肝癌小鼠造模实验方法

肝癌小鼠造模实验方法

(1)肿瘤细胞悬液的制备小鼠肿瘤细胞用小鼠腹腔培养，然后抽取腹水，是

取得大量肿瘤细胞最便捷的方法。具体操作如下：将肿瘤细胞株复苏后，接种于babl/c（昆明小鼠）腹腔，培养8-10天后，接种小鼠的腹腔内长出含肿瘤细胞的腹水，选择腹水饱满的小鼠，在超净台内于无菌条件下消毒小鼠腹部，用注射器抽取淡腹水为瘤源，放入无菌容器内，加入无菌生理盐水稀释瘤液，小心摇匀，并置冰水上保存。若用多只动物做瘤源时，则应混合腹水。(腹水应为淡黄色浓稠液体，若为深黄色或红色则应弃去不用。)

(2)肿瘤细胞计数取少量腹水，放置于干试管内，用生理盐水稀释100倍，用

枪头吸取少许腹水，滴于载玻片上，推片，镜下观察细胞形态：细胞为圆形，胞浆均匀，透

明，折光性好，分布均匀。并于镜下进行细胞分类计数，其中肿瘤细胞数应≥95％。

7mL，在小鼠右侧腋下(右侧腋窝(3)肿瘤细胞接种腹水用无菌生理盐水调整细胞浓度为1*10

6个瘤细胞)（5*106）？。全程严格无菌操作，皮下？)常规接种H22瘤液0．2mL／只(含2*10

40min内完成。

(4)分组与给药昆明小鼠用上法造模，造模后再将腹水瘤小鼠按体重分层，随

机分为阳性对照组(CTX)、青蒿素各剂量组(150mg／kg、300mg／kg)、青蒿琥酯P0组(60mg ／kg)、青蒿琥酯ip组(60mg／kg)、青蒿醇提物和青蒿水提物各剂量组

(1000mg／kg、4000mg／kg)和模型对照组(Model)，每组各lO只小鼠。造模24h后，阳性对照组(CTX)20mg／kg和青蒿琥酯ip组(60mg／kg)，腹腔注射0．2mL／只，每天1次，连续lOd：其它组灌胃给药，灌服溶液0．4mL／只，每天1次，连续lOd。模型对照组仅予等量CMC-Na 溶液，连续lOd。平均每只小鼠每天给等量鼠料，每周换垫料2次，每日换新鲜水1次。记录各小鼠死亡的时间。

其他问题：

检测药物对肿瘤的抑制作用，给药时间怎么确定？

1、造模后第二天给药

2、肿瘤长出一定体积后在给药