人教版高中生物选修一专题5课题3《血红蛋白的提取和分离》课件

1.发挥学生主观能动性。 2.激发学生学习兴趣，培养学会僧 创新能力。
教学重难点
课题重点
凝胶色谱法的原理和方法。
课题难点
凝胶色谱法的原理和方法。
内容解析
基础知识：
凝胶色谱法
什么是凝胶？
凝胶是一些多糖类构成的
内含许多贯穿的通道的微小多 孔的球体。
凝胶色谱法的原理
相对分子量
较小的蛋白质容 易进入凝胶内部 的通道，在凝胶 的外部移动，路 程较长，移动速 度较慢。
相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入 凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的 路程较短，移动速度较快；
相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易 进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速 度较慢。
因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质 先流出，相对分子质量中等的分子后流出，相 对分子质量最小的分子最后流出，这种现象又 叫分子筛现象。
在电场的作用下，这些带电分子会向着与其 所带电荷相反的电极方向移动。电泳技术就是在 电场的作用下，利用待分离样品中各种分子带电 性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使 带电分子产生不同的迁移速度，从而达到对样品 进行分离、鉴定或提纯的目的。
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携氧的血是鲜红色的，当你被 划伤时，你看到的是鲜红的携氧血 。 不携氧的血是深紫色的，当你 献血时，血被抽到没有氧气的试管里 ，你看到的血是深紫色的。
缓冲溶液：
在一定的范围内，能够抵制外加少 量强酸或强碱，使原来溶液PH值 基本保持不变的混合溶液。
电泳： 带电粒子在电场作用下发生迁移 的过程。
常用的电泳方法： 1.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.琼脂糖凝胶电泳
选和 应用越来越深入，首先要做的一步是（ Ｄ） A. 弄清各种蛋白质的空间结构 B. 弄清各种蛋白质的功能 C. 弄清各种蛋白质的合成过程 D. 获得高纯度的蛋白质
此外，凝胶本身具有三维网状结构，相对分 子质量大的分子通过这种网状结构，相对分子质 量大的分子通过这种网状结构上的空隙时阻力大 ，而相对分子质量小的分子通过时阻力小，因此 不同分子量的蛋白质分子可以获得分离。
2.什么是缓冲溶液？它的作用是什么？
答： 在一定范围内，能对抗外来少量强酸 、强碱或稍加稀释不引起溶液pH发生明显变化的 作用叫缓冲作用。
教学目标
知识目标
1.了解色谱法、电泳法等分离生物大分 子的基本原理。
2.掌握蛋白质提取的基本概念。
能力目标
1.学习对血液中蛋白质提取和分离的 方法。
2.掌握从复杂提取中提取生物大分子 的基本过程和方法。
过程与方法
本实验采取实验与课本相结合的方 法，在实验中掌握分离大分子物质的基 本方法。
情感态度与价值观
具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。缓冲 溶液通常是由一或两种化合物（缓冲剂）溶解 于水中制得的，调节缓冲剂的配比就可制得不 同pH范围的缓冲液。
人教版高中生物选修一 专题5课题3《血红蛋白
的提取和分离》课件
2020/9/19
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艾滋病研究进展 英国《自然》杂志登论文说，“ＴＲＩＭ ５”蛋白质可有效抑制艾滋病病毒的感染。 此后，世界各地的很多科学家开始研究“ ＴＲＩＭ５”蛋白质的结构，但到目前为止尚 未有人宣称取得突破性进展。
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课堂小结
凝胶色谱法： 根据被分离的蛋白质相对分子 质量的大小，利用具有网状结 构的凝胶的分子筛作用，来进 行分离的方法。
2. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白 质的叙述，正确的是（ A ）
A. 相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分 子质量较大的蛋白质
B. 相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分 子质量较大的蛋白质
C. 相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分 子质量较大的蛋白质
D. 二者根本无法比较
简答题
教材习题答案
1.凝胶色谱法分离蛋白质的原理是怎样的？
答：凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是 根据分子量的大小分离蛋白质的方法之一。
所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体 ，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成， 小球体内部有许多贯穿的通道，当一个含有各 种分子的样品溶液缓慢流经时，各分子在色谱 柱内进行两种不同的运动，即垂直向下的运动 和无规则的扩散运动。
1.人们用鸡的红细胞提取DNA，用人(猪、牛 、羊）的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？
答： 鸡的红细胞具有细胞核，含有DNA， 便于进行DNA的提取，人的红细胞无细胞核，结 构简单，血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。
2. 蛋白质的分离和提取的原理是什么？
答： 根据蛋白质各种特性的差异，如 分子的形状和大小、所带电荷的性质和多 少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的 亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。
调节缓冲剂的使用比例 就可以制得在不同PH范围内 使用的缓冲液。
利用缓冲液模拟细胞内 的PH环境，保证血红蛋白的 正常结构和功能，便于观察 和科学研究。
电泳
概念 带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。
分类
琼脂糖凝胶电泳 聚丙稀酰胺凝胶电泳
电泳的原理
许多重要的生物大分子，如氨基酸、多肽、 蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可解离基团，它 们在某个特定的pH下会带上正电或负电；
提问
研究“TRIM5”蛋白质的第一步是什么？
回答
分离和提纯TRIM5蛋白质。
如何分离和提纯蛋白质？
根据蛋白质各种特性的差异，如分子 的形状和大小、所带电荷的性质和多少、 溶解度、吸附的性质、对其他分子的亲和 力等等，可以用来分离不同蛋白质。
专题五 DNA和蛋白质技术
课题3 血红蛋白的提取和分离
相对分子量较
大的蛋白质无法 进入凝胶内部的 通道，只能在凝 胶外部移动，路 程较短，移动速 度较快。
缓冲溶液
概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸 、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变 化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液 叫做缓冲溶液。
缓冲溶液的配制
缓冲溶液通常由1~2种 缓冲剂溶解于水中配制而成 。