宠物医院实验室诊断(一)皮肤病检查PPT课件
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25
蠕形螨 疥螨 姬螯螨 癣菌 细菌 马拉色氏菌 过敏性皮炎 细胞学
26
蠕形螨
27
蠕形螨
28
蠕形螨
• 整个生活史共需24d； • 虫体寄生于皮肤毛囊和皮脂腺内； • 有4对足，口器小，体表无毛，吻突小而钝， • 正常犬猫体表均会有少量蠕形蟎存在； • 病变以动物眼、唇、耳、前肢内侧的无毛处； • 病变周围有界限分明的红斑，痒感不强烈。但
• 观察有无跳蚤பைடு நூலகம்跳蚤排泄物、虱子、蜱等 • 与主人沟通，了解有无新生的患处，瘙痒最严重部位
等，最好刮取新生病变与健康皮肤交界处，取2-3处病 变局部剪毛，（75%酒精稍作擦拭），采样。
13
采样工具的准备
• 剪毛剪1把、手术刀2把（钝刀片）、止血钳 一把、载玻片、盖玻片、碘酒棉球、酒精棉 球
• 在载玻片上分两点各滴上一滴50%甘油（主 要查看螨虫类）和10%KOH（主要查看真菌 类）备用
严重时，身体大面积脱毛、浮肿、皮脂溢和脓 性皮炎； • 本病是一种可以使动物致死的外寄生虫病；
29
蠕形螨临床症状
皮损可出现头面部、趾（指）部。临床症 状各异，起初常为局灶性皮损，随后扩大， 出现斑片状、局灶性、多灶性或弥漫性脱 毛，伴有各种红斑、皮屑、丘疹、瘙痒等， 感染皮肤可能出现苔藓化、色素过度沉着、 脓包、糜烂、浅表性溃疡或深部脓皮病。
（2）表层刮取后，用手挤压其患部，并 用另一把手术刀将挤压处毛囊内的皮肤 表层下刮取物置于事先准备好的50%甘 油中（起到固定和透明化作用）备用， 主要查看螨虫
• 在另一患处做同样的取样，分别将刮取 物置于载玻片上相应的溶液中
• 取盖玻片分别将刮取物轻轻按压，尽量 使刮取物与溶液混匀
• 采样结束后，在采样部位涂擦碘酒消毒
实验室诊断（一） 皮肤病
1
显微镜的正确使用
1、开电源开关 2、调光（光圈、聚光器） 3、低倍镜头对准通光孔 4、将要观察的部位调到 通光孔正中
2
显微镜的正确使用
5、用粗调焦手轮,调节 焦距，使载物台上升
6、不能上升时再调节载 物台下降，到视野中 出现清晰的物象止 ；
7、瞳距调节：左右推拉 目镜，调节屈光度
20
伍德氏灯检查法
• 伍氏灯：适用于查看 部分小孢子属的癣菌 感染
• 用手提式伍德氏灯在 暗室内开启灯光，预 热5-10分钟，光源与 皮肤距离约5-10cm左 右，光线对准被检处， 观察有无荧光出现
21
染色法流程
• 细菌、马拉色氏菌：通常临床使用革兰 氏染色法。
操作步骤：
1、抹片后自然晾干或采用火焰固定（待玻片完全恢 复常温） 2、按照革兰氏染色步骤进行染色 3、晾干或用滤纸沾去玻片表面的水份备用
• 重找或换片时的顺序： 1、在加油区外应按：低倍→高倍→油镜 2、在加油区内重找应按：低倍→油镜
5
显微镜的维护
对于显微镜的维护保养，主要做到防尘、 防潮、防热、防腐蚀。用后及时清洗擦拭 干净，并定期在有关部位加注中性润滑油 脂。对于一些结构复杂，装配精密的零部 件，如果没有一定的专业知识，一定的技 能和专用工具，就不能擅自拆装，以免损 坏零部件。（不能放在离心机附近！）
3
显微镜使用的注意事项
• 使用高倍镜、油镜时，应按从低倍镜逐步至 高倍镜，用细调节器螺旋调节。
• 使用完毕转动粗调手轮将工作台下降到底； • 每次油镜用后，必须用擦镜纸擦去镜头上的
油镜油； • 使用后4-10倍镜间把镜头八字形放置，镜体
复原。
4
显微镜使用的注意事项
• 忌频繁开关显微镜电源，临时不用时只需 将光源亮度调至最弱。
迪夫染色液
（主要用于血液、骨髓、脱落细 胞的涂片等）
染色步骤：
迪夫A液浸泡30秒---磷 酸盐缓冲液冲洗A液--甩干---迪夫B液浸泡 30秒---水洗---甩干--镜检
24
常用染色液用途及步骤
革兰氏染色液
（主要用于区分G+菌和G-菌）
染色步骤：
龙胆紫---10秒---水洗 ---甩 干---碘溶液---10秒---水洗 ---甩干---脱色液---10秒--水洗 ---甩干---沙黄溶液--10秒---水洗 ---甩干---镜检
• 细胞：通常临床使用瑞-姬氏染色法或迪 夫染色法。（操作步骤同上）
22
常用染色液用途及步骤
瑞氏-姬姆萨染色液
（主要用于血液、骨髓、脱落细胞 的涂片等）
染色步骤：
瑞氏-姬姆萨A液1-2滴； 瑞氏-姬姆萨B液2-4滴； 将AB液混匀，静止3-5分钟 左右---水洗---甩干---镜检
23
常用染色液用途及步骤
• 干净的载玻片备用（主要查看细胞、细菌类） • 根据采样方法还可选择胶带、伍德氏灯等
14
采样基本工具
15
刮片法流程
• 刮片法：适用于检查疥螨 、皮肤癣菌 等
• 采样的处局部剪毛（剪毛部要大于要刮 取的病变部）
• 用手术刀轻轻刮取新患部与健康皮肤交 界处
（1）其中一把手术刀刮取皮肤表层皮屑 置于事先准备好的10%KOH中（起到 透明化作用）备用，主要查看真菌
16
拔毛法流程
• 拔毛法：适用于查看 外寄生虫、蠕形螨、 皮肤癣菌，毛发形态 等
• 在病变处用止血钳拔 出少量毛发（连同毛 根拔出），置于KOH 中/甘油中备用
17
挤压法流程
• 挤压法：适用于查看 蠕形螨
• 在病变部位，以拇指 和食指捏起皮肤，用 力挤，使毛囊扩张， 用刀片刮取经挤压毛 囊液置于甘油中备用
6
皮肤片在显微镜下的适用倍数
• 癣菌：
40 X10、100X10镜
• 螨虫：
10X 10、20X 10镜
• 细菌：
40X 10、100X10镜
• 马拉色氏菌： 40X 10、100X10镜
• 细胞学： 40X 10、100X10镜
7
病变分布
• 局部 • 多处 • 全身 • 对称性分布 • 非对称性分布
18
胶带法流程
• 胶带法：适用于查看 外寄生虫、癣菌、细 菌、细胞学
• 选择合适的透明胶带， 在患病处皮肤上粘取 一些皮屑和组织碎片， 粘置于载玻片上备用
19
抹片法流程
• 抹片法：适用于查看细 菌，癣菌，细胞学等
• 在用刀片浅层刮取后， 直接用载玻片于皮肤上 按压，尽量较均匀涂满 玻片，火焰固定或自然 晾干备用
8
皮肤病变特征
9
皮肤病变特征
10
皮肤病变特征
11
皮肤病变特征
12
皮肤病采样前准备
• 了解患病动物的病史： 包括性别、年龄、是否绝育、皮肤瘙痒程度、 持续时 间、病变部位、临床症状、有无季节性、食物种类、 生活环境、用药史、 用药时间等。
• 观察皮肤的整体印象，包括：皮肤及被毛干燥、油腻、 易掉毛、气味等
蠕形螨 疥螨 姬螯螨 癣菌 细菌 马拉色氏菌 过敏性皮炎 细胞学
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蠕形螨
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蠕形螨
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蠕形螨
• 整个生活史共需24d； • 虫体寄生于皮肤毛囊和皮脂腺内； • 有4对足，口器小，体表无毛，吻突小而钝， • 正常犬猫体表均会有少量蠕形蟎存在； • 病变以动物眼、唇、耳、前肢内侧的无毛处； • 病变周围有界限分明的红斑，痒感不强烈。但
• 观察有无跳蚤பைடு நூலகம்跳蚤排泄物、虱子、蜱等 • 与主人沟通，了解有无新生的患处，瘙痒最严重部位
等，最好刮取新生病变与健康皮肤交界处，取2-3处病 变局部剪毛，（75%酒精稍作擦拭），采样。
13
采样工具的准备
• 剪毛剪1把、手术刀2把（钝刀片）、止血钳 一把、载玻片、盖玻片、碘酒棉球、酒精棉 球
• 在载玻片上分两点各滴上一滴50%甘油（主 要查看螨虫类）和10%KOH（主要查看真菌 类）备用
严重时，身体大面积脱毛、浮肿、皮脂溢和脓 性皮炎； • 本病是一种可以使动物致死的外寄生虫病；
29
蠕形螨临床症状
皮损可出现头面部、趾（指）部。临床症 状各异，起初常为局灶性皮损，随后扩大， 出现斑片状、局灶性、多灶性或弥漫性脱 毛，伴有各种红斑、皮屑、丘疹、瘙痒等， 感染皮肤可能出现苔藓化、色素过度沉着、 脓包、糜烂、浅表性溃疡或深部脓皮病。
（2）表层刮取后，用手挤压其患部，并 用另一把手术刀将挤压处毛囊内的皮肤 表层下刮取物置于事先准备好的50%甘 油中（起到固定和透明化作用）备用， 主要查看螨虫
• 在另一患处做同样的取样，分别将刮取 物置于载玻片上相应的溶液中
• 取盖玻片分别将刮取物轻轻按压，尽量 使刮取物与溶液混匀
• 采样结束后，在采样部位涂擦碘酒消毒
实验室诊断（一） 皮肤病
1
显微镜的正确使用
1、开电源开关 2、调光（光圈、聚光器） 3、低倍镜头对准通光孔 4、将要观察的部位调到 通光孔正中
2
显微镜的正确使用
5、用粗调焦手轮,调节 焦距，使载物台上升
6、不能上升时再调节载 物台下降，到视野中 出现清晰的物象止 ；
7、瞳距调节：左右推拉 目镜，调节屈光度
20
伍德氏灯检查法
• 伍氏灯：适用于查看 部分小孢子属的癣菌 感染
• 用手提式伍德氏灯在 暗室内开启灯光，预 热5-10分钟，光源与 皮肤距离约5-10cm左 右，光线对准被检处， 观察有无荧光出现
21
染色法流程
• 细菌、马拉色氏菌：通常临床使用革兰 氏染色法。
操作步骤：
1、抹片后自然晾干或采用火焰固定（待玻片完全恢 复常温） 2、按照革兰氏染色步骤进行染色 3、晾干或用滤纸沾去玻片表面的水份备用
• 重找或换片时的顺序： 1、在加油区外应按：低倍→高倍→油镜 2、在加油区内重找应按：低倍→油镜
5
显微镜的维护
对于显微镜的维护保养，主要做到防尘、 防潮、防热、防腐蚀。用后及时清洗擦拭 干净，并定期在有关部位加注中性润滑油 脂。对于一些结构复杂，装配精密的零部 件，如果没有一定的专业知识，一定的技 能和专用工具，就不能擅自拆装，以免损 坏零部件。（不能放在离心机附近！）
3
显微镜使用的注意事项
• 使用高倍镜、油镜时，应按从低倍镜逐步至 高倍镜，用细调节器螺旋调节。
• 使用完毕转动粗调手轮将工作台下降到底； • 每次油镜用后，必须用擦镜纸擦去镜头上的
油镜油； • 使用后4-10倍镜间把镜头八字形放置，镜体
复原。
4
显微镜使用的注意事项
• 忌频繁开关显微镜电源，临时不用时只需 将光源亮度调至最弱。
迪夫染色液
（主要用于血液、骨髓、脱落细 胞的涂片等）
染色步骤：
迪夫A液浸泡30秒---磷 酸盐缓冲液冲洗A液--甩干---迪夫B液浸泡 30秒---水洗---甩干--镜检
24
常用染色液用途及步骤
革兰氏染色液
（主要用于区分G+菌和G-菌）
染色步骤：
龙胆紫---10秒---水洗 ---甩 干---碘溶液---10秒---水洗 ---甩干---脱色液---10秒--水洗 ---甩干---沙黄溶液--10秒---水洗 ---甩干---镜检
• 细胞：通常临床使用瑞-姬氏染色法或迪 夫染色法。（操作步骤同上）
22
常用染色液用途及步骤
瑞氏-姬姆萨染色液
（主要用于血液、骨髓、脱落细胞 的涂片等）
染色步骤：
瑞氏-姬姆萨A液1-2滴； 瑞氏-姬姆萨B液2-4滴； 将AB液混匀，静止3-5分钟 左右---水洗---甩干---镜检
23
常用染色液用途及步骤
• 干净的载玻片备用（主要查看细胞、细菌类） • 根据采样方法还可选择胶带、伍德氏灯等
14
采样基本工具
15
刮片法流程
• 刮片法：适用于检查疥螨 、皮肤癣菌 等
• 采样的处局部剪毛（剪毛部要大于要刮 取的病变部）
• 用手术刀轻轻刮取新患部与健康皮肤交 界处
（1）其中一把手术刀刮取皮肤表层皮屑 置于事先准备好的10%KOH中（起到 透明化作用）备用，主要查看真菌
16
拔毛法流程
• 拔毛法：适用于查看 外寄生虫、蠕形螨、 皮肤癣菌，毛发形态 等
• 在病变处用止血钳拔 出少量毛发（连同毛 根拔出），置于KOH 中/甘油中备用
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挤压法流程
• 挤压法：适用于查看 蠕形螨
• 在病变部位，以拇指 和食指捏起皮肤，用 力挤，使毛囊扩张， 用刀片刮取经挤压毛 囊液置于甘油中备用
6
皮肤片在显微镜下的适用倍数
• 癣菌：
40 X10、100X10镜
• 螨虫：
10X 10、20X 10镜
• 细菌：
40X 10、100X10镜
• 马拉色氏菌： 40X 10、100X10镜
• 细胞学： 40X 10、100X10镜
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病变分布
• 局部 • 多处 • 全身 • 对称性分布 • 非对称性分布
18
胶带法流程
• 胶带法：适用于查看 外寄生虫、癣菌、细 菌、细胞学
• 选择合适的透明胶带， 在患病处皮肤上粘取 一些皮屑和组织碎片， 粘置于载玻片上备用
19
抹片法流程
• 抹片法：适用于查看细 菌，癣菌，细胞学等
• 在用刀片浅层刮取后， 直接用载玻片于皮肤上 按压，尽量较均匀涂满 玻片，火焰固定或自然 晾干备用
8
皮肤病变特征
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皮肤病变特征
10
皮肤病变特征
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皮肤病变特征
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皮肤病采样前准备
• 了解患病动物的病史： 包括性别、年龄、是否绝育、皮肤瘙痒程度、 持续时 间、病变部位、临床症状、有无季节性、食物种类、 生活环境、用药史、 用药时间等。
• 观察皮肤的整体印象，包括：皮肤及被毛干燥、油腻、 易掉毛、气味等