生物碱的提取与分离

第六节 生物碱的结构鉴定与测定
（一）色谱法
1.薄层色谱法
2.纸色谱法
与对照品共薄层，与文献报道的数据进行对照。
测定理化常数（如：熔点），测定其衍生物的
理化数据等来鉴定生物碱。
（二）谱学法 紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振 UV——反映分子中所含共轭系统情况； IR——利用特征吸收峰，鉴定结构中主要官能团； NMR——各种技术图谱测定结构；
OH N H N H COOMe
长春碱?
N
R= - CH3
醛基长春碱? R= - CHO
MeO
OCOMe H R OH COOMe N
长春花全草 除水杂 苯渗漉液
(干粉80目)
苯渗漉 药 渣
除脂杂 苯 液
6%酒石酸水溶液萃取 H+/H2O pH=4
除碱性较强的成分
过滤，氨水碱化至 pH=6~7 CHCl3提
(二)红外光谱
1.酮基的吸收 有跨环效应时，酮基吸收在1660-1690cm-1 2.Bohlmann吸收带 在反式喹诺里西丁环中，凡氮原子邻碳上的氢 有二个以上与氮孤电子对呈反式双直立关系者， 且氮孤电子不参与共轭时，则在2800-2700cm-1 区域有 2个以上明显的吸收峰 ,而顺式异构体则 此峰极弱。
OH- 如： NH4OH
有机溶剂提取
N + H2O
游离生物碱
（2）沉淀法 ①酸提碱沉法
适用于碱性弱的生物碱
药 材 H+/H2O提取；加碱碱化 沉 淀 不溶或难溶性Alk H2O 水溶性Alk、杂质
②盐析法：适用中等弱碱。
黄藤1%H2SO4水溶液
碱化至pH=9；加NaCl达饱和 沉淀 H2O
掌叶防已碱
CH3
草渣
水液 NaOH碱化，甲苯萃取
(-)Ephedrine
OH C H H
H C N CH3 CH3
甲苯 （循环使用） ① 草酸麻黄碱
CaCl2置换 (+)Pseudoephedrine 盐酸麻黄碱粗品 精制 盐酸麻黄碱纯品
(2)利用生物碱碱性强弱不同进行分离
PH梯度分离法 ①混合物溶于稀酸水，逐渐调碱性，分别用 CHCl3萃取 PH由低到高，生物碱碱性由弱到强 ②混合物溶于CHCl3中，用缓冲液依次萃取 PH由高到低，生物碱碱性由强到弱
萝芙木总碱 10%醋酸提取 醋酸 氯仿提取 C来自百度文库Cl3液 浓缩至干 弱碱部分 （降压灵） 碱水液 醋酸
加NaOH碱化 至pH10以上， Et2O：MeOH（9：1） 混合溶剂提取 混合有机溶剂 浓缩至干 强碱部分
沉淀物 （中强碱部分
碱水液
(3)利用生物碱的特殊功能团性质进行分离：
O N
EtOH -KOH
MS——依据文献，结合主要生物碱类型的质谱特
征进行解析。
一、光谱法在生物碱的结构鉴定与测定中 的应用 (一)紫外光谱 当生色团（羰基、双键、苯基和硝基等） 在生物碱的整体结构中 时，UV可以反映 其骨架类型特征，对其骨架类型的判断 和推定有重要作用。如：吡啶、喹啉、 氧化阿朴菲等。

若生色团仅是连接在生物碱的母核上或 侧链上时，其UV对判断其母核类型的作 用十分有限。不同类型的生物碱具有相 同或相似的UV谱，不能由UV谱推断生 物碱的骨架类型。如托品类、苄基四氢 异喹啉类、二氢吲哚类等。
生 药
碱化（如NH4OH）（使Alk游离） 渗滤（或浸渍）（如CHCl3等）
残 渣 亲水性Alk CHCl3 碱性较弱的Alk
CHCl3
H+/H2O
H+/H2O
OH-/H2O
Alk沉淀
（二）分离 溶解性——重结晶法
碱性强弱——pH梯度萃取
色谱法
（二）分离 系统分离
多用于基础研究 总 碱
生物碱的分离
（一）提取
第五节、提取分离
1.酸水提取法 2.醇类溶剂提取法
3.与水不相混溶的有机溶剂提取法
1.酸水提取法 （1）离子交换树脂法：酸水提取液通过离子交换树脂
- + RSO3H + 氢离子型阳 离子交换树脂 Alk + NH 生物碱盐 RSO3 NH4+ + 阳离子交换 树脂的铵盐 RSO3 + NH + + H
溶丙酮（乙醇）中 加Ag2SO4饱和水溶液
雷氏铵盐沉淀 滤液 (B2SO4) 加入氯化钡（BaCl2）
沉 淀
硫酸钡沉淀
滤 液
季铵碱的盐酸盐
2.醇类溶剂提取法
生药
醇或酸性醇
醇液
挥醇；加酸水
药渣
沉淀
H+ / H2O
OH-/H2O CHCl3
碱性较弱的碱
OH-/H2O 亲水性Alk
CHCl3 Alk
3.与水不相混溶的有机溶剂提取法
(1)二个以上与氮孤电子对呈反式双直立氢
H N N 顺式 C N H R1 H CH3OOC OH R1=R2=αH R2 有Bohmann带 R1=R2=βH 无Bohmann带 C/D环顺式，只有一个反式氢 H H H H H N 反式 C/D环反式，有三个反式氢 H H
CHCl3
弱碱
H2O
除脂杂
精 制
回收氯仿，蒸干 溶于无水乙醇 H2SO4调pH=3.8~4.1 Alk沉淀 溶于H2O，氨水碱化至 pH=8~9 CHCl3萃取
Alk硫酸盐 除水杂
CHCl3
回收氯仿
H2O
游离Alk
溶于苯:氯仿(1:2)液中 色谱分离 通过Al2O3吸附柱
用苯:氯仿(1:2)洗脱 长春碱 醛基长春碱
特定分离
侧重于生产实用
类别 指酸碱性强弱
部位 指极性不同
依据Alk的理化性质 单体Alk的分离
(1)利用生物碱及其盐类的溶解度不同进行分离
麻黄草
H C OH H
H C N CH3
甲苯 碱水 （回收甲苯后弃去） 流经2%草酸溶液 草酸溶液 减压浓缩，冷后过滤 ② 母液 置换 成盐 精制 盐酸伪麻黄碱成品
③雷氏铵盐沉淀法
适用于季铵碱
B+ + NH4[Cr(NH3)2(SCN)4] B2SO4 (B[Cr(NH3)2(SCN)4]) Ag2SO4 + Ag[Cr(NH3)2(SCN)4]
BaCl2 BaSO4 + B . Cl
季铵碱的水溶液
加酸水调至弱酸性 加新配制的雷氏铵盐饱和/H2O 沉淀(雷氏复盐) 水溶液
O KO N
N 苦参碱
N 苦参碱酸钾（溶于水中） OH O NaOH
N N O 喜树碱
N N O
OH O O
O
HCl
– (5)色谱法 »常用氧化铝作吸附剂 »硅胶柱：展开剂中一般加少量二乙胺等 碱性试剂； »大孔树脂 »Sephdex-LH20
»各种加压柱：低压柱、中压柱、制备性 HPLC等；
提取分离实例——长春碱与长春新碱