志物，是反映低度、持续炎症的指标[4]。

动脉粥样硬化常伴有炎症病变，超敏CRP可直接影响动脉粥样硬化斑块与血栓形成，且
已被证实是慢性炎症引发心血管疾病的独立危险因素[5-6]。

它在体外可激活补体，诱导内皮产生单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1），上调ICAM-1、VCAM-1，介导
巨噬细胞摄入天然LDL，使单核细胞组织因子增加，引起动脉内膜损伤，最终导
致斑块和血栓形成。

非活化内皮细胞有低于正常的VCAM-1表达。

标准的免疫组
化方法检测不到正常血管上VCAM-1表达，在体内炎症的病理条件下血管内皮有VCAM-1表达[7]。

VCAM-1在以上这些细胞表达同时分泌相应的sVCAM-1。

研究认为VCAM-1介导的炎症过程在动脉粥样硬化发生中起着极其重要的作用[8]，在病变早期，VCAM-1主要是促单核细胞向内皮黏附、迁移，在进展期，则促进
已迁入病灶的单核细胞位移，T淋巴细胞的激活，增加其他细胞与细胞间的相互作用。

动脉粥样硬化被认为是炎症损伤的反应，血管内皮细胞损伤后表达黏附分子，VCAM-1介导炎症细胞黏附和侵入血管壁是动脉粥样硬化发生的早期步骤。

随着
病程进展，VCAM-1介导更多的细胞进入斑块，促使斑块发展，同时影响斑块的
稳定性。

尤其在糖尿病病人sVCAM-1的水平越高，其心血管事件的风险就越大。

本研究发现，益气养阴方能明显降低动脉粥样硬化大鼠血清hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1表达，这为我们挖掘干预动脉粥样硬化免疫损伤的有效中药复方来防治
动脉粥样硬化进展提供了一个研究思路。

4 参考文献
[1] 王瑞英，禹远远，王棉，等，血管内皮功能与2型糖尿病患者大血管病变的关系.中国老年学杂志，2010，30（12）：1730
[2] 蔡穗珍.2型糖尿病内皮功能紊乱与动脉粥样硬化.福建医科大学学报，2006，
40（4）：416
[3] 孟国凡.动脉粥样硬化的中医病因病机初探.云南中医中药杂志，2004，25（2）：55
[4] 惠玉芬，王兴宁.超敏CRP与2型糖尿病及合并冠心病的关系分析.实用医技杂志，2008，15（8）1013
[5] 单倚玲.超敏CRP-血管疾病的独立危险因子.国外医学生化与检验分册，2004，25（1）：72
[6] Ohrona L，Ardissino D，Merlini P，et al.C.reactive protein elevation
and early outcome in patientswith unstablepectofis.Am J Cardiol，1997，80（8）：1002
[7] Wu KK，AleksicN， BallantnyneCM，etal.sICAM had a significantincreasein therisk ofCHD event.Circulation，2003，107：1729 [8] Hwang SJ，Ballantyne CM，Sharrett AR，et al.Circulating adhesion moleculesVCAM-1，ICAM-1 and E-selectin in carotid atherosclerosis and incident coronary heart disease cases the Atherosclerosis Risk In Communities （ARIC） study.Circulation，1997，96：4219。