庆大霉素的制备工艺课程

低单位洗脱液贮罐
高单位洗脱液
经阳串阴管道进入阴离子交换柱
7.打开夹层冷水阀，关闭罐底阀，打开回水阀降温至38℃时关闭。消 罐人员停搅拌，进行压差接种。
8.消罐人员停搅拌，将罐压降至0.04Mpa, 看罐人员配合种子组人员 接种，先取无菌样，接种前点燃火圈烧接种口，对接种口消毒，火焰 要大，要均匀。用火圈保护打开接种咀套管。
9.种子人员一手持接种瓶，一手将接种皮管插入接种咀。种子罐放在 木盒或双层布袋中以防爆裂，关闭种子罐机械搅拌。当罐压降至 0.03-0.04MPa，种子组人员在火焰保护下将接种头上的纱布迅速插 入接种口上。
口处，然后重新组装好接种瓶及接种皮管。 ❖ 10. 制备完毕关闭洁净台，出洁净室，符合人流、物流进出程序。
种子的发酵培养
❖ 以一级种子为例说明 ❖ 操作步骤 ❖ 1.校正量具，小于1kg用台秤，大于1kg用磅秤。 ❖ 2.先后将淀粉，玉米粉，硝酸钾，蛋白胨，轻质碳酸钙称好后装在编织
袋中，准备投料。 ❖ 3.向事先冲洗干净并压净的一级罐中加水至埋住下层搅拌桨时，开搅拌，
调pH至5.0-5.8
浓缩
成盐
脱色压滤
炭脱收率≥95%
进塔温度：116-135℃
喷速：20-80L/h
产品
喷雾干燥
喷雾收率≥90%
孢子悬浮液的制备流程及工艺要求
❖ 设备： ❖ 1、蒸汽灭菌柜 ❖ 2、双人净化工作台
孢子悬浮液的制备
❖ 操作步骤 ❖ 1.分装纯化水至三角瓶，每瓶装150mL左右。 ❖ 2.组装接种瓶及接种皮管，组装严密，包扎结实。 ❖ 3.以上器材及接种用具灭菌，125±1゜C，60min。 ❖ 4.在缓冲间穿好无菌衣，戴上无菌口罩，进入洁净室，符合人流﹑物流
硫酸庆大霉素工艺流程图
发酵用小 单胞菌
无菌接入
洗涤洗脱 脱色
培养48小时左右，
培养24小时左右，
一级种子 pH自然，36-37℃ 二级种子 pH6.8-7.4
罐
罐
三级种子 罐
分离漂洗
酸化中和 交换
培养24小时左右，
pH6.7-7.4
培养4天， 四级种子
34-35℃
罐
洗脱收率≥98%
浓缩收率≥88%
纯化水冲洗 除氯离子
稀酸洗 0 .0 5 M 盐 酸 、 0 .0 2 M 氯 化 铵
除钙离子、镁离子
解析完毕后水洗使树脂再生
再生树脂
需要时
压回酸化罐旁的树脂计量槽
旋 光 效 价 >1000u/mL 收 集 9500- 12000L
旋 光 效 价 2 0 0 -1 0 0 0 u /m L 3 0 0 0 -4 0 0 0 L
庆
大
❖
霉
素
的
制
备
工
艺
庆大霉素的制备工艺
❖ 庆大霉素是一种氨基糖苷类抗生素, 主要用于 治疗细菌感染，尤其是革兰氏阴性菌引起的 感染。庆大霉素能与细菌核糖体30s亚基结 合，阻断细菌蛋白质合成。庆大霉素是为数 不多的热稳定性的抗生素，因而广泛应于培 养基配置。
庆大霉素化学式
❖ 化学式：
庆大霉素的性状
10.种子人员高举接种瓶并倒置，再由消罐人员慢慢降低罐压至 0.04Mpa,借压将接种瓶中的孢子悬液引入罐内。一次接种不完可以重 复多次至接种完毕。罐压应维持在0.04-0.08 Mpa之间。 11.接种完毕，先关接种阀，再拔接种皮管，并拧上接种咀套管。 12.调节进排气控制罐阀，空气流量达到工艺要求，并开搅拌，交值 班
提炼车间流程图
氨回收罐
回收 套用下一批
发酵液 酸化罐
稀氨洗涤生物 效价低于200u/ml
树脂分离器
分离树脂 复合物
漂洗罐 除杂质
回收,套用下一批
阳离子交换柱
低单位收集罐
低于600u/ml
浓氨 洗脱
阳串阴
回收
测定生物效价 脱色
高于600u/ml
洗脱液贮灌
提炼车间流程简介
发酵液
酸化罐
酸化、中和 加树脂吸附
分离
漂洗
树脂分离器 饱和树脂 漂洗柱
阳离子交换柱
通空气
疏松 赶气泡
含部分庆大霉素的洗脱液
回收、氨捞（再吸附)
饮用水
4 .5 % -5 .3 % 浓 氨
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洗脱 解析
p H 8 .5 -9
0 .0 8 -0 .1 2 M 稀 氨 洗 1 :2 0 V V M - 1 :4 0 V V M
除蛋白质等杂质 调 节 pH值 至 碱 性
❖ 性状： 常用其硫酸盐，为白色或类白色结晶性粉
末；无臭；有引湿性。在水中易溶，在乙醇、 乙醚、丙酮或氯仿中不溶。
庆大霉素的功能主治
❖ 功能主治：
对大肠杆菌、产气杆菌、克雷白杆菌、奇异变形杆菌、 某些吲哚变形杆菌、绿脓杆菌、某些奈瑟菌、某些无色素沙 雷杆菌和志贺菌等革兰阴性菌有抗菌作用。适用于敏感细菌 所致的新生儿脓毒症、败血症、中枢神经系统感染（包括脑 膜炎）、尿路生殖系统感染、呼吸道感染、胃肠道感染（包 括腹膜炎）、胆道感染、皮肤、骨骼、中耳炎、鼻窦炎、软 组织感染（包括烧伤）、李斯特菌病。
进出程序。 ❖ 5.用酒精棉球擦拭超净台面﹑双手，先擦台面，后擦手。 ❖ 6.开启超净台通风，观察风速是否正常，将接种瓶、皮管、无菌水、接
种铲及斜面摆在洁净台上。 ❖ 7.将灭菌纯化水倒入茄子瓶中，一瓶纯化水倒两只茄子瓶。 ❖ 8.用接种铲将孢子刮下制成孢子悬浮液，用力适度，勿刮出培养基碎屑。 ❖ 9.打开接种瓶瓶口，将孢子悬浮液全部倒入接种瓶中，注意不要倒在瓶
然后将称好的物料缓缓加入罐中，再分别量取2%氯化钴溶液和豆油加入 罐中，加水至所需体积。上紧罐盖，准备灭菌。 ❖ 4.打开罐底阀，放掉夹套水，夹层通蒸汽预热至90℃后关闭。 ❖ 5.由取样管、压出管、进气管3路进蒸汽，进行直接蒸汽灭菌。升温，当 罐压达0.1MPa时，保压30min。保压过程重要适当控制进气、排气。 ❖ 6.灭菌结束，先关排气阀，后关进气阀，当罐压低于空气分过滤器压力 时，再开空气进气阀，控制排气要适当。
培养参数控制
一级种子
培养时间 罐温 48h左右 37℃
二级种子
培养时间 罐温 24h左右 37℃
罐压
空气压力 空气流量 搅拌时间
0.06Mpa 0.1Mpa
30m3/h
罐压
空气压力 空气流量 搅拌时间
0.03Mpa 0.7Mpa
170m3/h
提炼车间生产概况
❖ 提炼组的任务是将庆大霉素从来自发酵车 间的发酵液中提炼出来，同时也负责本车间 低单位稀氨洗脱液和成盐炭脱车间活性炭滤 饼中庆大霉素的提取，并最终得到含庆大霉 素的洗脱液，送入浓缩岗位浓缩。