L-苯丙氨酸的生产(课堂PPT)
L_苯丙氨酸生产与应用
L-苯丙氨酸工业生产中采用连续发酵。
因而发酵培养基中各物质的含量对提取过程非常有利。
在对发酵液进行处理后，苯丙氨酸的提取率上升12％。
由苯丙酮酸生产L-苯丙氨酸的生产工艺，生产成本为13万元／t左右。
用此法建设500t／a的L-苯丙氨酸装置，需投资3，500万元，主产品L-苯丙氨酸并副产丙酮酸，年销售总收入可达1．3亿元，适用于中、小化肥厂利用合成氨再生气开发生产，在原料、技术和经济上占有较大的优势。
1理化性质L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine，简称L-Phe)又名L-苯基-α-氨基丙酸，为白色斜方晶系结晶粉末。
具有苦杏仁味，熔点：283℃(分解)。
自然界广泛存在于卵、乳和动物蛋白中，含量5％～6％，植物性蛋白质中约含1％。
L-苯丙氨酸可溶于水，在水中的溶解度为3％，难溶于乙醇、乙醚，在100ml水中的溶解度为51℃：4．4g。
100℃：10g。
旋光度一34．5(25℃)。
苯丙氨酸有外消旋DL-型，L型和D型。
其中最重要的是L-苯丙氨酸。
2工艺开发L-苯丙氨酸是人体的必需氨基酸，人体本身无法合成，只能由植物和微生物合成。
L-苯丙氨酸合成的起始物为五碳糖磷酸途径的中间产物赤藓糖-4-磷酸(erythrose-4-phosphate，FAP)和糖酵解过程的中间产物磷酸烯醇式丙酮酸（phophoenolpyruvate，PEP)二者缩合形成一个七碳酮糖开链磷酸化合物称为3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸(3-Deoxy-O-arobinoheptu-losonate-7-phosphate，DAHP)，然后DAHP转化为莽草酸(SHIK)，然后再转化为分支酸(CHA)，由分支酸合成苯丙酮酸(PPY)，最后苯丙酮酸经转氨作用生成L-苯丙氨酸。
L-苯丙氨酸的制备方法有发酵法、酶法与化学合成法。
用化学合成法经拆分可制得L-苯丙氨酸。
国内生产厂家主要采用发酵法。
2．1一步法化学合成法路线长，副产物多，且产物为光学消旋体，需进行光学拆分，成本高。
氨基酸生产ppt课件
ห้องสมุดไป่ตู้
活性 超过生理需要量
A合成酶系（E1,E2…） 反馈抑制
A
野生型菌株酶合成水平的反馈阻遏
在日常生活中，随处都可以看到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费，也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
野生型菌株酶活性水平的反馈抑制
Gene编码酶
效应物位点 过量A 酶活中心
过量A作用效应物位点，酶构型变化，影响酶活性中心而失活
在日常生活中，随处都可以看到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费，也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
25.1 概述
氨基酸的生产方法
第三类用抗氨基酸结构类似物突变株，如利用乳糖发酵
短杆菌 的S-(2-氨基乙基）-L-半胱氨酸（AEC,赖氨酸结构类食物） 抗性菌株生产赖氨酸。利用黄色短杆菌的5-甲基色氨酸（5-MT，酪 氨酸结构类似物）抗性菌株生产酪氨酸。
在日常生活中，随处都可以看到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费，也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
25.1 概述
氨基酸的生产方法
2、酶法：利用酶来制造氨基酸。应用完整 菌体或从微生物细胞抽提的酶类合成氨基酸。 天冬氨酸已于1973年应用完整菌体固定化 进行生产，这是世界上最早应用固定化菌体 的例子。赖氨酸、色氨酸、丙氨酸也可以生 产。
同功酶的主要功能在于其代谢调节。在一个分支代 谢途径中，如果在分支点以前的一个较早的反应是 由几个同功酶所催化时，则分支代谢的几个最终产 物往往分别对这几个同功酶发生抑制作用而不致过 剩
在日常生活中，随处都可以看到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费，也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
基因工程菌发酵生产L-苯丙氨酸工艺优化
基因工程菌发酵生产L-苯丙氨酸工艺优化时间：2005-5-17 10:56:24 作者：不详来源：中国发酵工业网点击数：本站另注：L-苯丙氨酸已在国内江苏部分厂家有发酵工业规模化生产，但仍然推荐此文供大家研究参考，了解工艺配方和分析方法。
L-苯丙氨酸(L-phe)是人和动物体内不能合成的8种氨基酸之一,人们称其为必须氨基酸。
L-phe在生物体内是转化成L-酪氨酸的原料,因而L-phe成为一些氨基酸输液和氨基酸饮膳所必须的成分。
而且,L-phe是合成药物麦角胺、抗生物质和维生素B6的重要原料。
同时,L-phe也是合成一些抗癌药物的中间体[1]。
在食品工业中,L-phe最主要的用途是合成二肽甜味剂,俗称蛋白糖。
基于L-phe广泛的应用前景,近年来L-phe成为氨基酸行业单品中产量增长最快的一种。
目前,L-phe的生产方法有酶法、发酵法等,直接发酵法具有可利用廉价原料直接生产L-phe的优点,发酵法生产L-phe,国外报道产酸率为2.8%,L-phe在我国还未实现规模生产[2]。
本实验对构建的重组L-phe基因工程菌E.coLiHB101. 进行发酵实验,研究了其发酵工艺条件及营养物质的流加对产物L-phe积累的影响。
1实验材料与方法1.1发酵用菌株基因重组工程菌E.coLiHB101. 。
1.2培养基1.2.1种子培养基蛋白胨1%;氯化钠1%;酵母粉0.5%;葡萄糖2%;调pH=7.5;抗菌素Km(硫酸卡那霉素)。
1.2.2发酵培养基Na2HPO4·12H2O20g/L;Na-citrate6g/L;Na-gLutamat e0.4g/L;酪氨酸0.6g/L;葡萄糖20g/L;Km40mg/L。
1.2.3补料培养基CaCL2·2H2O0.6g/L;酪氨酸500mg/L;葡萄糖500g/L;MgSO4·7H2O1g/L;VB1500mg/L;氨水28%。
1.3培养方法1.3.1摇瓶培养250mL锥形瓶内装LB培养基25mL,接种菌种斜面后,于旋转摇床上,在37℃培养12h。
苯丙氨酸
食品工艺上：
可添加于焙烤食品中，强化苯丙氨酸的营养作用， 还与糖类发生氨基-羧化反应以改善食品店品香味， 并补充人体所需功能性食品氨基酸平衡；
L-苯丙氨酸是生产新型保健型甜味剂阿斯巴甜的主要原料。 阿斯巴甜是经世界卫生组织（ WHO）、粮农组织（ FAO） 专家联席委员会认定的A⑴级安全性食品添加剂，目前有120 多个国家、地区政府批准特点，其甜度是蔗糖的200倍， 热值不到其二百分之一，是高血压、心脏病、糖尿病人 最理想的甜味剂，但苯丙酮尿症患者不宜食用。
作为人体所需八大氨基酸之一 在食品,医药，营养，抗癌生产等等方 面的显著特点 所以，有必要对此氨基酸进行合理生
产。
苯丙氨酸的生产：以氯苯为原料，与 CO2经一步双羟基合成反应生产苯丙 酮酸（条件：压力2~5Mpa，温度 40~60）
文献摘录于：韩文爱 陈立群教授
因此：有必要对此氨基酸进行进一步的理解探究与合理 开发
That's
L-苯丙氨酸是具有生理活性的芳香族氨基酸，是人体和动物不能靠自身自然合 成的必需氨基酸之一，是复配氨基酸输液的重要成份；
用于医药，是苯丙氨苄、甲酸溶肉瘤素等 氨基酸类抗癌药物的中间体，也是生产肾 上腺素、甲状腺素和黑色素的原料；已有 研究表明，L-苯丙氨酸可作为抗癌药物的 载体将药物分子直接导入癌瘤区，其效果 是其他氨基酸的3～5倍。这样既可以抑制 癌瘤生长，又可以降低药物的毒副作用。
苯丙氨酸系统命名为“2-氨基苯丙酸”，是α-氨基酸的一种， 具有生物活性的光学异构体为L-苯丙氨酸（ L-Phenylalanine） 比旋光度为-35.1°。苯丙氨酸是人体必需氨基酸之一。苯丙氨 酸广泛用于医药和阿斯巴甜的主要原料。 L-苯丙氨酸在生物体内可被辅酶四氢生物喋呤不可逆地转化为 L-酪氨酸（ L- Tyrosine），后继续分解，经转氨基生成少量苯 丙酮酸 但先天性苯丙氨酸羟化酶缺陷患者，苯丙氨酸不能羟化生成酪 氨酸，苯丙酮酸生成就增多，在血和尿中出现苯丙酮酸，导致 智力发育障碍，称为苯丙酮尿症（ PKU），故此类患者应忌食 含苯丙氨酸的食品。
L-苯丙氨酸生产与应用
发 酵 培 养 基 中各 物 质 的 含 量 对 提 取 过 程 非 常 有 利 。 对发 酵液 进行处 理后 ， 丙氨 酸 的提取率 上 在 苯
升 １％。 由苯 丙 酮酸 生 产 Ｌ 苯 丙 氨 酸 的生 产 工 ２ 一
成苯 丙酮 酸（Ｐ １最 后苯 丙酮 酸经 转 氨作 用生 成 ＰＹ ．
种反 应副 产物 一 硼酸 。此 法适 合工业 上采 用 ， 反
５ ￣ ４４ 。 Ｏ ￣ １ ｇ 旋 光 度一 ３ ． ２ ￣） 苯 丙 １Ｃ：． Ｉ ０Ｃ：０ 。 ｇ ４５ ５Ｃ 。 （ 氨酸有 外消 旋 Ｄ 一 ， 和 Ｄ型 。 中最 重要 的 Ｌ 型 Ｌ型 其
是 Ｌ 苯 丙氨酸 。酸 （ ｙ ｒｓ一 一 ｈ ｓｈ ｔ。Ａ ） ４磷 ｅ ｔ ｏｅ ４ ｐ ｏｐ ａｅ Ｆ Ｐ ￣糖 酵 ｒｈ
解 过 程 的 中 间 产 物 磷 酸 烯 醇 式 丙 酮 酸 （ｈ ｐ ｏｎ ｌｙｕ ａｅＰ Ｐ二 者 缩合 形成 一个 七碳 ｐ ｏｈ ｅ ｏｐ ｒｖ ｔ，Ｅ ） 酮 糖开链 磷 酸化合 物称 为 ３ 脱氧 一ｔ阿拉伯 庚酮 一 Ｏ 一
一
１ 理 化 性 质
Ｌ 苯 丙氨 酸 ｆ— ｈ ｎ ｌ ａ ｉｅ 简称 Ｌ Ｐ ｅ又 一 Ｌ Ｐ ｅ ｙａ ｎｎ ， ｌ — ｈ）
名 Ｌ 苯基 一 氨基 丙 酸 ， 白色 斜方 晶系 结 晶粉 一 一 为
步法合 成 氨基酸 的技 术是 一项 既有效 又不
污染 环境 的合 成胺 和氨 基酸 的方法 。此 法可 同时 将氨 基酸 的三 个成 分 即氨基 、羧 基和侧 链结合 在
作 医药 的化 合物 。
一
步法 合成 氨基 酸 的反 应是 从 以往 各种 合成
法 的研究 中开发 出来 的 ，它 是一种 采用 过渡 金属
L-苯丙氨酸的生产
代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
五、展望
1、苯丙氨酸生物工程菌构建的成功是令人鼓 舞的。代谢工程在物种改良方面已经展现出了 非常强的生命力. 代谢工程在苯丙氨酸菌种选 育研究中的应用，大幅提升了微生物发酵法的 苯丙氨酸生产效率，但目前仍存在一定程度的 局限性。 2、DNA 重组技术飞跃式发展为微生物合成苯 丙氨酸的代谢工程研究带来了前所未有的机遇。
代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
（2）增加PEP 的合成 磷酸烯醇丙酮酸合成酶(PpsA)和磷酸烯醇丙酮 酸羧激酶(PckA)是糖代谢中心途径中生成磷酸烯 醇丙酮酸(PEP)的2个关键酶,在大肠杆菌中分别由 ppsA和pckA基因编码.扩增ppsA,pckA基因，使这 两个基因单独表达或串联表达，都能提高PEP的合 成量，进而提高DAHP的合成量。
DAHP合成酶（限速反应） 3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸
分支酸 分支酸变位酶（限速反应）
预苯酸
预苯酸脱水酶（限速反应） 苯丙酮酸
四、 L-苯丙氨酸代谢调控
1、增强中心代谢途径代谢流： （1）加强基因aroF的超量表达： DAHP的合成酶DS控制的反应是该途径中的第一个 限速反应。DS是基因aroF、aroG、aroH控制的同 工酶。
代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
3、葡萄糖一直是合成Phe的主要碳源，但随着 研究的深入，显现出很多弊端，如产生葡萄糖 效应和大量副产物乙酸，都会使细菌生长受到 抑制；而甘油价格低廉，容易获得，以甘油为 碳源进行微生物的生产将会成为一种趋势。 总之，虽然目前代谢工程技术在苯丙氨酸 菌种选育中的应用仍然存在许多不足之处，但 代谢工程确实为发酵法高产苯丙氨酸提供了巨 大的推动力，随着研究的深入，必然会为整个 苯丙氨酸产业的发展做出更大的贡献。
l-苯丙氨酸生产工艺
l-苯丙氨酸生产工艺1.引言苯丙氨酸（L-Phenylalanine）是一种重要的氨基酸，它被广泛应用于医药、食品和化妆品等领域。
本文将介绍一种常用的L-苯丙氨酸的生产工艺。
2.原料准备L-苯丙氨酸的制备主要原料为苯丙酮（Phenylacetone）和氨水（Ammonia）。
此外，还需要使用酵素催化剂和一些辅助材料。
3.反应步骤（1）首先，将苯丙酮和氨水以适当比例混合，并加入一定量的酵素催化剂。
酵素可选择使用外源源，如pseudomonas organisms等。
（2）反应混合物置于适当的反应器内，控制反应温度和压力，一般情况下，反应温度为30-40℃，压力为1-2atm。
（3）反应开始后，酵素催化剂将苯丙酮和氨水转化为苯丙氨酸。
此时，反应物和产物之间的比例将逐渐改变，苯丙氨酸的浓度会逐渐增加。
4.反应结束和产物分离（1）当苯丙氨酸的浓度达到一定数值后，反应停止，此时反应液中主要是苯丙氨酸和未反应的苯丙酮、氨水等。
（2）将反应液通过过滤、蒸发、结晶等方式进行分离和提纯，获得苯丙氨酸。
5.工艺优化为了增加工艺的产率和降低成本，可以采取以下措施进行工艺优化：（1）优化反应条件，包括反应温度、反应时间和反应压力等，以提高反应速率和产率。
（2）优化催化剂的种类和用量，选择高效的酵素催化剂，并通过控制催化剂的浓度来提高反应的效率。
（3）设计和改进反应器，使反应混合物的传质和传热更加均匀，以提高反应的速率和产率。
（4）改善分离和提纯的工艺，采用高效的分离技术和提纯方法，以提高产品的纯度和收率。
6.结论L-苯丙氨酸作为一种重要的氨基酸，在医药、食品和化妆品等领域具有广泛的应用前景。
通过优化反应条件和工艺流程，可以提高生产工艺的效率和产量，从而降低成本，提高产品质量。
氨基酸生产线建设之400KL发酵罐生产L-苯丙氨酸的工艺流程方框图
400KL发酵罐生产L-苯丙氨酸的工艺流程方框图
作者：黄启鹏
1.本方框图来源于实践，并应用于实际生产线的异地迁移。
该方框图为初设时形成，在异地生产线建设完工后，经过短时间人机配合，发酵产酸、放罐体积、糖酸转化率、提炼收率均比方框图所示大幅提高。
特别是产酸平均可达65%，提炼收率高于90.5%。
作为初设数据，也是工程技术人员对于建设方的承诺，趋于保守情理之中。
2.方框图中，发酵产酸按保守水平54%，放罐体积按保守水平328KL，放罐周期55hr，发酵指数为809g/m
3.hr。
放罐体积形成的因素有V消后、V初糖、V种子、V补糖、V液氨、V消沫剂等。
3.方框图中，提炼收率达到85%。
4.本图简述了菌种到发酵，从发酵到提炼出成品的流程，没有体现玉米制备淀粉，淀粉制备葡萄糖的过程。
要根据建设方的投资思路来决定从什么主原料开始生产。
5.本方框图中第一次结晶的母液采用了离子交换法来除杂，会产生大量的离子交换废水。
经过实践中验证，该母液采用活性炭脱色，也可以达到较好的效果，从而减轻了废水浓缩、浓缩残渣处理的环保压力。
L-苯丙氨酸的生产(课堂PPT)
代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
二、L-苯丙氨酸的生产方法
化学合成法：收率低，副产物多
酶法：工艺路线短，生产能力 强；酶的稳定性差，成本高
微生物发酵法：成本较低、产物纯 度高，对环境的污染相对较小
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
三、 L-苯 丙氨酸的 体内代谢
途径
E.coli是最常 应用的菌种。 图为以葡萄糖 作为E.coli生 长的碳源时的 由DAHP生产LPhe的详细路 径图
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
aroG基因编码的3-脱氧-D-阿 拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶是 Phe合成途径中的关键酶之一, 受到苯丙氨酸的反馈抑制.为得 到解除苯丙氨酸反馈抑制的突 变AroG,分别以Escherichia coli (E.coli)野生型和突变型 aroG基因和Salmonella typhimnrium(S.typhimnrium) 野生型aroG基因为亲本,通过 DNA suffling技术对aroG进行 改组,获得的中,在含 有Phe类似物对氟苯丙氨酸(pFP)的培养基上筛选转化子,获 得4个解除Phe反馈抑制的克 隆..
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
参考文献
❖ 1、黄坤央.苯丙氨酸基因工程菌的构建及其发酵条件研究[D] .郑州 大学.2012.6
❖ 2、郝瑞昕； 边英男； 李晓萍等.通过DNA shuffling技术获得初步 解除苯丙氨酸反馈抑制的3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶 (AroG)突变株[J] .复旦学报.2010.49(3):287-292
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
（2）增加PEP 的合成 磷酸烯醇丙酮酸合成酶(PpsA)和磷酸烯醇丙酮
L-苯丙氨酸的生产及市场分析
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
❖ 3、葡萄糖一直是合成Phe的主要碳源，但随着 研究的深入，显现出很多弊端，如产生葡萄糖 效应和大量副产物乙酸，都会使细菌生长受到 抑制；而甘油价格低廉，容易获得，以甘油为 碳源进行微生物的生产将会成为一种趋势。 总之，虽然目前代谢工程技术在苯丙氨酸 菌种选育中的应用仍然存在许多不足之处，但 代谢工程确实为发酵法高产苯丙氨酸提供了巨 大的推动力，随着研究的深入，必然会为整个 苯丙氨酸产业的发展做出更大的贡献。
表：携带不同表达质粒的大肠杆菌的粗抽提物 的酶比活增减倍数
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
苯丙氨酸生物合成途径关 键基因的串联表达：
优化关键酶基因 pheA、aroF、 ppsA、 tktA的协同表达
pheA:编码分支酸变 位酶和预苯酸合成 酶。简写成A
aroF:编码DHAP合成 酶。简写成F
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
（2）增加PEP 的合成 磷酸烯醇丙酮酸合成酶(PpsA)和磷酸烯醇丙酮
酸羧激酶(PckA)是糖代谢中心途径中生成磷酸烯 醇丙酮酸(PEP)的2个关键酶,在大肠杆菌中分别由 ppsA和pckA基因编码.扩增ppsA,pckA基因，使这 两个基因单独表达或串联表达，都能提高PEP的合 成量，进而提高DAHP的合成量。
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
aroG基因编码的3-脱氧-D-阿 拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶是 Phe合成途径中的关键酶之一, 受到苯丙氨酸的反馈抑制.为得 到解除苯丙氨酸反馈抑制的突 变AroG,分别以Escherichia coli (E.coli)野生型和突变型 aroG基因和Salmonella typhimnrium(S.typhimnrium) 野生型aroG基因为亲本,通过 DNA suffling技术对aroG进行 改组,获得的中,在含 有Phe类似物对氟苯丙氨酸(pFP)的培养基上筛选转化子,获 得4个解除Phe反馈抑制的克 隆..
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
L-苯丙氨酸的 应用
食品业：制成甜味剂 如阿斯巴甜；作为人 必需氨基酸制成保健 食品。
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医药业：Phe是一些抗 癌药物甲酸溶肉痛素、 苯丙氨苄等的中间体； 将抗肿瘤药导入靶部位 的载体，或添加于复合 氨基酸输液。
化妆品业：L-Phe广泛 应用于洗发用品和护肤 用品，有滋润和美白皮 肤、亮泽，毛发的作用 。
代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
二、L-苯丙氨酸的生产方法
化学合成法：收率低，副产物多
酶法：工艺路线短，生产能力 强；酶的稳定性差，成本高
微生物发酵法：成本较低、产物纯 度高，对环境的污染相对较小
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
三、 L-苯 丙氨酸的 体内代谢
途径
E.coli是最常 应用的菌种。 图为以葡萄糖 作为E.coli生 长的碳源时的 由DAHP生产LPhe的详细路 径图
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DAHP合成酶（限速反应） 3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸
分支酸
分支酸变位酶（限速反应）
预苯酸
预苯酸脱水酶（限速反应）苯丙酮酸源自四、 L-苯丙氨酸代谢调控
❖ 1、增强中心代谢途径代谢流： （1）加强基因aroF的超量表达：
DAHP的合成酶DS控制的反应是该途径中的第一个 限速反应。DS是基因aroF、aroG、aroH控制的同 工酶。
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
（3）改造PTS系统 野生型大肠杆菌体内PEP的消耗主要是磷酰
基转移系统(PTS系统)，丙酮酸激酶(pykA／ pykF编码)，PEP羧化酶(ppc基因编码)。此通 过改造PTS系统减少PEP的消耗可提高L-Phe产 量。
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
CK-AFPT为 pZA31-RBS-ppsA-tktA_pZE21-AF的简写
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。
代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
3、解除反馈抑制 ❖ aroG基因编码的3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷
酸合成酶( AroG)是苯丙氨酸合成途径中的关键 酶之一,受到苯丙氨酸的反馈抑制. ❖ 通过使用苯丙氨酸类似物对氟苯丙氨酸(pFP)的 筛选, 获得初步解除对苯丙氨酸的反馈抑制突变 株。通过DNAshuffiing技术有效的对ar0G基因 进行改组,积累并引入有益突变,实现分子的定向 进化,解除AroG的苯丙氨酸反馈抑制。
❖ 2、分支途径代谢调控：
在pheA、tyrB基因克隆、串联克隆和表达完成的 基础上,将aroG基因和pheA、tyrB基因以aroG-pheAtyrB的顺序三基因串联到表达载体进行表达,提高酶活， 提高L-Phe的产量。
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
基因克隆及基 因克隆流程图：
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
五、展望
1、苯丙氨酸生物工程菌构建的成功是令人鼓 舞的。代谢工程在物种改良方面已经展现出了 非常强的生命力. 代谢工程在苯丙氨酸菌种选 育研究中的应用，大幅提升了微生物发酵法的 苯丙氨酸生产效率，但目前仍存在一定程度的 局限性。 2、DNA 重组技术飞跃式发展为微生物合成苯 丙氨酸的代谢工程研究带来了前所未有的机遇。
ppsA：编码PEP合成 酶。简写成P
tktA：编码转酮酶。
简写成T.
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
pZE21：含有卡那霉素抗性基因的质粒；pZE12：含有氨 苄林抗性基因的质粒；pZA31：含有氯霉素抗性基因的质粒
CA-AFPT为pZA31-RBS-ppsA-tktA_pZE12-AF的 简 写
代谢工程在L-苯丙氨酸的 生产中的应用
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Diagram 一、 L-苯丙氨酸的简介
二、 L-苯丙氨酸的生产方法 三、 L-苯丙氨酸的体内代谢途径
四、 L-苯丙氨酸的代谢调控
五、展望
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代谢工程在L-苯丙氨酸的生产中的应用
一、 L-苯丙氨酸的简介
❖ L-苯丙氨酸是芳香族氨基 酸，是人体八大必需氨基 酸之一。常温下是白色结 晶或结晶性粉末固体，有 L-型、D-型两种消旋体和 DL-型外消旋体，具有生物 活性的是L-型光学异构体， 即L-苯丙氨酸(LPhenylalanine，L-Phe)。