生理生化实验报告

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生理性生化实验报告(3篇)

生理性生化实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应原理;2. 掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法;3. 了解生理生化反应在鉴别细菌中的意义。

二、实验原理通过测定微生物校内某些酶类的有无、对某些糖的利用能力、代谢产物的类型等来研究微生物的多样性。

某些细菌产生色氨酸酶,能分解培养基蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚,吲哚与对二甲基氨基苯甲醛发生反应,形成红色的玫瑰吲哚,为吲哚反应阳性。

微生物发酵葡萄糖成丙酮酸,2分子丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。

乙酰甲基甲醇在碱性条件下与肌酸类物质反应,生成红色物质,为甲基红反应阳性。

三、实验方法1. 吲哚试验:将细菌接种于含有色氨酸的培养基中,加入吲哚试剂,观察颜色变化。

2. 甲基红试验:将细菌接种于含有葡萄糖的培养基中,加入甲基红试剂,观察颜色变化。

四、实验结果1. 吲哚试验:接种了大肠杆菌的试管在加入乙醚和吲哚试剂后,能在乙醚和液体培养基的交界面上产生红色环状物质,大肠杆菌的吲哚试验显阳性。

2. 甲基红试验:大肠杆菌甲基红试验阳性,即大肠杆菌在培养期仍维持酸性pH。

五、实验分析1. 吲哚试验失败原因分析:可能是因为乙醚加量太少,影响实验现象的观察;另一个可能的原因是大肠杆菌菌种有问题。

2. 甲基红试验结果分析:大肠杆菌在培养后仍能维持酸性,而产气杆菌则转化为非酸性末端产物。

六、实验结论1. 通过本实验,我们了解了细菌生理生化反应原理;2. 掌握了细菌鉴定中常见的生理生化反应方法;3. 认识到生理生化反应在鉴别细菌中的意义。

七、实验注意事项1. 实验过程中要严格按照操作规程进行,避免污染;2. 注意观察实验现象,记录实验数据;3. 分析实验结果,找出实验失败的原因。

第2篇一、实验目的1. 了解生理性生化实验的基本原理和方法。

2. 掌握常用的生理性生化指标及其检测方法。

3. 通过实验,学会使用生理性生化检测仪器,提高实验技能。

二、实验原理生理性生化实验是研究生物体内各种生化反应及其代谢过程的重要手段。

玉米生理生化实验报告

玉米生理生化实验报告

一、实验目的1. 探究玉米在不同生长阶段的主要生理生化特性。

2. 分析玉米光合作用、呼吸作用、水分利用效率等生理指标。

3. 通过实验了解玉米种子萌发、幼苗生长及植株发育过程中的生理生化变化。

二、实验材料与方法1. 实验材料:玉米种子(品种:郑单958)、生长培养基、蒸馏水、NaOH溶液、碘液、斐林试剂等。

2. 实验方法:(1)种子萌发实验:将玉米种子浸泡在蒸馏水中,置于恒温培养箱中,定期观察种子萌发情况,并记录萌发率。

(2)幼苗生长实验:将萌发的玉米幼苗移栽至生长培养基中,定期测量幼苗株高、叶面积等生长指标。

(3)生理生化指标测定:a. 光合作用:利用光合仪测定玉米叶片的光合速率、蒸腾速率等指标。

b. 呼吸作用:利用呼吸仪测定玉米叶片的呼吸速率。

c. 水分利用效率:通过测定玉米植株的水分含量和光合速率,计算水分利用效率。

d. 植物激素含量:利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定玉米叶片中的生长素、细胞分裂素等植物激素含量。

e. 酶活性测定:利用比色法测定玉米叶片中过氧化物酶、超氧化物歧化酶等酶活性。

三、实验结果与分析1. 种子萌发实验:- 种子萌发率随浸泡时间延长而增加,浸泡时间为24小时时,种子萌发率最高。

- 种子萌发过程中,呼吸速率和水分含量逐渐增加,表明种子在萌发过程中需要消耗大量能量和水分。

2. 幼苗生长实验:- 玉米幼苗在生长培养基中生长良好,株高、叶面积等生长指标随培养时间延长而逐渐增加。

- 幼苗生长过程中,叶片颜色逐渐由黄绿色转变为绿色,表明光合作用逐渐增强。

3. 生理生化指标测定:- 光合作用:玉米叶片的光合速率和蒸腾速率随光照强度增加而增加,表明玉米具有较强的光合作用能力。

- 呼吸作用:玉米叶片的呼吸速率随温度升高而增加,表明玉米在较高温度下呼吸作用较强。

- 水分利用效率:玉米水分利用效率较高,表明玉米具有较强的水分利用能力。

- 植物激素含量:玉米叶片中生长素和细胞分裂素含量较高,表明玉米具有较强的生长调节能力。

实验十 微生物鉴定中常用的生理生化试验

实验十   微生物鉴定中常用的生理生化试验

实验十微生物鉴定中常用的生理生化试验摘要本次实验包括大分子水解试验、糖发酵试验和IMViC试验(吲哚、甲基红试验)三类试验,根据要求本实验使用六种培养基分别对所需菌种组合进行了大约24h的培养,之后按照实验要求进行各个试验。

最后观察到了实验现象,了解了所用菌种鉴别的方法和原则。

关键词微生物鉴定;生理生化试验;大分子水解试验;糖发酵试验;IMViC试验前言类的微生物有着不同的代谢类型,例如对一些物质的分解能力及分解代谢的产物的不同反映出他们不同的生理特征,这些特征可以用来对不同种类微生物进行鉴定和分类。

因此可以对微生物的不同生化反应进行试验,以此证明微生物生理特征的多样性,证明微生物分类鉴别的依据。

生理生化试验相比其他鉴别方法而言相对简便、快捷、经济实用,在一般的实验室中都可以进行,因此在微生物种类的初步鉴别中被广泛使用。

一、实验目的1、大分子水解试验证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同,从而说明不同微生物有着不同的酶系统,掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。

2、糖发酵试验了解糖发酵的原理和在肠细菌鉴定中的重要作用,掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。

3、IMViC试验了解IMViC的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。

二、实验原理在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢。

代谢过程主要是酶促反应过程。

具有酶功能的蛋白质多数在细胞内,称为胞内酶(endoenzymes).许多细菌产生胞外酶(exoenzymes),这些酶从细胞中释放出来,以催化细胞外的化学反应。

各种微生物具有不同的酶系统,所以它们能利用的底物不同,或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同,因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌,尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中,生理生化试验占有重要的地位。

具体的原理如下:1、大分子水解试验:微生物对大分子如淀粉、蛋白质和油脂不能直接利用,必须依靠产生的胞外酶将大分子物质分解后才能被微生物吸收利用。

生化实验报告

生化实验报告

生化实验报告引言:生化实验是现代生物科学研究中不可或缺的一部分。

通过生化实验,可以深入了解生物体的分子组成和功能,揭示生物体的生理过程和相关疾病的发生机制。

本报告将就我们进行的一系列生化实验结果进行总结和分析。

实验一:蛋白质浓度测定实验蛋白质是生物体的重要组成部分,也是许多生理过程的关键调节因子。

通过本实验,我们采用比色法测定了不同样本中的蛋白质含量,并得出以下结论:1. 样本A的蛋白质浓度明显高于样本B,表明样本A可能含有更多的蛋白质。

2. 样本C的蛋白质浓度最低,可能是由于样本C中存在其他干扰物质,影响了测定结果。

实验二:酶活性测定实验酶是生物体内参与代谢反应的重要分子,其活性的变化可以反映生物体的生理状态。

本实验中,我们通过测定不同条件下酶的活性,得出以下结论:1. 酶活性随着温度的升高呈先增加后下降的趋势,说明酶在适宜温度下具有最高的活性。

2. pH值的变化对酶活性也有一定影响,酶活性在酸性和碱性条件下均降低,表明酶对于特定pH值有一定的适应性。

3. 离子浓度的改变可以显著影响酶的活性,高浓度的阳离子对酶活性的抑制效果较大。

实验三:DNA提取实验DNA是生物体内存储遗传信息的重要分子,在基因研究和生物技术中应用广泛。

本实验中,我们采用了几种常见的DNA提取方法,得出以下结论:1. 不同提取方法对于不同样本的DNA提取效果有所差异,需要根据实际情况选择合适的方法。

2. 样本中其他杂质的存在会干扰DNA的提取,需要进行适当的纯化步骤以提高提取纯度。

3. 所得到的DNA质量可以通过比色法或荧光法进行检测,得出相对准确的结果。

实验四:酸碱滴定实验酸碱滴定是一种常用的分析方法,在酸碱度测定和沉淀反应等方面有广泛应用。

本实验中,我们进行了一系列的酸碱滴定实验,得出以下结论:1. 强酸和强碱的滴定过程呈现出明显的酸碱中和点,通过计算可以得到溶液中目标物质的浓度。

2. 在滴定过程中,我们需要通过指示剂的颜色变化来判断滴定终点,需注意颜色的变化程度和持续时间。

生化反应鉴定实验报告(3篇)

生化反应鉴定实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解生化反应在微生物鉴定中的重要性。

2. 掌握常见生化反应的原理和方法。

3. 通过实验,对给定的微生物进行鉴定。

二、实验原理生化反应是指微生物在生长过程中,通过酶的催化作用,将营养物质转化为自身所需的物质,同时产生一些代谢产物。

这些代谢产物可以用来鉴定微生物的种类。

常见的生化反应包括糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验等。

三、实验材料与仪器1. 材料:- 菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。

- 培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基(葡萄糖、乳糖或蔗糖)、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂等。

- 试剂:卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水等。

- 仪器:酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管等。

2. 仪器:- 酒精灯- 接种环- 超净工作台- 恒温培养箱- 高压灭菌锅- 试管- 移液枪- 滴管四、实验方法1. 菌种培养:将菌种接种于葡萄糖蛋白胨水培养基,置于恒温培养箱中培养24小时。

2. 糖发酵试验:- 将培养好的菌种接种于糖发酵培养基(葡萄糖、乳糖或蔗糖),置于恒温培养箱中培养24小时。

- 观察培养基颜色变化,记录发酵结果。

3. 吲哚试验:- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基,置于恒温培养箱中培养24小时。

- 加入吲哚试剂,观察颜色变化,记录结果。

4. 甲基红试验:- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基,置于恒温培养箱中培养24小时。

- 加入甲基红试剂,观察颜色变化,记录结果。

五、实验结果与分析1. 糖发酵试验:- 大肠杆菌:发酵葡萄糖、乳糖,不发酵蔗糖。

- 金黄色葡萄球菌:不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。

- 枯草芽孢杆菌:不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。

- 变形杆菌:发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。

2. 吲哚试验:- 大肠杆菌:吲哚试验阳性。

- 金黄色葡萄球菌:吲哚试验阴性。

- 枯草芽孢杆菌:吲哚试验阴性。

- 变形杆菌:吲哚试验阳性。

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告一、引言在微生物学中,鉴定细菌的方法有很多种,其中生理生化反应实验是最常用的一种方法之一。

生理生化反应实验可以通过观察细菌对不同物质的代谢情况来确定其种类和特性。

本报告将介绍细菌鉴定中常用的生理生化反应实验。

二、目的本报告旨在介绍常用的生理生化反应实验,包括试剂、操作步骤、结果解释等内容,以帮助读者更好地了解和掌握这些实验。

三、材料与方法1. 大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)培养基;2. 硝酸盐还原试剂;3. 糖类试剂:葡萄糖、果糖、半乳糖;4. 氨基酸试剂:天冬氨酸、赖氨酸;5. 酶试剂:淀粉酶、蛋白酶;6. 无水硫酸铜溶液。

四、实验步骤及结果解释1. 硝酸盐还原试验步骤:(1)取一支细菌液体培养物,加入硝酸盐还原试剂;(2)观察液体颜色变化。

结果解释:若液体变为红色,则表示细菌能够还原硝酸盐为亚硝酸盐,是亚硝化菌。

若无颜色变化,则表示细菌不能还原硝酸盐。

2. 糖类代谢试验步骤:(1)取三个试管,分别加入葡萄糖、果糖、半乳糖;(2)加入相同量的细菌液体培养物;(3)观察试管内气泡产生情况。

结果解释:若在葡萄糖试管内产生了气泡,则表示该细菌能够利用葡萄糖进行发酵代谢;若在果糖或半乳糖试管内产生了气泡,则表示该细菌能够利用果糖或半乳糖进行发酵代谢。

3. 氨基酸代谢试验步骤:(1)取两个试管,分别加入天冬氨酸和赖氨酸;(2)加入相同量的细菌液体培养物;(3)观察试管内气泡产生情况。

结果解释:若在天冬氨酸试管内产生了气泡,则表示该细菌能够利用天冬氨酸进行代谢;若在赖氨酸试管内产生了气泡,则表示该细菌能够利用赖氨酸进行代谢。

4. 酶代谢试验步骤:(1)取两个试管,分别加入淀粉和蛋白质;(2)加入相同量的细菌液体培养物;(3)观察试管内颜色变化情况。

结果解释:若在淀粉试管内出现了透明带,则表示该细菌能够分泌淀粉酶;若在蛋白质试管内出现了变色,则表示该细菌能够分泌蛋白酶。

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告细菌鉴定是微生物学中的一个重要分支,它是通过对细菌的形态、生理生化反应、生长特性等方面进行分析,来确定细菌种类的过程。

在细菌鉴定中,生理生化反应实验是一种常用的方法,它可以通过观察细菌在不同条件下的生长情况,来确定细菌的种类。

本文将介绍几种常用的生理生化反应实验。

1. 氧气需求实验氧气需求实验是一种常用的生理生化反应实验,它可以用来确定细菌的氧气需求量。

在这个实验中,我们需要将细菌接种到含有不同氧气浓度的培养基中,然后观察细菌的生长情况。

如果细菌只能在氧气充足的条件下生长,那么它就是一种需氧菌;如果细菌只能在氧气缺乏的条件下生长,那么它就是一种厌氧菌;如果细菌既能在氧气充足的条件下生长,也能在氧气缺乏的条件下生长,那么它就是一种兼性厌氧菌。

2. 糖类发酵实验糖类发酵实验是一种常用的生理生化反应实验,它可以用来确定细菌对不同糖类的发酵能力。

在这个实验中,我们需要将细菌接种到含有不同糖类的培养基中,然后观察培养基的酸碱度变化。

如果培养基的酸碱度发生了变化,那么说明细菌对这种糖类进行了发酵。

通过这个实验,我们可以确定细菌对哪些糖类具有发酵能力,从而进一步确定细菌的种类。

3. 氧化还原实验氧化还原实验是一种常用的生理生化反应实验,它可以用来确定细菌的氧化还原能力。

在这个实验中,我们需要将细菌接种到含有不同氧化还原剂的培养基中,然后观察培养基的颜色变化。

如果培养基的颜色发生了变化,那么说明细菌对这种氧化还原剂具有反应能力。

通过这个实验,我们可以确定细菌的氧化还原能力,从而进一步确定细菌的种类。

4. 酶活性实验酶活性实验是一种常用的生理生化反应实验,它可以用来确定细菌的酶活性。

在这个实验中,我们需要将细菌接种到含有不同底物的培养基中,然后观察底物的变化情况。

如果底物发生了变化,那么说明细菌对这种底物具有酶活性。

通过这个实验,我们可以确定细菌的酶活性,从而进一步确定细菌的种类。

微生物生理生化实验报告

微生物生理生化实验报告

实验十一IMViC与硫化氢试验指导教师:李海花周六第三组学号:060122010041 姓名:宋天佳专业:2010级水产养殖学号:030212010025 姓名:皇昊专业:2010级化学1班学号:060122010055 姓名:续鹏辉专业:2010级水产养殖一、实验目的了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。

二、实验原理IMViC是I-吲哚(indol test)、M-甲基红(methyl red test)、V-伏-普(Voges-Prolauer test)和C-柠檬酸盐(citrate test)4个实验的缩写。

这4个实验主要用来快速鉴别产气杆菌与大肠杆菌,多用于水的细菌检查。

大肠杆菌虽非致病菌,但在饮用水时若超过一定指标,则表示水质受粪便污染。

产气杆菌也广泛存在于自然界中,因此检查水是要将两者分开。

硫化氢(H2S)实验也是检查肠道细菌的生化实验。

(一)吲哚试验(indol test)吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生,有些细菌分解培养基中的色氨酸生成吲哚(靛基质),经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用,生成玫瑰吲哚而呈红色。

色氨酸+H2O色氨酸酶吲哚+NH3+丙酮酸吲哚+ 对二甲基氨基苯甲醛玫瑰吲哚(红色)只有部分细菌能产生色氨酸酶,从而具有分解色氨酸产生吲哚的能力,因此吲哚实验可以作为一个生化检测指标。

大肠杆菌产色氨酸酶实验结果为阳性(红色),产气肠杆菌不产色氨酸酶实验结果为阴性(无色)。

(二)M-甲基红试验(methyl red test)用来检测由葡萄糖产生的有机酸,如甲酸、乙酸、乳酸等。

细菌代谢糖产生酸使培养基变酸(pH下降),使甲基红指示剂变色:橘黄色(pH6.3)红色(pH4.2)尽管,所有肠道微生物都能发酵葡萄糖产生有机酸,但大肠杆菌和产气肠杆菌有区别:两者在培养早期产生有机酸,但大肠杆菌在培养后仍能维持酸性pH4,而产气肠杆菌则将有机酸转化为非酸性产物,使pH上升至6左右。

微生物生理生化反应实验报告

微生物生理生化反应实验报告

微生物的生理生化反应一、实验目的1.掌握细菌鉴定中常用生理生化反应的测定方法。

2.了解细菌代谢类型的多样性。

3.了解细菌生长现象及代谢产物在鉴别中的意义。

4.学习接种技术。

二、实验原理在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢,代谢过程主要是酶促反应过程,由于各种微生物具有不同的酶系统,所以他们能利用的底物不同,或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同,因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌。

1.糖发酵试验:糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸,醋酸,丙酸等)和气体(如氢气,甲烷,二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气.例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气。

产酸后再加入溴甲酚紫指示剂后会使溶液呈黄色,且杜氏小管中会收集到一部分气体。

若细菌不能使糖产酸产气,则最后溶液为指示剂的紫色,且杜氏小管中无气体。

2.甲基红试验(MR):某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸,后者进而被分解产生甲酸,乙酸和乳酸等多种有机酸,培养基就会变酸,使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色,即甲基红反应。

大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性。

3.伏-普试验(VP):某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成非酸性或中性末端产物,某些细菌产生丙酮酸,再将丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇,在碱性条件下被氧化成二乙酰,二乙酰与胍基作用,生成红色化合物,为阳性。

4.靛基质(吲哚)试验:是用来检测吲哚的产生,在蛋白胨培养基中,若细菌能产生色氨酸酶,则可将蛋白胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚,吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。

但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力,所以吲哚实验可以作为一个生物化学检测的指标。

大肠杆菌吲哚反应阳性,产气肠杆菌为阴性。

5.硫化氢实验:某些细菌分解含硫的氨基酸,产生硫化氢,硫酸铵亚铁等铁盐可与硫化氢反应生成不溶性硫化亚铁之黑色沉淀,为硫化氢实验阳性。

细菌生理生化实验报告

细菌生理生化实验报告

细菌生理生化实验报告细菌生理生化实验报告引言细菌是微生物界中最为广泛存在的一类生物,其在自然界中扮演着重要的角色。

为了更好地了解细菌的生理生化特性,我们进行了一系列的实验研究。

本报告将详细介绍实验的目的、方法、结果和讨论。

实验目的本次实验的目的是通过对细菌的生理生化特性进行观察和分析,探究其对环境的适应能力以及与人类的关系。

实验方法1. 细菌培养与分离:我们从自然环境中采集了多个样品,经过适当的稀释后,分别在琼脂平板上进行涂布,培养出各自的菌落。

2. 形态观察:通过显微镜观察细菌的形态特征,包括形状、大小、颜色等。

3. 静态培养:将细菌接种到含有特定营养物质的培养基中,观察其生长情况。

4. 生化反应:利用生化试剂对细菌进行一系列的生化反应测试,包括氧化酶试验、碳水化合物发酵试验等。

5. 抗生素敏感性测试:通过纸片扩散法,测试细菌对不同抗生素的敏感性。

实验结果1. 形态观察:我们观察到不同细菌的形态各异,有的呈球形,有的呈棒状,还有的呈螺旋形。

大小也有差异,从微小的球菌到较长的杆菌都有。

2. 静态培养:在不同培养基上,我们观察到细菌的生长情况有所差异。

有些细菌在富含葡萄糖的培养基上生长迅速,而在其他培养基上生长较慢。

3. 生化反应:细菌的生化反应也表现出多样性。

通过氧化酶试验,我们发现有些细菌能产生氧化酶,而有些则不具备这一能力。

碳水化合物发酵试验结果也显示了不同细菌的差异。

4. 抗生素敏感性测试:我们测试了多种常用抗生素对不同细菌的敏感性。

结果显示,不同细菌对抗生素的敏感性存在差异,有些细菌对某些抗生素表现出耐药性。

讨论通过本次实验,我们对细菌的生理生化特性有了一定的了解。

细菌的形态、生长特性、生化反应以及抗生素敏感性都表现出多样性。

这种多样性使得细菌能够适应不同的环境,并在自然界中发挥重要的作用。

然而,细菌也与人类密切相关。

有些细菌是人类的益生菌,可以帮助我们维持肠道健康;而有些细菌则是致病菌,会引发各种疾病。

生物生化实验报告

生物生化实验报告

一、实验目的1. 探究不同微生物对有机大分子物质的水解能力,分析其酶系统的差异。

2. 掌握微生物大分子物质水解试验的原理和方法。

3. 了解糖发酵的原理及其在肠道细菌鉴定中的重要作用。

4. 学习通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。

5. 理解吲哚和甲基红试验的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。

二、实验原理微生物的生理生化反应是微生物生命活动的重要组成部分。

微生物通过酶促反应将有机大分子物质分解为小分子物质,以获取能量和营养。

不同微生物具有不同的酶系统,对底物的水解能力存在差异。

糖发酵试验和吲哚、甲基红试验是常用的微生物鉴定方法。

三、实验仪器与试剂菌种:枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌培养基:- 固体淀粉培养基- 固体油脂培养基- 葡萄糖发酵培养基- 乳糖发酵培养基- 蛋白胨水培养基- 葡萄糖蛋白胨水培养基试剂:- 卢戈氏碘液- 乙醚- 吲哚试剂- 甲基红试剂- 蒸馏水仪器:- 酒精灯- 接种针- 培养皿- 试管- 试管架- 烧杯- 量筒- 德汉氏小管四、实验方法1. 菌种接种:将待测菌种接种于相应的培养基上,置于适宜的条件下培养。

2. 糖发酵试验:将培养好的菌液接种于葡萄糖发酵培养基和乳糖发酵培养基中,观察培养基颜色变化。

3. 吲哚试验:将培养好的菌液加入吲哚试剂,观察颜色变化。

4. 甲基红试验:将培养好的菌液加入甲基红试剂,观察颜色变化。

五、实验结果与分析1. 糖发酵试验:- 枯草芽孢杆菌:葡萄糖发酵培养基变黄,乳糖发酵培养基不变色。

- 大肠杆菌:葡萄糖发酵培养基变黄,乳糖发酵培养基变红。

- 金黄色葡萄球菌:葡萄糖发酵培养基不变色,乳糖发酵培养基变红。

- 铜绿假单胞菌:葡萄糖发酵培养基不变色,乳糖发酵培养基变红。

- 普通变形杆菌:葡萄糖发酵培养基变黄,乳糖发酵培养基变红。

- 产气肠杆菌:葡萄糖发酵培养基变黄,乳糖发酵培养基变红。

2. 吲哚试验:- 枯草芽孢杆菌:呈阳性反应。

生理生化实验报告

生理生化实验报告

生理生化实验报告生理生化实验报告引言:生理生化实验是一种重要的科学研究手段,通过对生物体内部的生理和生化过程进行观察和分析,可以揭示生物体的结构和功能,为疾病的预防和治疗提供科学依据。

本实验旨在探究人体血液中的生化指标,并分析其与健康状态的关系。

实验一:血糖测定血糖是人体内最主要的能量来源之一,血糖水平的异常与多种疾病的发生密切相关。

本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。

首先,取一定量的被试者血液样本,将其与试剂混合后,通过光学仪器测定样品的吸光度,进而计算出血糖浓度。

实验结果显示,被试者A的血糖浓度为5.2mmol/L,而被试者B的血糖浓度为7.8mmol/L。

根据世界卫生组织的标准,正常血糖浓度应在3.9-6.1mmol/L之间。

因此,被试者A的血糖水平正常,而被试者B的血糖略高,可能存在潜在的糖尿病风险。

实验二:血脂测定血脂是指血液中的脂类物质,包括胆固醇和甘油三酯。

正常的血脂水平对于维持心血管健康至关重要。

本实验采用酶法测定血清中的总胆固醇和甘油三酯含量。

实验结果显示,被试者A的总胆固醇为4.5mmol/L,甘油三酯为1.2mmol/L;被试者B的总胆固醇为6.2mmol/L,甘油三酯为2.5mmol/L。

根据世界卫生组织的标准,正常总胆固醇应低于5.2mmol/L,甘油三酯应低于1.7mmol/L。

因此,被试者A的血脂水平正常,而被试者B的血脂偏高,可能存在心血管疾病的风险。

实验三:血红蛋白测定血红蛋白是红细胞中的重要蛋白质,负责携带氧气和二氧化碳。

血红蛋白含量的异常与贫血等疾病密切相关。

本实验采用比色法测定血红蛋白含量。

实验结果显示,被试者A的血红蛋白含量为130g/L,而被试者B的血红蛋白含量为110g/L。

根据世界卫生组织的标准,成年男性的正常血红蛋白范围为130-175g/L,女性为120-150g/L。

因此,被试者A的血红蛋白水平正常,而被试者B的血红蛋白偏低,可能存在贫血的风险。

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告背景细菌鉴定是微生物学中的一项重要任务,通过对细菌的形态、生理特征和生化反应进行分析,可以确定细菌的种属和特性。

生理生化反应实验是其中的关键步骤,通过观察细菌对不同物质的代谢情况,可以获取有关其代谢能力、营养需求和产物生成等信息。

本报告旨在介绍常用的细菌生理生化反应实验方法,并分析实验结果以提供准确的鉴定和分类建议。

分析1. 嗜热/嗜冷性嗜热/嗜冷性是指细菌对温度的适应能力。

常用实验方法包括在不同温度条件下进行培养观察,并记录生长情况。

根据结果可将细菌分为嗜热菌(适宜高温)、嗜冷菌(适宜低温)或中温菌(适宜中等温度)。

2. 好氧/厌氧性好氧/厌氧性是指细菌对氧气需求的差异。

常用实验方法包括在含氧和不含氧的培养条件下观察细菌生长情况。

根据结果可将细菌分为好氧菌(需氧)、厌氧菌(不需氧)或兼性厌氧菌(能在有或无氧的条件下生长)。

3. 革兰氏染色革兰氏染色是观察细菌壁结构的常用方法。

该实验通过处理细菌样品,并使用革兰染色剂将其染色,然后观察其颜色变化。

根据结果可将细菌分为革兰阳性(蓝紫色)或革兰阴性(红粉色)。

4. 淀粉酶活性淀粉酶活性实验用于检测细菌对淀粉的降解能力。

该实验将待测细菌培养于含淀粉的琼脂平板上,经过一段时间后,用碘液滴定并观察是否出现透明圈。

透明圈表示淀粉被降解且产生了淀粉酶。

5. 水解酪蛋白活性水解酪蛋白活性实验用于检测细菌对酪蛋白的降解能力。

该实验将待测细菌培养于含酪蛋白的琼脂平板上,经过一段时间后,用盖有硫酸铜的试管放置在平板上,观察是否出现由蓝色转变为紫色的反应。

颜色变化表示细菌产生了水解酪蛋白酶。

6. 氧化/发酵代谢氧化/发酵代谢实验用于检测细菌在代谢过程中产生的产物。

该实验将待测细菌接种于含有碳源的培养基中,并根据pH指示剂颜色变化观察细菌是通过氧化代谢还是发酵代谢产生能量。

氧化代谢通常伴随着pH值升高,培养基呈碱性;而发酵代谢则通常伴随着pH值降低,培养基呈酸性。

昆虫生理生化实验报告

昆虫生理生化实验报告

一、实验目的通过本次实验,掌握昆虫生理生化实验的基本操作方法,了解昆虫生理生化特性,进一步理解昆虫的生理功能及其与外界环境的关系。

二、实验原理昆虫生理生化实验是研究昆虫生理现象及其生化过程的重要手段。

通过实验,我们可以了解昆虫的呼吸作用、能量代谢、消化吸收、激素调节等方面的生理特性,从而揭示昆虫的生命活动规律。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:家蚕幼虫、家蝇幼虫、果蝇、显微镜、离心机、分光光度计、试管、烧杯、酒精灯、蒸馏水等。

2. 实验仪器:显微镜、离心机、分光光度计、试管、烧杯、酒精灯、蒸馏水等。

四、实验方法1. 呼吸作用实验(1)取一定数量的家蚕幼虫,置于烧杯中,加入适量蒸馏水,观察其呼吸情况。

(2)记录家蚕幼虫的呼吸频率、呼吸幅度等生理指标。

(3)通过比较不同种类、不同生长阶段的昆虫呼吸指标,分析其呼吸作用的特点。

2. 能量代谢实验(1)取一定数量的家蝇幼虫,置于烧杯中,加入适量蒸馏水,观察其能量代谢情况。

(2)记录家蝇幼虫的能量消耗速率、能量转化效率等生理指标。

(3)通过比较不同种类、不同生长阶段的昆虫能量代谢指标,分析其能量代谢的特点。

3. 消化吸收实验(1)取一定数量的家蚕幼虫,观察其消化道的形态结构。

(2)将家蚕幼虫置于烧杯中,加入适量蒸馏水,观察其消化吸收情况。

(3)记录家蚕幼虫的消化时间、消化效率等生理指标。

4. 激素调节实验(1)取一定数量的果蝇,观察其生长发育过程。

(2)在果蝇生长发育的不同阶段,加入适量的激素,观察其生长发育的变化。

(3)通过比较不同激素对果蝇生长发育的影响,分析激素调节的特点。

五、实验结果与分析1. 呼吸作用实验实验结果显示,家蚕幼虫的呼吸频率和呼吸幅度均较高,说明其呼吸作用旺盛。

家蝇幼虫的呼吸频率和呼吸幅度较低,说明其呼吸作用相对较弱。

2. 能量代谢实验实验结果显示,家蝇幼虫的能量消耗速率和能量转化效率较高,说明其能量代谢旺盛。

家蚕幼虫的能量消耗速率和能量转化效率较低,说明其能量代谢相对较弱。

细菌的生理生化反应实验报告

细菌的生理生化反应实验报告

细菌的生理生化反应实验报告【实验目的】了解细菌生理生化反应原理,掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。

了解生理生化反应在鉴别细菌中的意义。

【实验原理】通过测定微生物校内某些酶类的有无、对某些第五的利用能力、代谢产物的类型等来研究微生物带血的多样性。

某些细菌产生色氨酸酶,能分解培养基蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚,吲哚与对二甲基氨基苯甲醛发生反应,形成红色的玫瑰吲哚,为吲哚反应阳性。

微生物发酵葡萄糖成丙酮酸,2分子丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。

乙酰甲基甲醇在碱性条件下与肌酸类物质反应,生成红色化合物为.反应阳性。

有些细菌发酵糖类产生有机酸较多,使发酵液的pH下降到以下,当加入甲基红试剂后,时发酵液变红色,为甲基红反应阳性。

某种微生物能以某种糖类为碳源,产酸产气,则判断为发酵这种糖。

【实验材料和用具】1.菌种:大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌。

2.培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基(葡萄糖、乳糖或蔗糖)、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂3.仪器:酒精灯、接种环、超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液枪、滴管、杜氏小管。

【实验方法】(一)V-P反应1.试管标记取5只装有葡萄糖蛋白胨水培养基的试管,分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。

2.接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至上述相应试管的培养基中。

空白对照不接种。

置37度恒温培养箱中培养24-48h。

3.观察记录去除以上培养物,分别取出2ml培养液加入另外5支相应编号的空试管中,加入与培养液等量的V-P试剂,充分震荡2min。

放置37度恒温培养箱中培养30min观察记录结果。

(二)甲基红实验于V-P实验留下的培养液中,分别加入2-3滴甲基红指示剂,立即观察培养液的颜色变化(三)吲哚实验1.试管标记取5只装有蛋白胨水培养基的试管,分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。

细菌生理生化实验报告

细菌生理生化实验报告

一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应的基本原理。

2. 掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。

3. 通过实验操作,学会观察和分析细菌的生理生化特性。

4. 培养实验操作技能和科学思维。

二、实验原理细菌生理生化反应是指细菌在生长代谢过程中,通过各种酶的作用,对营养物质进行分解、合成和转化的一系列化学反应。

这些反应反映了细菌的代谢类型、生长速度和代谢能力等特性,对于细菌的分类、鉴定和生理研究具有重要意义。

三、实验材料与仪器1. 菌种:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等。

2. 培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基、吲哚试剂、甲基红试剂、V-P试剂等。

3. 仪器:酒精灯、接种环、培养皿、试管、移液枪、滴管、显微镜等。

四、实验方法1. 菌种培养:将待测菌种接种于相应培养基中,在适宜温度下培养一定时间。

2. 生理生化反应检测:- 吲哚试验:将菌液接种于吲哚试剂中,观察是否产生红色沉淀。

- 甲基红试验:将菌液接种于甲基红试剂中,观察颜色变化。

- V-P试验:将菌液接种于V-P试剂中,观察是否产生红色沉淀。

- 糖发酵试验:将菌液接种于糖发酵培养基中,观察颜色变化和气体产生情况。

五、实验结果与分析1. 吲哚试验:大肠杆菌和枯草芽孢杆菌产生红色沉淀,金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌不产生红色沉淀。

2. 甲基红试验:大肠杆菌和金黄色葡萄球菌呈红色,枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌呈黄色。

3. V-P试验:大肠杆菌和金黄色葡萄球菌产生红色沉淀,枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌不产生红色沉淀。

4. 糖发酵试验:大肠杆菌和枯草芽孢杆菌发酵葡萄糖,产生红色沉淀和气体;金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌不发酵葡萄糖。

六、实验结论通过本次实验,我们了解了细菌生理生化反应的基本原理和实验方法,掌握了细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。

实验结果表明,不同细菌具有不同的生理生化特性,这些特性可以用于细菌的分类、鉴定和研究。

医学检验生化实验报告(3篇)

医学检验生化实验报告(3篇)

第1篇一、实验名称血清酶活性检测二、实验目的1. 掌握血清酶活性检测的基本原理和方法。

2. 学会使用生化分析仪进行血清酶活性检测。

3. 了解血清酶活性检测在临床诊断中的应用。

三、实验原理血清酶活性检测是通过测定血清中某种酶的活性来反映该酶在体内的代谢状况。

酶活性测定通常采用比色法、电化学法等方法,其中比色法是最常用的方法。

本实验采用比色法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的活性。

四、实验材料1. 试剂:丙氨酸转氨酶(ALT)试剂盒、天冬氨酸转氨酶(AST)试剂盒、缓冲液、磷酸盐缓冲盐溶液(PBS)、硫酸钠、氢氧化钠、盐酸、三氯乙酸等。

2. 仪器:生化分析仪、离心机、移液器、比色皿等。

3. 样品:血清样本。

五、实验步骤1. 样本处理:取血清样本,按照实验要求进行离心处理,分离出血清。

2. 丙氨酸转氨酶(ALT)活性检测:(1)按照试剂盒说明书配置反应体系,加入血清样本。

(2)将反应体系放入生化分析仪中,按照仪器操作步骤进行测定。

3. 天冬氨酸转氨酶(AST)活性检测:(1)按照试剂盒说明书配置反应体系,加入血清样本。

(2)将反应体系放入生化分析仪中,按照仪器操作步骤进行测定。

4. 结果记录与分析:记录实验数据,与正常值范围进行比较,分析实验结果。

六、实验结果1. 丙氨酸转氨酶(ALT)活性检测结果:实验测得的ALT活性为30 U/L,正常值范围为10-40 U/L。

2. 天冬氨酸转氨酶(AST)活性检测结果:实验测得的AST活性为25 U/L,正常值范围为15-35 U/L。

七、讨论与分析1. 丙氨酸转氨酶(ALT)活性检测:ALT主要存在于肝脏细胞中,其活性升高可反映肝脏损伤。

本实验中ALT活性检测结果在正常范围内,说明受试者肝脏功能正常。

2. 天冬氨酸转氨酶(AST)活性检测:AST广泛存在于人体各组织中,但以肝脏细胞中的含量最高。

AST活性升高可反映心肌损伤、肝脏损伤等。

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微生物实验报告微生物的生理生化实验侯汶青201300140031 组别:周四下午五组同组者:李璇、李倩茜实验完成时间:2014年12月6号一、实验目的1、证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同,从而说明不同微生物有着不同的酶系统。

2、掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。

3、了解糖发酵的原理,掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。

4、了解吲哚和甲基红试验的原理以及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。

5、熟习生理生化反应培养基的配制原理和一般方法步骤。

6、巩固无菌实验操作。

二、实验器材1、菌种:枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌(大分子水解实验);大肠杆菌、变形杆菌(糖发酵实验);大肠杆菌、产气杆菌(吲哚实验);大肠杆菌、产气杆菌(甲基红实验);2、培养基:(1)固体淀粉培养基,固体油脂培养基(淀粉和油脂的大分子水解实验);(2)葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基试管每组共5支,而且内装有倒置的德汉氏小管(糖发酵实验);(3)蛋白胨水培养基(吲哚实验)(4)葡萄糖蛋白胨水培养基(甲基红实验)3、溶液和试剂:卢戈氏碘液,乙醚,吲哚试剂,甲基红试剂,蒸馏水,去离子水、氢氧化钠溶液、中性红试剂、溴甲酚紫乙醇溶液等4、仪器或其他用具:成套培养皿,试管,玻璃棒、酒精灯,烧杯,德汉氏小管,接种环、吸管、滴管、洗耳球、无菌操作台、量筒、试管架等三、实验原理1、微生物的生理生化反应原理:在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢。

代谢过程主要是酶促反应过程。

许多细菌产生胞外酶,这些酶从细胞中释放出来,以催化细胞外的化学反应。

各种细菌由于具有不同的酶系统,致使它们能利用不同的底物,或虽然可以利用相同的底物,却产生不同的代谢产物,因此可以利用各种生理生化反应来鉴别细菌。

微生物代谢重要特征之一,就是代谢类型的多样性,因此使得微生物在自然界的物质循环中起着重要的作用,同时也为人类开发利用微生物资源提供更多的机会与途径。

在所有生活细胞中存在的这些化学反应被称为生理生化反应(酶促反应)。

2、大分子的水解实验:微生物对大分子物质如淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须依靠产生的胞外酶将大分子物质分解后,才能被微生物利用。

胞外酶主要为水解酶,通过加水裂解大分子物质为较小化合物,使其能被运输至细胞内。

如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖,脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸,蛋白酶水解蛋白质为氨基酸等,这些过程均可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实。

如淀粉遇碘液会产生蓝色,但细菌水解淀粉的区域,用碘液测定时,不再产生蓝色,表明细菌产生淀粉酶。

脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的pH,使pH降低,加入培养基的中性红指示剂会使培养基从淡红色转变为深红色,说明细胞外存在脂肪酶。

在淀粉固体培养基上接种细菌,培养两天以后,再往培养基中加碘液染色,若该细菌能分泌胞外淀粉酶,则能利用其周围的淀粉,淡然在染色后,其菌落周围不呈蓝色,而是无色透明圈。

3、糖发酵实验:糖发酵实验是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要,绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异,有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢气、加完、二氧化碳等),有些细菌只产酸不产气。

例如,大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌能分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖。

发酵培养基含有蛋白胨、指示剂(溴甲酚紫)、倒置的德汉氏小管和不同的糖类。

当发酵产酸时,溴甲酚紫指示剂可由紫色(pH6.8)转变为黄色(pH5.2)。

气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。

4、吲哚实验:IMViC是吲哚(indol)、甲基红(methyl red test)、伏-普(Voges-Prokauer test)和柠檬酸盐(citrate test)四个实验的缩写,主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌,多用于水细菌学检查。

硫化氢试验也是检查肠道杆菌的生化试验。

大肠杆菌虽非致病菌,但在饮用水中超过一定数量,则表示受粪便污染,产气肠杆菌也广泛存在于自然界中,因此检查水时要将两者分开。

吲哚实验是用于检测吲哚的产生,某些细菌可产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙酮酸。

对二甲基氨基苯甲醛遇吲哚形成玫瑰吲哚(红色)。

但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力,因此吲哚试验可以作为一个生物化学检测的指标。

色氨酸水解反应:吲哚与对二甲基氨基苯甲醛反应:大肠杆菌吲哚反应阳性,产气肠杆菌为阴性。

5、甲基红实验:甲基红实验是用来检测由葡萄糖产生的有机酸,如甲酸、乙酸、乳酸等。

当细菌代谢糖产生酸时,培养基就会变酸,使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色(pH6.3)转变为红色(pH4.2),即甲基红反应。

尽管所有的肠道微生物都能发酵葡萄糖产生有机酸,但这个试验在区分大肠杆菌和产气肠杆菌上仍然是有价值的。

这两个细菌在培养的早期均产生有机酸,但大肠杆菌在培养后期仍能维持酸性pH4,而产气肠杆菌则转化有机酸为非酸性末端产物,如乙醇、丙酮酸等,使pH升至大约6,因此,大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性。

四、实验步骤(一)培养基的合成、灭菌及准备无菌操作台1、淀粉培养基(制备固体平板,每组2个平板):换算---称量---先将淀粉溶解再溶解其它成分---调pH值---装入500毫升三角瓶中---加棉塞---包扎---待灭菌。

2、油脂培养基(制备固体平板,每组2个平板):换算---称量---油和琼脂及水先加热---调好pH后再加入中性红---装入500毫升三角瓶中---加棉塞---包扎---待灭菌。

3、葡萄糖发酵培养基(液体培养基,每组5支试管):换算---称量---溶解---调pH值---加溴甲酚紫指示剂---分装小试管30支---加棉塞---包扎---待灭菌。

4、乳糖发酵培养基(液体培养基,每组5支试管):换算---称量---溶解---调pH值---加溴甲酚紫指示剂---分装小试管30支并加入灌满培养基的德汉氏小管---加棉塞---包扎---待灭菌。

5、蛋白胨水培养基(液体培养基,每组5支试管):换算---称量---溶解---调pH值---分装大试管30支---加棉塞---包扎---待灭菌。

6、葡萄糖蛋白胨水培养基(液体培养基,每组5支试管):换算---称量---溶解---调pH值---分装大试管30支---加棉塞---包扎---待灭菌。

7、灭菌:将所有包扎好的含有培养基的试管和培养皿放入灭菌锅中进行灭菌。

8、准备无菌操作台:将无菌操作台的电源打开,通入无菌风并打开紫外灯进行灭菌准备工作,紫外灯约照射20min,并且关闭两侧的玻璃门。

20min后,关闭紫外灯,打开日关灯,放入酒精灯并点燃,准备进行实验操作。

(二)倒平板、接种、培养及观察分析A.大分子水解试验1.淀粉水解试验(1)固体淀粉培养基灭菌后取出,待培养基冷却至50℃左右,无菌操作制成平板,冷却凝固并倒置。

(2)用记号笔在平板底部划成四部分。

(3)无菌操作台上,在酒精灯旁无菌操作用接种环将枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌和铜绿假单胞菌分别在平板的不同部分进行点种(如下图所示),尽量接种面积要小,而且注意在平板的反面的对应部分分别写上菌名进行标记,以防弄混。

(4)接种好后,将平板倒置,在37℃温箱中培养两天。

(5)两天后,观察平板上不同区的各种细菌的生长情况,打开平板盖子,滴入少量卢戈氏碘液于平板中,轻轻旋转平板,使碘液均匀铺满整个平板,然后观察菌苔颜色变化。

如若菌苔周围出现无色透明圈,说明淀粉已被水解,细菌为阳性,否则细菌为阴性。

而且透明圈的大小可用来初步判断该菌水解淀粉能力的强弱,即产生胞外淀粉酶活力的高低(以“+”、“—”表示有无透明圈)。

2.油脂水解试验(1)固体油脂培养基灭菌后取出,待培养基冷却至50℃左右,无菌操作制成平板,冷却凝固并倒置。

(2)用记号笔在在平板底部划成四部分,并且分别在四部分上标记菌种名称,以防弄混。

(3)无菌操作台上,在酒精灯旁无菌操作用接种环将枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌和铜绿假单胞菌分别划十字线(如下图所示)接种于平板相对应部分的中心,可以让接种面积大一些,但是不要太大。

(4(5)两天后,取出平板,加入中性红试剂,观察菌苔颜色。

如果出现红斑点,说明脂肪水解,为阳性反应。

B.糖发酵试验(葡萄糖和乳糖两种培养基)(1)液体培养基灭菌后取出,用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基的名称或者在试管上粘贴记号标签标明发酵培养基名称,冷却。

(2)无菌操作台上,取葡萄糖发酵培养基试管3支,分别接入大肠杆菌1支试管、变形杆菌1支试管,第3支试管不接种,作为空白对照。

另取乳糖发酵培养基2支,同样分别接入大肠杆菌1支试管、变形杆菌1支试管,并且及时用记号笔或者标签在试管上做好标记,区分试管中接种的菌以及是否接种菌。

(3)将接过种和作为空白对照的10支试管均置37℃中培养两天。

(4)两天后取出试管,观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡。

而且,培养后各发酵管与空白对照相比,若接种培养液保持原有颜色,其反应结果为阴性,表明该菌不能利用该种糖,记录用“-”表示;如培养液呈黄色,反应结果为阳性,表明该菌能分解该种糖产酸,记录用“+”表示。

培养液中的杜氏小管内有气泡为阳性反应,表明该菌分解糖能产酸并产气,记录用“+”表示;如杜氏小管内没有气泡为阴性反应,记录用“-”表示。

C.吲哚试验(1)液体培养基灭菌后取出,冷却,无菌操作台上,将大肠杆菌、产气肠杆菌分别接入2支蛋白胨水培养基,并有一支试管什么都不接种,作为空白对照,5支试管均置于37℃恒温培养两天。

(2)在培养两天后取出试管,观察结果时,在培养液中加入乙醚约4-5滴(使呈明显的乙醚层)。

充分振荡,使吲哚溶于乙醚中,静置片刻,待乙醚浮于培养液上面时,沿管壁慢慢加入吲哚试剂2滴。

如吲哚存在,则乙醚层呈玫瑰红色(注意:加入吲哚试剂后,不可再摇动,否则红色不明显)。

以“+”、“—”表示有无红色的玫瑰吲哚。

D.甲基红试验(1)液体培养基灭菌后取出,冷却,无菌操作台上,将大肠杆菌、产气肠杆菌分别接入2支葡萄糖蛋白胨水培养基,并有一支试管什么都不接种,作为空白对照,5支试管均置于37℃恒温培养两天。

(2)培养两天后,将每支葡萄糖蛋白胨水培养基培养物内加入2~3滴甲基红指示剂,注意沿管壁加入,仔细观察培养液上层,若培养液上层变成红色,即为阳性反应;若仍呈黄色,则为阴性反应,分别用“+”或“-”表示。

五、实验结果(一)大分子的水解实验(1)淀粉水解试验:(2)油脂水解试验:(1)葡萄糖发酵培养基:(2)乳糖发酵培养基:(1)吲哚试验:(2)甲基红试验:六、实验结果分析1、大分子的水解实验:微生物对大分子物质如淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须依靠产生的胞外酶将大分子物质分解后,才能被微生物吸收利用。

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