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1． 4． 2 正交试验 在前期单因素试验确定的最佳提取工艺条件基础上， 选取 L 9 (3 4 )正交试验 表， 对乙醇体积分数、 提取温度、 时间和料液比在 4 个不同水平进行优化 。
1． 5 黑粒小麦麸皮中花色苷理 化性质的测定
1． 5． 1 pH 对花色苷稳定性的影响 取花色苷提取液 20． 00 mL 7 份， 用 Na 2 HPO 4 －柠檬酸缓冲液配制不同 pH 提取液， 测定溶液在 λ max处的吸光度(A)， 放置室内暗处， 一周后在 λ max 处测溶液吸光度并观察其颜色变化。 1． 5． 2 温度对花色苷稳定性的影响 取花色苷提取液 200 mL 装于 5 个碘量瓶中， 在不同温度水浴中各加热 3 h， 每 隔 30 min 取一次样，迅速冷却后测定 λ max 处的吸光度， 并观察其颜色变化 。
Байду номын сангаас
2.1.2 液料比影响
试验设定乙醇浓度50%、提取时间120 s和微波功率300 W，考虑不同液料 比对得率影响，结果见图3。 由图3可知，随着液料比提高，黑小麦色素吸光值先增加后降低，在液料 比为12 mL/g时吸光值达到最高。这主要是因为前期溶剂量越大，有效成 分浸出越完全，吸光值也就越大；但当溶剂过大时，会造成溶剂和能源 的浪费。因此确定液料比为12 mL/g，作为后续试验继续考察。
由图1可知，该色素在532 nm处有最大吸收。因此，在此波长下测定其吸光度值。 （3） 单因素试验 分别以乙醇浓度、液料比、提取时间和微波功率为影响因素考察其对吸光值的影响。
根据Box-Behnken试验设计原理，在单因素试验 的基础上，选取影响显著的液料比、提取时间和微波 功率3个影响因素，采用3因素3水平的响应曲面分析 方法，试验因素与水平设计见表1。共17个试验点： 其中12个为析因点，5个为中心点。
2． 3 黑粒小麦麸皮花色苷理化 性质
2． 3． 3 光照对花色苷稳定性的影响 由图 3 知， 花色苷溶液光照 3 d 内吸光值变化很小， 说 明短时间内花色苷对光照不敏感;随着时间的延长， 花 色苷溶液在光照贮存和避光贮存下， 吸光度均有一定 幅度降低， 但在阳光直射条件下降低最明 显， 说明光对花色苷有一定的破坏作用， 使用时要避 光保存。图 3 光照对花色苷稳定性的影响 2． 3． 4 金属离子对花色苷稳定性的影响 图 4 结果表明， 金属离子对该花色苷的稳定性作用由大到 小为:Mg 2 + ＞ K+＞ Al 3 + ＞ Ca 2 + ＞ Fe 2 + ＞Cu 2 + ＞ Zn 2 + ＞ Fe 3 + ， 其中 Mg 2 + 、 K+和 Al 3 + 对 花色苷有很好的增色、 稳定作用;Ca 2 + 和 Fe 2 + 对花 色苷的稳定性影响不大;Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 使花 色苷明显褪色， 并伴有沉淀， 这可能是因为花色苷与 金属离子形成了络合物， 因此， 在生产应用中应尽量 避免与Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 等金属离子的接触
为了对我校自主培育的黑粒小麦麸皮中花色苷进行开发利用， 本试验 以黑粒小麦麸皮为原料，进行了花色苷的提取条件和理化性质的研究 。结果表明， 用 pH 1． 0、 40% 的乙醇作提取剂， 在料液比为 1∶ 20(g/mL)、 70 ℃条件下浸提80 min， 提取效果最好， 花色苷得率为 14． 5%;该花色苷可见光范围内的最大吸收波长为 525 nm， pH 对其 影响明显， 温度影响不大， 60 ℃以内比较稳定。Mg 2 + 、 K+和 Al 3 + 对该花色苷有很好的增色、 稳定作用， Ca 2 + 和 Fe 2 + 对其稳 定作用影响不大， Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 使其明显褪色。该花色 苷耐氧化性、 耐还原性差， 耐光性好。蔗糖、 柠檬酸对其有明显的 褪色作用， 苯甲酸钠在低质量浓度( ＜0． 1 mg/mL)时对其基本无影 响， 在高质量浓度( ＞0． 2 mg/mL)时有一定的褪色作用， 盐对其有 一定的增色、 稳定作用。
2． 3． 1 pH 对花色苷稳定性的影响 7 d 后在 pH ＜5． 0 时， 该花色苷提取液为红色透明状， 稳定性较好;pH ＞ 5． 0 时， 花色苷提取液颜色由浅红变黄绿色， 并出现混浊甚至沉淀现象， 说明 花色苷在中性和碱性范围内色素稳定性很差， 花色苷结构易发生变化。颜色 变化是因为随 pH 变化， 花色苷在水溶液中存在形式为花徉盐式(红色) →查 耳酮式(无色) →醌式(蓝色)。pH 越大， 花色苷的降解速度越快。由此说明， 花色苷在酸性条件下稳定性较好， 可作为酸性食品添加剂。 2． 3． 2 温度对花色苷稳定性的影响 从图2 可以看出， 加热温度小于60 ℃时， 温度及受热时间都对花色苷提取 液的吸光度影响较小， 即较低温下花色苷对热表现出较好稳定性;而当加热温 度高于 80 ℃， 随着时间的延长， 花色苷吸光度明显下降， 说明花色苷在高 温下稳定性差， 这可能是花色苷母体结构受热生成无色查尔酮式结构的缘故 。
2． 3． 5 氧化还原剂对花色苷 稳定性的影响
由图 5 可见， 随着氧化剂 VC、 H 2 O 2 和还原剂Na 2 SO 3 浓度的增大， 花色苷的吸光度急剧下降， 颜色逐渐消退， 其中 Na 2 SO 3 影响最大 ， 0． 5 mg/mL 就能使花色苷褪色， 原因是 SO 2 作用于花色苷类色 素的苯并吡喃环的 4 － 位碳上， 生成了一种无色物质，表明该色素耐 氧化、 耐还原性差， 在使用时应尽量避免与氧化性或还原性物质接触 。 2． 3． 6 食品添加剂对花色苷稳定性的影响 从表 4 可见， 加入一定浓度的 NaCl， 该花色苷溶液的吸光度从 0.849(对 照)上升到 0． 985， 增加了12．84%， 说明 NaCl 对该花色苷有一定 增色、 稳定作用;加入蔗糖和柠檬酸后， 该花色苷溶液的吸光分 别降低了82． 85% 和64． 05% ， 说明蔗糖和柠檬酸对表 4 食品添加剂 对花色苷稳定性的影响该花色苷有明显的褪色作用， 且褪色作用随浓 度增大而加强;当苯甲酸钠质量浓度低于 0． 1 mg/mL 时，花色苷溶液 吸光度基本无变化， 高于 0． 2 mg/mL 时，吸光度降低了 6． 42%， 但随着加入浓度的增大基本保持不变， 说明苯甲酸钠质量浓度在高于 0． 2 mg/mL时对该花色苷有一定的褪色作用。
2． 2 提取条件的选择 由表 2 的极差分析可知， 各因素的影响力为B 提取温度 ＞ A 乙醇体积分数 ＞ D 料液比 ＞ C 提取时间， 据表 2 中的吸光度、 K 值和平均值(K/4)可知， 最佳提取方案是 A 2 B 4 C 2 D 2 ， 即乙醇体积分数为40%， 温度为 70 ℃， 时间 80 min， 料液比为 1∶ 20。按此优化条件重做一次试验， 得其平均吸 光度值为 0．983， 与正交试验最大值 0． 997(A 2 B 4 C 3 D 2 )无显著差异 (P ＞0． 05)， 但却更经济、 实用。此条件下花色苷得率为 14． 50%。
宁夏枸杞子极性提取物在食用油 高温氧化中的作用研究
本试验通过单因素试验和响应曲面分析，得 到超声波协同微波提取黑小麦色素的最佳 工艺条件为液料比11.9 mL/g，提取时间 121 s和微波功率299 W，实际测得的吸光 值为0.704，与理论预测值比较误差仅为 0.72%，该方法稳定可靠。
黑粒小麦麸皮中花色苷的提取及 性质研究
2 结果与分析
2． 1 光谱特征 由图1 可见， 以 pH 1． 0 的乙醇浸提， 所 得色素提取液在紫外光区280 ～285 nm 有 较强的吸收峰， 为花色苷酰基结构的特征 峰;在可见光范围内的最大吸收在 525 nm 处， 为典型的花青素光谱特性［6 ］ 。自 然界花青素多以与糖苷键结合的形式存在 ， 所以推断黑粒麸皮色素为花色苷类， 这 与前人研究结果相符。图 1 黑粒小麦麸皮 色素花色苷紫外全扫描图(200 ～800 nm)
2.1.3 提取时间的影响
试验设定乙醇浓度50%、液料比10 mL/g和微波功率300 W，考虑不 同提取时间对得率影响，结果见 图4。由图4可知，随着提取时间 的增加，黑小麦色素吸光值不断 增加，在120 s时达到峰值。再继 续增加时间，色素吸光值明显下 降，这可能是因为随着超声时 间的增加，温度急剧升高，导致 色素分解所致。因此选择提取时 间120 s，作为后续试验继续考察。
1． 3 测试方法
花色苷提取率采用比色法:通过测定最大波长处的吸光度来计算总花色苷质量 分数， 此方法被用来对黑米色素进行定量分析 ［5 ］ 。 其计算公式为: 总花色苷质量分数(mg/g) =A ×V ×N/(98．2 ×m) 式中:A 为吸光度;V 为定容体积/mL;98． 2 为花第 26 卷第 10 期 李 伟等 黑粒 小麦麸皮中花色苷的提取及性质研究色苷色的平均消光系数;N 为比色时的稀 释倍数(本试验中 N 都为 2);m 为被测样品的质量。 由上式可看出， 当样品质量、 定容体积、 比色时的稀释倍数相同时， 总花 色苷质量分数与吸光度 A成正比， 为了描述方便在本文中直接用吸光度(A)代 表花色苷质量分数。
1． 4 黑粒小麦麸皮中花色苷提 取
1． 4． 1 花色苷的提取光谱特征分析 称取黑粒小麦麸皮 0． 500 g， 加入 10． 00 mLpH 1． 0的 40%乙醇溶液， 立即放入 HH －6 数显恒温水浴锅中 70 ℃浸提 120 min。倒出色素液冷却至 室温， 离心 10 min(转速4 800 r/min)， 上清液为花色苷提取液， 用 UV － 2550 紫外可见分光光度计在 200 ～600 nm 波长内扫描其吸收光谱， 确定最 大吸收波长(λmax )。
1． 5． 3 光照对花色苷稳定性的影响 取花色苷提取液 200 mL 分别装于 3 个碘量瓶中， 分别置于阳光直射处(夏季室 外晴天)、 室内自然光处、 室内避光处保存， 定期测定其 λ max 处的吸光度 ，并观察其颜色变化。
1． 5． 4 金属离子对花色苷稳定性的影响 分别配制含 Mg 2 + 、 Al 3 + 、 Zn 2 + 、 Cu 2 + 、 K+、 Fe 2 + 、Fe 3 + 、 Ca 2 + 离子浓度达 5． 0 ×10－4 mol/L 的溶液， 吸取花色苷提取液 5． 00 mL， 加入金属离子溶液定容至15． 00 mL。在室内暗处放置 7 d 后， 测定 其 λ max 处的吸光度并观察其颜色变化。 1． 5． 5 氧化还原剂对花色苷稳定性的影响 取 9 份 10． 00 mL 花色苷提取液， 加入不同浓度的 VC(维生素 C)、 H 2 O 2 和 Na 2 SO 3 ， 定容为 25． 00mL， 测定其在 7 d 后 λ max 处的吸光度 。 1． 5． 6 食品添加剂对花色苷稳定性的影响 取 5 份 10． 00 mL 花色苷提取液， 分别加不同浓度的食品添加剂(蔗糖、 盐 、 苯甲酸钠、 柠檬酸)溶液15． 00 mL， 测定其在 7 d 后 λ max 处的吸光度 。
文献阅读整理
超声波协同微波提取黑小麦色素的 工艺优化
1. 最佳提取工艺条件为液料比11.9 mL/g，提取时间121 s和微波功率299 W，在此条 件下，吸光值达0.704。工艺稳定可靠，可在生产中应用。 2. 超声波协同微波提取作为一种优良的提取方法，具有操作简便快捷、 提取时间短、 提出率高等特点， 目前已广泛应用在生物活性物质的提取方面 。 3.原料与试剂 黑小麦麸皮，其它试剂均为分析纯 4.方法 （1）超声波协同微波提取 称取3 g黑小麦麸皮于100 mL特制三角瓶中，再 加入一定体积一定浓度的乙醇溶液后，抽滤、定容、 测定。 （2）最大吸收波长的确定 用1.0 cm比色皿，在狭缝宽度为2 nm，采样间 隔为0.50 nm，扫描速度为快速的仪器条件下，用 TU-1810紫外分光光度计对色素从400 nm~700 nm进行 自动光谱扫描。
2.1.4 微波功率的影响
试验设定乙醇浓度50%、液料比10 mL/g和提取时 间120 s，考虑不同微波功率对得率影响，结果见图5。 由图5可知，随着微波功率的增加，物质的加热 程度随着增加，黑小麦色素的吸光值也增加；在超声 功率达到300 W之后，吸光值有减少趋势，这可能是 由于高超声功率导致的热效应使得色素分解所致。因 此确定超声功率300 W。
单因素试验
2.1.1 乙醇浓度的影响
试验设定液料比10 mL/g、微波时间120 s和微波 功率300 W，考虑不同乙醇浓度对得率影响，结 果见图2。 从图2可知，当乙醇浓度小于50%时，随着乙醇 浓度的增加，吸光值随之增加；在50%时达到峰 值，这是因为色素是有一定极性的化合物，根据 相似相溶原理，当提取剂的极性与此色素的极性 更加接近时，从而使吸光值最大。因此在此选择 乙醇浓度50%进行后续试验。
1． 5 黑粒小麦麸皮中花色苷理 化性质的测定
1． 5． 1 pH 对花色苷稳定性的影响 取花色苷提取液 20． 00 mL 7 份， 用 Na 2 HPO 4 －柠檬酸缓冲液配制不同 pH 提取液， 测定溶液在 λ max处的吸光度(A)， 放置室内暗处， 一周后在 λ max 处测溶液吸光度并观察其颜色变化。 1． 5． 2 温度对花色苷稳定性的影响 取花色苷提取液 200 mL 装于 5 个碘量瓶中， 在不同温度水浴中各加热 3 h， 每 隔 30 min 取一次样，迅速冷却后测定 λ max 处的吸光度， 并观察其颜色变化 。
Байду номын сангаас
2.1.2 液料比影响
试验设定乙醇浓度50%、提取时间120 s和微波功率300 W，考虑不同液料 比对得率影响，结果见图3。 由图3可知，随着液料比提高，黑小麦色素吸光值先增加后降低，在液料 比为12 mL/g时吸光值达到最高。这主要是因为前期溶剂量越大，有效成 分浸出越完全，吸光值也就越大；但当溶剂过大时，会造成溶剂和能源 的浪费。因此确定液料比为12 mL/g，作为后续试验继续考察。
由图1可知，该色素在532 nm处有最大吸收。因此，在此波长下测定其吸光度值。 （3） 单因素试验 分别以乙醇浓度、液料比、提取时间和微波功率为影响因素考察其对吸光值的影响。
根据Box-Behnken试验设计原理，在单因素试验 的基础上，选取影响显著的液料比、提取时间和微波 功率3个影响因素，采用3因素3水平的响应曲面分析 方法，试验因素与水平设计见表1。共17个试验点： 其中12个为析因点，5个为中心点。
2． 3 黑粒小麦麸皮花色苷理化 性质
2． 3． 3 光照对花色苷稳定性的影响 由图 3 知， 花色苷溶液光照 3 d 内吸光值变化很小， 说 明短时间内花色苷对光照不敏感;随着时间的延长， 花 色苷溶液在光照贮存和避光贮存下， 吸光度均有一定 幅度降低， 但在阳光直射条件下降低最明 显， 说明光对花色苷有一定的破坏作用， 使用时要避 光保存。图 3 光照对花色苷稳定性的影响 2． 3． 4 金属离子对花色苷稳定性的影响 图 4 结果表明， 金属离子对该花色苷的稳定性作用由大到 小为:Mg 2 + ＞ K+＞ Al 3 + ＞ Ca 2 + ＞ Fe 2 + ＞Cu 2 + ＞ Zn 2 + ＞ Fe 3 + ， 其中 Mg 2 + 、 K+和 Al 3 + 对 花色苷有很好的增色、 稳定作用;Ca 2 + 和 Fe 2 + 对花 色苷的稳定性影响不大;Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 使花 色苷明显褪色， 并伴有沉淀， 这可能是因为花色苷与 金属离子形成了络合物， 因此， 在生产应用中应尽量 避免与Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 等金属离子的接触
为了对我校自主培育的黑粒小麦麸皮中花色苷进行开发利用， 本试验 以黑粒小麦麸皮为原料，进行了花色苷的提取条件和理化性质的研究 。结果表明， 用 pH 1． 0、 40% 的乙醇作提取剂， 在料液比为 1∶ 20(g/mL)、 70 ℃条件下浸提80 min， 提取效果最好， 花色苷得率为 14． 5%;该花色苷可见光范围内的最大吸收波长为 525 nm， pH 对其 影响明显， 温度影响不大， 60 ℃以内比较稳定。Mg 2 + 、 K+和 Al 3 + 对该花色苷有很好的增色、 稳定作用， Ca 2 + 和 Fe 2 + 对其稳 定作用影响不大， Cu 2 + 、 Zn 2 + 和 Fe 3 + 使其明显褪色。该花色 苷耐氧化性、 耐还原性差， 耐光性好。蔗糖、 柠檬酸对其有明显的 褪色作用， 苯甲酸钠在低质量浓度( ＜0． 1 mg/mL)时对其基本无影 响， 在高质量浓度( ＞0． 2 mg/mL)时有一定的褪色作用， 盐对其有 一定的增色、 稳定作用。
2． 3． 1 pH 对花色苷稳定性的影响 7 d 后在 pH ＜5． 0 时， 该花色苷提取液为红色透明状， 稳定性较好;pH ＞ 5． 0 时， 花色苷提取液颜色由浅红变黄绿色， 并出现混浊甚至沉淀现象， 说明 花色苷在中性和碱性范围内色素稳定性很差， 花色苷结构易发生变化。颜色 变化是因为随 pH 变化， 花色苷在水溶液中存在形式为花徉盐式(红色) →查 耳酮式(无色) →醌式(蓝色)。pH 越大， 花色苷的降解速度越快。由此说明， 花色苷在酸性条件下稳定性较好， 可作为酸性食品添加剂。 2． 3． 2 温度对花色苷稳定性的影响 从图2 可以看出， 加热温度小于60 ℃时， 温度及受热时间都对花色苷提取 液的吸光度影响较小， 即较低温下花色苷对热表现出较好稳定性;而当加热温 度高于 80 ℃， 随着时间的延长， 花色苷吸光度明显下降， 说明花色苷在高 温下稳定性差， 这可能是花色苷母体结构受热生成无色查尔酮式结构的缘故 。
2． 3． 5 氧化还原剂对花色苷 稳定性的影响
由图 5 可见， 随着氧化剂 VC、 H 2 O 2 和还原剂Na 2 SO 3 浓度的增大， 花色苷的吸光度急剧下降， 颜色逐渐消退， 其中 Na 2 SO 3 影响最大 ， 0． 5 mg/mL 就能使花色苷褪色， 原因是 SO 2 作用于花色苷类色 素的苯并吡喃环的 4 － 位碳上， 生成了一种无色物质，表明该色素耐 氧化、 耐还原性差， 在使用时应尽量避免与氧化性或还原性物质接触 。 2． 3． 6 食品添加剂对花色苷稳定性的影响 从表 4 可见， 加入一定浓度的 NaCl， 该花色苷溶液的吸光度从 0.849(对 照)上升到 0． 985， 增加了12．84%， 说明 NaCl 对该花色苷有一定 增色、 稳定作用;加入蔗糖和柠檬酸后， 该花色苷溶液的吸光分 别降低了82． 85% 和64． 05% ， 说明蔗糖和柠檬酸对表 4 食品添加剂 对花色苷稳定性的影响该花色苷有明显的褪色作用， 且褪色作用随浓 度增大而加强;当苯甲酸钠质量浓度低于 0． 1 mg/mL 时，花色苷溶液 吸光度基本无变化， 高于 0． 2 mg/mL 时，吸光度降低了 6． 42%， 但随着加入浓度的增大基本保持不变， 说明苯甲酸钠质量浓度在高于 0． 2 mg/mL时对该花色苷有一定的褪色作用。
2． 2 提取条件的选择 由表 2 的极差分析可知， 各因素的影响力为B 提取温度 ＞ A 乙醇体积分数 ＞ D 料液比 ＞ C 提取时间， 据表 2 中的吸光度、 K 值和平均值(K/4)可知， 最佳提取方案是 A 2 B 4 C 2 D 2 ， 即乙醇体积分数为40%， 温度为 70 ℃， 时间 80 min， 料液比为 1∶ 20。按此优化条件重做一次试验， 得其平均吸 光度值为 0．983， 与正交试验最大值 0． 997(A 2 B 4 C 3 D 2 )无显著差异 (P ＞0． 05)， 但却更经济、 实用。此条件下花色苷得率为 14． 50%。
宁夏枸杞子极性提取物在食用油 高温氧化中的作用研究
本试验通过单因素试验和响应曲面分析，得 到超声波协同微波提取黑小麦色素的最佳 工艺条件为液料比11.9 mL/g，提取时间 121 s和微波功率299 W，实际测得的吸光 值为0.704，与理论预测值比较误差仅为 0.72%，该方法稳定可靠。
黑粒小麦麸皮中花色苷的提取及 性质研究
2 结果与分析
2． 1 光谱特征 由图1 可见， 以 pH 1． 0 的乙醇浸提， 所 得色素提取液在紫外光区280 ～285 nm 有 较强的吸收峰， 为花色苷酰基结构的特征 峰;在可见光范围内的最大吸收在 525 nm 处， 为典型的花青素光谱特性［6 ］ 。自 然界花青素多以与糖苷键结合的形式存在 ， 所以推断黑粒麸皮色素为花色苷类， 这 与前人研究结果相符。图 1 黑粒小麦麸皮 色素花色苷紫外全扫描图(200 ～800 nm)
2.1.3 提取时间的影响
试验设定乙醇浓度50%、液料比10 mL/g和微波功率300 W，考虑不 同提取时间对得率影响，结果见 图4。由图4可知，随着提取时间 的增加，黑小麦色素吸光值不断 增加，在120 s时达到峰值。再继 续增加时间，色素吸光值明显下 降，这可能是因为随着超声时 间的增加，温度急剧升高，导致 色素分解所致。因此选择提取时 间120 s，作为后续试验继续考察。
1． 3 测试方法
花色苷提取率采用比色法:通过测定最大波长处的吸光度来计算总花色苷质量 分数， 此方法被用来对黑米色素进行定量分析 ［5 ］ 。 其计算公式为: 总花色苷质量分数(mg/g) =A ×V ×N/(98．2 ×m) 式中:A 为吸光度;V 为定容体积/mL;98． 2 为花第 26 卷第 10 期 李 伟等 黑粒 小麦麸皮中花色苷的提取及性质研究色苷色的平均消光系数;N 为比色时的稀 释倍数(本试验中 N 都为 2);m 为被测样品的质量。 由上式可看出， 当样品质量、 定容体积、 比色时的稀释倍数相同时， 总花 色苷质量分数与吸光度 A成正比， 为了描述方便在本文中直接用吸光度(A)代 表花色苷质量分数。
1． 4 黑粒小麦麸皮中花色苷提 取
1． 4． 1 花色苷的提取光谱特征分析 称取黑粒小麦麸皮 0． 500 g， 加入 10． 00 mLpH 1． 0的 40%乙醇溶液， 立即放入 HH －6 数显恒温水浴锅中 70 ℃浸提 120 min。倒出色素液冷却至 室温， 离心 10 min(转速4 800 r/min)， 上清液为花色苷提取液， 用 UV － 2550 紫外可见分光光度计在 200 ～600 nm 波长内扫描其吸收光谱， 确定最 大吸收波长(λmax )。
1． 5． 3 光照对花色苷稳定性的影响 取花色苷提取液 200 mL 分别装于 3 个碘量瓶中， 分别置于阳光直射处(夏季室 外晴天)、 室内自然光处、 室内避光处保存， 定期测定其 λ max 处的吸光度 ，并观察其颜色变化。
1． 5． 4 金属离子对花色苷稳定性的影响 分别配制含 Mg 2 + 、 Al 3 + 、 Zn 2 + 、 Cu 2 + 、 K+、 Fe 2 + 、Fe 3 + 、 Ca 2 + 离子浓度达 5． 0 ×10－4 mol/L 的溶液， 吸取花色苷提取液 5． 00 mL， 加入金属离子溶液定容至15． 00 mL。在室内暗处放置 7 d 后， 测定 其 λ max 处的吸光度并观察其颜色变化。 1． 5． 5 氧化还原剂对花色苷稳定性的影响 取 9 份 10． 00 mL 花色苷提取液， 加入不同浓度的 VC(维生素 C)、 H 2 O 2 和 Na 2 SO 3 ， 定容为 25． 00mL， 测定其在 7 d 后 λ max 处的吸光度 。 1． 5． 6 食品添加剂对花色苷稳定性的影响 取 5 份 10． 00 mL 花色苷提取液， 分别加不同浓度的食品添加剂(蔗糖、 盐 、 苯甲酸钠、 柠檬酸)溶液15． 00 mL， 测定其在 7 d 后 λ max 处的吸光度 。
文献阅读整理
超声波协同微波提取黑小麦色素的 工艺优化
1. 最佳提取工艺条件为液料比11.9 mL/g，提取时间121 s和微波功率299 W，在此条 件下，吸光值达0.704。工艺稳定可靠，可在生产中应用。 2. 超声波协同微波提取作为一种优良的提取方法，具有操作简便快捷、 提取时间短、 提出率高等特点， 目前已广泛应用在生物活性物质的提取方面 。 3.原料与试剂 黑小麦麸皮，其它试剂均为分析纯 4.方法 （1）超声波协同微波提取 称取3 g黑小麦麸皮于100 mL特制三角瓶中，再 加入一定体积一定浓度的乙醇溶液后，抽滤、定容、 测定。 （2）最大吸收波长的确定 用1.0 cm比色皿，在狭缝宽度为2 nm，采样间 隔为0.50 nm，扫描速度为快速的仪器条件下，用 TU-1810紫外分光光度计对色素从400 nm~700 nm进行 自动光谱扫描。
2.1.4 微波功率的影响
试验设定乙醇浓度50%、液料比10 mL/g和提取时 间120 s，考虑不同微波功率对得率影响，结果见图5。 由图5可知，随着微波功率的增加，物质的加热 程度随着增加，黑小麦色素的吸光值也增加；在超声 功率达到300 W之后，吸光值有减少趋势，这可能是 由于高超声功率导致的热效应使得色素分解所致。因 此确定超声功率300 W。
单因素试验
2.1.1 乙醇浓度的影响
试验设定液料比10 mL/g、微波时间120 s和微波 功率300 W，考虑不同乙醇浓度对得率影响，结 果见图2。 从图2可知，当乙醇浓度小于50%时，随着乙醇 浓度的增加，吸光值随之增加；在50%时达到峰 值，这是因为色素是有一定极性的化合物，根据 相似相溶原理，当提取剂的极性与此色素的极性 更加接近时，从而使吸光值最大。因此在此选择 乙醇浓度50%进行后续试验。