高效液相色谱-质谱法在中药的应用研究
高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用进展
高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用进展高效液相色谱一质谱联用(LC-MS)将高效液相色谱的高分离效能与质谱的强大结构测定功能组合起来,不仅实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析,而且简化了样品的前处理过程,样品分析更简便,为中药组分的分析及结构的鉴定提供了一个重要和全新的技术支撑。
该技术对中药化学成分的分析及鉴定,中药指纹图谱的研究,中药药代动力学的研究有应用价值。
论述了高效液相色谱-质谱联用(LC-MS)在中药领域的应用进展,阐述了各方法的特点、应用范围及研究现状,旨在为中药研究者提高参考依据。
促进中药研究向现代化的发展。
标签:高效液相色谱质谱联用;中药;指纹图谱;药代动力学作为一种新的现代技术分析手段,高效液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术在分离效能、灵敏度和专属性等方面都有着巨大的优势,展现出强大的定性、定量分析能力,从而在药物分析特别是中药分析得到广泛的运用。
本文就近年来HPLC-MS联用技术在中药成分分析及结构的鉴定、中药指纹图谱研究、中药药代动力学研究3个方面的应用作一论述。
1高效液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术有独到的优势和特点当用传统的高效液相色谱(HPLC)测定样品时,样品中的杂质对主成分有较大的干扰,主峰不易分离,峰型也不好,准确性有影响但却找不到好的办法时,高效液相色谱一质谱(LC-MS)可以排除其他杂质的干扰,即使主成分在色谱上没有完全分离开,但通过MS的特征离子质量色谱图也能给出它的色谱图来进行定性定量。
采用高效液相色谱-质谱(LC-MS)分析时其流动相主份相对于传统高效液相色谱(HPLC)法更少更简单,色谱柱更短更小(常用规格是2.1mm×50mm,1.8μm),出峰时间大大缩短,却可以得到很好的分离效果,短时间内可完成对一个样品的分析,操作简单、重复性好。
更适合于大批量样品的测定。
高效液相色谱一质谱(LC-MS)还可以用相对简单的色谱条件对中药中多种成分的定性、定量分析,比如分析西青果中的诃子酸、诃黎勒酸、鞣云实精、原诃子酸等化合物,方法简便,分析时间短。
高效液相色谱-质谱法在中药的应用研究
高效液相色谱-质谱法在中药的应用研究摘要:液质联用技术将液相色谱(HPLC)的高分离效能与质谱(MS)的强大结构鉴定功能结合起来,逐渐成为中药现代化研究的强有力手段。
本文对我国科学工作者应用液质联用技术在中药化学成分分析、中药质量控制、中药体内代谢、药代动力学、药效学、中药材指纹图谱及在复方中成药分析的方面进行的研究工作作一综述。
关键字:HPLC-MS 质量控制药代动力学药效学指纹图谱中成药分析HPLC是目前分离复杂体系最为有效的分析工具,由于其仪器自动化、普及化程度愈来愈高,已成为中药分析最常用的仪器之一。
但目前中药分析中运用的HPLC仪器绝大多数与UV或DAD检测器相联接,对于单个色谱峰仅能提供保留时间及紫外图谱等信号,而对未知成分所能提供的结构信息相当有限,对中药等复杂体系的定性结果可能给出错误的结论[1]。
MS是一种高灵敏度的检测器,且不同化合物的特征性强,可用于部分解析未知化合物的结构。
中草药是一个非常复杂的化学体系,其中含有大量的次生代谢产物,其结构复杂,性质相似,有的化合物还不稳定。
HPLC-MS将HPLC的高分离效能与MS的强大结构测定功能组合起来,为中药化学成分的快速分析提供了一个重要的新技术。
一、中药化学成分研究中药化学成分是其发挥药效作用的物质基础,它的深入研究是中药现代化的关键和核心。
以往中药成分研究主要采用传统提取分离方法,从复杂体系中分离提取单一化学物质,再通过光谱和质谱等分析技术进行鉴定。
而且对环境极不友好。
HPLC-MS在使化学成分达到有效分离的基础上,提供丰富的化合物结构信息,在中药化学成分分析中发挥了重要作用。
中药中某些常见的化学成分已经有对照品,通过与对照品的色谱和质谱特征进行对照可以快速、准确地对化学成分进行鉴定。
刘瑞等[2]采用HPLC-MS2鉴定大青叶水提液中的5种化学成分,通过与对照品的保留时间、色谱增益、紫外光谱图和特征离子碎片进行比较,鉴定出大青叶水提液图谱中的5个色谱峰分别为胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤。
高效液相色谱-质谱联用技术在药物分析中的应用
( z o d sr l o ain l n e h ia si t, in s z o 214 , Chn ) Xu h uI u ti e t a dT c n c ln tu e Ja g uXu h u2 1 0 n aV o a I t ia
文献标识码 : A 文章编 号 : 17 — 4 0( 0 ) 9 0 8 — 3 6 10 6 2 1 0 — 9 8 0 1 中图分 类号 :T 6 .2 Q40 7
Applc to fH PLC - S i ia i n o M n Pha m a e i a r c utc l Ana y i l ss
第 4 卷第 9 0 期
唐学红 ,等 :高效 液相 色谱一 质谱联用 技术在 药物分 析 中的应用
99 8
2 P C MS H L — 技术 在药物分 析 中的
应 用
21 在 中药 指 纹 图谱 研 究 的应 用 .
进行 鉴定 及定 量分 析 。 陈勇 等 以苦参碱 和氧化 苦参碱 为对 象 , 液相 对 色谱一 电喷雾离子 阱质谱 实验条 件进行优 化 , 研究 了 氧化 苦 参碱 在大 鼠体 内的主要 代谢 产 物 。健 康 大 鼠 腹腔肌 注 4 / g 0mgk 氧化 苦参碱 ,收集 0~ 4h的尿 2 样 ,尿样 中的代谢 物经 Cs 小柱进 行富集 与纯化后 , 在选 择 的最佳 条 件下 进样 分析 ,结 果表 示 ,在 大 鼠 尿样 中有原 药及其 6种 I 相氧化 及还原代 谢产 物 , 其 中苦参 碱为 主要代谢 产物 ,未检 出 I相 代谢 物 。 I 郑 国钢等嘲 用液 质联用法对人血浆 中雷米普利 及其 活性 代谢 产 物雷 米普 利拉 的浓 度进 行 了测定 。 以依那 普利 为 内标 , 用 甲醇 一 . 采 01 %甲酸溶液 (s: 5 7 2) 为流 动相 , Wa r Al t - 以 t s tni Cs e a s 色谱柱 为分析柱 ,通
中药复方分析新方法及应用
中药复方分析新方法及应用中药复方(Traditional Chinese Medicine Formula)是指由多种药物组合而成的传统中药剂型,具有多种药物的协同作用和治疗效果。
中药复方是中药学领域的重要研究课题,其研究方法和应用有着广泛的意义和价值。
近年来,随着科学技术的不断发展和中药研究的深入,出现了许多新的中药复方分析方法和应用。
本文将介绍一些中药复方分析的新方法及其应用。
一、高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)高效液相色谱-质谱联用技术是一种现代化的分析方法,将高效液相色谱技术与质谱技术相结合,可同时实现对中药复方中不同成分的分离、检测和鉴定。
这种技术能够快速准确地确定中药复方中的主要成分和含量,为药物质量控制和药效评价提供了可靠的手段。
HPLC-MS技术的应用范围广泛,可以用于分析中药复方中的多种成分,比如生物碱、酚类、黄酮类等。
通过建立合适的色谱条件和质谱参数,可以实现对复杂中药复方的快速分析。
同时,HPLC-MS技术还可以通过对复方中的成分进行定性和定量分析,揭示复方中不同成分之间的相互关系。
因此,在中药复方质量控制和功效评价中具有广阔的应用前景。
二、指纹图谱技术指纹图谱技术是对中药复方进行质量控制和鉴别的重要手段。
指纹图谱是通过对中药复方进行多次成分分析和比较而得到的一个图谱,能够展示复方中主要和次要成分的含量和相对峰面积,是对复方中成分的整体特征进行定性和定量评价的方法。
指纹图谱技术可以通过建立合适的色谱条件和数据处理方法,对中药复方进行快速、准确的分析。
与传统的药典方法相比,指纹图谱技术更能反映复方中成分的多样性和复杂性。
通过对多批次样品的指纹图谱进行比对和统计分析,可以评估复方的一致性,为药物质量控制提供科学依据。
三、代谢组学技术代谢组学技术是一种研究生物体内代谢物整体谱的方法。
中药复方作为多成分、多靶点的复杂药物系统,对药物代谢组学的研究提出了新的挑战和机遇。
通过代谢组学技术,可以全面了解中药复方在生物体内的代谢途径和代谢产物,为中药的药效评价和药物安全性评价提供科学依据。
液相色谱质谱联用技术进展及其在中药中的应用
中药作用机制和药效研究
总结词
液相色谱质谱联用技术有助于深入探究中药的作用机制和药效,为中药的通过分析中药在体内代谢产物的变化,可以探究中药的作用机制和代谢途径。同时,利用该技术可以 检测中药对生物体内各种代谢产物的调控作用,从而全面了解中药的药效和作用特点。这有助于推动 中药的现代化研究和临床应用,为中药的国际化和普及化奠定基础。
随着技术的不断发展,LC-MS 逐渐应用于环境、食品、药物等 领域,成为一种重要的分离和检
测手段。
近年来,LC-MS在仪器设备、 分离效果、检测灵敏度等方面取 得了显著进展,为复杂样品的分
析提供了有力支持。
技术的主要突破和进步
高通量分析
高分离效果
通过自动化和快速进样技术,LC-MS可以 实现高通量分析,提高了分析效率。
液相色谱质谱联用技术进 展及其在中药中的应用
• 引言 • 液相色谱质谱联用技术的进展 • 液相色谱质谱联用技术在中药研究中
的应用 • 案例分析:液相色谱质谱联用技术在
中药研究中的应用实例 • 结论
01
引言
目的和背景
液相色谱质谱联用技术是一种重要的分离分析技术,广泛应 用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。随着科技的发 展,该技术在中药领域的应用也日益广泛,为中药质量控制 、药效物质基础研究等方面提供了有力支持。
采用新型色谱填料和优化色谱条件,LCMS的分离效果得到显著提高,能够更好地 解决复杂样品中的分离难题。
高灵敏度检测
多维度分析
通过采用新型离子源和质谱检测器,LCMS的检测灵敏度得到显著提升,能够检测 低浓度的目标物。
通过串联质谱技术,LC-MS可以实现多维 度分析,提供更多的结构信息和分子量信 息。
高效液相色谱法测定中药复方制剂中有效成分含量的研究
[实验原理]本实验采用HPLC法测定饮料中咖啡因的含量。实验材料包括饮料 样品、色谱纯甲醇、超纯水、咖啡因标准品等。实验步骤如下:
1、准备饮料样品,将其中的咖 啡因提取出来。
2、使用甲醇和水混合液进行稀 释,制备标准系列。
3、用HPLC仪进行色谱分析,测 定咖啡因的含量。
4、通过对标准系列进行色谱分析,确定咖啡因的保留时间和峰高。 5、根据样品溶液的峰高和标准系列的峰高,计算饮料中咖啡因的含量。
高效液相色谱法测定中药复方制剂中有 效成分含量的研究
01 引言
03 实验原理 05 实验步骤
目录
02 实验方法 04 实验材料 06 数据处理方法
07 实验结果
09 结论
目录
08 实验分析 010 参考内容
引言
随着中医药学的不断发展,中药复方制剂在临床上的应用日益广泛。为了确保 中药复方制剂的质量和疗效,准确测定其中有效成分的含量至关重要。高效液 相色谱法(HPLC)具有高分辨率、高灵敏度、快速分析等特点,为中药复方制 剂中有效成分含量的测定提供了有效手段。
展望未来,高效液相色谱法在中药复方制剂研究中的应用仍有广阔的发展空间。 未来研究可以进一步优化实验条件,提高分析方法的系统性和灵敏度。可以结 合其他现代分析技术,如质谱联用、核磁共振等手段,对中药复方制剂中的有 效成分进行深入研究和探讨。这将有助于更好地理解中药复方制剂的药效物质 基础及其作用机制,为中药复方制剂的质量控制和临床应用提供有力支持。
[实验结果分析]通过对10种不同品牌和类型的饮料进行测定,实验结果表明, 其中7种饮料中检测到咖啡因,含量范围为50-200mg/L,另外3种饮料中未检 测到咖啡因。实验数据的表格和图形如下:
(请在此处插入表格和图形)
高效液相色谱-质谱联用法分析降糖中药制剂中含有的西药成分
Te h me ii e t d d cn su y
中 国 民 族 民 间 医 药
C ieejunlo eh o dcn n tn p am c hns ora f tnmeiiea d e o hr ay h ・2 ・ 9
高效 液 相 色 谱 一质 谱 联 用 法 分 析 降 糖 中药 制 剂 中含 有 的 西 药 成 分
【 关键词 】R 2. 高效液相色谱 一 972 质谱联用法 ;苯 乙双胍 ;中药 制剂
【 中图分 类号 】 【 文献标识码 】 A 【 文章编号 】10 — 5 7 (0 0 3 0 2 0 0 7 8 1 2 1 )1 — 0 9— 2
Abtat src :0bet e oaa z s r dc e addpeu al i Taio a C ieeMeiie fr euigb o u— jci :T nl e v y Wet nMeii s d e rsm by n rdt nl h s dc s o dcn l dsg e n糖尿 病患 病
样量 :1t 。 0z L 3 质谱检 测条件 离子 化 方 式 为 电 喷 雾 ( S ) E I ;选 择 性 离 子 检 测 (I) SR ;检测离子 为正离 子 。苯 乙双胍 为 [ +H] +,m M / = 0 . 。毛细管 电压 :3 2 V;锥孔 电压 :3 V;离子 源 z 264 .k 0 温度 :10C;脱 溶 剂 温 度 :3 0C;脱 溶 剂 气 体 流 速 : 1 ̄ 2 ̄ 40 h 0 L・ ~,锥孔反吹气体 流速 :3 L・ ~。 0 h
mo im a ea —g c c t c ( 0 3 : 0 2 ,f w r e . L . mi ~ ;R s l :T e T a i o a C iee Me i n s nu c t e l i aei a i 7 : O . ) l a :0 2 m n t aa l c d o t eu t s h rdt n l h s i n dc e i
液相色谱质谱联用技术在中药研究中的应用进展
器 。对于一级质谱选 择离子检测或串联 质谱多反应监测 时,
四极杆 质量 分析器 的灵敏 度一般 比离子阱高 1 2 - 个数量级 ,
器 和计算机控 制与数据处理 系统 等部分组成I, 2 质谱仪需要 J
在 高真空下 工作 :1 量氧会烧坏 离子源 的灯丝 ; ) () 大 ( 用作加 2 速离子 的几千伏高 压会引起放 电 ; ) ( 引起额 外的离子 一 3 分子
分 , 中包括用 现代科技 手段对 中药有 效成分确 定 , 其 中药 的
生产 和质量 控制 , 以及 中药 代谢过程确 定等一 系列的 问题 。
成聚合 物等 。但 由于 M L I A D 自身 的特点 , 前 直接 在线 与 目
HL P C联用的应用研究还相对较少l。 』 】 从 质 量分 析器 角度来 看 , 四极杆 是在交 变 电场 的作 用
点, 同时具有定性 、 定量能力强 的特点 , 非常适合活性成分复 杂、 含量低 的植物 药研 究 , 中药 中有效成分 的定性 、 为 定量及 中药代谢 等问题 的解决提供了强有力 的工具 和手段 【。 J J 1 质谱 技术 简介 质谱仪 器一般 由真空 系统 、 进样系统 、 子源 、 离 质量分析
下 , 某些符 合要求 的离子通过 四极 杆到达检 测器 , 使 三级 四 极 杆质谱则 可 以实现二 级质谱 功能 。离 子阱则 是首先 把 J
离子聚集到 阱内 , 通过改变 电参数把 阱内离子逐个 释放到达 检测器 , 子阱质谱具 有多级 质谱 功能 , 于解 析化合 物结 离 对 构更为有利 , 但是质量准确度和分辨率不及 四极杆 质量分析
( et sryi i t n E I、 e c pa nz i , S)大气 压化 学 电离 源 ( m shr l r o o ao a op e c t i pesr hmi li i t n A C)大 气 压 光 电离 源 (mo rsuece c o z i , P I、 a n ao a — t shr rsueIt a eA P) p eepesr ne c , P I r f 和基 质辅 助激 光解 析 电离源 ( tx as tdlsrdsrt ni i t n MA D ) 另 一 ma — sie ae eopi / nz i , L I等I; i r s o o ao 种是从质谱 的质量分 析器角度来划分 , 括四极杆 、 包 离子 阱 、
液相色谱质谱联用技术进展及其在中药中的应用
液相色谱质谱联用技术在新药研发中也具有广泛应用,如用于药效物质基础研究、药代动力学研究等,为新 药的开发提供技术支持。
液相色谱质谱联用技术在
05 中药活性成分研究中的应 用
活性成分筛选与鉴定
快速筛选与分离
利用液相色谱质谱联用技术,可以快速筛选和分离中药中的活性 成分,提高研究效率。
结构鉴定
07 总结与展望
当前液相色谱质谱联用技术在中药领域取得成果总结
成分鉴定与质量控制
液相色谱质谱联用技术已广泛应用于中药复杂体系的成分鉴定和质 量控制,为中药现代化和国际化提供了有力支持。
代谢组学研究
利用液相色谱质谱联用技术,对中药在体内外的代谢过程进行深入 研究,揭示了中药药效物质基础和作用机制。
质谱技术简介
质谱(MS)是一种通过测量样 品离子的质荷比来进行分析的 技术。
质谱具有高通量、高灵敏度和 高分辨率等特点,能够提供样 品的分子量和结构信息。
常用的质谱类型包括电子轰击 质谱、化学电离质谱、电喷雾 质谱和基质辅助激光解吸电离 质谱等。
液相色谱质谱联用原理及优势
1
液相色谱质谱联用(LC-MS)技术将液相色谱的 分离能力与质谱的定性分析能力相结合,提高了 分析的准确性和可靠性。
当前中药研究面临问题
成分复杂
中药通常包含多种化学成分,其结构和性质各异, 给研究带来一定难度。
质量标准不统一
由于缺乏统一的质量标准和检测方法,不同批次 或来源的中药质量存在差异。
药效机制不明确
部分中药的药效机制尚未完全阐明,限制了其在 临床上的广泛应用。
液相色谱质谱联用技术在中药研究中的应用前景
药物相互作用评价
该技术可评估中药与其他药物间的相互作用,为临床合理用药提供 科学依据。
液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用
液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用液相色谱质谱联用技术(LC-MS)已经成为分析化学领域中的一项重要工具。
它不仅可以用于生化分析和环境检测, 还在药物分析中表现出很强的优势。
本文将重点介绍液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用。
一、液相色谱质谱联用技术的原理及优势液相色谱质谱联用技术是将液相色谱(LC)和质谱(MS)两种技术结合起来, 使得样品经过某种分离后直接进入质谱分析器, 从而达到高灵敏度, 高选择性和高分辨率的目的。
液相色谱的选择性和分离能力可以使样品中各种成分被分离出来, 而质谱则以其高灵敏度和特异性, 鉴别每一个分离出来的成分, 确保每种物质都得到准确的定量和定性分析。
液相色谱质谱联用技术优势显著, 其主要表现在以下三个方面:1.更高的分离能力和选择性, 增强样品分离和分析的准确性和可靠性。
2.具有高度的灵敏性和特异性, 能提高分析的探测下限和峰面积, 使得样品中的低浓度成分也能准确地被检测到。
3.可以进行组分结构的确定和鉴定, 通过分子离子的质量谱图,可确定组分的分子结构和可能的化学反应路径。
二、液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用已经得到广泛的发展和应用。
主要表现在以下几个方面:1.药物代谢研究液相色谱质谱联用技术被广泛应用于药物代谢研究中。
通过监测药物的代谢产物, 可以研究药物在体内的代谢途径, 剖析药物的药效, 药物代谢动力学参数和评价药物对人体生理的影响。
2.药物成分分析液相色谱质谱联用技术可以实现药物中各种成分的分离和分析, 确保药物的安全和质量。
通过确定药物中的各种成分, 可以评价药物的性质和作用机理, 为药物的研发和质量监测提供有力的技术支持。
3.毒物分析液相色谱质谱联用技术也可以用于毒物分析。
通过对毒物样品进行分离和质谱分析, 可以鉴定毒物类别和浓度, 及时采取措施, 保护公众健康安全。
4.药物残留检测液相色谱质谱联用技术可以用于药物残留检测。
超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用
2020年12月邓博等.超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用49超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用邓博,邓护军,杨飞,门靖西安万隆制药股份有限公司,西安710119摘要超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-M S/MS)是一种高效、迅速、稳定性和精密度高的综合性分析技术,其应用前景十分广阔。
本文着重介绍了近年来UPLC- MS/MS在人体化学药品、动物体内化学药品、以及中医药分析与检测三方面的最新应用研究,并展望了其发展前景,以期为医药产品检测与分析、临床药物应用提供参考。
关键词液相色谱串联质谱中西医检测分析应用超高效液相色谱-串联质谱(UPL C - M S/ M S)检测分析技术具有高效分离度和超高灵敏度 的优势,可显著提高数据分析与检测的可靠性与 耐用性,增强目标化合物的分析效率与准确度,是 分析检测领域内的一种综合性的分析手段[3_4]。
近年来,UPLC - M S/M S分析技术在医药[5-6]、化 工[7]、生物工程[84、保健食品[1°]、特种材料"1]等众多领域应用广泛,尤其是化工与医药产品的 检测与残留分析凭借U P L C- M S/M S获得了大幅 度的提升与改进。
本文将重点综述U P L C- M S/M S在中西医药 品检测与分析中的应用研究现状,从人体化学药 品、动物体内化学药品、以及中医药分析与检测三 方面归纳U P L C -M S/M S最新应用研究进展。
1 UPLC-M S/M S应用于人体化学药品的检测1.1 UPLC- M S/M S检测抗菌药物泊沙康唑是一种三唑类广谱抗真菌药物,具 有高效、广谱、低毒等特点[U]。
检测该药物在人 体血浆中的浓度对监测药物吸收、指导临床用药 安全尤为重要[1243]。
金鸿宾等[14]建立了一种特 异性强、灵敏度高的U P L C - M S/M S法测定血浆 中泊沙康唑浓度方法。
高效液相色谱-质谱联用技术在药物分析中的应用
高效液相色谱-质谱联用技术在药物分析中的应用发布时间:2021-06-22T10:05:46.027Z 来源:《基层建设》2021年第8期作者:张平[导读] 摘要:在高效液相色谱技术是色谱法的一个重要分支,其在实际应用中以液体为流动相,其与单独的任何一种色谱检测技术相比,有着快速和准确的优点。
山东省济南市济南高华制药有限公司摘要:在高效液相色谱技术是色谱法的一个重要分支,其在实际应用中以液体为流动相,其与单独的任何一种色谱检测技术相比,有着快速和准确的优点。
当前,高效液相色谱技术与质谱分析方法也得到了高度融合,产生了高效液相色谱 - 质谱联用技术,其在有机化学领域得到了重要应用,进而为药物分析工作提供了有力支持。
关键词:液相色谱;联用技术;药物分析引言:近年来,在药物质量研究过程中,对杂质的研究越来越重视,这一研究贯穿于药物研发的整个过程。
药物中的某些杂质与药物临床使用中产生的不良反应存在密切关系,是影响药物安全有效的重要因素。
药物中的杂质可分为有机杂质、无机杂质、残留溶剂,其中有机杂质包括起始原料、工艺中间体、化学反应副产物、化学试剂及贮藏运输过程中产生的降解产物等物质,这类杂质通常被称为有关物质。
因药物中有关物质的含量微小,检查时必须选择专属性强、灵敏度高的检测方法。
本文综述了药物中有关物质检测方法研究进展及应用。
1高效液相色谱法(HPLC)概述HPLC 法具有灵敏、快捷、准确的优势,是目前测定药物中有关物质最常用的方法之一,广泛被各国药典采用。
根据待测物质结构,可以选择不同分离原理的色谱类型。
应用 HPLC 法测定药物中有关物质常用的方法主要有四种:外标法、加校正因子的主成分自身对照法、不加校正因子的主成分自身对照法及面积归一化法。
其中,前三种应用最为广泛。
在 2015 版《中国药典》中,对尼莫地平片、加巴喷丁片等有关物质检测均采用外标法与不加校正因子的主成分自身对照法。
部分研究人员采用反相 HPLC 法以加校正因子的主成分自身对照法测定双氯芬酸钠有关物质。
液相色谱-串联质谱技术在中药体内过程研究中的应用
作者简介:杨崇仪(1986-),男,白族,硕士,主管药师,研究方向为药物安全性评价及药物体内动力学研究。
E-mail:chongyi2002@sina com液相色谱-串联质谱技术在中药体内过程研究中的应用杨崇仪 吴 凡 程 宾 王 莉 张红宇云南省食品药品监督检验研究院,云南 昆明 650011【摘 要】 由于液相色谱-串联质谱法在复杂待测组分的定量和定性检测上相较于单一的色谱法和质谱法具有较好的分辨率,更高的灵敏度和准确性,近年来被广泛的应用于中药的研究。
文章对液相色谱和质谱法的原理和在中药体内过程研究中所具备的优缺点进行介绍,并通过检索近15年来在国内外发布的运用液相色谱-串联质谱法研究中药体内过程的文献,对目前不同种液相色谱-串联质谱法在各种中药材、中药方剂和中药制剂的体内过程研究应用进行综述。
【关键词】 液相色谱-串联质谱;传统中药;药动学【中图分类号】R917 【文献标志码】A 【文章编号】1007-8517(2021)05-0043-06TheapplicationofLC-MS/MSinStudyofPharmacokineticsofTraditionalChineseMedicineYANGChongyi WUFan CHENGBin WANGLi ZHANGHongyuYunnaninstituteforfoodanddrugcontrol,Kunming650011,ChinaAbstract:Comparewiththeindividualliquidchromatographyandmassspectrometry,Liquidchromatography-tandemmassspectrometry(LC-MS/MS)hasexcellentresolution,highersensitivityandbetteraccuracywhendealwiththequantitationandqual itationofthecomplexcomponents,itwaswidelyusedintheresearchofTraditionalChineseMedicine.Inthisarticle,theadvantagesanddisadvantagesofliquidchromatographyandmassspectrometryintheresearchoftraditionalChinesemedicinehavealreadybeenpointedout,andweretrievethepublishedliteraturesthatusetheLC-MSmethodstostudythepharmacokineticsprocessoftraditionalChinesemedicineinrecent15yearsathomeandabroad,andreviewedtheresearchandapplicationofdifferentLC-MSmethodsinthestudyofthepharmacokineticsprocessofChinesecrudedrug,Chinesemedicinalformula,Chinesemedicinepreparation.Keywords:LiquidChromatography-tandemMassSpectrometry;TraditionalChineseMedicine;Pharmacokinetics 中药制剂是以中医药理论为指导,以中药为原料,按规定的处方和方法加工成的一定剂型,是中医传统理论与西医的结合的产物。
制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用
制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用一、本文概述制备型高效液相色谱法(Preparative High Performance Liquid Chromatography, Prep-HPLC)是一种重要的色谱分离技术,以其高效、快速、自动化的特点在多个领域,特别是中药研究中发挥着越来越重要的作用。
本文旨在全面介绍制备型高效液相色谱法的基本原理、技术特点以及其在中药研究中的应用情况。
文章将概述制备型高效液相色谱法的基本原理和操作流程,包括色谱柱的选择、流动相的优化、样品的制备和分离等关键环节。
文章将重点讨论制备型高效液相色谱法在中药研究中的应用,包括中药成分的分离纯化、质量控制、药物代谢动力学研究等方面。
文章还将对制备型高效液相色谱法在未来的发展趋势和挑战进行展望,以期为相关领域的科研人员提供有益的参考和启示。
二、制备型高效液相色谱法的基本原理与技术制备型高效液相色谱法(Preparative High Performance Liquid Chromatography,Prep-HPLC)是高效液相色谱法(HPLC)的一个重要分支,它主要用于大规模分离、纯化和制备样品。
其基本原理基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配平衡,通过高压泵将流动相推动,使待测样品在固定相和流动相之间不断进行吸附、解吸、再吸附的分配过程,从而实现各组分的有效分离。
制备型高效液相色谱法通常使用更粗的色谱柱和更高的流速,以实现更大规模的分离和制备。
与分析型高效液相色谱法相比,制备型高效液相色谱法更注重样品的纯度和回收率,而不仅仅是各组分的定性和定量分析。
在制备型高效液相色谱法中,选择合适的固定相和流动相至关重要。
固定相的选择应根据样品的性质和目标组分的特性来确定,常用的固定相包括硅胶、氧化铝、聚合物等。
流动相的选择则要考虑其与固定相的相容性、对目标组分的洗脱能力以及分离效果等因素。
制备型高效液相色谱法还涉及到柱层析、梯度洗脱、循环洗脱等技术。
高效液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用
2、高效液相色谱质谱联用技术 在药物分析中的应用
(1)药品质量检测:高效液相色谱质谱联用技术可用于对新药、仿制药以及 中药的质量进行全面检测,包括对药物中各种成分的定性定量分析、立体构型 测定等。此外,该技术还可用于筛选和优化药物候选物,提高药物研发效率。
(2)药品浓度测量:在临床药物治疗中,准确的药物浓度对于治疗效果至关 重要。高效液相色谱质谱联用技术可实现对患者血清、尿液等生物样本中药物 浓度的精确测定,为临床医生提供准确的药物治疗方案依据。
3、药物代谢研究
液相色谱质谱联用技术可以用于药物代谢的研究。通过对药物在体内的代谢过 程进行监测,可以了解药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄情况,有助于药 物的优化设计和新药研发。
四、结论
液相色谱质谱联用技术在药物分析中具有广泛的应用前景。它不仅可以用于药 物成分的分析、质量控制和代谢研究,还可以为新药研发提供有力的技术支持。 随着技术的不断发展和完善,液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用将会 越来越广泛。
(2)上机分离:将处理后的样品通过输液泵注入色谱柱,利用高压液体流将 样品分离成不同组分;
(3)检测:将分离后的组分进入质谱仪,通过离子化、质量分析和检测器进 行检测。关键技术:高效液相色谱质谱联用技术的关键技术包括色谱分离和质 谱检测。
(1)色谱分离:通过选择合适的色谱柱填料和流动相组成,优化色谱分离条 件,提高目标物与杂质的分离效果;
4、药物代谢产物鉴定:UPLC-MS还可以用于药物代谢产物的鉴定。通过分析 药物在生物体内的代谢产物,可以了解药物的代谢途径和机制,为药物的设计 和优化提供参考。
五、总结
超高效液相色谱质谱联用技术是一种强大的分析工具,它在药物分析领域的应 用已经越来越广泛。随着科技的不断进步,我们有理由相信,这种技术将在未 来的药物分析中发挥更大的作用,为药物研发、质量控制以及临床应用提供更 多的支持。
高效液相色谱法及其在中药研究中的应用
一、概述高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种应用广泛的分离和分析技术,其在中药研究中扮演着重要角色。
本文将对HPLC技术及其在中药研究中的应用进行介绍和探讨。
二、高效液相色谱法的原理及技术特点高效液相色谱法是一种基于液相为分离介质的色谱分析技术。
其原理是将待分析物质溶解于流动相中,在固定的色谱柱中经过固定相的分离。
HPLC技术具有分离效率高、分析速度快、灵敏度高、分析准确等特点,因此在中药研究中得到了广泛应用。
三、高效液相色谱法的应用1. 中药质量控制HPLC技术可以对中药中的有效成分进行定量分析,为中药的质量控制提供了重要手段。
通过HPLC技术可以对中药中的多种成分进行快速、准确的分析,实现对中药质量的快速检测。
2. 药效成分分离HPLC技术可以有效分离药效成分中的杂质,提高药效成分的纯度。
通过HPLC技术可以对药效成分进行快速分离和检测,为药物研发提供了有力支持。
3. 药物代谢动力学研究HPLC技术可以对药物在体内的代谢过程进行分析,为药物代谢动力学研究提供了重要手段。
通过HPLC技术可以对药物在体内的代谢产物进行快速分离和检测,为药物代谢过程的研究提供了有力支持。
四、当前HPLC技术在中药研究中的挑战与发展1. 检测方法的标准化当前HPLC技术在中药研究中仍面临着检测方法标准化的问题,各种方法的标准化程度有待提高。
2. 技术发展趋势随着科学技术的不断发展,HPLC技术在分辨率、分析速度、检测灵敏度等方面仍有进一步提升的空间。
未来HPLC技术有望在中药研究中发挥出更大的作用。
3. 多样性应用未来HPLC技术有望在中药研究中实现多种成分同时分析、高通量检测等多样化应用,为中药研究提供更全面的支持。
五、结论HPLC技术作为一种高效、准确、灵敏的分析技术,在中药研究中发挥着重要作用。
当前HPLC技术仍面临着标准化、技术发展等问题,但未来有望在中药研究中发挥更大的作用,为中药研究提供更全面的支持和保障。
中药鉴定新技术新方法及其应用
中药鉴定新技术新方法及其应用中药鉴定是对中药材进行质量鉴定和真伪辨别的过程,其重要性不言而喻。
为了提高中药鉴定的准确性和效率,近年来出现了许多新技术和新方法。
本文将对一些重要的中药鉴定新技术和新方法进行介绍,并探讨其应用前景。
1. 超高效液相色谱(UHPLC)技术UHPLC是一种高效且分离效果好的色谱技术,其分离速度比传统的高效液相色谱(HPLC)更快。
在中药鉴定中,UHPLC可用于分离和鉴定中药中的有效成分,以及探索中药组分之间的相互作用。
该技术具有高灵敏度、高分辨率和高通量等优点,能够提高中药鉴定的准确性和效率。
2. 质谱技术质谱技术在中药鉴定中的应用越来越广泛。
其中,液相质谱(LC-MS)技术可用于快速分离和鉴定中药中的复杂成分,如生物碱、多糖、单体等。
气相质谱(GC-MS)技术则可用于中药中挥发性成分的分析和鉴定。
质谱技术的高灵敏度和选择性使其成为中药鉴定的重要工具。
3. 核磁共振波谱(NMR)技术NMR技术是一种基于原子核在外磁场中吸收电磁波的原理进行分析的技术。
在中药鉴定中,NMR技术可用于定量和定性分析中药中的化学成分。
与传统的色谱技术相比,NMR技术无需分离和纯化样品,因此可以节省时间和成本。
此外,NMR技术还可以获取中药中活性成分的立体结构信息。
4. DNA条形码技术DNA条形码技术是利用DNA序列的差异性对物种进行鉴别的技术。
在中药鉴定中,DNA条形码技术可用于鉴别药材的真伪和种属。
通过分析药材中的DNA序列,可以快速确定其来源和真实性,避免使用劣质或假冒的中药材。
DNA条形码技术具有高灵敏度和高特异性的优势,有望成为中药鉴定的重要手段。
这些新技术和新方法在中药鉴定中的应用前景广阔。
它们可以提高中药鉴定的准确性和效率,同时节省时间和成本。
此外,它们还可以促进中药产业的发展和中药质量的提高。
然而,这些新技术和新方法的应用仍面临一些挑战,例如标准建立、仪器设备的成本等。
因此,需要进一步研究和发展相关的技术和方法,以促进中药鉴定领域的进一步突破。
高效液相色谱在中药检测的应用研究
高效液相色谱在中药检测的应用研究摘要:高效液相色谱法(HPLC)是色谱法的一个分支,在医药、化学、工业、农业、商检等领域应用广泛。
文章从HPLC的检测原理和技术特点出发,介绍了HPLC在中药检测中的应用现状,并结合实例进行分析。
关键词:中药;HPLC;技术特点;成分检测;质量分析中药是我国的传统医药,以往检测中药的真假和质量,主要采用观察、触摸、闻尝、水试、火试等方法[1]。
近年来随着中医研究深入,中药在临床上的应用更加广泛,传统的检测方法不满足准确性要求,必须采用先进的检测技术。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)在成分测定、质量分析等方面,均具有较高的应用价值,是一种可行的检测技术方案。
1.HPLC的检测原理和技术特点1.1 检测原理HPLC的检测原理,是以液体为流动相,采用高压输液系统,将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂/缓冲液等流动相,泵入装有固定相的色谱柱,各种成分在柱内被分离后,进入检测器进行检测,就能得到各种成分的含量,以便开展深入分析。
HPLC最早出现于1903年,经过百年的发展和演变,分析精度和自动化水平不断提升。
1.2 技术特点HPLC的技术特点,可以总结为“四高、一广、环保”。
①“四高”指的是高压(对载液加高压,减小流经色谱柱时受到的阻力)、高速(载液流速和分析速度快,一个样本的分析时间通常在15-30min)、高效(固定相和流动相能达到最佳分离效果)、高灵敏度(检测精度可达到0.01mg)。
②“一广”指的是应用范围广,70%以上的有机化合物,均可采用HPLC分析,尤其是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物,分析时更有优势[2]。
③“环保”指的是色谱柱可以反复使用,一根柱子能分离不同化合物;而且检测过程中样品量少、容易回收。
2.HPLC在中药检测中的应用现状2.1 中药材成分测定《中国药典》中收录的中药材和饮片有500多种,300多种采用现代技术测定含量,约70%采用的是HPLC法,典型代表如人参、白芍、大黄、天麻、丹参、甘草、五味子、牛蒡子等,检测既快速又准确。
质谱在中药研究中的应用
质谱在中药研究中的应用
质谱是一种能够对物质进行快速、准确、灵敏的分析技术,因此在中药研究中得到了广泛应用。
特别是在中药复方的成分分析、活性成分筛选和药效评价等方面,质谱技术发挥了重要作用。
质谱技术可以通过分析分子的质量和结构信息,来确定中药中的活性成分和其数量,以及成分之间的相互作用等。
结合其他分析技术,质谱技术还可以对中药复方进行全面、系统的分析,为中药的质量控制和药效评价提供了可靠的手段。
常见的质谱技术包括质谱-质谱联用技术、气相色谱-质谱联用技术和液相色谱-质谱联用技术等。
其中,质谱-质谱联用技术可以通过对中药复方进行分子碎片的分析,来确定其中的活性成分和它们的结构信息;气相色谱-质谱联用技术和液相色谱-质谱联用技术则可以对中药中的各种成分进行分离和定量分析。
总之,质谱技术在中药研究中的应用,有助于深入了解中药的成分和作用机制,为新药研发和中药的临床应用提供了重要的科学依据。
- 1 -。
高效液相色谱-质谱联用技术在中药研究中的应用
A MP Au , 0 7, 13 , o 3 C . g 2 0 Vo . 5 N .
高效液相色谱 一质谱联用技术在 中药研究中的应用
邵 清松 , 胡润淮
( 浙江林学院, 浙江 杭州 3 1 0 13 ) 0
摘 要: 综述 了高效液 相 色谱 一质谱联 用技 术( ̄t r c—M ) S 的发展 状 况 以及 近年 来该技 术在 中药化 学成
E I 去 除溶 剂 后 的带 电液 滴 形 成 离子 , 有 多 电荷 S从 具
能力 , 以其分析的分子量范围很大, 所 既可用于小分子 分析 , 又可用于多肽 、 白质和寡聚核苷酸分析 , 蛋 尤其 适 用于 在溶 液 中已形成 离子 的化 合物 或 能够带 多 电荷 的生 物 大分 子 的分 析 。A C 是 在 大气 压 下 利 用 电晕 PI 放 电来使 气 相样 品 和流 动 相 电离 的一 种 离 子 化技 术 ,
后的离子信号被转变为 电信号 , 传送至计笋机数据处 理 系统 , 据 质谱 峰 的 强度 和位 置 对样 品 的成 分 和结 根
构进 行分 析 u j 工。
用测定高质量数的分子 , 其灵敏度高 , 样品制备简单 ,
现 已广 泛应用 于分 析 蛋 白质 、 类 、 苷 酸 、 糖类 物 肽 核 多 质 。从 质 量分 析器 角度 来 看 , Q—MS中样 品 在第 一 个 四极质 量 分析器 中进 行 质 量 分 析 , 后 按 质 荷 比选 择 然 离子 , 选定 的离 子在 第 二个 四极 质 量 分 析 器 中进 行 碰 撞诱 导 裂解 产生 一 系列新 的产 物离 子 。产物 离子 被第
目前 常用 的 H L S 联 用 仪 具 有 两 大 分 类 系 PE—M 统 , 种是 从质 谱 的离子 源角 度来 划分 , 一 包括 电喷雾 离 子 (l tsryi itn E I, 气 压 化 学 电离 (to e copa n ao, S)大 er o zi an. l shr r sr hmcloitn A C) pec e uece i n i , P I和基 质 辅 助激 ip s ai z o a 光 解 吸离 子 化 ( txast a r eo tni ztn a i ie s d p o o i m r ssdle sr i n ao , i
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
高效液相色谱-质谱法在中药的应用研究摘要:液质联用技术将液相色谱(HPLC)的高分离效能与质谱(MS)的强大结构鉴定功能结合起来,逐渐成为中药现代化研究的强有力手段。
本文对我国科学工作者应用液质联用技术在中药化学成分分析、中药质量控制、中药体内代谢、药代动力学、药效学、中药材指纹图谱及在复方中成药分析的方面进行的研究工作作一综述。
关键字:HPLC-MS 质量控制药代动力学药效学指纹图谱中成药分析HPLC是目前分离复杂体系最为有效的分析工具,由于其仪器自动化、普及化程度愈来愈高,已成为中药分析最常用的仪器之一。
但目前中药分析中运用的HPLC仪器绝大多数与UV或DAD检测器相联接,对于单个色谱峰仅能提供保留时间及紫外图谱等信号,而对未知成分所能提供的结构信息相当有限,对中药等复杂体系的定性结果可能给出错误的结论[1]。
MS是一种高灵敏度的检测器,且不同化合物的特征性强,可用于部分解析未知化合物的结构。
中草药是一个非常复杂的化学体系,其中含有大量的次生代谢产物,其结构复杂,性质相似,有的化合物还不稳定。
HPLC-MS将HPLC的高分离效能与MS的强大结构测定功能组合起来,为中药化学成分的快速分析提供了一个重要的新技术。
一、中药化学成分研究中药化学成分是其发挥药效作用的物质基础,它的深入研究是中药现代化的关键和核心。
以往中药成分研究主要采用传统提取分离方法,从复杂体系中分离提取单一化学物质,再通过光谱和质谱等分析技术进行鉴定。
而且对环境极不友好。
HPLC-MS在使化学成分达到有效分离的基础上,提供丰富的化合物结构信息,在中药化学成分分析中发挥了重要作用。
中药中某些常见的化学成分已经有对照品,通过与对照品的色谱和质谱特征进行对照可以快速、准确地对化学成分进行鉴定。
刘瑞等[2]采用HPLC-MS2鉴定大青叶水提液中的5种化学成分,通过与对照品的保留时间、色谱增益、紫外光谱图和特征离子碎片进行比较,鉴定出大青叶水提液图谱中的5个色谱峰分别为胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤。
刘进怀等[3]建立了分析中药三七的HPLC-UV-MS方法。
通过与对照品比较,鉴定了14个成分;根据正负离子质谱数据和文献,推断出了41个化合物结构。
其中,野三七皂苷-H、野三七皂苷-E、竹节参皂苷L5、丙二酰基人参皂苷-Rgl、以及三七皂苷-J、-A、-R1、-G、-R2和人参皂苷-Rh3的异构体首次在三七中发现。
液相色谱一飞行时间质谱(HPLC-TOF-MS)全扫描模式可以得到色谱峰的精确分子量,而离子阱多级质谱(HPLC-IT-MS)可以得到化合物的多级离子碎片,二者结合可以给出更多的化合物结构信息。
曹阳等[4]采用HPLC-TOF-MS和HPLC-IT-MS的多维液质联用系统筛查和鉴定了中药复方六神丸中的多类化学成分。
在优化的液质条件下,飞行时间质谱对六神丸质谱信息中的每个色谱峰进行了精确分子量测定,并匹配出可能的化学组成;结合离子阱质谱提供的多级碎片结构信息对其进行结构解析,共鉴定出六神丸中来源于蟾酥、麝香和牛黄三味药材的25种化合物。
该法为复杂体系的多类别成分分析提供了一种有效、可靠的新模式。
Xintian Zheng等[5]对温脾汤中酚类、生物碱类、三萜皂苷类、黄酮苷类成分进行了快速分析,通过TOF-MS光谱和MS/MS碎片离子信息与对照品或与文献数据对比确定了59种成分的化学结构。
二、中药质量控制研究2005年版中国药典大部分是以单一指标性成分作为中药材或其制剂的含量测定指标。
鉴于中药的多组分,多靶点作用特点,从单一指标性成分控制向多项指标的多信息质量模式发展是必然的趋势。
HPLC-MS由于本身的特殊优势,可以满足多指标测定要求:质谱检测可以排除药材中理化性质相近的化学成分的相互干扰,专属性强,适于复杂样品的定性和定量;质谱检测的灵敏度高,适于样品中低含量组分的测定;质谱检测不受化合物无生色团的限制,适应范围广。
HPLC-MS在中药多组分的测定中发挥了优势。
Jun Chen等[6]采用毛细HPLC-ESI-MS同时测定了金银花中的24种成分,包括9种黄酮类成分,8种环烯醚萜苷类成分和7种皂苷类成分。
由于皂苷类在紫外区无强吸收,用MS法检测提高了此类物质的检测灵敏度。
选择DAD 检测方式,样品中6种化合物色谱峰重叠。
而采用质谱选择离子监测(SIM)检测方式,不同质荷比(m/z)的离子可以通过不同通道检测,使化合物不必完全分离就可准确测定。
i等[7]使用HPLC-ESI-MS2,用选择反应监测(SRM)模式鉴别了血塞通注射剂中的27种皂苷类成分,并对9种成分进行了含量测定。
包括三七皂苷R1,人参皂苷Rbl,Rb2,Rb3,Rc,Rd,Re,Rf和Rgl,分析时间为25分钟。
Lian Wen Qi[8]等报道了用HPLC-ESI-TOF-MS分析黄芪药材和制剂中13中组分的方法,采用负离子检测模式进行测定。
并与紫外、蒸发光散射检测法对比了灵敏度、重现性和选择性,MS检测法使用窄的质量窗获得的提取离子色谱图避免了共洗脱色谱峰和样品背景成分的干扰,具有较高的选择性和灵敏度。
HPLC-MS可灵敏准确地测定中药中含量低的活性或毒性成分。
乌头类生物碱即是乌头中的有效成分又是有毒成分,王兆基等[9]用多反应监测扫描方式测定样本中乌头碱、次乌头碱、中乌头碱含量,方法适于样品中含有微量乌头类生物碱或其基质较为复杂的情况。
Yue Song[10]建立了毛细管HPLC-ESI-MS法测定忍冬属植物花蕾中所含的环烯醚萜苷类物质,方法具有良好的线性关系,最低检测限为1.9ng/mL。
应用该法首次成功的测定了植物中所含环烯醚萜苷的含量,为金银花等药材的质量控制奠定了基础。
三、中药代谢与药代动力学研究药物代谢是指药物在机体内的生物转化过程。
药物进入体内后,多数经过代谢转化失活或降低了活性。
也有的药物经代谢转化生成了药理活性更强的代谢物。
还有一些药物经代谢转化会产生毒性中间体或代谢物。
因此,了解中药复杂体系的代谢过程和途径,对于阐明中药药理作用的机理,了解中药的毒副作用具有重要意义。
中药体内代谢和药代动力学研究的挑战在于缺乏对进入体内的所有微量组分和微量的代谢产物的足够灵敏的分析方法,而HPLC-MS在一定程度上为其提供了契机。
LC-MS在药物代谢研究中除了可确定分子量外,还可以根据分子特异性断裂规律推导出重要部分结构甚至是完整的结构,其依据是由于多数药物的代谢物保留了原形药物分子的骨架结构。
代谢物可能与母体药物具有相似的裂解规律,即丢失一些相同的中性碎片或形成一些相同的特征离子,因此利用LC-MS可以迅速找到可能的代谢产物,并鉴定出结构[11]。
Peng Li等[12]使用大鼠肝微粒体与丹参酮ⅡA共同培养,用HPLC-MS n鉴别了大鼠肝代谢物中的丹参酮ⅡA及其代谢产物。
采用电喷雾离子源,正离子扫描,通过与对照品对比色谱保留时间和质谱碎片峰,成功地鉴别出丹参酮ⅡA的三种羟基代谢物丹参酮ⅡB、紫丹参甲素A和羟基丹参酯ⅡA,并推测出它们与丹参酮ⅡA和总丹参酮药理活性相同。
陈勇等[13]采用LC-ESI-IT-MS n研究了大鼠腹腔肌注氧化苦参碱后尿液中的代谢产物,在大鼠尿样中发现6种I相氧化还原代谢产物,主要代谢物是苦参碱,未发现Ⅱ相代谢物。
HPLC-MS n和HPLC-TOF-MS联用。
从多个角度提供信息,增加了定性的准确性。
庞丽琼等[14]建立大鼠血清中复方清开灵(含牛黄等7种中药)药物原型成分的HPLC-MS n和HPLC-TOF-MS联用分析方法。
对血样进行TOF-MS分析得到精确的分子量和分子式,由电喷雾离子阱多级质谱扫描,得到目标成分的多级离子碎片,两者结合识别和鉴定了大鼠血清中复方清开灵的四种主要原型成分栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷和胆酸。
HPLC-MS在中药药代动力学研究方面正显示出极大的优势。
由于中药复方成分复杂,目前药代动力学研究一般集中在主要活性成分上。
沈岚等[15]采用HPLC-MS对大鼠口服麦冬皂苷肠溶微球的代谢产物之一薯蓣皂苷元体内过程进行了研究。
使用电喷雾电离源选择性地监测质荷比为415的带正电荷的分子离子峰,方法准确重现。
丹参酮和隐丹参酮在大鼠血浆中的达峰浓度均低于20ng/ml,因此HPLC-UV法不能满足测定要求[16](紫外检测法丹参酮和隐丹参酮的定量限为(50ng/mL)。
使用HPLC-ESI-MS,用SIM方式检测[M+H]+离子,两种组分可在大鼠血浆中被灵敏地检测,线性范围为2~200ng/mL,定量限分别为lng/mL和0.2ng/mL[l7]。
当归补血汤含有多种化学成分,XiaoDong Wen等[18]建立了测定大鼠灌胃给予当归补血汤后血浆中5种活性成分:毛蕊异黄酮-7-O-p-D葡糖糖苷、芒丙花苷、黄芪皂苷Ⅳ、黄芪皂苷I和阿魏酸的HPLC-MS测定方法,并研究了大鼠给药后的药代动力学过程。
该法采用ESI源,SIM模式检测分析物的甲酸根加合物,灵敏度高,5种成分的定量限依次为0.55,0.46,1.07,1.12和4.6ng/mL。
四、中药药效学研究利用HPLC-MS分析中药中组分和生物系统(细胞、DNA、蛋白质等)作用的特征,从而筛选和分析有效成分,是研究中药药效物质基础的新思路。
张溪等[19]利用体外细胞模型模拟体内细胞对中药有效成分的特异性吸收,结合HPLC-MS筛选中药黄芪中的生物活性成分。
将中药黄芪提取液与Caco-2细胞及红细胞分别混合培养,破碎与药材结合后的细胞,使之释放出结合的药材中的成分,用HPLC-ESI-TOF-MS分析黄芪提取液与活性细胞结合的成分,并对其进行结构鉴定。
发现黄芪中有8个黄酮类和2个皂苷类化合物与Caco-2细胞结合,10个黄酮类和4个皂苷类化合物与红细胞相结合。
Zhang X[20]建立了细胞提取与高效液相色谱结合的方法筛选当归补血汤剂中的活性成分,并用HPLC-TOF对活性成分结构进行进一步的确证,结果显示有9种化合物与HL-7702细胞结合、7种化合物与RAW264.7细胞结合、13种化合物与Caco-2细胞株结合。
在体内形成DNA加合物是遗传毒性致癌物最终导致肿瘤发生的必要阶段。
Wan Chang[21]采用LC-ESI-MS-MS法鉴别马兜铃酸与DNA的加合物,并对其质谱裂解模式进行了解释。
活性代谢物的检测有助于致癌物分析。
应用HPLC-MS还可以对药物相互作用引起的药效改变进行研究。
Jie Liu等[22]研究了华法林与丹参酮ⅡA联合给药对华法林代谢的影响。
用ESI-IT-MS和ESI-TOF-MS分析大鼠灌胃给药后血浆和尿液中代谢产物。
发现单独给予华法林时,在大鼠血浆和尿样中除了发现较低浓度的羟基华法林硫酸酯外,未发现华法林和其他代谢产物;华法林和丹参酮ⅡA联合给药后,在大鼠尿样中发现华法林和华法林醇等多种代谢物,说明丹参酮ⅡA可以加速华法林的代谢。