几种药物对大肠杆菌的治疗效果
复方黄连素与几种抗菌药物对大肠杆菌作用效果的比较
复方黄连素与几种抗菌药物对大肠杆菌作用效果的比较
吴科榜;董丽娜
【期刊名称】《中兽医学杂志》
【年(卷),期】2009(0)3
【摘要】通过药敏试验掌握细菌对药物的敏感度,选择最佳治疗药物,提高治病的效果,这是在畜禽生产中的-个重要环节.本次试验采用药敏纸片扩散法,研究测定培氟沙星、卡那霉素、黄连素、复方黄连素(培氟沙星+黄连素)对猪的致病性大肠杆菌C83645的药物敏感度,从而得出首选治疗药物.试验表明,培氟沙星平均抑菌圈为16.7mm、卡那霉素平均抑菌圈为12 mm、黄连素平均抑菌圈为6.6 mm,复方黄连素平均抑菌圈为21 mm.根据药敏实验的判定标准,则可得出猪大肠杆菌C83645对这四种药的敏感度为:复方黄连素为极敏,培氟沙星为高敏,卡那霉素为中敏,黄连素为低敏.猪大肠杆菌C83645引起的疾病,这四种药物中首选治疗药物为复方黄连素.【总页数】3页(P7-9)
【作者】吴科榜;董丽娜
【作者单位】海南大学农学院,海南海口570228;海南大学农学院,海南海口570228
【正文语种】中文
【中图分类】S9853.52
【相关文献】
1.肉鸡大肠杆菌对几种抗菌药物的药敏试验 [J], 张金玲
2.大肠杆菌对几种抗菌药物的药敏试验 [J], 包绵俊;金任毛;黄毅;谢国怀
3.黄连素与抗菌药物联用对大肠杆菌体外抗菌活性的影响 [J], 陈志华;陈晓生;缪小群;吴智慧
4.从几种抗菌药物疗效的改变看鸡大肠杆菌的耐药性 [J], 艾武;任萍
5.黄连素与其它抗菌药物联用对大肠杆菌体外抗菌活性研究 [J], 陈志华;陈晓生;缪小群;吴智慧
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几种抗生素对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌作用
的耐 药性 问题 亦少 报道 ． 因此 ， 探 讨抗 生素 联合 效应 导致 的 耐药性 研究 可 为 医学 、 畜牧业 和 流行 病学 等 领 域 提 供一定 的数据 支持 和理论 依 据．
败 菌 的生长 ， 增加 有益 菌数 量 ， 增 强 细胞 免疫 和体 液免 疫 的功 能［ ２ ］ ．
抗 生素 （ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｉ ｏ ｔ ｉ ｃ ｓ ） 是 由微 生 物 （ 包括细菌、 真菌、 放线菌） 和一 些 高等 动 植 物 在 生 活 过 程 中 自身产 生 的具 有抗病 原 体或其 他 活性 的一 类 次级 代 谢 产 物 ， 能 干 扰其 他 生 活 细胞 发 育 和 正 常 活 动 功 能 的一 类 化学 物质 ［ ３ ］ ． 抗 生 素 的出现 为疾病 的治疗作 出了 巨大 贡献 ， 然 而近 年来 ， 抗 生 素 的过 度 使 用 ， 特 别在 养 殖 业、 畜牧 业等 领域 的过 度滥 用 ， 导 致抗 生 素通 过食 物链 进人 人 体 ， 改 变机 体 内菌群 的 结构 和 数量 ， 致使 人 体和 动物 体发 生免 疫失 调 ， 抵 抗 力下 降 ， 甚 至导 致机 体感 染某 些 超级 细菌 而致 死 ［ ４ ］ ． 所 以尽 管抗 生 素在 各
摘 要 ： 采 用 琼 脂 扩 散 纸 片法 分 析 ４ 种 抗 生 素 单 独 及 联 合 使 用 对 大 ． 选
用 普 适 性 抗 生 素 注射 用 青 霉 素 钠 、 注射 用 四 环 素 、 注射 用 硫 酸链 霉 素 和 注 射 用 头 孢 米 诺 钠 ， 分 别 在 各 自常 用 剂 量的 １ ０ 、 １ 、 ０ ． １倍 剂 量 下 进 行 ， 以 牛 肉 膏 蛋 白胨 琼 脂 平 板 培 养 基 上 圆形 滤 纸 片 的 抑 菌 圈 直 径 来 确 定 两 种 菌 种 对 抗 生 素 抑 菌 作 用 的敏 感 程 度 ． 结果表 明 ， ４种 抗 生 素 对 两 种 菌 均 有 一 定 的 抑 菌 作 用 ， 两 种 菌 对 常 用 剂 量 的 注 射 用青霉素钠 、 注 射 用 四环 素 、 注射 用 硫 酸 链 霉 素 表 现 为 中 度 敏 感 ， 而对 注射用 头孢 米诺钠 表现 为极度敏 感 ， 在 常用剂量 的 ０ ． １ 倍 剂 量 条件 下 ， 其 对 注 射 用 头 孢 米 诺 钠亦 表 现 为 极 度 敏 感 ； 且 抗 生 素 两 两 联 用 的抑 菌 效 果 与单
实验十四 纸片法测定五种抗生素对大肠杆
（牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂
20g、蒸馏水1000mL）。
(2) 营养肉汤按常规方法制备（牛肉膏3g、
蛋白胨10g、氯化钠5g、蒸馏水1000mL）。
四 操作步骤
2.菌悬液的制备
3.抑菌活性的测定
四 操作步骤
4.测定抑菌圈直径 抑菌强度判定标准：无抑菌圈者为抗药， 记为“-”；抑菌圈直径小于10mm者为耐药， 记为“+”；在10～15mm者为中度敏感，记 为“++”；在15~20mm者为高度敏感，记为 “+++”；大于20mm者为极敏感，记为
实验十四
纸片法测定五种抗生素对 大肠杆菌的抑制效果实验
一 目的要求
对四种抗生素对大肠杆菌的抑制效果进行
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
比较，掌握抑菌实验中的纸片法操作过程。
二 基本原理
随着抗生素的广泛使用，大肠杆菌对抗 生素药物的耐药性逐渐增强。了解大肠杆 菌（革兰氏阴性菌）对抗生素药物的敏感 程度，对微生态制剂的研究及临床用药具 有指导作用。本实验结果表明青霉素对大 肠杆菌有抑菌作用，但是作用不大且易出 现耐药性，出现不敏感。而其他四种抗生 素对革兰氏阴性杆菌作用强，出现敏感性。
三 实验器材与仪器
1.药品：庆大霉素、头孢菌素、四环素、链 霉素的滤纸片和青霉素的滤纸片。 2.菌种：大肠杆菌
三 实验器材与仪器
3.仪器和其他用具 ：高压蒸汽灭菌锅、生化 培养箱、无菌工作台、显微镜、平皿、三 角烧瓶、酒精灯、烧杯、移液管、镊子、 试管、胶头滴管、涂布棒、移液枪、游标 卡尺。
四 操作步骤
“++++”。
6种抗菌药对鸡大肠杆菌病的疗效比较
56 | 2014年第34卷第12期 总215期 |试验研究随着我国养禽业集约化的快速发展，禽类疾病也越来越频发。
细菌性疾病呈现上升趋势[1-2]，大肠杆菌病已成为困扰养禽业主要的疾病之一。
禽大肠杆菌病是由大肠杆菌的某些致病性菌株所引起的多种禽病的总称，其特征是引起鸡的心包炎、腹膜炎、关节炎、输卵管炎、大肠杆菌性肠炎、肉芽肿、败血症等症状[3]。
例如鸡胚感染大肠杆菌后可导致鸡胚的死亡率升高、孵化率下降以及增加雏鸡发病死亡率。
成年鸡感染大肠杆菌可增加死亡率，导致生长缓慢、饲料报酬率降低。
由于禽大肠杆菌抗原性比较复杂、临床病变表现复杂，所以当禽大肠杆菌病常与病毒性疾病和其他细菌性疾病并发或继发时，容易给养禽业带来十分大的危害。
目前禽大肠杆菌病临床上一般已药物治疗为主[4-5]。
但是，由于养殖过程中用药不科学、盲目的滥用抗菌类药物，使得细菌的耐药性问题逐渐的显现出来，由此造成的危害十分严重，不仅降低了抗菌药的疗效、延长治疗周期，而且增加了死亡率，给养禽业带来了巨大的经济损失。
1 试验材料1.1 主要仪器与设备托盘天平、电热恒温干燥箱、隔水式恒温培养箱、打孔器、无菌操作台、微量移液枪、试管、烧杯、锥形烧瓶、平皿、接种环、定性滤纸、打孔器。
1.2 试剂琼脂、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、0.1 mol/L 氢氧化钠溶液、纯化水、灭菌生理盐水。
1.3 药品硫酸多黏菌素可溶性粉，批号20140301，规格：100 g/袋。
由上海宏牧动物药业有限公司生产。
盐酸土霉素可溶性粉，批号140702，规格：100 g/袋；由华北制药集团动物保健有限公司生产。
硫酸新霉素可溶性粉，批号：140201，规格：100 g/袋；由华北制药集团动物保健有限公司生产。
乳酸诺氟沙星可溶性粉，批号20140816，规格：100 g/袋；由北京华盛堂生物科技有限公司生产。
硫酸庆大霉素可溶性粉，批号140102，规格：100 g/袋；由华北制药集团动物保健有限公司生产。
不同药物对哺乳期仔猪大肠杆菌病预防的效果
１ ０ 日， 试验地点在黑龙江省拜泉县阳光种猪场。 试验药品有庆大霉素注射液 ，河北远征动物药 业 有 限公 司生产 （ ２ ０国际 单 位 ／ 支） ； 环 丙 沙星 注 射 液， 郑州亚 卫动物药业有 限公司生产 （ ２ ． ５ ％） ； 氟苯
尼 考 注 射 液 ，河 北 远 征 动 物 药 业 有 限 公 司 生 产
仔猪 ， 说 明庆大霉素 、 环丙沙星 、 氟苯尼考 、 磺胺 嘧啶
对哺乳仔猪 的大肠杆菌病有一定 的预防效果 ，这也 为仔猪断奶后 的快速生长和健康状况提供 了基础和 保障。 从试验中可 以看 出，试验 ４ 组、 ５组仔猪在断奶
２ 结 果
各组仔猪增重情况见表 ｌ 。 由表 １ 可知 ， ５ 个试验组仔猪初生时体重基本一 致， 但试验末期 ， 试验 ２ 、 ３ 、 ４ 、 ５ 组仔猪个体重均高于
分别死亡 ８ 、 ５ 、 ２ 、 １ 、 １头 ， 成 活 率 分 别 为 ８ １ ． ４ ０ ％、 ８ ９ ． １ ３ ％、 ９ ５ 。 ４ ５ ％、 ９ ６ ． ６ ７ ％、 ９ ６ ． ６ ７ ％。 试验 ２组 仔猪 成 活
１ 材 料 与 方 法
试 验 日期 为 ， ２ ０ １ ２年 ３月 １ ２日 ～ ２ ０ １ ２年 ４月
兽 药
不 同药 物对 哺乳期仔猪大肠杆 菌病预 防的效 果
孟 凡 学 （ 黑龙 江省拜泉县龙泉镇 畜牧兽 医站 黑龙 江拜泉 １ ６ ４ ７ ０ ０ ）
大肠 杆 菌是属 于 肠杆 菌科 ， 需 氧或兼 性 厌 氧菌 的 表 １ 不 同药物对仔 猪 增 重的影 响
革兰氏阴性杆菌 ， 是人畜肠道 内的正常栖居菌 ， 通常 情况下对人 和动物是有益的。但其中的某些致病菌 株可引起 畜禽 ， 特别是幼畜 、 幼禽 的大肠杆菌病 ， 使
几种药物治疗大肠杆菌性卵黄性腹膜炎的疗效观察
（ 甘肃 畜牧 工程 职业 技术学 院 ， 甘肃 武威 ７ ３ ３ ０ ０ ６ ）
［ 中图分 类号］ Ｓ ８ ５ ３ ． ４ ９ ９ ［ 文献 标识码 ］ Ｃ ［ 文章编 号］ １ ０ ０ ４ — ６ ７ ０ ４ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ 一 Ｏ １ １ ２ — ０ １
鸡群 中 曾使 用过 青 霉 素 、 四环 素 、 病 毒灵 等 药 物 ， 但
效果 均不 明显 。
１ ． ２ 剖 检 变 化
取 已分 离 的细 菌在 普 通 琼 脂 培 养 基 上 划 线 接 种， 再 分别取 上述 备用 纸片各 一枚 ， 均匀 贴布 于培 养
基表面； 置于 ３ ７ ℃恒温箱中 ２ ４ ｈ ， 结果 ： 多粘菌素 、
月龄 的蛋鸡 陆续 出现 发病 ， 病初食 欲 减退 ， 产蛋率 急
剧下 降 ， 病 鸡肛 门周 围的 羽 毛沾 有 蛋 白或 蛋黄 样 粪 污物 质 ； 在 排泄 物 中发 现 有 蛋 白状 物 或 白色及 黄 色 碎 片或凝 块 ， 发 病鸡 ４ ～５ ｄ 后 开 始有 不 同程 度 的死
种 较为 经济有 效 且使 用 方 便 的 药物 ， 通 过 本 次 实验 得 出多 黏菌 素和 庆 大霉 素 是 治疗 该 病 的理 想药 物 ，
现 报告 如下 。
色沉 淀 ， 麦 康凯 培养 基 上 长 出均 匀 一 致 的亮 红 色 菌 落， 边缘 整齐 ， 光滑 突起 ； 用 分离 的菌株 做生 化试 验 ，
①： 产气产酸 ； ＋： 阳性 ； 一： 阴性
３ 试 验 用 药
３ ． １ 硫 酸多 粘 菌 素 Ｂ， 规格 ： ５ ｋ ｇ ／ 桶， 厂家： 浙 江 凯
胜 生物 药业 有 限公 司。
大肠杆菌对几种抗菌药物的药敏试验
Ｄｏ Ｉ ．９ ９Ｊ １ Ｎ．６ １ ６ ２ ２ ．８ ０ ３ ：０ ３ ６ ／ ． １ ＳＳ １ ７ — ０ ７．０１ Ｏ ．２ ２
肟、 普康 和阿莫 西林 ， 进行 药敏试验 ， 有筛选 有效 的抗菌药
物。 １ 材 料 与 方 法
已经灭 菌的空平皿 内 ， 每皿约 １～ ０ （ ４ ｍ厚 ）冷却后 ８ ２ｍＬ 约 ｍ ，
倒 置放入 ３ ￣恒温箱过夜 ， ７Ｃ 经无 菌检验合格后置冰箱备用 。 料 高压灭 菌锅 ，规格 ＨＶ 一 ０型 ， ｔ Ｅ５ Ｅ
每管 ５ ，２ ℃高压 １ｍｉ， ｍＬ １ １ ５ ｎ 冷却后放入 ３ ｃ恒温箱过夜进 ７Ｃ
行无菌检验 。见液体 清澈 ， 透明 ， 无菌产生 ， 证明合格 ， 备用。
或少数几种抗生素 ， 而且能够耐药多种抗生素。由此而造成 的危害 十分严 重 ， 它不 仅使抗生素 的疗 效降低 ， 而且使用剂 量增大 ， 疗程延长 ， 死亡率升高 和增加 了治疗 的费用 ， 不但给 养殖业带来巨大的经济损失 ，也极 大地影响 了食 品的安全 ， 危害 了人类 的身体健康 。 本实验应用 了 ８ 种血清型的大肠杆
学实验兽药厂实验室提供 。 １ ． 培养基 ．２ １ 普 通 肉汤 ， 营养琼脂 ， 麦康 凯琼脂均购 自杭
州天和微生物试剂有 限公司。 按说明书方法制成营养琼 脂斜
１ ． 干燥药敏试纸 的制备 ： ．４ ２ 用杭州天 和微生物有 限公 司提 供 的直径 ６６ ． ｍｍ的滤纸片 ５ ０片 ， 置青霉素小瓶内 ， 包扎好瓶 口，２ 。高压灭菌 ３ ｒｎ 取 出小瓶置于温箱烘干 ， １１ｃ ０ ｉ， ａ 按每张纸
头孢喹诺对鸡大肠杆菌病的疗效
头孢喹诺对鸡大肠杆菌病的疗效作者：李俊燕来源：《畜牧兽医科学》 2021年第10期作者简介：李俊燕（1991-），女，河南汝州人，本科，兽医师，研究方向：兽医相关。
李俊燕（河南省安阳市动物卫生监督所，安阳 455000）摘要：市场上对于鸡蛋及鸡肉产品的需求量不断提升，我国鸡养殖规模正处于不断扩大阶段，然而在一定程度上也增加了鸡出现疫病的概率。
鸡大肠杆菌病是由于致病性大肠埃希氏杆菌导致的传染性疾病，会使鸡出现炎症反应，如果没有及时干预会使鸡群内部出现疾病扩散的现象，给养殖农户带来严重的经济损失。
头孢喹诺是专门治疗动物疾病的第4代头孢菌素药物，属于抗生素药物之一，杀菌作用和抗菌作用较好，在鸡大肠杆菌病的治疗过程中能取得较好的治疗效果。
为了明确头孢喹诺在鸡大肠杆菌疾病中的治疗效果，该文选择共120只鸡作为研究对象，分成6组进行对照试验。
关键词：头孢喹诺；鸡；大肠杆菌病；治疗效果；对比中图分类号：S858.31 文献标识码：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2021.10.001Efficacy of Cefquinome in the Treatment of Avian ColibacillosisLi Junyan（Animal Health Inspectorate of Anyang City，Henan Province，Anyang 455000，China）Abstract：With the increasing demand for eggs and chicken products in the market，the scale of chicken breeding in China isexpanding，but to a certain extent，it also increases the probability of epidemic disease．Avian colibacillosis is an inflammatoryreaction in chickens caused by pathogenic escherichia coli infectious disease that can spread the disease within the flock if leftuntreated，it brings serious economic losses to the breeding farmers．Cefquinome is the 4th generation cephalosporin which is usedto treat animal diseases．It is one of theantibiotics．It has good bactericidal and antibacterial effect and can get good therapeuticeffect in the treatment of chicken colibacillosis．In order to evaluate the efficacy of cefquinome in the treatment of colibacillosis inchickens，120 chickens were selected and divided into 6 groups．Key words：cefquinome，chicken，colibacillosis，therapeutic effect，comparison0 引言头孢喹诺在临床上又被称为头孢喹咪，是一种利用竞争细菌的肽合成酶，也是青霉素结合蛋白，对细胞壁的粘肽合成反应起到一定的抑制作用。
几种药物对大肠杆菌的治疗效果
几种药物对大肠杆菌的敏感性测定结果报告组员：*** *** ***报告人：***学号：***几种药物对大肠杆菌的敏感性测定摘要：大肠杆菌的抗原性复杂，毒力因子多种多样，不同血清型、不同毒力因子菌株的宿主范围和致病性大不相同，可在不同的动物或在同种不同年龄的动物中引起多种多样的疾病。
通过采用不同的抗菌药物对鸡大肠杆菌病进行治疗，结果表明，该菌对头孢噻肟、庆大霉素、阿米卡星、氧氟沙星和卡那霉素敏感。
【实验目的】通过检测抑菌圈大小测定大肠杆菌对氟苯尼考、头孢噻呋呐、硫酸新霉素可溶粉、氧氟沙星和卡那霉素几种药物的敏感程度。
【实验原理】纸片法药敏试验是将抗菌药物吸收到特定的纸片中，然后置于已接种待测定菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏感细菌的生长，从而出现抑菌环（带）。
由于药物扩散的距离越远，达到该距离的药物浓度越低，故可以根据抑菌环的大小，判断细菌对药物的敏感度。
通过药物敏感试验，我们可以找出针对于某些致病菌的敏感药物，从而对临床中的细菌性疾病的治疗提供指导。
【实验材料】1、药品及细菌——氟苯尼考、头孢噻呋呐、硫酸新霉素（杆菌净）、氧氟沙星和卡那霉素等抗菌药物，生理盐水，磷酸盐缓冲溶液，MH营养肉汤，MH培养基，麦康凯培养基，蒸馏水，大肠杆菌2、器材——纸片，试管，移液器，酒精灯，高压蒸汽锅，无菌操作台，镊子，剪刀，锥形瓶，烘箱，培养箱，天平，玻璃棒，干净毛巾（报纸），炭笔，接种环，小广口瓶【实验方法及内容】1．药敏纸片的制作1.1制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。
取圆纸片50片放入清洁干燥的小广口瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。
经15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。
1.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的小广口瓶内加入药液0.25毫升（因不好取材，故扩大十倍配药。
），并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。
庆大霉素和阿莫西林的协同作用对鸡大肠杆菌病的治疗试验-本科毕业论
东北农业大学学士学位论文学号：A06110080庆大霉素和阿莫西林的协同作用对鸡大肠杆菌病的治疗试验学生姓名：孟远建指导教师：刘克祥所在院系：动物医学学院所学专业：动物医学东北农业大学中国·哈尔滨2015 年 11 月hNEAU B.A. Degree Dissertation NO：A06110080Synergistic Effect of Gentamicin and Amoxicillin Treatment Test of Chicken Escherichia ColiStudent’s Name：Meng YuanjianSupervisor：Liu KexiangDepartment and faculty：Veterinary MedicineMajor：Veterinary MedicineNortheast Agricultural UniversityHarbin · ChinaOct · 2015h摘要鸡大肠杆菌病是危害鸡养殖业最为严重的疾病之一，是由大肠埃希菌属中的致病性大肠杆菌所致的动物和人共患的一种传染病，以纤维素性浆膜炎、卵黄性腹膜炎和卡他性肠炎等为特征。
大肠杆菌病多使用疫苗进行预防，可以使用抗生素进行治疗。
大肠杆菌病给养殖业造成极大的经济损失，为了能更好更有效的治疗鸡大肠杆菌病，本实验以自然感染大肠杆菌的患鸡为治疗动物，研究药物单独用药和联合用药对大肠杆菌病的疗效。
实验中将经诊断患有大肠杆菌病的雏鸡随机分为3组，每组30只，第一组给药硫酸庆大霉素（100 mg/kg 拌料）、第二组给药阿莫西林可溶性粉（100 mg/kg拌料）、第三组硫酸庆大霉素和阿莫西林可溶性粉联合用药（100 mg/kg拌料，各50mg/kg），连续给药5d。
主要以各组治愈率和存活率等为标准评价疗效。
结果表明，庆大霉素和阿莫西林对鸡大肠杆菌病均有疗效，治愈率分别为83%、73%，而混剂的治愈率为93%。
五种抗菌药物对大肠杆菌的体外抗菌效果比较
目录中文摘要（关键词） (2)外文摘要（关键词） (2)前言 (3)1 材料与方法 (6)1.1 材料 (6)1.1.1 菌株 (6)1.1.2 药物 (6)1.1.3 培养基及试剂 (7)1.1.4 器材 (7)1.2 方法 (7)1.2.1 培养基的制备 (8)1.2.2 大肠杆菌的扩大培养 (6)1.2.3 药敏纸片琼脂扩散试验 (8)1.2.4 微量稀释法试验 (10)1.2.5 棋盘稀释法测定联合抑菌浓度指数（FIC） (13)2 结果与分析 (13)2.1 药敏纸片琼脂扩散试验 (13)2.2 微量稀释法试验 (14)2.3 FIC指数 (16)3 结论与讨论 (17)3.1 讨论 (17)3.1.1 关于试验 (17)3.1.2药敏试验在兽医临床疫病防治中的意义 (18)3.1.3 药敏试验的注意事项 (19)3.1.4 关于耐药性 (19)3.2 结论 (20)参考文献 (22)致谢······················································································································错误！未定义书签。
大肠杆菌对七种常见抗菌药的敏感性试验
畜禽大肠杆菌对七种常见抗菌药的敏感性试验董卫超（2010届动医专升本08-2）摘要：为了的了解河南地区的大肠杆菌耐药情况，更好的对大肠杆菌病进行有效防治，近期从河南省内数家养殖场的带病或死亡的猪、鸡、鸭分离、鉴定大肠杆菌17株，采用微量肉汤稀释法测定它们对几种常用抗菌药物的敏感性。
结果显示：不同源地的大肠杆菌,对单用氟苯尼考、强力霉素的耐药率高达94.1%~100%；单用克林沙星的抗菌活性最强，仅5.9%的菌株产生耐药；SMM/TMP（5/1）联用对大多数菌株的MIC值几乎都是≥640 μg/mL；以上结果表明：在河南地区大量存在着耐药大肠杆菌菌株，而且磺胺类药物与叶酸代谢途径抑制剂联用仍表现出较高的耐药率，而单用克林沙星能收到较好的效果。
关键词：药物敏感性实验；最小抑菌浓度；大肠杆菌；耐药性；猪；禽The Antibiotics susceptibility test of several commonly used antibioticsagainst Animal E. coliDONG Wei-chao(Class 2 of Animal Veterinary, Graduated in 2010)Abstract:In order to understand the resistance of E. coli in Henan and to carry out effective prevention and treatment of E. coli illness, recently we isolated and identifide 17 strains of E. coli from several farms of pigs, chickens, ducks in Henan Province. Microdilution was used to measure their sensitivity to several common antibiotics.The results showed that the rate is as high as 94.1% to 100% when we single use of florfenicol, doxycycline resistance to different sources of E. coli.The antibacterial activity is strongest when we single use Clinafloxacin,the drug resistance and the drug resistance is just 5.9%. Combined SMM with TMP,the MIC is almost ≥640 μg/mL.These results suggest that lots of resistant E. coli is presenced in Henan.And high resistance rates were show when sulfonamides combined folic acid metabolic pathway inhibitors combined.And clinafloxacin receive good resultsKey words:Drug sensitivity test;Minimum inhibitory concentration;E. coli;Resistance; Swine;Poultry近期随着畜禽养殖业的快速发展，大肠杆菌病已成为危害养殖业的主要传染病之一。
庆大霉素等抗菌药物在大肠杆菌培养基中的抑菌效果
庆大霉素等抗菌药物在大肠杆菌培养基中的抑菌效果李帆;张伟;丁文渊【摘要】Objective: To develop an antimicrobial selective medium which has characteristics of pollution resistance for Escherichia coli in experimental teaching. Methods: The bacteria from the laboratory air, desktop and fingers of experimenters were identified. The composition and content of antimicrobialin selective medium for Escherichia coli were investigated through drug sensitivity test. The bacteriostatic effect of selective medium was tested by simulating student experiments. Results: The bacteria in laboratoryaffecting the growth of Escherichia coli were Corynebacterium pseudodiphtheriae, Staphylococcus caprae, Staphylococcus epidermidis and Bacillus subtilisby 16 SrDNA analysis. Escherichia colicould grow on gentamycin agar medium which inhibited the growths of Corynebacterium pseudodiphtheriae, Staphylococcus caprae, Staphylococcus epidermidis and Bacillus subtilis with a concentration of 1. 0 U/L. The selective medium had a certain bacteriostatic effect by Simulated student experiments. Conclusions: The selective medium had a certain bacteriostatic effect with a concentration of 1. 0 U/L for Escherichia coli in experimental teaching.%目的:研制出一种含庆大霉素等抗菌药物的选择培养基, 应用于高校实验教学常用菌种大肠杆菌的培养, 能抑制杂菌生长.方法:采集实验室空气、桌面以及实验人员的手指皮肤标本, 分离纯化后经16 SrDNA鉴定其种类;通过药敏试验确定大肠杆菌选择培养基中抗菌药物的成分及含量;模拟学生实验, 检验庆大霉素的抑菌效果.结果:影响大肠杆菌生长的实验室环境菌种主要是假白喉棒状杆菌、山羊葡萄球菌、表皮葡萄球菌和枯草芽胞杆菌;庆大霉素浓度为1. 0 U/L的选择培养基能抑制假白喉棒状杆菌、山羊葡萄球菌、表皮葡萄球菌和枯草芽孢杆菌生长, 但不影响大肠杆菌生长, 且在模拟学生实验中抑菌效果明显.结论:庆大霉素药物浓度为1. 0 U/L的选择培养基用于实验教学中大肠杆菌菌种的培养有一定的抑菌效果.【期刊名称】《宜春学院学报》【年(卷),期】2018(040)012【总页数】4页(P62-64,75)【关键词】大肠杆菌;庆大霉素;污染【作者】李帆;张伟;丁文渊【作者单位】安庆医药高等专科学校医学基础部,安徽安庆 246052;安庆医药高等专科学校医学基础部,安徽安庆 246052;安庆医药高等专科学校医学基础部,安徽安庆 246052【正文语种】中文【中图分类】Q93-33菌种是微生物学实验教学中一个必不可少的实验用物，离开它微生物学实验就无法开展。
大肠杆菌病的常用药物
禽大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌的某些致病性菌株引起的多种疾病总称，包括大肠杆菌性败血症、肠炎、脐带炎、肝周炎、心包炎、腹膜炎、全眼球炎、卵黄性腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、关节炎、肉芽肿等，并能导致胚胎和幼雏死亡。
由于大肠杆菌血清型复杂，1 / 20下载文档可编辑给免疫防治带来一定的困难，药物防治仍是控制禽大肠杆菌病的主要手段。
yz.ag365yz.ag365本文就防治禽大肠杆菌病的常用药物作一简述。
yz.ag365yz.ag365一、β-内酰胺类抗生素yz.ag365yz.ag3652 / 20下载文档可编辑β-内酰胺类抗生素为化学结构中含有β-内酰胺环一类抗生素，主要包括青霉素类、头孢菌素类、β－内酰胺酶抑制剂。
抗病作用机理均为抑制细胞壁的合成。
yz.ag365yz.ag3651、青霉素类。
防治禽大肠杆菌病的青霉素类抗生素主要为半合成广谱抗生素氨苄西林、阿莫西林。
氨苄西林、阿莫西林均耐酸、不耐酶，内服或肌注易吸收。
阿莫西林耐酸较氨苄西林强，该药抗菌谱广，杀菌力强，作用迅速，阿莫西林的血清浓度比氨苄西林高 1.5-3倍。
阿莫西林对大肠杆菌有较强的抗菌作用，其体外抗菌谱等同于氨苄西林，但体内效果则增强2-3倍。
3 / 20下载文档可编辑yz.ag365yz.ag365用法与用量：⑴氨苄西林：内服一次量为每千克体重10毫升或肌注为一次量每千克体重10毫升，1日2-3次。
⑵阿莫西林：内服一次量为每千克体重10-15毫升，1日2次。
yz.ag365yz.ag3652、头孢菌素类。
为广谱半合成抗生素，具杀菌力强、抗菌谱广、毒性小、对酸和β-内酰胺酶比青霉素类稳定等优点，第三、四代头孢菌素对大肠杆菌具有较强的抗菌作用，因较贵而多用于4 / 20下载文档可编辑宠物、种畜禽及贵重动物。
临床上应用的有头孢噻呋、头孢噻肟、头孢唑肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶、头孢吡肟。
yz.ag365yz.ag365头孢噻呋是美国普强于80年代开发成功的兽医专用第三代头孢菌素，该药1998年在美国首次上市。
猪大肠杆菌病怎么治效果好？治疗猪大肠杆菌病用什么药好得快？
猪大肠杆菌病怎么治效果好？治疗猪大肠杆菌病用什么药好得快？畜牧堂倪老师为你,讲解该疾病的治疗预防:猪大肠杆菌病用什么药?把止痢、抗菌以及消炎作为基本原则，在猪仔发病的初期，可以肌注卡那霉素或是庆大霉素，一天注射两次。
在发病中期可以口服硫酸新霉素，同时可以注射阿托品、恩诺沙星以及诺氟沙星治疗。
治疗猪大肠杆菌病的药物有哪些?1.仔猪黄痢对患病仔猪,口服或肌肉注射赐美键、恩诺沙星、庆大霉素、痢菌净和葡萄糖盐水等,能有效治疗该病。
2.仔猪白痢按每公斤仔猪体重取利福平7毫克，磺胺二甲基嘧啶0.01克，胃蛋白酶0.5克，次硝酸铋0.5克，干姜粉1.0克，共研末，与适量炒香的玉米粉充分拌匀，加少许开水调成糊状，喂给发病仔猪，一天两次，一般喂两次即停泻，喂2~3天排粪正常。
3.仔猪水肿病断奶后一个月内,每100公斤饮水或饲料中加1公斤～2公斤食醋或柠檬酸,以提高胃内酸度。
定期给予金霉素、土霉素、喹乙醇、亚硒酸钠、维生素B粉等药物,对防治仔猪腹泻和水肿病有明显效果。
猪大肠杆菌病控制策略减少大肠杆菌的传播以及感染的储存是至关重要的。
提高仔猪和母猪的免疫力也很关键。
了解风险因素会使生产商修改管理技术以便减少大肠杆菌，如广泛应用足浴，控制害虫，疫病暴发时停止猪群间的移动等。
分娩的卫生显得尤为重要。
猪舍应彻底清洗和消毒，母猪引入圈舍前清洗母猪。
室外猪群中，不同批次间的生产设施要移除，圈舍也需要进行处理。
为了减少大肠杆菌病爆发的可能性，其它病原体也需要考虑。
通过降低畜群内整个的感染压力，疾病发病率也会减少。
确保母猪尽可能的健康意味着母猪能够将**的免疫力传递给仔猪。
提高母猪的免疫力也应与反饲程序(使用感染仔猪的粪便)同时进行。
哺乳仔猪一般都在良好的条件下饲养。
不过断奶后，一切都改变了：环境，温度，分组和日粮。
采食量和日粮配方会影响到动物的易感性。
如果发生疫情，必须根据环境条件进行审查。
仔猪应该可以获得少量的教槽料以便断乳后的采食量并不会太大。
几种药物对鸡大肠杆菌病的治疗效果
２３ 药 敏 试 验 结 果 ．
结果 判 定按 参 考 文献 ［］ ［１ 行 ， ４ 和 ８进
２ ５个 菌株 对 头孢 噻 肟 、 大 霉素 、 庆 阿米 卡 星 、 氟 沙 星和 卡 氧 那 霉 素均 敏 感 ， 链 霉 素 、 对 土霉 素 、 多西 环 素 、 氟苯 尼 考 、 氧
败 血症 、 大肠 杆菌 性 肉芽肿 、 囊病 、 气 禽蜂 窝织 炎 、 头综 合 肿 征、 腹膜 炎 、 卵管炎 、 膜炎 、 输 滑 全眼球 炎和 脐炎 。随 着集 约 化 养鸡场 的增 多和 养殖规 模 的不断 扩大 ．鸡 的细菌 性疾病 越 来越复 杂 ，特别是 由致病 性大 肠杆 菌 引起 的鸡 大肠 杆 菌 病 已成为 养鸡场 的 常见多 发病 ．常引起 较 高的 发病 率和死 亡率。 大肠 杆菌 病在 哺乳动 物 中主要 引起肠 道疾 病 ， 而在禽 类中， 当宿主 防御能 力下 降时 ， 引起继 发性 局部 或全 身性 常 感染 ， 肠杆 菌病 的发生 给养 禽业造 成 了巨大 的经济 损失 。 大
畜 牧与 饲 料 科 学
Ａ ｉ ａ ｓ ａ ｄｙ ａ ｄ Ｆ ｅ ｃｅ ｃ ｎｍ ｌ Ｈｕ ｂｎ ｒ ｎ ｅ ｄ Ｓ ｉｎ ｅ
２ １ ３ （ ）１６ ０ ０， １ ９ ：４
几种药物对鸡大肠杆菌病的治疗效果
梁 菲 菲
（ 河北 省 衡水 学 院生 命科 学 系 ， 北 河 衡水 ０ ３０ ） ５ ０ ０
速杆克 （ 旋氧 氟沙 星 内含 头孢 类 ） 阿莫西 林 ， 左 、 上述 药 品均 由河北 华强 动物 药业公 司 、 保定 科恒 动物 药业公 司提 供 。与 分 析
肠 杆菌 病 时可 服用 抗菌 药物 治疗 ，但 由于鸡 大肠 杆 菌病 的 病 原菌 是条 件 致病 性大 肠杆 菌 ，而 不 同条件 激 发 的大肠 杆 菌病对 同一 种抗 菌 药物 的敏 感度 不 同 ，且 同一鸡 群 用 同一 种 抗菌 药物 的次数 越多 ， 其产 生 的耐药 性 就越 强 。因此 ， 当 发 现鸡 群有 大肠 杆 菌病 症时 ， 及 时送 检 ， 应 并进 行 细 菌 的分
猪场常用十大类药物用药介绍
一、《青霉素类药物》1、常用的品种：青霉素、氨苄青霉素（氨苄西林）、青霉素Ⅴ、氯唑青霉素、阿莫西林。
2、药物的适应症：对葡萄球菌、链球菌病部分种类较好（氯唑青霉素、苯唑青霉素）。
对大肠杆菌、鸡白痢、绿脓杆菌病效果比庆大霉素和卡那霉素差。
青霉素Ⅴ耐鸡胃中的酸性，与抗球虫药物配合使用，防治球虫发病后继发细菌病。
3、目前使用的效果抗金黄色葡萄球菌效果：氯唑青霉素＞苯唑青霉素＞阿莫西林＞青霉素；抗大肠杆菌、绿脓杆菌效果：羧苄青霉素＞阿莫西林＞青霉素。
4、使用剂量：阿莫西林预防量为100kg水加水5g，治疗量为100kg 水加10g；阿莫西林+棒酸治疗量为100kg水加3-5g，连续使用4-5天。
氨苄西林预防量为1000kg水加100g，治疗量为150g。
5、药物的配伍阿莫西林可以与硫酸链霉素、庆大霉素、氯霉素及其它半合成青霉素搭配。
阿莫西林配合棒酸，可以使抗菌活性提高1000倍，配方比例为4：1。
阿莫西林配合磺胺增效剂（TMP），常用的比例为5：1，增强治疗大肠杆菌的疗效。
阿莫西林配合盐酸环丙沙星，增强抗大肠杆菌的效果。
此外，还有氨苄西林与盐酸环丙沙星（比例为3：1）、氨苄西林配合硫酸链霉素（比例为1：3）。
6、不能配合使用的药物⑴青霉素与四环素类抗生素配合使用，能使青霉素的作用减弱。
⑵青霉素与氯霉素配合使用，能使青霉素的作用减弱。
由于青霉素药物处于最强的对数期时，氯霉素则受到抑制，从而使青霉素作用减弱。
⑶青霉素不与土霉素、红霉素、万古霉素、卡那霉素、多粘菌素、放线菌素D、庆大霉素配合使用。
⑷青霉素不要与小苏打、维生素C、磺胺类钠盐、阿托品混合使用。
主要是因为酸、碱、氧化剂、重金属盐可以失效。
7、本类药物的残留时间：青霉素、氨苄青霉素2天，阿莫西林5天。
二、《头孢菌素类药物》1、常用的品种第一代头孢：头孢拉定、头孢唑啉（仅供注射）、头孢氨苄、头孢噻吩、头孢羟氨苄等。
第二代头孢：头孢孟多、头孢呋辛、头孢替安等。
五种抗生素联合应用对大肠杆菌抗菌效果实验
五种抗生素联合应用对大肠杆菌抗菌效果实验杜冬冬;王涛;常维山【摘要】研究亚胺培南与头孢曲松钠、亚胺培南与头孢噻肟钠、丁胺卡那与痢菌净在体外联合应用对于大肠杆菌ATCC25922的抗菌效果。
测定各种药物对于大肠杆菌ATCC25922的最小抑菌浓度，应用棋盘微量稀释法测定亚胺培南与头孢曲松钠、亚胺培南与头孢噻肟钠、丁胺卡那与痢菌净对大肠杆菌ATCC25922的抑菌效果。
结果显示，亚胺培南与头孢曲松钠、亚胺培南与头孢噻肟钠、丁胺卡那与痢菌净联合应用对大肠杆菌ATCC25922呈现协同作用。
亚胺培南与头孢曲松钠、亚胺培南与头孢噻肟钠、丁胺卡那与痢菌净的联合应用大大减少了药物用量，提高了药物效果，为临床用药提供理论支持。
%The combined antibacterial effects of imipenem and ceftriaxone sodium, imipenem and cefotaxime sodium, amikacin and mequindox on Escherichia coli ATCC25922 in vitro were studied. Firstly the minimal inhibitory concentration of these medicines against Escherichia coli ATCC25922 was determined. The antibacterial effects of imipenem and ceftriaxone sodium, imipenem and eefotaxime sodium, amikaein and mequindox were determined by chessboard micro - dilution method. The results showed that the combined application of imipenem and ceftriaxone sodium, imipenem and cefotaxime sodium, amikaein and mequindox on Escherichia coliATCC25922 had synergistic effect. The combined application of imipenem and ceftriaxone sodium, imipenem and eefotaxime sodium, amikacin and mequindox reduced dosage of the drugs and improved curative effect, the study provided theoretical support for clinical medication.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2012(046)006【总页数】3页(P14-16)【关键词】大肠杆菌;联合用药;棋盘微量稀释法;耐药性【作者】杜冬冬;王涛;常维山【作者单位】山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018【正文语种】中文【中图分类】S852.61药物滥用导致大肠杆菌等细菌的耐药性是影响畜牧业健康发展的主要原因，如何减少细菌耐药性，已经成为人们越来越关心的话题。
药敏试验结果分析
6种抗生素类药物对大肠杆菌的体外抑菌试验xxx（山东农业大学）摘要:研究6种抗生素药物对大肠杆菌体外抑菌的作用。
通过在琼脂平皿上贴药敏片，测量抑菌圈的直径来确定抑菌作用。
结果表明大肠杆菌对青霉素、头孢他啶表现中度敏感，其他表现为高度敏感关键词:抗生素；大肠杆菌；抑菌文献综述：大肠杆菌是肠杆菌科埃希菌属中具有代表性的菌种，主要寄居在人和动物肠道中，其特性为革兰氏阴性，对营养要求不高，在普通培养基上就能很好的生长，并广泛分布于水、土壤或腐败物中。
禽大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌引起的多种病的总称，包括大肠杆菌性肉芽肿、腹膜炎、输卵管炎、脐炎、滑膜炎、气囊炎、眼炎、卵黄性腹膜炎等疾病，对养禽业危害严重。
大肠杆菌病的发生，常与许多不利的外界条件密切相关。
发生时具备如下特点：发病率高，死亡率高，复发率高；各日龄均易感染，症状典型；混合感染严重；传播途径较多：呼吸道、消化道（包括滥用药物引起的肠道菌群失调）、垂直传播；治疗困难。
多年来，随着抗生素的大量应用致使大肠杆菌病的耐药菌株越来越多，耐药谱也越来越广。
本实验通过6种临床常用抗生素对大肠杆菌的药敏试验，检测临床常用的六种抗生素对大肠杆菌的敏感性以便准确有效的利用药物进行治疗。
1 药敏实验简介抗菌药物敏感性试验（AST，简称药敏试验）：用于测试抗菌药物在体外对病原微生物有无抑制作用。
常用最低抑菌浓度（MIC）表示，即体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度。
通常根据MIC结合常用剂量时体内该药所能达到的血药浓度，划定细菌对各种抗生素敏感或耐药的界限，给出S（敏感）、I（中介）、R（耐药）等定性的结果来分别表示实验菌对抗菌药物的敏感性。
高度敏感（s ）表示用某种药物治疗某种细菌引起的感染常用剂量就有效，或者说常规剂量达到的平均血药浓度超过该药对细菌的MIC 的5 倍以上；中度敏感（I ）表示用某种药物治疗某种细菌引起的感染仅在高剂量时才有效，或者说常规剂量达到的血药浓度相当于或略高于对细菌的MIC ; 耐药（R ）表示药物对某一细菌的MIC（最低抑菌浓度）高于治疗量的药物在血液或体液内可能达到的浓度，或细菌能产生灭活抗菌药的酶，无论其MIC 值大小都要判定为耐药。
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几种药物对大肠杆菌的敏感性测定
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几种药物对大肠杆菌的敏感性测定摘要：大肠杆菌的抗原性复杂，毒力因子多种多样，不同血清型、不同毒力因子菌株的宿主范围和致病性大不相同，可在不同的动物或在同种不同年龄的动物中引起多种多样的疾病。
通过采用不同的抗菌药物对鸡大肠杆菌病进行治疗，结果表明，该菌对头孢噻肟、庆大霉素、阿米卡星、氧氟沙星和卡那霉素敏感。
【实验目的】
通过检测抑菌圈大小测定大肠杆菌对氟苯尼考、头孢噻呋呐、硫酸新霉素可溶粉、氧氟沙星和卡那霉素几种药物的敏感程度。
【实验原理】
纸片法药敏试验是将抗菌药物吸收到特定的纸片中，然后置于已接种待测定菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏感细菌的生长，从而出现抑菌环（带）。
由于药物扩散的距离越远，达到该距离的药物浓度越低，故可以根据抑菌环的大小，判断细菌对药物的敏感度。
通过药物敏感试验，我们可以找出针对于某些致病菌的敏感药物，从而对临床中的细菌性疾病的治疗提供指导。
【实验材料】
1、药品及细菌——氟苯尼考、头孢噻呋呐、硫酸新霉素（杆菌净）、氧氟沙星和卡那霉素等抗菌药物，生理盐水，磷酸盐缓冲溶液，MH营养肉汤，MH培养基，麦康凯培养基，蒸馏水，大肠杆菌
2、器材——纸片，试管，移液器，酒精灯，高压蒸汽锅，无菌
操作台，镊子，剪刀，锥形瓶，烘箱，培养箱，天平，玻璃棒，干净毛巾（报纸），炭笔，接种环，小广口瓶
【实验方法及内容】
1．药敏纸片的制作
1.1制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。
取圆纸片50片放入清洁干燥的小广口瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。
经15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。
1.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的小广口瓶内加入药液0.25毫升（因不好取材，故扩大十倍配药。
），并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。
同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。
切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
2．药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。
此稀释液即为用于做药敏试验的药液。
3.培养基的制备
3.1普通肉汤的制备
蛋白胨2g 杭州微生物试剂有限公司
牛肉膏0.6g 成都长寿生物利剂有限公司
Nacl 1g 成都市科龙化工试剂厂
水200ml
PH 7.4
按上述要求称取各种成分于三角瓶中，混合均匀，用NaOH调PH至7.4，调好PH后其瓶口用报纸封好，至于高压蒸汽灭菌中灭菌30min。
待冷却后，倒于无菌平板中。
冷凝后放置在无菌操作台上备用。
3.2普通琼脂平板的制备
水解酪蛋白琼脂（M-H琼脂）杭州微生物试剂有限公司用法称取本品36g于1000ml蒸馏水中，加热溶解，经121℃15min高压灭菌，待冷至50℃左右，倾注无菌平板。
此次实验只需要配置200ml,称取水解酪蛋白琼脂7.2g于三角瓶中，往三角瓶中加入200ml蒸馏水即可。
放入高压蒸汽灭菌锅里灭菌30min。
待冷却50℃左右，倾注无菌平板。
4．细菌的转种、纯化、活化培养
（1）在麦康凯培养基上用无菌接种环接种大肠杆菌
（2）用无菌接种环将细菌接种到MH培养基中（6个），保证细菌均匀的涂布在培养基中。
注意无菌操作。
（3）将培养基置于37℃的恒温箱中培养24h。
4.药敏片法操作方法
4.1在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。
具体方式；
用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。
然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。
（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。
要求涂布均匀致密）
4.2将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。
为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。
为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴四片），每种药敏片的名称要记住。
4.3将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
附：
1.结果判断依据
2. 所用药品：
A 杆菌净泰硫酸新霉素可溶粉
主要成分：硫酸新霉素
生产商：四川莱邦药业有限公司
用法及用量：200g兑水600kg
B 头孢噻呋钠批号061202 生产商：浙江海正药业浓度：
89.6%
C 卡那霉素用法及用量：禽类10g可混饮水500-1500kg
D 氧氟沙星可溶粉
生产商：广东大华农动物保健品有限公司动物保健厂
用法及用量：禽类每1L水混饮2.5g，每日2次，连用3-5日
E 氟苯尼考可溶粉
生产商：广东养宝生物制药有限公司
用法及用量：鸡每1L水混饮100mg
3.【注意事项】
3.1培养基：应根据试验菌的营养需要进行配制。
倾注平板时，厚度合适（约5-6mm），不可太薄，一般90mm直径的培养皿，倾注培养基18-20ml为宜。
培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺药和TMP的活性。
3.2细菌接种量：细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性。
3.3药物浓度：药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制。
商品药应严格按照其推荐治疗量配制。
3.4培养时间：一般培养温度和时间为37℃8-18小时，有些抗
菌药扩散慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4℃冰箱内2~4小时，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养，可以推迟细菌的生长。
【实验进度】
6.23 上午：称量和制备药液，药敏片打孔、装瓶、灭
菌、干燥，称量制备肉汤、普通、麦康凯、MH培养基并灭
菌，实验用品和器具的灭菌处理。
下午：将药液加入已干燥的药敏小瓶，制备药敏片。
倒平板、接种细菌进行复活扩大培养。
6.24 倒MH平板、准备大肠杆菌的纯化培养。
6.25 上午：大肠杆菌接种到MH培养基中，贴药敏片。
晚上：观察药敏片抑菌情况，测量并记录抑菌圈大小。
【实验结果】
0.005.00
10.00
15.00
20.00
25.00
30.00
35.00
40.00
123456
平均值。