重组人胰岛素生产工艺
重组人胰岛素和重和生长激素的生产工艺
由于结构和性质的差异，胰岛素和生长激素的分离纯化过程有所不同，
涉及的步骤和技术也有所区别。
重组人胰岛素和重和生长激素生产工艺的优缺点分析
要点一
酵母表达系统
要点二
低成本、高产出
酵母作为宿主细胞具有高表达、易培养、易发酵等优点， 有助于提高胰岛素的生产效率。
通过大规模发酵和分离纯化，可以实现低成本、高产出， 降低治疗费用。
使用哺乳动物细胞作为宿主细胞，能够实现更接近人体 生理状态的糖基化过程，提高生长激素的生物活性。
重组人胰岛素和重和生长激素生产工艺的优缺点分析
更接近人体天然结构
哺乳动物细胞表达的生长激素更接近 人体天然结构，降低了免疫排斥的风 险。
临床效果更佳
由于结构和性质的优化，重组人生长 激素在治疗某些疾病方面具有更好的 临床效果。
重组人胰岛素和重和生长激素生产工艺的异同点
01 02
原料与培养基
胰岛素生产主要使用酵母作为宿主细胞，而生长激素则更倾向于使用哺 乳动物细胞作为宿主。此外，培养基的成分也有所不同，以满足不同细 胞的需求。
蛋白质修饰
胰岛素和生长激素在蛋白质修饰方面存在差异，以适应其特定的生理功 能和药理作用。
03
分离纯化过程
重组人胰岛素和重和生长激素生产工艺的优缺点分析
生产成本高
哺乳动物细胞培养成本较高，导致生长激素的生产成本增加。
生产周期长
哺乳动物细胞生长缓慢，培养周期长，影响了生产效率。
潜在的病毒污染风险
虽然采用了各种病毒消除技术，但仍存在病毒污染的风险。
重组人胰岛素和重和生长激素生产工艺的发展趋势与展望
基因编辑技术应用
通过控制培养条件，如温度、pH、营养物 质等，优化细胞代谢，提高目标蛋白质的产 量。
重组人胰岛素制备工艺
重组人胰岛素制备工艺引言胰岛素是一种由胰腺β细胞分泌的激素，它参与调节葡萄糖代谢，维持血糖水平稳定。
然而，对于许多糖尿病患者，体内胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗使得血糖控制成为难题。
为了解决这一问题，重组人胰岛素制备工艺应运而生。
本文将详细介绍重组人胰岛素的制备工艺，以及如何通过优化制备工艺提高其产量和质量。
关键词介绍1、重组人胰岛素：是指利用基因工程技术，通过细胞培养或微生物发酵生产的胰岛素。
它具有与天然人胰岛素相同的结构和功能，因此在临床上有广泛的应用。
2、制备：是指通过一系列工艺步骤，从原料中提取或制造出所需物质的过程。
在重组人胰岛素制备中，主要包括基因工程操作、细胞培养、发酵、分离和精制等步骤。
3、工艺：是指实现制备过程的一系列具体方法和操作规程。
工艺的选择和优化直接影响到产品的产量和质量。
重组人胰岛素制备工艺1、酵母菌的筛选：选用适合生产重组人胰岛素的酵母菌种，对其进行筛选和改良，以提高发酵过程中的产量。
2、基因工程操作：将人胰岛素基因插入到酵母菌的染色体或质粒中，确保基因正确表达。
3、发酵：在适宜的营养条件下，利用筛选得到的酵母菌进行发酵生产。
4、分离和精制：通过一系列物理、化学和生物学方法，将重组人胰岛素从发酵液中分离出来，并进行精制和纯化，以得到高纯度的产品。
制备工艺优化1、通过现代实验设计方法和技术，如响应面法和均匀设计法，筛选最佳工艺条件，以提高重组人胰岛素的产量和质量。
2、通过基因工程技术改良酵母菌，增强其生产重组人胰岛素的能力，提高产量。
3、采用先进的分离和精制技术，如高效液相色谱和超滤膜过滤等，进一步提纯产品，提高产品质量。
4、结合计算机模拟技术和实验验证，模拟工艺过程，指导实际生产，优化制备工艺。
重组人胰岛素制备工艺在糖尿病治疗中具有重要意义，本文详细介绍了其制备过程及优化方法。
通过合理选择工艺条件和基因工程改良，可以有效提高重组人胰岛素的产量和质量。
随着科学技术的发展，相信未来制备工艺将进一步优化，为糖尿病患者提供更好的治疗选择。
胰岛素工艺流程说明
胰岛素工艺流程说明-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
重组人胰岛素产品生产工艺流程
时转入发酵罐培养
分两阶段进行控制，第一阶段主要通过控制溶氧和补加
体达到富集的目的，第二阶段通过补加甲醇使菌体进行高密度表
达目的产物，HPLC检测目的产物含量
目的产物存在于发酵液上清中，此步骤主要控制目的产物收率
通过两步柱层析，分别去除发酵上清液中的色素和杂蛋白
利用紫外检测仪控制目的产物收率，主要试剂为乙醇与异丙醇
调节PH值，使P1沉淀，再经离心干燥，得中间体I 固体
2
3
控温进行转肽反应，主要试剂为DMSO 与1,4-丁二
醇
再通过柱层析进行提纯，主要试剂为异丙醇
调节PH 值，使P2沉淀，再经离心干燥，得中间体
II 固体
通过控制湿度与温度进行脱帽反应，得到终产物胰岛素
主要试剂为丙酮，产品为半固体
经过两步柱层析对胰岛素进行提纯，试剂为Tris-HCl 和异丙醇
通过超滤对提纯后的胰岛素进行浓缩，通过管道传递
到下工序
通过制备色谱对胰岛素粗品进行精制，主要试剂为色谱乙腈
然后经两步结晶后通过管道过滤除菌到百级区
对胰岛素成品进行一次结晶和水洗
对水洗后的胰岛素进行过滤除菌后冻干，即得胰岛素成品
4
重组人胰岛素生产工艺流程功能间分布
5。
利用重组酵母菌生产人胰岛素
利用重组酵母菌生产人胰岛素摘要：利用重组酵母菌生成人胰岛素为以下流程：获得目的基因→构建重组质粒→构建基因工程菌→工程菌发酵→产物分离纯化→产品检验。
其中前三个流程为产人胰岛素酵母工程菌的构建，根据人胰岛素的氨基酸序列和酵母偏爱的密码子，采用基因半合成技术合成人胰岛素基因。
将合成的胰岛素基因克隆到pPIC9质粒，构建了毕赤(Pichia)酵母重组表达载体pPINS319，用BglII线性化后用电转化法导入毕赤酵母GSll5菌株，经过营养筛选和PCR 复筛，得到含人胰岛素基因的毕赤酵母工程菌株。
后三个流程为胰岛素的大规模发酵生产，通过补料-分批发酵获得发酵液，分离纯化后获得人胰岛素。
纯化后的重组人胰岛素产品经SDS-PAGE检测，氨基酸组成分析及小鼠惊厥实验证明制得产品为有生物活性的人胰岛素。
关键词：重组酵母；人胰岛素；发酵；纯化；鉴定Using recombinant yeast to produce human insulinHuSheng 1142043040Abstract：The proceedings of produce human insulin by recombinant yeast show as follow:get purpose gene→c onstruct the recombinant plasmid→construct the genetic engineering bacteria→fermentation of e ngineering bacterium→separation and purification of the product→identification of the product. The front three processes is building engineering bacteria of human insulin yeasts . Insulin gene was synthesized according to the amino acid sequence of human insulin and yeast preferential codons. The insulin gene was cloned in to pPIC9 vector and expression vector pPINS319 was constructed. The expression vector was digested with BgllI and then used to transform Pichia Pastoris GSll5 by electroporation. The expression analysis showed that the insulin gene w s able to expressed efficiently in Pichia Pastoris. The posterior three processes is large-scale production by fermentation.Through fed - batch fermentation getting fermentation liquor, separation and purification the fermentation liquor getting human insulin.The final products purified by supedrex 75showed one band by SDS-PAGE analysis and were identical with the native human insulin by all critetia employed.(SDS-PAGE analysis,amin acid composition analysis and bioidentity assay) Keywords：recombinant yeast;human insulin; fermentation;purification;identification 胰岛素是FDA批准的第一个用于人类的基因重组药物。
重组人胰岛素的研究历史与生产工艺
四、重组人工胰岛素
通过基因工程酵母菌E．coli发酵生 产hPI，经后加工形成hI。
4.1菌种制备
提取目的基因 提取质粒 基因重组
将质粒送回大肠杆菌 胰岛素的产生
4.2胰岛素的产生和精制（即菌种的 发酵培养）
重组人工胰岛素的工业生产制备和深加工 技术在如今已经是炉火纯青。有近百年 的 发酵工程为基础，结合现在的基因工程技 术的产物，在菌种制备后的发酵培养过程 更是可靠和安全的。
1996 胰岛素类似物
从动物胰岛素到人胰岛素是 胰岛素历史的极大进步，之 后动物胰岛素时代终结。
1987 人胰岛素 1973 单组分胰岛素
1953 长效胰岛素
1946 NPH 胰岛素 1923 动物胰岛素
1920 1930 1940 1950 1960 1970 1980 1990 2000
胰岛素的生产
从猪和牛的胰腺中提取，两者药效相同，但与人胰岛素相比，猪胰岛素中有1个 氨基酸不同，牛胰岛素中有3个氨基酸不同，因而易产生抗体
半合成胰岛素 ----将猪胰岛素第30位丙氨酸，置换成与人胰岛素相同的苏氨酸，即为
半合成人胰岛素
重组DNA技术生产人胰岛素
※AB链合成：分别表达AB链，化学方法连接 ※逆转录法：表达胰岛素原，酶切得到重组人胰岛素（广泛）
4.3药物检测
这种重组人工胰岛素的检测重点应该是 ① 测定生物活性 ② 效价测定 ③ 控制产品中杂质潜在有害物质 ④ 保证产品安全性和有效性
五、问题与展望
胰岛素在糖尿病治疗中具有无可替代的作用和地位， 但因注射给药让许多患者产 生畏惧心理，使其作 用发挥受到限制。
研究方向： 1.新的给药方式，例如:口服、吸入; 2.改变药物代谢机制; 3.改进注射手段，让使用者无痛; 这是国际国内胰岛素类药物研究发展的前沿和趋势。
大肠杆菌生产制备重组人胰岛素工艺
1.提取目的基因:既从人的DNA中提取胰岛素基因,可使用限制性内切酶将目的基因从原DNA中分离.2.提取质粒:使用细胞工程,培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,质粒为环状DNA.3.基因重组:取出目的基因与质粒,先利用同种限制性内切酶将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的基因与质粒"缝合",形成一个能表达出胰岛素的DNA质粒.4.将质粒送回大肠杆菌:再大肠杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质,如CaCl2,这使细胞会吸收外源基因.此时将重组的质粒也放入培养液中,大肠杆菌便会将重组质粒吸收.5.胰岛素的产生:再大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后,便产生出胰岛素蛋白质.通过大肠杆菌的大量繁衍,便可大量生产出胰岛素!〖学习要求〗知道DNA的粗提取与鉴定的原理；掌握并能分析DNA粗提取的技术方法和要求；学会DNA分子的鉴定方法【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论，完成下列问题，并初步巩固。
一、基础知识【活动1】阅读教材P54“基础知识”，讨论并回答下列问题：1．（记忆）提取生物大分子的基本思路是利用它们的理化性质的不同进行分离。
2．（记忆）DNA的溶解性特点：DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精。
【思考1】据图5－1分析：DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？在0.14mol/L时溶解度最小；要使DNA溶解，需要使用什么浓度？较高浓度，可使DNA溶解；要使DNA析出，又需要使用什么浓度？0.14mol/L可使DNA析出。
【思考2】利用DNA不溶于酒精的原理，可以达到将DNA和蛋白质进一步分离目的。
3．（记忆）DNA的耐受性特点：蛋白酶能分解蛋白质而不能分解DNA；在60～80℃时蛋白质变性沉淀而DNA 分子不变性。
洗涤剂能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子。
4．（记忆）DNA的鉴定原理当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用二苯胺（甲基绿）进行鉴定。
利用重组酵母菌生产人胰岛素
利用重组酵母菌生产人胰岛素摘要：利用重组酵母菌生成人胰岛素为以下流程：获得目的基因→构建重组质粒→构建基因工程菌→工程菌发酵→产物分离纯化→产品检验。
其中前三个流程为产人胰岛素酵母工程菌的构建，根据人胰岛素的氨基酸序列和酵母偏爱的密码子，采用基因半合成技术合成人胰岛素基因。
将合成的胰岛素基因克隆到pPIC9质粒，构建了毕赤(Pichia)酵母重组表达载体pPINS319，用BglII线性化后用电转化法导入毕赤酵母GSll5菌株，经过营养筛选和PCR 复筛，得到含人胰岛素基因的毕赤酵母工程菌株。
后三个流程为胰岛素的大规模发酵生产，通过补料-分批发酵获得发酵液，分离纯化后获得人胰岛素。
纯化后的重组人胰岛素产品经SDS-PAGE检测，氨基酸组成分析及小鼠惊厥实验证明制得产品为有生物活性的人胰岛素。
关键词：重组酵母；人胰岛素；发酵；纯化；鉴定Using recombinant yeast to produce human insulinHuSheng 1142043040Abstract：The proceedings of produce human insulin by recombinant yeast show as follow:get purpose gene→c onstruct the recombinant plasmid→construct the genetic engineering bacteria→fermentation of e ngineering bacterium→separation and purification of the product→identification of the product. The front three processes is building engineering bacteria of human insulin yeasts . Insulin gene was synthesized according to the amino acid sequence of human insulin and yeast preferential codons. The insulin gene was cloned in to pPIC9 vector and expression vector pPINS319 was constructed. The expression vector was digested with BgllI and then used to transform Pichia Pastoris GSll5 by electroporation. The expression analysis showed that the insulin gene w s able to expressed efficiently in Pichia Pastoris. The posterior three processes is large-scale production by fermentation.Through fed - batch fermentation getting fermentation liquor, separation and purification the fermentation liquor getting human insulin.The final products purified by supedrex 75showed one band by SDS-PAGE analysis and were identical with the native human insulin by all critetia employed.(SDS-PAGE analysis,amin acid composition analysis and bioidentity assay) Keywords：recombinant yeast;human insulin; fermentation;purification;identification 胰岛素是FDA批准的第一个用于人类的基因重组药物。
重组人胰岛素生产工艺
生产企业
NOVO NORDISK INC
LILLY
INSULIN INSULIN INSULATARD NPH NORDISK INSULIN NORDISK MIXTARD (PORK) LENTARD
NOVO NORDISK INC NOVO NORDISK INC NOVO NORDISK INC NOVO NORDISK INC
速效胰岛素
特点： • 起效快，皮下注射后15分钟起效。 • 达峰快，注射后15分钟起效，30～60分钟达到药效高峰。 • 药效维持时间短，大约在3小时左右（2～4小时）。 药代动力学特点与进餐后人体内源性胰岛素分泌十分相似， 能够很好地控制当餐后血糖而且不容易发生低血糖。
起效时间
常规皮下Ins: 30-90min 生理Ins： 0-20min
动物来源的胰岛素（28种）
药品名称
ILETIN I
ILETIN II
生产企业LILLYLILFra bibliotekY药品名称
NPH PURIFIED PORK ISOPHANE INSULIN
PROTAMINE ZINC & ILETIN I (BEEF-PORK) PROTAMINE ZINC AND ILETIN II PROTAMINE ZINC AND ILETIN II (PORK) PROTAMINE ZINC INSULIN REGULAR ILETIN II
苏泌啉-- 常规重组人胰岛素注射液 苏泌啉恩-- 低精蛋白重组人胰岛素注射液
3. 徐州万邦
万邦林-- 常规重组人胰岛素注射液 万苏林—猪胰岛素制剂
其他（持有药品注册证）
---南京新天生物化学制药有限公司、华西医科大学制药厂、上海第一生化 制药厂、武汉生化制药厂 等
重组人胰岛素原料药生产实验报告
重组人胰岛素原料药生产实验报告一、引言胰岛素是一种重要的药物，用于治疗糖尿病等疾病。
重组人胰岛素是指通过基因工程技术生产的胰岛素，与传统的动物源性胰岛素相比，具有更高的纯度和更好的效果。
本报告旨在介绍重组人胰岛素原料药生产实验的过程和结果。
二、实验设计1. 实验目的本实验旨在通过大肠杆菌表达系统生产重组人胰岛素原料药，并对其进行纯化和鉴定。
2. 实验步骤（1）构建表达载体：将人胰岛素基因插入大肠杆菌表达载体pET-28a(+)中。
（2）转化大肠杆菌：将表达载体导入大肠杆菌中，使其能够表达人胰岛素基因。
（3）培养大肠杆菌：在LB培养基中进行培养，使其能够表达出人胰岛素。
（4）收集细菌：将细菌离心收集，并用冷冻离心法裂解细胞获得包含目标蛋白的上清液。
（5）纯化目标蛋白：通过离子交换层析、凝胶过滤层析等方法对上清液进行纯化。
（6）鉴定目标蛋白：通过SDS-PAGE电泳、Western blot等方法对纯化后的目标蛋白进行鉴定。
三、实验结果1. 表达载体构建将人胰岛素基因插入pET-28a(+)表达载体中，经PCR扩增和酶切，得到正确的表达载体。
2. 转化大肠杆菌将表达载体导入大肠杆菌BL21(DE3)中，利用热激法转化。
经PCR检测和测序验证，转化效率较高。
3. 大肠杆菌培养在LB培养基中进行培养，经过16小时的培养后，细菌进入对数生长期。
经过4小时的诱导，大肠杆菌开始表达人胰岛素基因。
4. 目标蛋白纯化通过离子交换层析、凝胶过滤层析等方法对上清液进行纯化。
最终得到了高纯度的重组人胰岛素原料药。
5. 目标蛋白鉴定通过SDS-PAGE电泳、Western blot等方法对纯化后的目标蛋白进行鉴定。
结果表明，纯化后的目标蛋白具有正确的分子量和免疫反应性。
四、实验讨论本实验通过大肠杆菌表达系统成功生产了重组人胰岛素原料药，并对其进行了纯化和鉴定。
其中，表达载体构建和大肠杆菌转化是实验的关键步骤，需要严格控制条件以确保表达效率和转化效率。
重组人胰岛素生产工艺
手术和应激状态：在手术或应激状态下，重组人 胰岛素可以作为葡萄糖代谢调节剂，维持血糖稳 定
重组人胰岛素生产工艺流程
第三章
基因工程菌培养
基因工程菌的选 择与构建
培养基的配制与 灭菌
基因工程菌的培 养条件与过程
培养过程中的注 意事项与质量控 制
基因工程菌发酵
基因工程菌的选择与构建
基因工程菌的培养条件
重组人胰岛素生产工艺中的 关键技术
第四章
基因工程菌的选择和培养条件优化
基因工程菌的选择：选择具有高表达量、稳定性和适应性的工程菌株
培养条件优化：通过控制培养基成分、温度、pH、溶氧等条件，提高工程菌的生长和表 达水平
发酵过程监控：实时监测工程菌的生长和表达情况，及时调整培养条件
分离纯化技术：采用高效液相色谱、凝胶过滤等方法对重组人胰岛素进行分离纯化，确 保产品质量
质量控制和 监管：加强 质量控制和 监管，确保 重组人胰岛 素的安全性 和有效性
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汇报人：
重组人胰岛素的应用
糖尿病治疗：重组人胰岛素是治疗糖尿病的主要 药物之一，可以降低血糖，改善糖尿病症状
胰岛素缺乏症治疗：对于胰岛素分泌不足的糖尿 病患者，重组人胰岛素可以替代体症如 酮症酸中毒和高渗性非酮症性昏迷的治疗 中，重组人胰岛素可以降低血糖，纠正代 谢紊乱
变质。
原材料使用：按 照规定的投料量 和使用方法进行 操作，确保原材 料在生产过程中 得到充分利用， 同时避免浪费和
污染。
生产过程的质量控制
原料质量控制：对原料进行严格筛选和检测，确保符合质量标准 生产过程监控：对生产过程中的关键步骤进行严格监控，确保产品质量 稳定 成品检验：对成品进行严格检验，确保符合质量标准
重组人胰岛素生产工艺
3D Structure of Insulin 胰岛素二聚体（dimer） 胰岛素六聚体（hexamer ）
胰岛素的性质
胰岛素的功能 胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素，也是唯一同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成的激素。 药理作用 治疗糖尿病、消耗性疾病。
胰岛素的研究历史 1921年----从动物胰腺中提取出胰岛素，开创了人类胰岛素治疗的历史。 1926年----重结晶胰岛素 1930s----传统中、长效动物胰岛素 1970s----单峰胰岛素和 单组分胰岛素 70年代末----半合成胰岛素 1982年----采用基因重组技术生产的人胰岛素正式上市。 90年代至今----重组人胰岛素类似物成功研发上市，包括超短效和长效人胰岛素类似物。
03
结构： 胰岛素由A、B两个肽链组成。A链有11种21个氨基酸，B链有15种30个氨基酸，共26种51个氨基酸组成。其中A7(Cys)-B7(Cys)、A20(Cys)-B19(Cys)四个半胱氨酸中的巯基形成两个二硫键，使A、B两链连接起来。此外A链中A6(Cys)与A11(Cys)之间也存在一个二硫键。
人工合成法：根据转录蛋白或者mRNA推导出基因序列，然后人工合成，没有内含子。从基因中提取：也就是事先已经提取完毕的拿来用
PCR扩增技术：用于大量生产该段基因片段，用于商业化运作……
03
02
01
提取质粒：使用细胞工程,培养大肠杆菌，从大肠杆菌的细胞质中提取质粒，质粒为环状。主要有如下2种方法：
转化大肠杆菌
PCR
连接
胰岛素原
活性胰岛素
二硫键
酶切
提取质粒 限制性内切酶酶切
重组胰岛素的质量控制
测定生物活性
1
效价测定
重组人胰岛素冻干制剂生产工艺流程
重组人胰岛素冻干制剂生产工艺流程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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重组人胰岛素工业生产流程
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重组人胰岛素生产工艺
重组DNA技术生产人胰岛素
※AB链合成：分别表达AB链，化学方法连接 ※逆转录法：表达胰岛素原，酶切得到重组人胰岛素
重组DNA技术制造人胰岛素
1. AB链合成法：以人工合成的人胰岛素A链和 B链基因分别与半乳糖苷酶基因连接;形成融 和基因;分别在大肠杆菌中表达A链和B链;然 后再通过化学氧化作用;通过二硫键连接起 来 ————已被淘汰
30%常规重组人胰岛素和70%低精蛋白重组人胰岛素
2. 科兴
苏泌啉 常规重组人胰岛素注射液 苏泌啉恩 低精蛋白重组人胰岛素注射液
3. 徐州万邦
万邦林 常规重组人胰岛素注射液 万苏林—猪胰岛素制剂
其他持有药品注册证
南京新天生物化学制药有限 华西医科大学制药厂 第一生化 制药厂 武汉生化制药厂 等
临床用胰岛素分类
LILLY
LENTE ILETIN II
LENTE ILETIN II PORK LENTE INSULIN
NPH ILETIN I BEEFPORK
LILLY
LILLY NOVO NORDISK INC
LILLY
REGULAR PURIFIED PORK INSULIN
REGULAR INSULIN SEMILENTE
猪胰岛素 牛胰岛素 赖脯人胰岛素礼来 速效Ins 门冬胰岛素 诺和诺德 速效Ins 甘精胰岛素 安万特 长效Ins
3D Structure of Insulin
胰岛素二聚体（dimer）
胰岛素六聚体（hexamer ）
Ins的性质
1. Mw：5700 左右
pI：5.3～5.35
2. 溶解度
Ins 在 pH4.5~6.5 范围内几乎不溶于水，在乙醚中不溶，在
基因工程大肠杆菌发酵生产重组人胰岛素[宝典]
![基因工程大肠杆菌发酵生产重组人胰岛素[宝典]](https://img.taocdn.com/s3/m/90a698430242a8956aece443.png)
基因工程大肠杆菌发酵生产重组人胰岛素[宝典] 基因工程大肠杆菌发酵生产重组人胰岛素的工艺一，背景知识1，基因工程科技名词定义中文名称:基因工程英文名称:genetic engineering;gene engineering其他名称:重组脱氧核糖核酸技术(recombinant DNA technique) 定义1:狭义的基因工程仅指用体外重组DNA技术去获得新的重组基因;广义的基因工程则指按人们意愿设计，通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性。
如用重组DNA技术，将外源基因转入大肠杆菌中表达，使大肠杆菌能够生产人所需要的产品;将外源基因转入动物，构建具有新遗传特性的转基因动物;用基因敲除手段，获得有遗传缺陷的动物等。
定义2:将在体外进行修饰、改造的脱氧核糖核酸分子导入受体细胞中进行复制和表达的技术。
扩充:基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。
上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
一个完整的、用于生产目的的基因工程技术程序包括的基本内容有:(1)外源目标基因的分离、克隆以及目标基因的结构与功能研究。
这一部分的工作是整个基因工程的基础，因此又称为基因工程的上游部分;(2)适合转移、表达载体的构建或目标基因的表达调控结构重组;(3)外源基因的导入;(4)外源基因在宿主基因组上的整合、表达及检测与转基因生物的筛选;(5)外源基因表达产物的生理功能的核实;(6)转基因新品系的选育和建立，以及转基因新品系的效益分析;(7)生态与进化安全保障机制的建立;(8)消费安全评价。
基本操作步骤(上游技术)提取目的基因获取目的基因是实施基因工程的第一步。
如植物的抗病(抗病毒抗细菌)基因，种子的贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因干扰素基因等，都是目的基因。
要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因，是十分不易的。