蝇蛆壳提取壳聚糖的综合评价解析
壳聚糖的制备及性质的鉴定
壳聚糖的制备及性质的鉴定实验目的：1、掌握从虾、蟹壳中制备壳聚糖的方法及原理。
2、掌握多糖分离的基本步骤。
3、掌握壳聚糖的基本指标鉴定及检测方法。
实验原理：甲壳素生物多糖之一，其制备原料主要是虾壳、蟹壳、蚕蛹、蝇蛆、蘑菇、真菌等。
制备甲壳素的主要操作是脱钙和脱蛋白，再脱乙酰基就得到壳聚糖。
壳聚糖的基本指标有脱乙酰度、分子量、含氮量、水分、灰分等（本实验用测定脱乙酰度）。
脱乙酰度的测定方法有酸碱滴定法、电位滴定法、紫外光谱法、红外光谱法等。
本实验采用虾壳原料、用酸碱滴定测定脱乙酰度。
器材：玻璃棒、催洗瓶、烧杯(50ml、500ml、1000ml)各一个、胶头滴管、量筒（10ml、50ml）各一个、铁夹子、酸碱滴定装置、电子天平、恒温箱、恒温水浴箱、烘干箱。
试剂：31克鲜虾壳、蒸馏水、10%HCL溶液、10%烧碱溶液、1%KMnO4溶液、2%NaHS溶液、50%烧碱溶液、0.1mol/L标准HCL溶液、0.1mol标准NaOH溶液（两者都要用分析纯配制）、0.1%甲基橙水溶液、0.1%苯胺蓝水溶液、甲基橙—苯胺蓝以1:2（v/v）混合配制，作为指示剂使用。
溶液的配制：1、10%盐酸：吸取（36%~38%）盐酸250ml于1000ml容量瓶，加蒸馏水定容至1000ml。
2、10%烧碱溶液：称取100gNaOH粉末，加蒸馏水溶解，于1000ml 容量瓶中定容至1000ml。
3、1%KMnO4溶液：取5g KMnO4粉末，加蒸馏水溶解，于1000ml 大烧杯中配成500ml溶液。
4、2%NaHS溶液：取10gNaHS粉末，加蒸馏水溶解，于1000ml 大烧杯中配成500ml溶液。
5、浓度为C1标准盐酸：吸取（36%~38%）盐酸15ml于100ml 容量瓶，定容至100ml。
6、0.1mol/L标准NaOH溶液;称取1gNaOH固体，加蒸馏水溶解，于250ml容量瓶中定容至250ml。
7、0.1%甲基橙水溶液：称取0.1g甲基橙粉末，溶解于10ml水中。
壳聚糖选择性吸附剂的研制与性能评价
壳聚糖选择性吸附剂的研制与性能评价壳聚糖是一种由N-乙酰葡萄糖胺通过β-1,4-糖苷键连接而成的聚合物，具有很强的吸附能力和生物相容性。
因此，壳聚糖被广泛用作吸附剂，在环境修复、废水处理、食品加工等领域发挥着重要的作用。
本文将重点探讨壳聚糖选择性吸附剂的研制与性能评价。
壳聚糖材料的研制是开发高效、选择性吸附剂的基础。
首先，壳聚糖的来源和制备方法对其性能有着重要影响。
壳聚糖可以从海洋生物贝壳、虾蟹等动物外壳中提取得到，也可以通过酸碱水解法、微生物法等途径进行合成。
其中，贝壳提取的壳聚糖具有天然的结构和生物活性，被广泛应用于生物医学和药物领域。
而通过合成方法得到的壳聚糖，可以根据需要调控其分子量、酸碱性等性能。
壳聚糖选择性吸附剂的性能评价需要从吸附剂对目标物质的选择性、吸附容量、吸附速度和再生性等方面进行考察。
首先，对于特定的目标物质，选择性吸附剂应具有高选择性，即能够选择性地吸附目标物质而不吸附其他干扰物质。
这可以通过调控壳聚糖的结构、功能基团等来实现。
例如，通过改变壳聚糖的交联度和交联剂的类型，可以调节其孔道结构和表面电荷密度，从而实现对特定目标物质的选择性吸附。
吸附容量是衡量吸附剂性能的重要指标之一。
壳聚糖选择性吸附剂的吸附容量受到壳聚糖的分子量、孔道结构、表面积和功能基团等因素的影响。
一般来说，壳聚糖的分子量越高，其吸附容量越大。
另外，通过调控壳聚糖的孔道结构和表面积，可以增加有效吸附位点的数量，提高吸附容量。
此外，引入具有亲吸附性质的功能基团，如胺基、羟基等，也能增加吸附剂与目标物质之间的相互作用，提高吸附容量。
吸附速度是评价吸附剂性能的另一个重要指标。
壳聚糖选择性吸附剂的吸附速度受到壳聚糖的孔道结构和表面性质的影响。
孔道结构的大小和分布会影响目标物质分子在吸附剂表面的扩散速率，从而影响整个吸附过程的速度。
此外，引入具有良好亲吸附性质的功能基团，可以增加吸附剂与目标物质之间的相互作用，提高吸附速度。
蝇蛆营养成分的测定与评价
蝇蛆营养成分的测定与评价目的：通过对家蝇幼虫(蝇蛆)的营养成分进行测定，对其营养价值做出初步评价。
方法：对家蝇进行养殖，收集蝇蛆，测定蝇蛆的粗蛋白、粗脂肪、总糖、氨基酸和脂肪酸构成，维生素及微量元素含量，用粮食与农业组织-世界卫生组织(FAO-WHO)提出的参考蛋白模式评价。
结果：蝇蛆粗蛋白含量为62.52 %，必须氨基酸含量(色氨酸未测)占总氨基酸(E %)的47.72 %，必须氨基酸与非必需氨基酸总量的比值(E/N)为0.91,E %/T为3.18,均高于参考模式的40 %、0.6和3。
粗脂肪含量为18.05 %，亚油酸及亚麻酸等必需脂肪酸分别为24.21 %和0.68 %，不饱和脂肪酸含量为58.50 %;总糖含量为2.87 %;维生素A、D、E含量分别为727.8 μg/100 g、131.0 μg/100 g、10.04 mg/100 g;Fe、Zn、Ca、Se含量分别为268 mg/kg、159 mg/kg、0.31 %、8.90 mg/kg。
结论:蝇蛆各营养素含量较丰富，氨基酸模式高于参考模式，具有较高的营养价值，适于开发利用。
家蝇(Musca domestica L.)是昆虫家族中的一大类，种类多、数量大，是世界瞩目的蛋白资源。
对家蝇的开发利用开始于上个世纪20年代，但当时主要是探讨利用家蝇幼虫来处理粪便以获取蛋白质饲料的可能性，60年代，Calvert等[1]分析了家蝇蛹的营养成分，探讨了作为饲料的可能性。
我国在80年代就开展了家蝇养殖技术和营养价值研究，但对蝇蛆营养价值在其食用价值方面及开发利用技术方面的研究报道甚少。
本文利用包头地区家蝇繁殖了蝇蛆，通过蝇蛆粉营养成分的测定和分析，对这一新型的昆虫食品的营养价值进行初步评价，旨在为今后开发利用蝇蛆资源提供理论依据和实践指导。
1 材料与方法以红糖和奶粉为饲料在室温25～30 ℃饲养苍蝇，以麦麸为培养基繁殖蝇蛆。
收集鲜蝇幼虫→洗涤→灭菌→烫漂→干燥→磨粉→收粉备用。
蝇蛆壳中提取甲壳素工艺研究
蝇 蛆壳 ， 盐酸 ， 浓 氢氧 化钠 ， 次氯 酸钠 等 。
１２ 工艺流 程 ．
波 数／ ｍ ｃ 图 １ 甲壳 素 红外 图谱
蝇蛆 废渣 制 甲壳 素 的 过 程 可表 示 为 ：蝇 蛆 废
渣一清 洗一 干燥一 干燥 的蝇 蛆壳一 除无 机 盐一 除蛋 白一 脱 色一 甲壳 素 。
水 分和 灰 分 的检 测 。 分别 按 Ｇ ６ ～７ （ ８ Ｂ ２ ０ ７８ ）
和 Ｇ ２５ ８ Ｂ ２ ９ ～ ０进 行 。
收稿 日期 ：０７ ０ — ２ ２０ — ５ ２
维普资讯
・
３・ ６
李
平等
蝇 蛆壳 中提取 甲壳素工 艺研 究
计 ） 。
关键 词
甲 壳 素 ； 蛆 ； 取 蝇 提 Ｔ ２１ Ｑ ８ 文献 标 识 码 Ａ 文章 编 号 １０ — ８９２０ ）３ ０ ３ — ２ ０６ ６ ２ （ ７０— ０ ５ ０ ０
中 图分 类 号
蝇蛆作 为一 种重 要 的昆虫 资源 ， 目前 已经 广泛
提 取蛋 白后 的蝇蛆 废渣 经 清洗 、干燥 得到 干燥
实验表明 ， 随着 盐 酸 含 量 的 增加 ， 分 含 量 减 灰
图 ４ 提 取 温 度对 除 甲 壳素 无 机 盐 的影 晌
和 品质 。
Ｔ ｅｍｏ Ｎ ｃｌ ｖｔｒ ３ ０型 红 外 光 谱 仪 上测 定 ， ｈｒ ｉ ｅ Ａ ａａ ７ ｏｔ 所 得 谱 图 （ １ 与 标 准谱 图基 本 一致 ： （ｍ ： 图 ） ‰ ａ ）
３ ４５， ２ ４． ８ ． ６ ９． ５ ７， ０ ４。 ４ ３ ６ ２ ９１ １ ５ １ ５ １ ７
源广泛 。
理 论 上 ， 酸 的含 量越 高 、 取 时 间越 长 ， 机 盐 提 无
从蝇蛆中提取亮聚糖的研究
等原 因，使得 海洋资源 日渐匮乏 。而家蝇属 于再 生资源 ，在昆虫世界里 ，苍蝇 的繁殖 能力位 居第
一
，
一
对苍蝇 ４个月可繁殖２６０ ６ 亿个蝇蛆 。据测
基金项 目：黑龙江省科技攻关项 目资助（ Ｃ ３ ５ ５） Ｇ ０Ｂ０ 作者简介 ：徐宁彤 （９ ４ ，女 ，满族 ，黑龙江人 ，博 士研究 １６ 一）
表 １。试验结果表明：在６ ～ ５ 时 甲壳素脱乙酰 ） Ｏ６ ℃
度 达到 最大 。
１ ． 利 用黏度 仪 测定黏 度 ４
维普资讯
从 蝇 蛆 巾 漫 取 竞 囊 糖 的 硪 宄
徐 宁彤 ，曲琪环 ，周玉岩 ，刘纹芳
（ 东北农业大学 ，黑龙江 哈尔滨 １０ ３ ５０ ０）
摘
要：蝇蛆属 于再生资源。在 昆虫世界 里 ，苍蝇的繁 殖能力位居 第一 ，一对苍 蝇 ４个 月可繁 殖 ２６０ 亿个 ６
含量 为３ ％左右 。 由于 水污 染及 虾 、蟹 过量 的打捞 ０
的一种天然高分子聚合物，属于直链 氨基多糖 ，由 于 大分 子间强 的氢 键作 用 ，导致 甲壳 素成 为保 护 生
物 的一 种 结 构物 质 ，结 晶构 造 坚 固 ，一 般不 熔 化 ，
也不溶于一般的有机溶剂和酸碱 ，只溶于浓酸和某 些 溶 剂 。化 学 性质 非 常稳 定 ，应用 有 限【。甲壳 素 ２ ＿
蝇蛆 。据测算干蛆 中含 甲壳质 ３％ ５ ． ０ ４ ％。 因此 ， 蝇蛆 中 取的一种极有前途的抗茵活性蛋 白后 的蛆皮 ，提取 ８ 从 提 甲壳质 ，再 脱 乙酰基制成 壳聚糖 ，是很 有经济价值 的。研 究表明 ，将提取后 的甲壳质经 ５％的 Ｎ Ｏ ０ ａ Ｈ溶液在 ６— ０ ６℃的水浴锅 中 热 ８ ，可以得到较好质量的壳聚糖 。 ５ 加 ｈ 关键 词：壳聚糖 ；脱 乙酰基 ； 蝇蛆 中圈分类号 ：￥ １． ；￥ １． 文献标 识码 ：Ｂ 文章编号 ：１０－０４ ２０ ）７－ ３－３ ８６ ５ ８６ ９ ３ ７ ０ １０ ８ （ ６０－０２０ ０ ０
蝇蛆壳聚糖制备工艺的研究
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是采用其脱乙酰产物—— —壳聚糖。壳聚糖现已广泛 地应用于食品工业、医药工业、轻纺工业和环境保 护等行业 。在以往壳聚糖制备工艺研究中，大多数
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以虾、蟹为原料 ，而以蝇蛆为原料制备壳聚糖甚少。
"(&)$
本文以蝇蛆甲壳素为原料，探讨合适的工艺条件， 为工业化生产提供理论基础。 # 实验 #*# 材料和仪器 材料：蝇蛆甲壳素、氢氧化钠 +,-./0、冰醋酸 —苯胺蓝指示剂； +1/21../3：化学纯；甲基橙——
蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病大鼠脂代谢的影响
１２ ．
实验 方 法
１ ２ １糖 尿病 动物 模 型 的 建 立 ： 鼠禁 食 不 禁 水 ｌ ．． 大 ２
ｈ 按 照 ５ ／ ｇ・ ｗ 的剂 量 腹 腔 注射 １ 的链 脲 ， ５ｍｇｋ ｂ ％ 佐 菌 素 ； 脲 佐 菌 素 临 用 前 溶 于 ０ １冲液 中 ， Ｈ． 柠 冰浴 配 制 。７ ｄ后 ， 禁食 １ ， 静 脉 取 血 测 空 腹 血 糖 （ Ｂ ， ０ｈ 尾 Ｆ Ｇ） 以 Ｆ Ｇ≥１． ｏ ・Ｌ 确 定 为糖 尿 病 模 型 ， 入 作 Ｂ ６７ｍｍ ｜ 纳
一
１２ ２动物 分组 及处 理 ： 常 Ｓ ．． 正 Ｄ大 鼠 ８ ０只 ， 机分 随 出ｌ ２只作 为 Ａ 正 常 对 照 组 ， 余 按 １２ １方 法 建 其 ．． 模 ， 常对 照组 腹 腔 注射 同体 积 的柠檬 酸 一柠 檬 酸 正 钠 缓 冲液 。将成 模 的糖尿 病 大 鼠 ５ ９只 ， 随机 分 为 Ｂ
１ ２ ３实 验大 鼠血 脂 的测定 ：采 用 Ｅ立 全 自动 生化 ．． ｔ
清洁级 Ｓｒ ｕ — ａ ｌ （ Ｄ 雄性大鼠 ８ ｐａ ｅ Ｄ ｗｅ Ｓ ） ｇ ｙ ０只， ６
７ 周龄 ， 体重 ２０ １ 。购 自第二军医大学实验 ０ ± ０ｇ 动物 中心 ， 格证 号 Ｓ Ｘ 军 ）０ ８— ４ ． 合 Ｙ Ｋ（ ２０ ０ ２
摘要： 目的 测定实验糖尿病大 鼠血脂 ， 探讨蝇蛆壳聚糖改善脂 代谢 以降低血 糖 的机制 。方 法 用全 自动生 化分析仪 测定
各组大 鼠血清 总胆 固醇（ ｃ 、 Ｔ ） 甘油三酯 （ Ｇ 、 Ｔ ） 高密度脂 蛋 白（ Ｄ ） 低密度 脂蛋 白 （ Ｄ ） Ｈ Ｌ 、 Ｌ Ｌ 的含 量 。结果 经蝇蛆 壳聚糖 治疗 后， 高剂量组 Ｔ ， Ｇ含量 明显低于模型对照组 （ ００ ） 其 中 Ｔ ＣＴ Ｐ＜ ． １ ， Ｇ含 量与拜 糖平组 相 比有 明显 差异 （ Ｐ＜０ ０ ） 中剂 量组 ．５ 。 Ｔ Ｃ含量明显低于模型对照组 （ ０ ０ ） Ｔ Ｐ＜ ． １ ，Ｇ含 量低 于模 型对照组 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。低 剂量组 Ｈ Ｌ含量最 高 ， Ｄ 与模 型对照组 相 比 有显著差异 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ． １ 。结论 蝇蛆壳聚糖有改善实验糖尿病 大鼠血脂 的作 用。 关键词 ： 蝇蛆壳聚糖 ； 糖尿病 ； 血清总胆 固醇 ； 甘油三酯 ； 高密度脂蛋 白 ； 低密度脂蛋 白
蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病大鼠血糖、糖耐量及糖化血清蛋白的影响
蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病大鼠血糖、糖耐量及糖化血清蛋白的影响冯晓慧;蔡东联;曲丹;金迪;林宁;郑慧【期刊名称】《中国中医药咨讯》【年(卷),期】2010(002)002【摘要】目的研究蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病大鼠的降糖作用及其可能的机制.方法 :测定糖尿病模型组、正常对照组及阳性对照组大鼠的血糖、糖耐量及糖化血清蛋白.分析蝇蛆壳聚糖降低实验性糖尿病大鼠血糖、糖化血清蛋白含量,改善糖尿病大鼠糖耐量中的作用.结果 31d时蝇蛆壳聚糖高剂量组的血糖为19.99±2.10与对照组24.97±6.02相比,差异显著(P<0.01).糖耐量蝇蛆壳聚糖各组与模型组比较均有极显著差异(P<0.01),高剂量组效果最好.血清糖化蛋白高剂量组2.37±0.35与对照组2.64±0.15相比有显著性(P<0.05).结论蝇蛆壳聚糖可降低糖尿病模型组大鼠血糖、糖化血清蛋白含量的含量,改善糖耐量,促进胰岛功能的恢复.【总页数】2页(P7-8)【作者】冯晓慧;蔡东联;曲丹;金迪;林宁;郑慧【作者单位】第二军医大学附属长海医院营养科,临床营养中心,上海,200433;上海市第六人民医院营养科,上海,200433;第二军医大学附属长海医院营养科,临床营养中心,上海,200433;上海市第六人民医院营养科,上海,200433;第二军医大学附属长海医院营养科,临床营养中心,上海,200433;上海市第六人民医院营养科,上海,200433;第二军医大学附属长海医院营养科,临床营养中心,上海,200433;上海市第六人民医院营养科,上海,200433;第二军医大学附属长海医院营养科,临床营养中心,上海,200433;上海市第六人民医院营养科,上海,200433;第二军医大学附属长海医院营养科,临床营养中心,上海,200433;上海市第六人民医院营养科,上海,200433【正文语种】中文【相关文献】1.耐力运动对糖尿病大鼠血清血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数、糖化血清蛋白、红细胞糖化血红蛋白的影响 [J], 邵月2.重组人胰高血糖素样肽-1对实验性糖尿病大鼠血糖的影响 [J], 张志珍;毛积芳;杨生生3.蝇蛆干粉营养素含量及蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病大鼠抗氧化损伤能力影响的研究 [J], 陈林军;冯晓慧;蔡东联;林宁;曲丹;金迪;郑慧;王洁4.蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病大鼠脂代谢的影响 [J], 冯晓慧;蔡东联;曲丹;金迪;林宁;郑慧5.蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病大鼠糖代谢的影响 [J], 冯晓慧;葛声;蔡东联因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
蝇蛆壳聚糖降血脂作用的实验研究
蝇蛆壳聚糖降血脂作用的实验研究覃容贵;付萍;吴建伟;国果【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2007(027)012【摘要】目的探讨蝇蛆壳聚糖降血脂的作用.方法预防性给药时,给高脂饲料造模的同时连续给药4 w,于第28天测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,同时观察对大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率的影响.治疗性给药时,给高脂饲料造模成功后连续给药4 w,测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,并观察对大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率的影响.结果预防性给药时,中、高剂量蝇蛆壳聚糖组能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量,显著升高HDL-C,降低大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率.治疗性给药时,低、高剂量蝇蛆壳聚糖组能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量,显著升高HDL-C,降低大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率.结论蝇蛆壳聚糖能调节血脂平衡,预防高脂血症的产生,对已形成的高脂血症有一定的治疗效果.【总页数】3页(P1156-1158)【作者】覃容贵;付萍;吴建伟;国果【作者单位】贵阳医学院基础医学院,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院基础医学院,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院基础医学院,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院基础医学院,贵州,贵阳,550004【正文语种】中文【中图分类】R972+.6【相关文献】1.水溶性壳聚糖降血脂作用的化学机理(Ⅰ)--水溶性壳聚糖及其衍生物对胆酸盐的结合能力研究 [J], 吴雁;王亦农;马建标2.蝇蛆壳聚糖降血脂作用机制探讨 [J], 覃容贵;吴建伟;张国果;付萍3.壳聚糖及其衍生物的降血脂作用机理 [J], 来水利;王克玲4.蝇蛆干粉营养素含量及蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病大鼠抗氧化损伤能力影响的研究 [J], 陈林军;冯晓慧;蔡东联;林宁;曲丹;金迪;郑慧;王洁5.水溶性壳聚糖降血脂作用的化学机理(II) 水溶性壳聚糖及其氨化衍生物对硬脂酸钠、十二烷基硫酸钠结合能力 [J], 吴雁;王亦农;马建标因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
蝇蛆壳聚糖对高脂血症大鼠降脂作用
蝇蛆壳聚糖对高脂血症大鼠降脂作用覃容贵;吴建伟;国果;付萍【期刊名称】《中国公共卫生》【年(卷),期】2008(24)4【摘要】目的研究不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠的降血脂作用。
方法采用酸碱化学法制备72.3%,80.5%,96.1%脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖,并用红外扫描鉴定其结构。
取成年雄性SD大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、高脂模型组、蝇蛆壳聚糖72.3%,80.5%,96.1%脱乙酰度组,给高脂饲料造模的同时连续给予蝇蛆壳聚糖8周,测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量,同时观察对大鼠体重影响。
结果各脱乙酰度组蝇蛆壳聚糖均能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量(P<0.01),显著升高HDL-C(P<0.01),降低大鼠体重(P<0.01)。
结论蝇蛆壳聚糖具有明显降血脂作用,其作用与脱乙酰程度呈正相关。
【总页数】2页(P474-475)【关键词】蝇蛆壳聚糖;高脂血症;脱乙酰度;降血脂【作者】覃容贵;吴建伟;国果;付萍【作者单位】贵阳医学院基础医学院寄生虫教研室【正文语种】中文【中图分类】R36【相关文献】1.降脂养阴方对高脂血症大鼠降脂作用机制研究 [J], 姜厚望;李思琪;闫玉冰;吴巧敏;柴欣楼2.虎杖降脂颗粒对高脂血症大鼠降脂作用的研究 [J], 郭梅红;黄小丹;范颖;黄燕;孔晓龙3.蝇蛆壳聚糖对高脂血症大鼠的降脂保肝作用 [J], 覃容贵;吴建伟;国果;付萍4.纯中药降脂片对高脂血症大鼠降脂作用的实验研究 [J], 马迎春;贺军权;吕栋;王奕匀5.蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠的降脂保肝作用 [J], 覃容贵;吴建伟;付平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ ａｎｄ ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏＤ－ｅｆｆｅｅｔｓ．Ｆｌｉｅｓ ｍａｇｇｏｔ ｓｈｅｌｌ ｃｏｎｔａｉｎｓ ｍｕｃｈ ｃｈｉｔｏｓａｎ．ｗｈｉｃｈ ｉｓ
ｒａｗ
ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ
ｍａｔｅｒｉａｌｓ．Ｔｈｅ ａｉｍ ｏｆ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｉｓ
ｗｅｒｅ
ｔｅｓｔｓ
ａｓ
ｏｆ ｈｅａｖｙ
ｍｅｔａｌ），ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ
ｃｏｎｔｅｎｔ
ｔｅｓｔ，ｓｋｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ，ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ
ｗｅｌｌ
ａｓ
ｈｅｍｏｌｖ，ｓｉｓ
ｔｅｓｔ
ａｃｃｏｒｄｉｎｇ
ｔｏ
ｎａｔｉｏｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｏｆ Ｃｈｉｎａ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
ｏｆ
Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍａｓｓ ｏｆ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｗａｓ ２６６ ｋｕ，ｔｈｅ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｄｅａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ
ＮＩ斜－．物医学工程杂志２０１６年６月第３９卷第３期Ｉｎｔ Ｊ Ｂｉｔ—ｅｄ Ｅｎｇ．Ｊｕｎｅ ２０１６．Ｖ０１．３９．Ｎｏ．３
・论著・
蝇蛆壳提取壳聚糖的综合评价
垢德双闵昌敏 ３００１９１天津市医疗器械技术审评中，心
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｅｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１８１．２０１６．０３．Ｏｌ
式中：７７为特性黏度，相对黏度哺＝Ｔ／Ｔｏ，增比黏度 ７７，＝＇Ｏｒ－１，Ｃ为样品溶液的质量浓度（ｇ／ｍ１），７１为溶液 的流出时间，死为纯溶剂的流出时间： 用黏度方程ｍ】－７．９２ｘ１０‘５Ｍ１ ００计算黏均分子量。 １．２．２脱乙酰度测定
析综合评价，３～５级判为不合格。
１．２．５致敏实验
依据国家ＧＢ／Ｔ１６８８６．１０标准第七章“最大剂量
ｏｆ ｈｅａｖｙ
ｃｈｉｔｏｓａｎ ｗａｓ ７５％，ａｎｄ ｔｈｅ
ｍｅｔａｌ ｗａｓ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ １ ０～．Ｔｈｅ ｃｙｔｏｔｏｘｉｅｉｔｙ ｌｅｖｅｌ
ｔｅｓｔ
ｗａｓ
ｅｖａｈｌａｔｅｄ
ａｔ
ｔｈｅ
ｗａｓ
ｆｉｒｓｔ
Ｉｅｖｅｌ ｗｈｉｃｈ ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈｅ ＩＯＷ ｃｅｌＩ ｔｏｘபைடு நூலகம்ｃｉｔｙ．Ｓｋｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｅｄ，Ｔｈｅ ｈｅｍｏｌｙｓｉｓ
【关键词】壳聚糖；蝇蛆；生物学评价
Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｆｒｏｍ ｆｌｉｅｓ ｍａｇｇｏｔｓ ｓｈｅｌｌ Ｇｏｕ Ｄｅｓｈｕａｎｇ，Ｍｉｎ Ｃｈａｎｇｍｉｎ
Ｃｅｎｔｅｒｆｏｒ Ｍｅｄｉｃ（ｄ Ｄｅｖｉｃｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆＴｉａｎｊｉｎ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３００１９１，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｃｈｉｔｏｓａｎ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｗｉｄｅｌｙ ｓｔｕｄｉｅｄ ｉｎ
血。作用机制主要有：①壳聚糖分子能携带大量阳
离子，所带的正电荷可以和血液中红细胞表面带负 电荷的物质发生相互吸引，有助于伤口形成血凝 块，起到止血目的。此外，壳聚糖大分子物质可以在
（２）
采用双突跃电位滴定法。准确称取蝇蛆壳聚糖
样品０．５ ｇ，加入０．１ ｍｏｌ／Ｌ盐酸至过量，均匀缓慢搅
拌至样品完全溶解。用ＮａＯＨ标准溶液滴定样品溶 液，准确记录突跃点前后的ＮａＯＨ标准溶液体积
差，计算脱乙酰度
脱乙酰度（％）＝—ＡＶｘＣＮ，，ｏＨ—Ｘ１０－３Ｘ１６
ｍｘＯ．０９９ ４
阳性对照组为生理盐水；阴性对照组使用蒸馏 水；实验组使用蝇蛆壳聚糖生理盐水浸提液？分别
乙两管中分别加入２ ｍｌ硫代乙酰胺溶液，摇动混匀， 放置２ ｒａｉｎ后置于白纸上仔细观察，比较两管颜色， 进行重金属含量检查： １．２．４体外细胞毒性实验 依据国家ＧＢ／Ｔ１４２３３．２—２００５标准进行蝇蛆壳
下一步临床试验提供实验依据：
１材料与方法 １．１主要材料与仪器
蝇蛆壳聚糖粉（天津普生元医疗科技发展有限
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】
０引
言
料【５］，广泛应用于工业、农业及医药等领域。在医药 领域主要用于止血、抗菌消炎和促进伤口愈合㈣。 在自然界中，壳聚糖分布十分广泛，在菌类、藻类植
物等细胞以及虾、蟹外壳中含量较高。此外，壳聚糖
出血与渗血是目前外科手术中常见的难题。近
年来，优秀的可吸收医用止血材料引起了医学界和 产业界的广泛关注：随着临床对止血材料性能要求
ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ
待细胞完全贴壁后弃去原培养液：样品组加入蝇蛆 壳聚糖浸提液，放置于５％的ＣＯ：培养箱中培养。培
养３ ｄ后加入噻唑蓝（Ｍ１Ｔｒ）溶液，继续培养４ ｈ，加
入二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）：将溶液震荡混匀后放人酶
标仪中，在５７０ ｎｍ波长下测定其溶液的吸光度（ＯＤ）
溶液中充分搅拌混合均匀。取１ ５．０ ｍｌ样品溶液置于 乌式黏度计中，在３０℃恒温水浴中放置１０ ｍｉｎ，并用 秒表分别测定溶剂和样品溶液的流出时间，重复５次 取其平均值。利用公式（１）计算样品的黏均分子量
ｎ’
值：计算相对增殖率（ｒｅｌａｔｉｖｅ
ｍ］＝４ｒ／印ｌ－。２１ｎ而‰
相对增殖率（％）＝ｊｉ；耋雩荨器×ｌ。。％（３）
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｔａｔｅ，ＲＧＲ）
样品毒性分级标准：０级≥１００；１级，８０～９９；
２级，５０～７９；３级，３０～４９；４级，ｌ～２９；５级，０。样品合
格与，否标准：０级和１级判为合格，２级结合形态分
的不断提高，开发可降解、无刺激及无毒副作用的 止血材料是亟需解决的问题。目前常用的止血材料 可分为天然材料（如胶原、壳聚糖和海藻酸钠），合 成材料（如聚氨酯、聚乙烯醇）和复合材料（如将纤 维蛋白原、凝ｆＩＩＬ酶等复合在壳聚糖、氧化多糖等天
然材料上制成止血绷带等）【１Ｉ：近年来，壳聚糖因具
有止血效果好刚、生物相容性高Ｈ等特点，成为止血 材料的研究热点之一： 壳聚糖是天然获取的，无毒性的高分子多糖材
式中：ＡＶ为两个突跃点消耗的ＮａＯＨ溶液体积之
差（ｍ１），Ｃ、舯。为氢氧化钠标准溶液浓度（ｍｏｌ／Ｌ），ｍ为
样品质量。 １．２．３重金属含量 按照中国药典（２００５版）标准方法测量。取样
放入３７℃水浴中保温，加入稀释抗凝兔血，轻轻混 匀：继续在３７℃恒温水浴中保温６０ ｍｉｎ。水浴结束 后倒出管内液体，离心后吸取上清液置于紫外分光
光度计比色皿中，在５４５ ｎｍ处测量ＯＤ值：计算溶 血．率
万方数据
溶蟀％，＝斋糍器嚣器ｘ１００％㈩
１．２．７抑菌能力的测定
国际生物医学工程杂志２０１６年６月第３９卷第３期Ｉｎｌ
Ｊ Ｂｉｏｍｅｄ Ｅｎｇ，Ｊｕｎｅ ２０１６，Ｖ０１．３９，Ｎｏ．３
血毒性。 ２．５抑菌活性分析 在１９～２ｌ℃条件下，用质量浓度为２５ ｇ／Ｌ的本
析，以Ｐ＜０．０５为差异具有统计学意义： ２结果 ２．１蝇蛆壳聚糖理化性质 蝇蛆壳聚糖的相对分子质量为２６６ ｋｕ，脱乙酰 度为７５％，重金属含量为６ｘ１０。６： ２．２细胞毒性实验 实验结果显示，阴性对照组与空白对照组的细
壳聚糖材料使红细胞发生凝集反应、促进血液
中血小板和其他补体系统激活，最终来实现伤口止
ｒａｔｅ
ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｎ
ｔｈａｔ
ｎｏ
ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ
ｚｅｒｏ
ｐｒａｃｔｉｃａｌｌｙ
ｗａｓ
０．７６９％．ｗｈｉｃｈ
ｗａｓ
ｌｅｓｓ
５％．ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ
ｈｅｍｏｌｙｓｉｓ．
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ
Ｃｈｉｔｏｓａｎ ｈａｓ ｇｏｏｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒ，ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｍｅｅｔ ｔｈｅ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｍｅｄｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ． Ｃｈｉｔｏｓａｎ；Ｆｌｉｅｓ ｍａｇｇｏｔ；Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ
本研究以蝇蛆壳提取的壳聚糖为研究对象，依 照国家对医疗器械的规定，对来源于蝇蛆壳的壳聚 糖粉进行物理、化学以及生物安全性评价。实验结
果有助于预测临床试验中可能出现的不良反应，为
溶液至酚酞指示液出现粉红色，再向溶液中加入醋 酸盐缓冲液，稍微加至完全没有沉淀，将样品转移 至纳氏比色管中，加入蒸馏水稀释至２５ ｍ１，将该处 理液作为甲管；另取加标准铅溶液作为乙管。向甲、
１
【摘要】目的壳聚糖具有良好的水溶性、生物相容性、生物降解性、成膜性及止血、愈创、消炎等作用，
在医用生物材料应用方面具有广阔前景：蝇蛆的皮中含有大量壳聚糖成分，是获得较纯壳聚糖的方式之一： 对蝇蛆提取的壳聚糖创伤敷料进行综合评价。方法按照国家统一标准对蝇蛆壳聚糖进行理化分析（相对 分子质量、脱乙酰度和重金属含量）、抑菌、皮肤致敏、细胞毒性和溶血实验。结果蝇蛆壳聚糖的相对分子 质量为２６６ ｋｕ，脱乙酰度为７５％，重金属含量小于１０一，细胞毒性总评级为１级，具有较轻细胞毒性：致敏和 溶血实验结果表明，蝇蛆壳聚糖材料不具有致敏反应，材料的溶血率为０．７６９％，小于５％，即没有溶血现象。 此外，蝇蛆壳聚糖还具有抑菌作用：结论蝇蛆壳聚糖具有较好的综合特性，可以满足生物医药方面 的要求：
选取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和白色念 球菌作为初始菌悬液二实验方法按照《消毒技术规 范》（２０１２年版）执行二
１．３统计学方法
品糊状物作用２ ｒａｉｎ，对金黄色葡萄球菌和铜绿假 单胞菌的平均抑菌率为９５％，对白色念球菌平均抑
菌率为８３％＝ ３讨论与结论
采用ＳＰＳＳ １ ５．０统计学软件进行统计分析，数据 以均值±标准差（互±ｓ）表示，实验结果进行方差分
万方数据
国际生物医学工程杂志２０１６年６月第３９卷第３期Ｉｎｌ
Ｊ ＢｉｔｉｍｅｄＥｎｇ，Ｊｕｎｅ
２０１６．、１一Ｉ
３９．Ｎｏ．３
对较低，且碳酸盐和重金属含量低，色素少，因此蝇 蛆壳是提取甲壳素的极好原料：