微生物生理生化实验培养基配方

配方1（用于细菌葡萄糖发酵---半固体穿刺培养）：

蛋白胨2g，NaCl5g，K2HPO40.2g，1%溴酚蓝3ml，葡萄糖10g，琼脂8g，水1000ml。115度灭菌20分钟。

小提示：先将蛋白胨和NaCl溶于热水，调pH至7.4（这时总体积接近1000ml），再加入1%溴酚蓝3ml，再加入糖，溶解均匀后分装。

配方2（用于细菌乳糖发酵---半固体穿刺培养）：

蛋白胨2g，NaCl5g，K2HPO40.2g，1%溴酚蓝3ml，乳糖10g，琼脂8g，水1000ml。115度灭菌20分钟。

小提示：先将蛋白胨和NaCl溶于热水，调pH至7.4（这时总体积接近1000ml），再加入1%溴酚蓝3ml，再加入乳糖，溶解均匀后分装。

配方3:MR与VP试验-------请实验员准备

蛋白胨5g，葡萄糖5g，NaCl5g，水1000ml，调pH至7.2-7.4左右，115度灭菌20分钟。甲基红试剂（需新配）

40%KOH，-萘酚（需新配）

配方4:柠檬酸盐利用试验步骤（液体-直接观察现象）-------请实验员准备

NaCl5g，MgSO4.7H2O0.2g，磷酸氢二铵1g，K2HPO41g，柠檬酸钠2g，水1000ml，调pH至6.8-7.0左右后加入1%溴酚蓝10ml。

1%溴酚蓝：称取0.08g溴酚蓝溶于0.5ml95%乙醇中，再加水至总体积到10ml。

以上成分加热溶解后，调pH至6.8，然后加入指示剂，摇匀。制成后为黄绿色，分装试管，121度灭菌20分钟。

配方5:淀粉酶实验

0.2%淀粉2g，蛋白胨1g，1.5%琼脂20g，调pH7.0至7.2，水1000ml。

小提示：可先将琼脂放入水中加热，待完全溶解后，加淀粉。混匀后高压灭菌。

检测用卢戈氏碘液

过氧化氢酶试验

过氧化氢溶液

配方6:吲哚试验-------

胰蛋白胨10g，NaCl5g，水1000ml，调pH至7.2-7.4左右，121度灭菌20分钟。

检测用乙醚及吲哚试剂

配方7:H2S试验：柠檬酸铁铵半固体培养基

1000ml蛋白胨10g，氯化钠5g，Na2S2O3.5H2O0.5g，柠檬酸铁铵0.5g，琼脂8g，pH7.2，121度灭菌20分钟。

配方8:明胶液化实验（穿刺培养）-----不做

明胶15g，牛肉膏0.5g，蛋白胨1g，氯化钠0.5g，水100mL,将明胶加入肉汤中，水浴加热溶解，调pH7.2-7.4，分装试管，115度高压灭菌20min，取出迅速冷却，使其凝固。

配方9:尿素酶试验（液体）：-------

氯化钠5g，KH2PO42g，蛋白胨1g，酚红0.012g(溶于500mL水中，取60mL加入即可)，水1000mL，pH6.8。

尿素20g（将上述溶液灭菌后冷却至60度加入混匀即可分装）

配方10:苯丙氨酸脱氨酶试验（固体斜面）：

DL-苯丙氨酸2g，氯化钠5g，酵母浸膏3g，磷酸氢二钠1g，琼脂20g，水1000mL，pH7.0，115度灭菌20分钟。

检测用10%FeCl3

配方11:硝酸盐还原试验（液体）：----

蛋白胨5g，硝酸钾2g（分析纯），水1000mL，pH7.4，121度灭菌20分钟。要求容器非常洁净。

甲液：甲基-萘胺0.6g，5M冰醋酸100mL，稍加热溶解，用脱脂棉过滤，放棕色瓶中，4-10

度保存。

乙液：对氨基苯磺酸0.8g，5M冰醋酸100mL，先用30mL冰醋酸溶解对氨基苯磺酸，再加冰醋酸至100mL。放入带塞的玻璃瓶中，4-10度保存。