百尾参抑菌活性研究
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百尾参抑菌活性研究
甘秀海;梁志远;王瑞
【摘要】Objective: To study the antibacterial activity of Disporum cantoniense ( Lour. ) Merr.. Methods: Antibacterial activity of various extraction of Disporum cantonieuse (Lout.) Merr. were examined by using plate - punch method. Results: The acetic ether extract from roots of Disporum cantonierue ( Lout. ) Merr. was active against Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus. Conclusion: The roots of Disporum cantoniense( Lour. )Merr. had a certain antibacte- rial activity.%目的:研究百尾参的抑菌活性。
方法:采用平板打孔法,通过测定抑菌圈研究百尾参不同提取部位的抑菌作用。
结果:百尾参乙酸乙酯萃取物对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用。
结论:百尾参根具有一定的抑菌活性。
【期刊名称】《贵阳学院学报(自然科学版)》
【年(卷),期】2012(007)001
【总页数】3页(P43-44,52)
【关键词】百尾参;提取物;抑菌活性
【作者】甘秀海;梁志远;王瑞
【作者单位】贵州师范学院化学与生命科学学院,贵州贵阳550018;贵州师范学院化学与生命科学学院,贵州贵阳550018;贵阳学院生物与环境工程系,贵州贵阳550005
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
百尾参为百合科(Liliaceae)万寿竹属(Disporum)植物万寿竹(Disporum cantoniense(Lour.)Merr.)的根及根茎,是苗族习用药材。
其味甘、淡,性平,具有润肺止咳、健脾消积的功效,可用于治疗虚损咳喘、痰中带血、肠风下血、食积胀满等症[1][2],以百尾参为主药的市售复方制剂有贵州百灵生产的咳速停
系列药物。
关于百尾参的研究主要集中在栽培方面[3-6],目前仅有陈磊等[7][8]对其化学成分开展了初步研究,但未见百尾参生物活性方面的报道。
因此,为了探究百尾参的抑菌活性,本文对百尾参不同部位提取物开展了抑菌活性研究,其结果将为百尾参抑菌机理的研究及综合利用提供理论依据。
1.1.1 主要仪器
BS224精密天平(Sartorius公司);RE-52AA旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHZ-3循环水真空泵(河南巩义科教仪器厂);HH-4型数显恒温水浴锅(常州
国华电器有限公司);pHS-3C型超菌工作台(天津医疗净化设备厂);LB-50L高压
灭菌锅(江阴滨江医疗设备厂);DH600电热恒温培养箱(北京科伟仪器有限公司)。
1.1.2 材料与试剂
百尾参(Disporum cantoniense(Lour.)Merr.)的根及根茎,于2010年10月采自安顺,经贵州师范学院朱富寿教授鉴定为百尾参(Disporum
cantoniense(Lour.)Merr.)。
铜绿假单胞菌(Pseudom onas aerug inosa)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、
大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)、金黄色葡萄
球菌(Staphylococcus aureus)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)均由贵州省中
国科学院天然产物化学重点实验室提供。
实验中所用试剂均为分析纯。
1.2.1 培养基的制备
称取牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂18g,用1mol·L-1NaOH 调节pH 值于 7.0 ~7.2之间,然后蒸馏水定容至1000 mL,加热溶解后分装,121℃灭菌20 min,倒入已灭菌的培养皿中,制成平板,待冷却凝固后作无菌检查,备用。
1.2.2 供试品的制备
取干燥百尾参根样品,粉碎后用80%乙醇回流提取三次,2 h/次,将乙醇提取物经过旋转蒸发得棕褐色固体浸膏。
浸膏用适量水分散,分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次,回收溶剂,分别得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇及水萃取物。
在真空干燥箱中放置2 h烘干,即得供试品,备用。
1.2.3 菌悬液的制备
将上述供试菌种分别接种在LB培养基上,37℃活化培养24 h,挑取活化后的菌落与无菌生理盐水中混合,所得菌悬液中细菌数目应为106~108CFU·L-1。
1.2.4 抑菌活性的测定
抑菌活性的测定采用平板打孔法。
准确称取百尾参各萃取物供试品,用DMSO配成浓度为10 mg·mL-1的溶液,用微型移液器吸取40 μL的菌悬液加入到凝固的培养基上,涂布均匀,然后用镊子取药敏纸片均匀贴在平板上。
挥干溶剂后,放入37℃恒温培养箱中倒置培养24 h。
观察有无抑菌圈的产生,并用直尺测量抑菌圈大小(mm),记录结果,求其平均值。
实验共设3个实验组,每3个平板为1组,每组重复3次。
以庆大霉素作为阳性对照。
按1.2.4项下的方法测定了百尾参不同萃取部位对6种供试菌株的抑菌效果,结果见表1。
由表1可知,百尾参不同部位中只有乙酸乙酯萃取物对枯草芽孢杆菌和金黄色葡
萄球菌有抑菌作用,其抑菌圈直径为9.77±0.49mm和7.12±0.34mm,其它萃取物对铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌和藤黄微球菌无抑菌作用。
由研究结果显示,百尾参不同提取部位中只有乙酸乙酯萃取物有抑菌活性,这说明其抑菌成分主要集中在乙酸乙酯部位中,陈磊发现乙酸乙酯提取物中含有香草酸、水杨酸等芳香酸及黄酮类化合物,而此类化合物具有抑菌活性。
在6种菌株中乙
酸乙酯萃取物对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有抑菌效果,由此可初步推断百尾参的抑菌活性具有一定的选择性。
因而,百尾参的抑菌活性值得进一步研究,尤其是筛选出较灵敏的菌株及探讨其抑菌作用机理。
百尾参乙酸乙酯部位对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有抑菌活性,因此,百尾参抑菌活性具有一定的选择性。
注:活性测试由贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室活性筛选室完成。
【相关文献】
[1]邱德文,杜江主编.中华本草(苗药卷)[M].贵阳:贵州科技出版社,2005:54-55.
[2]贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准(2003年版)[M].贵阳:贵州科技
出版社,2003:162.
[3]张雁萍.安顺民族药用植物野生百尾参植株的形态特征与分布[J].贵州农业科学,2006,
34(5):55-57.
[4]张雁萍,向波.苗族药用植物野生百尾参间套作不同播期育苗试验[J].贵州农业科学,2007,35(3):55-57.
[5]张雁萍.野生百尾参种子2年生植株生长发育特性研究[J].安徽农业科学,2008,
36(5):1915-1917.
[6]张雁萍.苗族药用植物百尾参野生种子发芽育苗栽培试验[J]. 种子,2008,27(5):82-85. [7]CHEN L,SU Y F,YIN Z Y,et al.Flavonoids from Disporum cantoniense(Liliaceae)[J].Biochemical Systematics and Ecology,2009,37(5):609-612.
[8]陈磊.百合科两种药用植物化学成分及生物活性研究[D]. 天津:天津大学,2009.。