第三章抗体

合集下载

免疫学导论于善谦 第3章 抗体

免疫学导论于善谦 第3章 抗体

(2)亚类
IgG:IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 IgA:IgA1, IgA2 IgM: IgM1, IgM2
2.型和亚型(根据轻链C区抗原特异性不同分型) (1)型 κ(kappa)型 λ(lambda)型 (2)亚型(λ链): OZ(+) (或λ1) :第190位(亮氨酸) OZ(-) (或λ2) :第190位(精氨酸) Kern(+)(或λ3) :第154位(甘氨酸) Kern(-)(或λ4) :第154位(丝氨酸)

☆结合细胞表面的Fc受体发挥调理作用、 ADCC作用、介导I型超敏反应 IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、 FcμR结合,增强其吞噬能力,通常将抗体促 进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理 作用 (opsonization)。
当IgG与带有相应抗原的靶细胞结合后, 其Fc段可与NK细胞、Mф细胞、单核细胞 的FcγR结合,促使细胞毒颗粒的释放,发 挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 (antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC),导致靶细胞溶解。
pathway)和以次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶脱氧核苷(T)为原料进行补救
(亦称替代或称中间)合成(salvage pathway)2个途径。由于氨基蝶呤可 阻碍起始合成途径,所以培养基中含有它时,细胞便只有补救合成途径可以
利用,如果培养基中额外提供或补充H和T,正常细胞就可以通过补救合成途
径合成DNA的核酸原料。用于细胞融合的骨髓瘤是的在遗传上缺失中间合成 途径的永生化细胞系,在HAT培养基中将失去增殖能力趋于死亡,而产生特 异性抗体的脾细胞是正常细胞,不能长期传代。融合后的杂交瘤细胞不仅具 有了永生化和抗体分泌的特性,同时还由于补充了替代合成途径,因此可以 在HAT筛选培养基中生存并增殖,未融合的脾细胞增殖数代后逐渐死亡,而 骨髓瘤细胞因补救合成途径缺陷而全部死亡。据此,把混存于细胞群中的杂 交瘤细胞与正常脾细胞和骨髓瘤细胞通过筛选培养进行自动选择。

第三章中和试验(Neutralization)及中和抗体

第三章中和试验(Neutralization)及中和抗体

实验仪器和材料:
小鼠 L929 细胞 RPMI-1640 培养液 细胞因子--重组大鼠 TNF-α,产品标号:400-14,规格:20ug,生产商:Peprotech 中和抗体--兔抗大鼠 TNF-α,产品标号:500-P72,规格:50ug,生产商:Peprotech 培养板 离心机 培养箱
实验方法:
全国免费电话8008571184联科杭州057188226558联科上海02164511079联科北京01051805911联科苏州051268666623联科厦门059253222277联科广州02083506317联科武汉13995511341联科南京0258660929418抗体名称种属humanhuman产品编号500p195500p85规格50ug100ug50ug100ugbmp2bngf抗体名称种属rathuman产品编号500p180g500p21b规格50ug100ug50ug100ugil1alphail1beta联科生物技术有限公司wwwgotofcmcom全国免费电话8008571184全国免费电话8008571184联科杭州057188226558联科上海02164511079联科北京01051805911联科苏州051268666623联科厦门059253222277联科广州02083506317联科武汉13995511341联科南京0258660929419抗体名称cardiotrophin1humancntfcsfegfena78eotaxineotaxineotaxineotaxin2eotaxin3eotaxin3exodus2exodus2fgf9fgf10fgf17fgfacidicfgfbasicflt3ligandgcp2gcsfgcsfgmcsfgmcsfgromgsahumangrobmip2ratgrobetagrogammaifnalphaifngammaifngammaigfiigfiigfiiil1alphail1alpha种属产品编号500p101500p79500p44500p45500p91500p41500p67500p175g500p103g500m32500p156g500p109500p114500p66500p151g500p152500p17500p18500p42500p120500p43500p69500p33500p65500p92500p75500p104500p105500p32a500p32500p122g500p11500p157g500p12500p21a500p51a规格50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug1

4-1第三章第三节免疫球蛋白与抗体

4-1第三章第三节免疫球蛋白与抗体
单克隆抗体制备示意图
PEG:聚乙二醇
三、基因工程抗体
五类免疫球蛋白
二、免疫球蛋白的结构和功能
• 3.免疫球蛋白的水解片段
二、免疫球蛋白的结构和功能
(二)生物学功能(特异 性结合抗原)
• • • • 1.Fab段 (1)结合的部位:V区 (2)结合有特异性 (3)结合的力学特点:氢键、 静电、范德化力 • (4)可逆性 • (5)影响因素:pH值、温 度、电解质等 • (6)价位
二、免疫球蛋白的结构和功能
• ②抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)
• antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity
二、免疫球蛋白的结构和功能
• ③介导Ⅰ型变态反应
二、免疫球蛋白的结构和功能
• (3)穿过胎盘与黏膜(IgG、SIgA)
三、各类免疫球蛋白的特性和功能
第三节 免疫球蛋白
第三节 免疫球蛋白
• 抗体(antibody,Ab)是B细胞接受抗原刺激后 增殖分化为浆细胞,由浆细胞产生的一类能与相 应抗原特异性结合的球蛋白。 • 免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig):具有抗体 活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。 • 抗体都是免疫球蛋白,免疫球蛋白不一定都具有 抗体活性。 • Ig分泌型:存在血液、组织液中,抗体功能 • Ig膜型:构成B细胞膜上的抗原受体。
• • • •
2.Fc段: (1)激活补体 (2)结合细胞 (3)穿过胎盘和黏膜
二、免疫球蛋白的结构和功能
• • • • • (1)激活补体 能激活补体的免疫球蛋白: IgG1~IgG3、IgM的CH区——补体C1q IgA1、IgG4旁路 IgD、IgE不能
二、免疫球蛋白的结构和功能

第3章 免疫球蛋白

第3章 免疫球蛋白

三、免疫球蛋白的水解片断
1、水解作用
Ig 木瓜蛋白酶 2Fab+Fc Ig 胃蛋白酶 F(ab´)2+pFc´
2、 水解意义
阐明Ig的结构和生物活性, 指导生物制品的生产和临床应用
第二节 五类免疫球蛋白 的特点和功能
一、Ig分类 1、类:根据同种系所有个体的Ig重链C区的抗原性 分为五类 IgM()、IgG()、IgA()、IgD()、IgE() 2、亚类:同一类Ig内的aa序列及二硫键的数目和位 置 IgG—IgG1、IgG2、IgG3和IgG4 ; IgA—IgA1和IgA2; IgM—IgM1和IgM2。 3、型:根据Ig轻链C区的抗原性分为链和链。 :约2:1. 4、亚型: 链有多种亚型。(轻链抗原决定簇在CL区, 分κ 和λ 。1个Ig分子轻链只有一个型,不是κ 型就 是λ 型。)
10,530
320 X 10,530 = 3,369,600
The potential diversity generated by V(D)J recombination is virtually infinite. >Total lymphocytes in a human ~1012 >Genome size ~3X109 bp
四、选择性传递
(主要借助胎盘滋养层细胞表面的FcR进行的。 )
五、具有免疫原性
1、同种型(isotype)
2、同种异型(allotype)
3、独特型(idiotype)

将Ig作为抗原在异种、同种异体或自身体 内进行免疫,均能诱导机体发生免疫应答, 产生相应的抗体,这些抗体可用血清学方 法进行检测,因此称为Ig的血清型
(二)重链类型转换 (成熟B细胞,抗原刺激后) 即class switch,又称S-S转换。

第03章抗体制备

第03章抗体制备
3.刺激淋巴细胞的增殖分化,增强和扩大免疫应答。
第三节 多克隆抗体的制备及应用
一、免疫动物的选择
抗原与动物种属之间的关系 动物的个体因素 抗原的性质与动物种类 抗体的用量和要求
IgY有如下几方面的优点
无需采血,只需收集免疫母禽产下的禽蛋即可提取 抗体;
使用少量的抗原免疫禽类既可获得大量的质量均一 的特异性IgY;
噬菌体抗体库主要工作流程
从外周血或其他免疫组织器官克隆出全套抗体基因菌体表达,构建全部Ig cDNA的噬菌体抗体库。
筛选含有目的Ig表达的噬菌体。 建立目的Ig表达的噬菌体抗体库。 扩增制备噬菌体抗体。 纯化抗体。
噬菌体抗体库技术的主要特点
IgY抗体耐酸、耐热,经巴氏消毒后活性依然存在, 因此容易保存和运输;
由于种系发生距离相差很大,禽类IgY与哺乳动物免 疫球蛋白之间不会发生交叉反应;
IgY不激活哺乳动物的补体系统,不与类风湿因子或 Fc受体相结合,避免在免疫检测过程中产生假阴性或假阳 性结果;
IgY对哺乳动物抗原的敏感性高。
二、抗原剂量的选择
四、采血方法
颈动脉放血法 静脉采血法 心脏采血法
五、抗血清鉴定及保存
抗体效价和纯度的测定 抗体特异性的鉴定 抗体亲和力的鉴定 抗血清的保存
六、抗体的纯化
IgG类抗体的纯化:盐析法粗提γ-球蛋白、离子交换 层析提取IgG、亲和层析法。
特异性抗体的纯化:亲和层析法、吸附法
七、多克隆抗体的特性和应用
用于某些疾病的紧急预防,例如破伤风和Rh不合的 新生儿溶血症等。
用于某些感染性疾病和移植排斥反应等的治疗。 应用于某些疾病的临床检验。 在科研中常用于免疫印迹和免疫组化等。
第四节 单克隆抗体的制备及应用

南开大学免疫学讲义-第三章 抗体

南开大学免疫学讲义-第三章 抗体

第三章免疫球蛋白分子—抗体第一节抗体的发展及其特征一、抗体的发现血清中存在一种能特异性中和外毒素的组分称为抗毒素,使细菌发生特异性凝集的组分称之为凝集素。

其后将其称为抗体(antibody,Ab),将能刺激机体产生抗体的物质称为抗原(antigen)。

二、抗体的理化性质40年代初期Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫家兔,证实了抗体活性与血清丙种球蛋白组分相关。

图1. 兔血清电泳分离图2.不同类免疫球蛋白的电泳分离离心常数7Sγ(16, IgG) ; 19S,β2(β2M,90,IgM); β2A(IgA)三、抗体的生物学活性1.抗体与抗原的特异性结合。

2.抗体与补体的结合。

3.抗体的调理作用。

第二节免疫球蛋白的分子结构与功能一、免疫球蛋白的基本结构Porter对血清IgG抗体的研究证明,Ig分子基本结构是由四个肽链组成的,二条较小的轻链和二条较的重链,轻链与重链是由二硫键连接形成,分为氨基端(N端),羧基端(C端)。

(一)轻链和重链1.轻链(light chain,L链)214氨基酸残基组成,通常不含碳水化合物,分子量为24KD,有两个由链内二硫键组成的环肽,可分为:Kappa(κ)与lambda(λ)2个亚型。

2.重链(heavy chain,H链)450-550氨基酸残基组成,分子量55或75KD,含糖数量不同,4-5个链内二硫键,可分为5类,μ、γ、α、δ、ε链,不同的H链与L链(κ或λ)组成完整的Ig分子。

分别称为:IgM,IgG,IgA,IgD和IgE。

(二)可变区和恒定区1.可变区(Variable region,V区)L链N端1/2处(V L)108-111个氨基酸残基,H链N端1/5-1/4处(V H)118个氨基酸残基,V区有一个肽环65-75个氨基酸残基。

高变区(hypervariable region, HVR)可变区骨架区(framework region, FR)V L的HVR在24-34,50-56,89-97氨基酸位置。

第三章抗体习题

第三章抗体习题

免疫球蛋白(仅掌握单选题、填空题及标※的名词解释和问答题即可,其余内容为了解内容)※名词解释:1.抗体(antibody)2.Fab(fragment antigen binding)3.Fc(fragment crytallizable)4.免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)5.超变区(hypervariable region,HVR)6.可变区(variable region,V区)7.单克隆抗体(Monoclonal antibody, mAb)8.ADCC(Antibody –dependent cell-mediatedcytotoxicity)9.调理作用(opsonization)10.J链(joining chain)11.分泌片(secretory piece)12.Ig功能区(Ig domain)13.CDR(complementary-determining region)问答题※1.简述抗体与免疫球蛋白的区别和联系。

※2.试述免疫球蛋白的主要生物学功能。

※3.简述免疫球蛋白的结构、功能区及其功能。

4.简述单克隆抗体技术的基本原理。

参考答案名词解释1.抗体(Antibody) :是B 细胞特异性识别Ag后,增殖分化成为浆细胞,所合成分泌的一类能与相应抗原特异性结合的、具有免疫功能的球蛋白。

2.Fab(Fragment antigen binding):即抗原结合片段,每个Fab段由一条完整的轻链和重链的VH和CH1功能区构成,可以与抗原表位发生特异性结合。

3.Fc片段(fragment crytallizable):即可结晶片段,相当于IgG的CH2和CH3功能区,无抗原结合活性,是抗体分子与效应分子和细胞相互作用的部位。

4. 免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig):是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。

可分为分泌型和膜型两类。

5.高变区(hypervariable region ,HVR):在Ig分子VL和VH内,某些区域的氨基酸组成、排列顺序与构型更易变化,这些区域为超变区。

免疫学第三章抗体

免疫学第三章抗体
❖ 同种型特异性因种而 异,如人类有五类 Ig、大鼠有七类Ig、 家兔有四类 Ig。
IgG1 (kappa)
IgM (kappa)
(2)同种异型(allotype)
❖ 同种系的不同个体之 间,同一类、亚类、型、 亚型的免疫球蛋白, 在结构上可能会有一 个或数个氨基酸的差 异, 称为同种异型。
❖ 由同一基因座位上不 同等位基因编码。
排列顺序以及结构是随 抗体分子的特异性不同而 有所变化,决定了抗体的 特异性。
重链的可变区和恒定区
❖ 恒定区(constant region, C区):可变区外其余 的氨基酸分子。(占重 链的3/4)。
数量、种类、排列 顺序及含糖量都比较 稳定,称为稳(恒)定 区。
轻链的可变区和恒定区
❖ 可变区(V区):氨基
❖ 免疫球蛋白的存在形式:
免疫球蛋白除分布于体液中之外,还可 存在于B细胞膜上。
❖ 膜型(membrane immunoglobulin, mIg)
--- B细胞膜上的抗原受体;
❖ 分泌型(secreted immunoglobulin, sIg)
---分泌进入体液, 介导体液免疫应答。
2、免疫球蛋白的基本结构
即抗原结合片段。
Fc 片段(fragment crystallizable,Fc):在
低温或低离子强度下可形成结晶,故称为可 结晶片段。
❖ Fab 片段:
每一个含有一条 完整的 L 链和 H 链近 N 端侧 的 1/2 。
❖ Fc 片段:
含有两条 H 链 羧基端(C 端) 的一半。
❖ Fab 片段:
❖ 五 类 免 疫 球 蛋 白 IgG , IgM , IgA , IgE , IgD的单体分子结构都是相似的,即是由 两条相同 H 链和两条相同 L 链共四条肽 链构成的“Y”字形的分子。

微生物兽医免疫第三章抗体与免疫球蛋白

微生物兽医免疫第三章抗体与免疫球蛋白

2、胃蛋白酶 水解 IgG,获得一个F(ab′)2片段及若
干小分子片段,被称为pFc′。 (1)F(ab′)2片断:
为双价; (2)pFc′:
失去生物学活性 。
三、J链和分泌成分
1、J链(joining chain) (1)是一条多肽链,由浆细胞产生; (2)可连接Ig单体形成二聚体、五聚体。
IgG 440,IgM、IgE 550个氨基酸
(3)V区有3个区域的氨基酸组成和排列顺序 特别易变化,称为高变区;高变区之外区域 称为骨架区; (4)据重链 C 区氨基酸的组成和排列的不同, 将Ig分为五类。
IgG、IgM、IgA、IgD、IgE
2、轻链(light chain,L链) (1)由220个氨基酸组成; (2)轻链N端的109个氨基酸为V区,其余 为C区; (3)V区有3个高变区; (4)轻链分为κ(Kappa)和λ(Lambda) 两型。
猪瘟病毒 —— 抗猪瘟病毒抗体(猪) 口蹄疫病毒 —— 抗口蹄疫病毒抗体(猪) 猪丹毒杆菌 —— 抗丹毒杆菌抗体(猪) 猪免疫球蛋白G 免疫家兔 兔产生抗猪 免疫球蛋白抗体(抗抗体)
抗原 抗体(猪,IgG) 抗抗体(兔)
抗原
抗体
(猪瘟病毒,口蹄疫病毒,猪丹毒杆菌)
第七节 人工制备抗体的种类
多克隆抗体 : 多个抗原决定蔟——机体——多种
3、铰链区 (1)位于CH1与
CH2之间; (2)易于弯曲;
含有丰富的脯氨酸 (3)易被木瓜蛋白酶、
胃蛋白酶水解。
二、免疫球蛋白的水解片段及生物学活性 1、木瓜蛋白酶水解片段 Ig被木瓜蛋白酶水解后得到3个片段,2个相
同的 Fab 片段和1个 Fc 片段。
(1)Fab片段:即抗原结合片断 (antigen-binding fragment)

第三章抗体

第三章抗体

一、Ig的基因结构
κ链 Vκ(约100个)、 Jκ(5个)、 Cκ(1个)
λ链 Vλ(约30个)、 Jλ-Cλ(4个)
H链 V基因(约95个) D基因(27个) J基因(6个) C基因(9个)
Human antibody genes
二、Ig的基因的重排与表达调控
Light chain diversity created by variable recombination
➢IgD
特点
扁桃体、脾等处的浆细胞产生 为单体分子,分子量为 175KD 占血清 Ig 总量的 0.2% 左右 IgD 的铰链区较长,对蛋白酶敏感,因此,半衰期仅 2.8 天 存在形式 分泌性 — 血清中;膜结合性 — B细胞表面
功能
IgD 是 B 细胞膜表面的抗原受体。在 B 细胞分化成熟的过程 中,细胞表面除了表达 mIg M ,同时表达 mIgD ,是 B 细胞 成熟的一个标志。
分泌片( secretory piece ) 简称 SP, 由上皮细胞合成,和分泌型 IgA 连接,使 之不受环境中酶的破坏
➢Ig的功能区
{L 链功能区: VL 、 CL H 链功能区: VH 、 CH1 、 CH2 、 CH3 ( Ig G 、 IgA 、 IgD ) ,IgM 和 IgE 的重链有五个功能区,多一个功能区, CH4 。
IgG 或IgA 与靶细胞结合后其Fc 段和携带FcγR的效 应细胞(NK cells 、Mф和PMN)或FcαR的效应细 胞(PMN)结合,释放穿孔素或颗粒酶导致靶细胞 溶解或凋亡。
多形核中性粒细胞简称中性粒细胞
(Polymorphonuclear Neutrophils,PMN),
J Chain
在CHl和CH2之间,含较多脯氨酸和半胱氨酸残基,不易构 成氢键。妨碍螺旋结构的形成,而呈伸展状态,从而保持相当 柔曲性。

第三章-抗体

第三章-抗体

第三章-抗体第三章抗体在我们的身体中,有一种神奇的物质,叫做抗体。

它就像是身体里的“小战士”,时刻准备着与入侵的“敌人”作战,保护我们的健康。

抗体,本质上是一种蛋白质,由我们身体的免疫系统产生。

当我们的身体遭遇外来的病原体,比如细菌、病毒、真菌等等,免疫系统就会被激活,启动一系列的防御机制,其中就包括产生抗体。

这些抗体具有高度的特异性,这意味着它们能够精准地识别并结合特定的病原体。

就好像每一把钥匙只能开一把特定的锁一样,每一种抗体也只能与特定的病原体或其产生的物质相结合。

这种特异性使得免疫系统能够有针对性地进行攻击,而不会误伤自身的正常细胞和组织。

抗体的产生是一个复杂而精妙的过程。

首先,当病原体进入体内后,免疫系统中的抗原提呈细胞会将病原体的特征“展示”给淋巴细胞。

淋巴细胞接收到这些信息后,会开始分化和增殖,形成能够产生抗体的浆细胞。

浆细胞会大量分泌抗体,释放到血液和组织液中,去寻找并结合病原体。

抗体与病原体结合的方式多种多样。

有的抗体可以直接中和病原体的毒性,使其失去致病能力;有的抗体能够标记病原体,让免疫系统中的其他细胞更容易识别和吞噬它们;还有的抗体可以激活补体系统,引发一系列的免疫反应,最终消灭病原体。

在我们的日常生活中,抗体发挥着至关重要的作用。

例如,当我们接种疫苗时,实际上就是让身体提前接触一些经过处理的病原体成分,刺激免疫系统产生抗体。

这样,当真正的病原体来袭时,身体已经有了“记忆”,能够迅速产生大量的抗体进行抵抗,从而避免生病。

另外,抗体还可以用于疾病的诊断和治疗。

通过检测血液中特定抗体的存在和水平,可以帮助医生判断一个人是否感染了某种疾病,以及感染的程度和阶段。

在治疗方面,人工制备的抗体药物已经成为了治疗许多疾病的重要手段,比如肿瘤、自身免疫性疾病等。

然而,抗体并非是万能的。

有时候,病原体可能会发生变异,导致原本有效的抗体无法识别它们。

这也是为什么一些疾病会出现反复感染或者难以治愈的情况。

免疫学概览第三章-B细胞和抗体

免疫学概览第三章-B细胞和抗体
免疫学概览
第三讲 B细胞和抗体
回顾
• 补体蛋白 • 专职吞噬细胞
• NK细胞
• B细胞起源于骨髓中的干细胞 • 在骨髓中产生的早期阶段,B细胞通过选择基因片段来编码组成其
受体(BCRs)的两种蛋白质,这些受体继而占据B细胞表面的位置 • 抗体分子几乎与BCRs完全相同,唯一的区别是在其重链末端缺乏
体细胞高突变
• 在B细胞成熟的过程中,体细胞高突变发生得相对较晚,事 实上,能持续产生IgM抗体的B细胞通常不会经历体细胞的高 突变
• 不依赖T细胞就能激活的B细胞通常不发生体细胞高突变和类 型转换
职业抉择
• 浆细胞——抗体工厂 • 记忆细胞
• 在非T细胞依赖的B细胞激活过程中,是不 会产生记忆B细胞的
• 在T细胞依赖型激活中,第二种信号通常由Th细胞提 供,在激活的Th细胞表面有CD40L的蛋白
• 当CD40L插入B细胞表面上的CD40蛋白时,共刺激信号 就被发送出去了,而且BCRs被交联,B细胞也就被激 活了
• 在对特定抗原的应答中,也有些原初细胞很少或干脆不需要T细 胞的帮助就能被激活,这种模式被称为非T细胞依赖型激活
形式排出体外(粪便中细菌50%) • 作为被动抗体
IgE抗体
• 过敏性休克是由肥大细胞脱颗粒引起的 • 防御能穿过保护屏障的寄生虫的感染 • 组胺 • 接触过敏原,产生IgE抗体
过敏原 脱颗粒
抗体类型转换是由转换发生时B细胞所遇到的细胞因子所控制 的:
某些细胞因子或者其不同组合能影响B细胞从一种类型转换 成另一种类型
抗体的种类及其功能
• IgM抗体:当原初B细胞第一次被激活时就主要制造IgM抗体, 第一抗体
• IgM抗体最初是在感染过程中产生的,非常善于激活补体级联反 应,又称为“修复补体”

第三章 人工抗体的制备

第三章  人工抗体的制备

h
9
五、单克隆抗体的应用
(一)在血清学技术方面。
(二)在免疫学基础研究方面。
(三)在肿瘤治疗方面。如生物导弹。
(四)在抗原纯化方面。
h
10
第三节 基因工程抗体
一、概念: 利用基因工程技术制备的抗体分子,称为基因工程抗体。这是分子水平的抗体。
优势:去除或减少 无关结构,保留或 增加天然抗体特异 性和生物学活性。
五、全套抗体基因库
h
15
第四节 催化抗体
一、概念: 是具有催化活性的免疫球蛋白,也叫抗体酶。具有抗体的高度选择性和酶的高效催化性。
优点: 具有抗体的高
度选择性和酶的高
效催化性。
h
16
二、催化抗体的制备:
如:细胞融合法、基因工程抗体技术、引入辅助因子法等。
三、催化抗体的应用:
如:在抗肿瘤方面的应用。在戒毒上也有重要应用价值。
h
17
h
11
基本制备过程:
h
12
一、嵌合抗体:
是指在同一抗体分 子中含有不同种属来 源抗体分子片段的抗 体。
嵌合抗体多为“鼠-
人”类型。
h
13
二、重构抗体:
将鼠抗体超变区基因嵌入人抗体Fab骨架区编码基因中,再将 此DNA片段与人Ig恒定区基因相连,转染杂交瘤细胞,并表达嵌合的V 区抗体。
三、单链抗体:

需适当选择 产生高纯度抗体
无 悬浮培养:0.01~0.05
中空纤维: 小鼠
体外培养液:无7
三、建立B细胞杂交瘤与单克隆抗体生产基本过程
h
8
四、单克隆抗体的优势
高度均一性: 纯度很高的均一性抗体
高度专一性: 只对抗原分子上某一抗原决定簇起反应。

《医学免疫学 》教学课件:第三章 抗体

《医学免疫学 》教学课件:第三章 抗体
抗体主要存在于血清和体液中,是介导特异性体液免疫作 用的重要效应分子。它们能与病原体等相应抗原特异性结 合,并在其他固有免疫细胞和分子协助下产生抗感染免疫 效应。
表 达 于 B 细 胞 表 面 的 膜 型 免 疫 球 蛋 白 M ( membrane immunoglobulin M, mIgM)为IgM 单体,其胞外区结构与 血液中的IgM基本相同,且具有特异性识别结合相应抗原 表位的功能,故称之为B细胞抗原受体(BCR)。
多克隆抗体:由多个B细胞克隆产生的针对多种抗原 表位的混合抗体。
特点:来源广泛,制备容易,但特异性不高,易发生 交叉反应。
单克隆抗体:由单一克隆杂交瘤细胞产生的只识别 某一特定抗原表位的同源抗体。
特点:结构高度专一,特异性强,效价高,少或无交 叉反应,可大量生产。
单克隆抗体的制备原理和方法:
与Tiselius一起,用电 泳证明了抗体是丙种球 蛋白。
Elvin A. Kabat (1914-2000)
Adapted from A. Tiselius and E. A. Kabat, J. Exp. Med. 1939, 69:119
The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1972
同种型
同种异型
独特型
(种属型标志) (个体型标志) (细胞型标志)
同种型
同一种属所有个体抗体分子共有的抗原特异性, 为种属型标志。 同种型抗原决定基位于CH、CL。 根据CH抗原特异性的不同将抗体分成五类。 亚类:因重链恒定区内某些抗原表位及二硫键数 目和位置存在差异,IgG分四个亚类(IgG1~4), IgA分两个亚类(IgA1~2)。 根据CL抗原特异性的不同将Ig分成两型:κ、λ。 亚型:λ型轻链恒定区内由于某些抗原表位存在差 异,可将其分为λ1~4四个亚型。

第三章 抗体与免疫球蛋白

第三章  抗体与免疫球蛋白

第三章抗体与免疫球蛋白第一节抗体的发现及其特性一、发现:1890年德国学者Behrong和日本学者北里用白喉杆菌外毒素免疫动物,在其血清中发现一种能力和这种外毒素的组分称为抗毒素。

这是在血清中发现的第一种抗体。

二、抗体的理化性质1、抗体是球蛋白(Globulin)通过电泳证明抗体是两种球蛋白后又经电泳分析,超速离心分析和分子量测定等方法,发现大部分抗体是r球蛋白,小部分是β球蛋白。

所以早期对抗体性质的研究证明抗体不是由均质性球蛋白(γ〃β)组成,是异均性的。

2、免疫球蛋白(lmmunoglabulin, Ig)为了准确描述抗体球蛋白的性质,在60年代初提出将具有抗体活性的球蛋白称为免疫球蛋白。

从此r球蛋白则改称为IgG,BIM称为IgM,而B:A称为IgA,其后又发现IgE和IgE。

抗体主要存在于血清中,但也存在于体液和外分泌液中,所以含有抗体的血清称为免疫血清。

B细胞表面上也存在免疫球蛋白,称为膜表面免疫球蛋白Surface membrane Ig,SmIg。

第二节免疫球蛋白的结构一、Ig的基本结构1、是由四条链组成的糖蛋白2、重链(Heavy chain)轻链(light chain)3、可变区和恒定区①可变区(VariableV区)②恒定区(Constant region, C区)二、Ig功能区1、L链:VL,CL2、H链:3、铰链区:①富含脯氨酸,易发生伸展及一定程度的转动,便于与抗原决定簇发生互补,也易于与补体结合。

②对木瓜蛋白酶,胃蛋白酶敏感。

③ IgM,IgE缺乏铰链区。

4、T链和分泌成分① T链(Toining chain)存在于IgM和IgA中,通过二硫键与它们结合,IgM为五聚体,IgA为二聚体(分泌型)②分泌成分或分泌片(seeretory componant, secratory, piece)是分泌型IgA的一种辅助成分。

功能是抵抗外分泌液中蛋白水解酶的降解。

三、Ig水解片段(1)木瓜蛋白酶(Papain)水解片段①在二硫键上方切断,产生三个片段:2个Fab段(抗原结合段)Fragineut:fantigen binding)。

沈阳农业大学 免疫学第三章 抗体PPT幻灯片

沈阳农业大学 免疫学第三章 抗体PPT幻灯片
第一节 免疫球蛋白的结构和类别
一、抗体的基本结构 二、免疫球蛋白的类别
三、Ig的类别转换
第二节 抗体多样性的原理
一、免疫球蛋白的基因结构 二、免疫球蛋白基因的重排 三、免疫球蛋白的多样性
第三节 抗体的功能
一、V区的功能
二、C区的功能
第四节 单克隆抗体和基因工程抗体
一、多克隆抗体 二、单克隆抗体 三、基因工程抗体
三、Ig的类别转换 B细胞接受抗原刺激后首先合成IgM,在多种因素影响下
可转变为合成IgG、IgA或IgE。 IgG
IFN-γ
IgM
IL-4
IgE
IL-5
Ig的类别转换是重链C区发生了变化,V区不变
结合抗原的特异性不变
IgA
与同一抗原决定簇结合
一、免疫球蛋白的基因结构
H链C区的不同:
γ: Gammar---IgG α: Alpha---IgA μ: Mu---IgM δ: Delta----IgD
区、
CH4区
各功能区的功能
(1)VL和VH:抗原结合的部位 (2)CL和CH1:提高抗体与抗原的结合能力 (3)CH2(IgG)和CH3(IgM):补体 结合部位
(4)CH3(IgG):与多种免 疫细胞的Fc受体结合
FcγR (5)CH4(IgE):与多种免疫细
胞的Fc受体结合 FcεR
二、免疫球蛋白的类别
先重链
先D-J 后V-DJ
重排是通过重组酶识别V、 (D)、J基因片段两侧 的重组信号序列,再通 过切断和修复DNA而实
现的。
后轻链
先κ 后λ
V基因片段编码重链可 变区约98个氨基酸, 包括CDR1、CDR2和
部分CDR3
D基因片段编码 重链可变区大

第三章 免疫球蛋白和抗体(a)

第三章 免疫球蛋白和抗体(a)

木瓜蛋白酶
胃蛋白酶
➢作用位点:铰链区二硫键 ➢作用位点:铰链区二硫
连接2条H链的近N端处
键连接2条H链的VH ➢F(ab’)2:双价与Ag结合 和CH1,单价与Ag结合
➢Fc:2条H链CH2+CH3, 与免疫分子和效应细胞结 合部位,同种型抗原性存 在于此
➢ pFc’:大分子片段,失 去活性
(二)Ig功能区的结构和主要功能
❖结构——Ig折叠 Ig的二级结构是由几股多肽链折叠形成 的两个反向平行的片层,两个片层中 心由链内二硫键垂直连接,形成“桶状” 或“三明治”结构。这种折叠方式称为 免疫球蛋白折叠。
❖功能区的作用——
➢ VH和VL:结合抗原 ➢ CH和CL:同种异型遗传标志 ➢ IgG的CH2和IgM的CH3:激活补体 ➢ IgG的CH2:通过胎盘 ➢ IgG的CH3和IgE的CH2和CH3:与免疫细胞Fc受体结合
重链和轻链
❖重链(H链)
➢ 50-70KD,450-550个氨基酸组成 ➢ 分成五类,相应Ig也分为五类。 H: Ig: IgA IgG IgM IgD IgE
➢亚类—— 同一类Ig据其铰链区的氨基酸组成及重链二硫键 数目将Ig分为不同的亚类。
❖轻链(L链)
➢ 25KD,214个氨基酸组成 ➢ 分为、型,功能相似。 ➢ 型有4个亚型 ➢ 据种属不同,其:比例不一
❖调理作用——
IgG类抗体与相应细菌等颗粒性抗原特异性结 合后,通过其Fc段与巨噬细胞或中性粒细胞表 面相应IgG Fc受体(FcγR)结合,促进吞噬细 胞对颗粒性抗原吞噬的作用。
❖抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用——
IgG类抗体与肿瘤或病毒感染细胞表面相应抗原 表位特异性结合后,再通过其Fc段与NK细胞、 巨 噬 细 胞 和 中 性 粒 细 胞 表 面 相 应 IgG Fc 受 体 (FcγR)结合,增强或触发上述效应细胞对靶
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

四月中,流感访问了中国和日本。
五月,流感遍布非洲和南美。
流感病毒
第四节 免疫球蛋白的功能
第四节 免疫球蛋白的功能
一、特异性结合抗原
最显著的生物学特点 抗原结合点由L链和H链超变区组成 与相应抗原上的表位互补,借助静 电力,氢键以及范德华力等次级键 相结合。
第四节 免疫球蛋白的功能
一、特异性结合抗原
基酸组成和二硫键数目的差异。
一、同种型
2、型和亚型(types and subtypes) (1)型:位于CL (2)亚型:按λ轻链恒定区(C2)个别氨 基酸的差异又可分为λ1,2,3,4,四个亚型。
第三节 免疫球蛋白分子的抗原性
一、同种型 二、同种异型 三、独特型
第三节 免疫球蛋白分子的抗原性
胃蛋白酶
(1)F(ab’)2 段 1个 结合颗粒性抗原出现凝集反应 (2)Fc’段 1个
无生物学活性
Edelman
研究简史
3、Edelman: 兔Fab 羊 巯基乙醇-尿素变性电泳
与重链反应
羊抗兔Fab段的抗体
与轻链反应 与重链反应
兔Fc

羊抗兔Fc段的抗体
不与轻链反应
4、X-线晶体衍射技术进一步证明
第三章 抗

与免疫球蛋白
浆 细 胞
第一节 概
抗体(antibody,Ab):

是指由浆细胞(PC)合成和分泌的, 能与Ag进行特异性结合的糖蛋白。
免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig):
具有抗体活性,或者在结构上与Ab 相似的球蛋白。


Behring
(德 国)
概 述
一、抗体的发现
HVR1,HVR2,HVR3又分别称为CDR1,CDR2,CDR3
三、可变区和恒定区
2、恒定区(constant region,C区)
L链C端1/2处,105个aa;
H链C端3/4-4/5处,331-431个aa。
在同一种属动物中是比较恒定的, 是制备第二抗体进行标记的重要基础。
第二节 抗体的分子结构 及其酶解片段
1890
概 述
二、抗体的理化性质
第二节 抗体的分子结构 及其酶解片段
Porter
研究简史
1、Porter
(1)Fab段
木瓜蛋白酶
2个 抗原结合片段
fragment with antigen binding
(2)Fc段 1个 可结晶片段
fragment crystallized
研究简史
2、Nisonoff
第二节 抗体的分子结构 及其酶解片段
一、酶解片段
二、轻链和重链
三、可变区和恒定区 四、功能区
一、酶解片段 木瓜蛋白酶
(1)Fab段 2个
胃蛋白酶
(1)F(ab’)2 段 1个
(2)Fc段
1个
(2)Fc’段
1个
第二节 抗体的分子结构 及其酶解片段
一、酶解片段
二、轻链和重链
三、可变区和恒定区 四、功能区
3、抗原进入体内选择相应的免 疫细胞克隆与之结合并激活它。该 克隆的细胞增殖分化为抗体生成细 胞,分泌抗体发挥免疫效应或形成 免疫记忆细胞。
4、胚胎期免疫细胞克隆受到抗原刺激
(自身的或体外的),该克隆将被排除或受
抑制,从而形成免疫耐受性。该克隆称为
“禁忌克隆系”。“禁忌克隆系”可以突变
或复活成为能与自身抗原起反应的克隆,从
一、酶解片段
二、轻链和重链
三、可变区和恒定区 四、功能区
四、功能区
链内二硫键折叠成球形区称为功能
区,约由110个aa组成。 1、L链:2个,VL,CL各1 2、H链: IgG,IgA,IgD:4个(V区1个,C 区3个) IgM,IgE:5个(V区1个,C区4个)
四、功能区
3、功能区的作用:
(1)VL和VH:结合抗原决定簇(FV区) (2)CL和CH:具有同种异型的遗传标记 (3)CH2:结合补体 (4)CH3:结合Fc受体 单核细胞,巨噬细胞,粒细胞,B细胞,
二、轻链和重链
1、轻链(light chain,L链)
214个氨基酸残基,24KD。 分为:κ与λ 2个亚型。 2、重链(heavy chain,H链) 450-550个氨基酸残基,55-75KD。 分为5类,μ、γ、α、δ、ε链。 IgM,IgG,IgA,IgD,IgE。
第二节 抗体的分子结构 及其酶解片段
4、可经初乳传给新生儿 5、免疫排除作用: sIgA结合、阻止饮食中的可溶性Ag或 肠菌群产生的热原性物质进入血流的作用
粘 膜 淋 巴 集 合 体
脊髓灰质炎病毒
脊髓灰质炎患儿脊髓切片
脊髓灰质炎疫苗
国家免疫日
国家免疫日
1957年美国进行大规模抗小儿麻痹疫苗免疫注射
国家免疫日
我们赢了!
4、自然选择学说
1955 Jerne
在正常情况下,血液中有少量抗体,
抗原与抗体相结合进入细胞内,刺激机
体产生更多的抗体。
5、克隆选择学说
1957 Burnet
细胞表面天然存在着识别抗原的 受体,一个细胞只能合成一种特异性 的抗体,接受抗原刺激后这些细胞增 殖、分裂并合成更多的抗体,胚胎期 免疫细胞接受抗原刺激后,该细胞会 被排除或受抑制,从而形成自身耐受。
二、同种异型(allotype)
是指同一种属不同个体间的 Ig分子抗原性的不同。
第三节 免疫球蛋白分子的抗原性
一、同种型
二、同种异型 三、独特型
第三节 免疫球蛋白分子的抗原性 三、独特型(idiotype,Id)
为每一种特异性IgV区上的抗原特异性 独特型的抗原决定簇称为 独特位(idiotope) 独特型和抗独特型抗体 可形成复杂的免疫网络
而导致自身免疫或自身免疫病。
解 释:
抗体形成; 抗原识别; 免疫耐受; 自身免疫: 免疫记忆; 排斥反应: 血型抗体。
Burnet原则
结果表明:能与某种抗原进行特异性
结合的免疫细胞受到了放射性元素的破 环,不能形成分泌抗体的细胞,致使相 应的特异性抗体明显减少,而识别其他 抗原的细胞则不受影响。
一、酶解片段
二、轻链和重链
三、可变区和恒定区 四、功能区
三、可变区和恒定区
1、可变区(Variable region,V区)F
L链N端 1/2处(VL)110个aa; H链N端1/5-1/4处(VH)118个aa。 骨架区(framework region, FR) 高变区(hypervariable region, HVR) 互补决定区(complementarity-determining region, CDR),F
3、介导I型超敏反应
可抗寄生虫
祝 福
免疫学多媒体教学
--免疫学第一定律
他是发现嗜酸性、嗜碱性粒 细胞和肥大细胞的学者,是世界 上第一个治疗梅毒病人的医生, 是把定量技术引入免疫学研究的 第一人,是生命科学届受体概念 的创始人,免疫学界的鼻祖, 1908年诺贝尔奖获得者,著名的 德国免疫学家--
J chain
CH4
二、IgM :五聚体
1、产生部位:同IgG
2、含量与分布:10%
900KD
分布血液和组织液中
3、初次应答中的主要抗体
4、进化上和个体发育最早出现的抗体
5、主要的血型Ab 6、处女型B cell的主要mIg
Ig-
Ig-
Ig-
Ig -
C1q与IgG、IgM结合的特点
同一克隆的浆细胞
产生的不同类别的Ig
具有相同的特异性
第四节 免疫球蛋白的功能
二、活化补体
1、IgM,IgG1,IgG2和IgG3可通过 经典途径活化补体。
2、凝聚的IgA1,IgG4,IgE等可以
通过替代途径活化补体。
第四节 免疫球蛋白的功能
三、结合Fc受体
1、介导I型变态反应
IgE诱导的细胞脱颗粒,引起I型变态反应。
患脊髓灰质炎的儿童 (Child with polio sequelae WHO)
WHO 宣称将在2003年在全球消灭脊髓灰质炎
Victims of polio WHO
三、IgA (局部Ab)
血清型:单体 170KD 分泌型:双体 IgA1
390KD IgA2
三、IgA (局部Ab)
1、产生部位:粘膜淋巴组织 2、含量与分布:10% 粘膜表面 3、粘膜免疫中的主要Ab
这场流感的病原,到现在还不是很清楚,但大家相 信,它是一种突变后的猪病毒。
它开始于1918年3月11日上午,地点是肯萨斯州的方斯顿军营。 某连炊事员艾尔伯特· 米丘到部队卫生所看病,症状似为典型的感冒:低热、中等喉 痛、轻微头痛及肌肉痛。卫生员建议卧床休息。 到中午,107名士兵发病。 不到两天,522名士兵发病。许多因为严重肺炎而病危。 没多久,全国各地的军事基地都有发病的消息传来。 几千名在东海岸的海员发病。 一周内,流感传染到封闭的地域,如旧金山附近的阿尔克揣兹岛。 不管病原如何,它肯定是靠空气传染。 七天之内,全美所有州都被传染。 然后,流感漂过了大西洋。 到四月,法国军民均被传染。
第四节 免疫球蛋白的功能 2、调理作用(opsonization)
是指抗体,补体等调理素(opsonin),
促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原
的作用。
抗体:热稳定调理素 补体:热不稳定调理素
第四节 免疫球蛋白的功能
3、ADCC作用 antibody dependent cell-
mediated cytotoxicity
NK细胞
第三节 免疫球蛋白分子的抗原性
第三节 免疫球蛋白分子的抗原性
一、同种型 二、同种异型 三、独特型
相关文档
最新文档