消毒、灭菌

第二节
消毒、灭菌
教学目标
1、掌握清洁、消毒、灭菌的概念 2、掌握消毒灭菌的方法 3、熟悉常见的清洁、消毒、灭菌工作
一、概念：
（一）清洁（cleaning)：是指用物理方法清除物体 表面的污垢、尘埃和有机物. 目的: 去除和减少微生物，但并非杀灭微生物。
（二）消毒(disinfection)： 用物理或化学的方法清除或杀灭除芽胞以外的所 有病原微生物，使其数量减少到无害程度的过程。
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
4）压力蒸汽灭菌法 方法：根据排放冷空气的方式和程度的不同， 分为 1）下排气式压力蒸汽灭菌： 2）预真空压力蒸汽灭菌：
压力蒸汽灭菌法
分类
原理 压力 温度
下排气式压力蒸汽灭 预真空压力蒸汽灭菌 菌
重力置换原理 102.97～137.3kpa 121～126℃ 利用机械抽真空，形 成负压 205.8kpa 132℃ 5～10min
方法：将物品刷洗干净，全部浸没在水中，然后 加热煮沸，水沸后开始计时。经5～10分钟可杀灭繁 殖体，达到消毒效果，多数细菌芽胞需煮沸15分钟 可将其杀灭(破伤风杆菌芽孢– 60分钟;肉毒杆菌芽 孢----3小时).将碳酸氢钠加入水中，配成1%～2%的 浓度时，可提高沸点达105℃， 增强杀菌作用，还可去污防锈。
1）燃烧法 方法：1）金属器械可在火焰上烧灼20s； 2）瓶塞或试管口在火焰上来回旋转2~3次 3）搪瓷类容器可倒入少量95％的乙醇， 慢慢转动容器，使其分布均匀，然后点 火燃烧直熄灭 4）无保留价值的物品可直接在焚烧炉内焚毁
1、热力消毒灭菌法-----干热法
1）燃烧法 注意事项: 1）注意安全：操作时远离易燃、易爆物品， 如氧气、乙醚、汽油等。 2）在燃烧过程中不能添加乙醇。 3）贵重物品、锐利刀剪禁用。
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
4）压力蒸汽灭菌法
定义：利用高压下的高温饱和蒸汽杀灭所有的微生物 及其芽孢。灭菌方法可靠，临床使用最 广的一种方法。 特点：是热力消毒灭菌中效果最为可靠、是物理灭菌 法中最有效的方法。 适用：耐高温、高压、耐潮湿物品的灭菌。如各类器 械、敷料、搪瓷、橡胶、玻璃制品及溶液、 药品、细菌培养等。
煮沸消毒锅
其温度不能杀灭芽胞，只能作消毒使用。
注意事项
1、煮沸消毒前，应将物品刷洗干净，空腔导管须 先在腔内灌水； 2、玻璃器皿应用纱布包裹好后，从冷水或温水中 放入，水沸后计时，消毒时间为10-15min； 3、橡胶制品用纱布包好，待水沸后放入，消毒时 间为5min； 4、有轴节的器械或带盖的容器应将轴节或盖打开 再放入水中，物品不宜放置 过多，大小相同的碗、盆不能 重叠，要保证物品各面都与 水相接触；
1、热力消毒灭菌法-----干热法
1）燃烧法 定义：是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。 特点：简单、迅速、彻底 适用：1）无保留价值的污染物品，如废弃物、病 理标本、带脓性分泌物的敷料和纸张等 2）某些金属器械或搪瓷类物品急用时也可 用燃烧法(锐利刀剪禁用此法以免锋刃2、光照消毒法
(2)紫外线灯管消毒法
3）注意事项 3、由于紫外线的穿透力差，消毒物品时应将物 品摊开或挂起，并定时翻动，使其表面受到直接 照射； 4、紫外线消毒的适宜温度为20℃～40℃，适宜 湿度为40％～60％； 5、紫外线的消毒时间须从灯亮5～7min后开始 计时，照射后病室要通风换气。关灯后如需再开 启，应间歇3～4min。
注意事项
5、如煮沸途中加入物品，则在再次水沸后开 始计时。 6、水的沸点受气压影响，海拔高的地区气压 低，水的沸点也低，需适当延长消毒时间。 海拔每增高300m，消毒时间延长2min； 7、较小的物品用纱布包好沉入水中。 8、尖锐器械不宜用此方法，以免受热变钝。 9、消毒后应用无菌器械将物品及时取出，置 于无菌容器内。
紫外线强度分析仪
紫外线强度监测仪
使用方法：将其放置在灯下照射，观察指针所指刻度，若强 度低于70μW/cm2时应更换灯管。
3）臭氧灭菌消毒
臭氧发生器
臭氧灭菌灯
2、光照消毒法
（3）臭氧灭菌灯消毒法
臭氧在常温下为强氧化剂，稳定性极差，易爆炸， 主要依靠强大的氧化作用杀菌，可杀灭细菌繁殖体、 病毒、芽孢、真菌，并可破坏肉毒杆菌毒素。（补 充） 灭菌灯内装有臭氧发生管，在电场作用下，可 将空气中的氧气转换成高纯臭氧。主要用于空气、 物品表面等的消毒。 方法：关闭门窗，人员离开，打开开关20分钟， （杀灭芽孢40分钟）。消毒后30分钟，人方可进入。
消 毒 灭 菌 方 法
光照消毒法 微波消毒灭菌 电离辐射灭菌法 过滤除菌
压力蒸汽灭菌 日光曝晒 紫外线灯管消毒 臭氧灭菌灯灭菌
化 学 消 毒 灭 菌 法
浸泡法 擦拭法 喷雾法 熏蒸法
注：每一种消毒灭菌的方法、特点、适 用物品、注意事项都是掌握的重点。
（一）物理消毒灭菌法 （physical disinfection sterilization）是利用 物理因素作用于病原微生物，将之清除或杀灭，常 用的方法有热力、光照、辐射、过滤除菌等。 1．热力消毒灭菌法(heat disinfection sterilization) 主要利用热力破坏微生物的蛋白 质、核酸、细胞壁和细胞膜，从而导致其死亡，是 应用最早、效果可靠、使用最广泛的方法。 分类： 干热法（燃烧法、干烤法）：由空气传导，传热慢。 湿热法 （煮沸消毒法、压力蒸汽灭菌法）： 由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强。
厚度应小于2cm,并根据紫外线的辐照强度确定水流速度。
2、光照消毒法
(2)紫外线灯管消毒法
3）注意事项 1、由于紫外线辐照能量低，穿透力弱，应经常 保持灯管清洁，灯管表面至少每2周用乙醇棉球 擦拭一次 2、由于紫外线对人的眼睛和皮肤有刺激作用， 直接照射30s可损伤角膜或致皮炎，同时，照射 过程中产生的臭氧对人体亦不利，故照射时人应 离开房间，必要时戴防护镜，肢体用被单遮盖。
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
2）流通蒸汽消毒法
方法：在常压下用100℃的左右的蒸汽消毒,从 产生蒸汽后开始计时,15~30分钟即可达到消毒 效果,常用于食具、 便器的消毒。
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
3）低温蒸汽消毒法
将蒸汽输入预先抽空的压力蒸汽灭菌器内， 并控制其温度在73~80℃，持续10~15分钟进行 消毒，主要用于不耐高热的物品，如内镜、塑 料制品和麻醉面罩的消毒。可杀灭大多数致病 微生物。
2、光照消毒法
又称辐射消毒，主要利用紫外线的杀菌作 用，使菌体蛋白光解、变性而导致细菌死 亡。 （1）日光暴晒法 （2）紫外线灯管消毒法
2、光照消毒法
（1）日光暴晒法
日光有热、干燥和紫外线的作用，有一定杀菌力 常用于：床垫、毛毯、衣服、书籍等物品的消毒 方法：是将物品放在直射阳 光下暴晒6h，定时翻动，使物 品各面均能受到日光照射，达 到消毒的目的
4）压力蒸汽灭菌法
注意事项
1、器械或物品灭菌前必须清洗干净并擦干或晾干 2、灭菌包的体积不宜过大，用下排气式压力蒸汽灭 菌器的物品包不大于30cm×30cm×25cm，用预真空 压力蒸汽灭菌器的物品包不大于30cm×30cm×50cm。 3、灭菌包放置合理，各包之间留有空隙（便于蒸汽 流通、渗入包中央，排气时蒸汽迅速排除，保持物 品干燥）布类物品放于金属、搪瓷类物品之上，以 免蒸汽遇冷凝成水珠，使包布受潮，影响灭菌效果
易被灰尘微粒吸收而影响效果），关闭门窗，人员停止走动， 每10m2安装30W紫外线灯管一支，有效距离不超过2m，照射 时间为30～60分钟；
2、物品消毒：消毒时应将物品摊开或挂起以减少遮挡
（紫外线穿透力差），有效距离为25㎝～60cm，照射时间为 20～30分钟。
3、液体消毒：可采用水内照射法或水外照射法，水层
普通移动紫外 线灯消毒车
C波段移动紫 外线灯消毒车
家用紫外消 毒线灯
监测：
1）紫外线强度测定仪：将其放置在紫外线 灯管1m处中央位置，开灯照射5min，仪表所 示数值即为紫外线强度值，若强度低于 70μW/cm2时应更换灯管。 2）紫外线光敏涂料指示卡：将指示卡置于 离紫外线灯管1m处中央位置，照射1min，根 据指示卡颜色程度与标准色比较，可测知紫 外线照射强度是否达到要求。 3）建立使用时间记录卡：凡使用时间超过 1000h需更换灯管。
（三）灭菌(sterilization)： 用物理或化学方法杀灭全部微生物，包括致病和 非致病的微生物，以及细菌的芽胞的过程。
二、消毒灭菌的方法 消毒灭菌方法有两大类： 物理消毒灭菌法和化学消毒灭菌法
燃烧法 物 理 消 毒 灭 菌 法 热力消毒灭菌
干热
湿热
干烤法 煮沸消毒法
手提式压力蒸汽灭菌器 卧式压力蒸汽灭菌器 预真空压力蒸汽灭菌器
消毒后
消毒前
灭菌前
灭菌后
B-D试验前
B-D试验后
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
压力蒸汽灭菌的效果监测
3、生物监测法：是最可靠的监测方法，利用对热 耐受力较强的非致病性嗜热脂肪杆菌芽孢指示管， 使用时将10片菌片分别放于灭菌器四角及中央， 待灭菌完毕，用无菌镊取出，再放入培养基内， 在56℃温箱中培养48小时至一周，若全部菌片均 无细菌生长则表示灭菌合格。
消毒时间 15～30min
1）手提式压力蒸汽灭 菌器： 压力：103kPa，时 间：15-30分钟，温 度：121~126℃
手提式压力 蒸汽灭菌器
2）卧式压力蒸汽 灭菌器： 压力： 103~137kPa，时 间：15~30分钟， 温度121~126℃
卧式压力 蒸汽灭菌器
预真空压力蒸汽灭菌器
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
2、光照消毒法
(2)紫外线灯管消毒法
紫外线属电磁波辐射，根据波长可分为A波、B波、 C波和真空紫外线。消毒使用的是C波紫外线，其 波长范围为200 nm～275nm，杀菌作用最强的波 段为250 nm ～270nm。紫外线可杀灭多种微生物， 包括杆菌、病毒、真菌、细菌繁殖体、芽孢等。