人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第3章 基因工程 本章整合

第3章
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生物
内容索引
知识网络系统构建 核心观点专题归纳
知识网络系统构建
核心观点专题归纳
专题一 基因工程基本操作类试题的一般解题步骤 1.三辨 分辨限制酶的种类、识别序列和切割位点。在切割目的基因和载体时, 一般用同一种限制酶,也可用不同的限制酶,但两种限制酶切割后产生的黏 性末端的碱基要互补配对。 2.三找 找出标记基因、目的基因及其插入位点。一般来说,质粒中至少要有一 个标记基因,如抗生素抗性基因。明确目的基因的插入位点是在标记基因 内部还是在标记基因之外。
3.一析 分析目的基因插入质粒后是否会破坏标记基因。如果质粒中仅有一个 标记基因,则目的基因插入后不能破坏该标记基因;如果质粒中有两个至多 个标记基因,则至少应保留一个完整的标记基因。 4.一厘 厘清判断目的基因是否导入受体细胞的方法。一般用含有某种抗生素 的培养基培养受体菌。如果有两种抗生素抗性基因,还需判断用哪一种抗 生素来检测。
专题二 基因表达载体的构建与限制酶切割片段的判断 1.构建基因表达载体不可缺少的工具酶是限制酶和DNA连接酶。 2.选择何种限制酶取决于目的基因两端和载体上的限制酶识别序列和切 割位点。解决此类问题时要遵守的原则:(1)要在目的基因的两端和载体上 切出相同的黏性末端或平末端,以保证目的基因与载体的连接;(2)至少保 证载体上有一个标记基因不被破坏,以便于筛选;(3)要确保目的基因能插 入载体的启动子与终止子之间。 3.E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4 DNA连接酶。因此,在构建基因表达载体时要根据限制酶切割的结果来加 以选择。
本课结束6.将切开的载体与源自开的目的基因混合,加入DNA连接酶后,会出现多种 连接方式,如载体与载体连接、目的基因与目的基因连接、载体与目的基 因连接、载体自接、目的基因环化等。
专题三 三种转基因生物的培育过程 1.转基因植物培育过程图解(以抗虫棉培育过程为例)
2.转基因动物培育过程图解(以转基因牛培育过程为例) 3.转基因微生物培育过程图解(以可生产干扰素的酵母菌的培育过程为例)
4.解答限制酶切割DNA或载体后产生的片段数或片段的长度问题时,首 先要认真、仔细审题,明确每种限制酶的切割位点,确定不同限制酶切割位 点间的距离,然后再得出结论。
5.目的基因的插入位点不是随意的。基因表达需要启动子与终止子的调 控,所以目的基因应插到启动子与终止子之间的部位。若使目的基因在特 定细胞中表达,还必须有针对性地选择相应的启动子,比如构建乳腺生物反 应器的基因表达载体时,一定要将目的基因与乳腺中特异表达的基因的启 动子等调控元件结合。