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生理性生化实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应原理；2. 掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法；3. 了解生理生化反应在鉴别细菌中的意义。
二、实验原理通过测定微生物校内某些酶类的有无、对某些糖的利用能力、代谢产物的类型等来研究微生物的多样性。
某些细菌产生色氨酸酶，能分解培养基蛋白胨中的色氨酸，产生吲哚，吲哚与对二甲基氨基苯甲醛发生反应，形成红色的玫瑰吲哚，为吲哚反应阳性。
微生物发酵葡萄糖成丙酮酸，2分子丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。
乙酰甲基甲醇在碱性条件下与肌酸类物质反应，生成红色物质，为甲基红反应阳性。
三、实验方法1. 吲哚试验：将细菌接种于含有色氨酸的培养基中，加入吲哚试剂，观察颜色变化。
2. 甲基红试验：将细菌接种于含有葡萄糖的培养基中，加入甲基红试剂，观察颜色变化。
四、实验结果1. 吲哚试验：接种了大肠杆菌的试管在加入乙醚和吲哚试剂后，能在乙醚和液体培养基的交界面上产生红色环状物质，大肠杆菌的吲哚试验显阳性。
2. 甲基红试验：大肠杆菌甲基红试验阳性，即大肠杆菌在培养期仍维持酸性pH。
五、实验分析1. 吲哚试验失败原因分析：可能是因为乙醚加量太少，影响实验现象的观察；另一个可能的原因是大肠杆菌菌种有问题。
2. 甲基红试验结果分析：大肠杆菌在培养后仍能维持酸性，而产气杆菌则转化为非酸性末端产物。
六、实验结论1. 通过本实验，我们了解了细菌生理生化反应原理；2. 掌握了细菌鉴定中常见的生理生化反应方法；3. 认识到生理生化反应在鉴别细菌中的意义。
七、实验注意事项1. 实验过程中要严格按照操作规程进行，避免污染；2. 注意观察实验现象，记录实验数据；3. 分析实验结果，找出实验失败的原因。
第2篇一、实验目的1. 了解生理性生化实验的基本原理和方法。
2. 掌握常用的生理性生化指标及其检测方法。
3. 通过实验，学会使用生理性生化检测仪器，提高实验技能。
二、实验原理生理性生化实验是研究生物体内各种生化反应及其代谢过程的重要手段。
细菌的生理生化反应实验报告
细菌的生理生化反应实验报告【实验目的】了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。
了解生理生化反应在鉴别细菌中的意义。
【实验原理】通过测定微生物校内某些酶类的有无、对某些第五的利用能力、代谢产物的类型等来研究微生物带血的多样性。
某些细菌产生色氨酸酶，能分解培养基蛋白胨中的色氨酸，产生吲哚，吲哚与对二甲基氨基苯甲醛发生反应，形成红色的玫瑰吲哚，为吲哚反应阳性。
微生物发酵葡萄糖成丙酮酸，2分子丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。
乙酰甲基甲醇在碱性条件下与肌酸类物质反应，生成红色化合物为.反应阳性。
有些细菌发酵糖类产生有机酸较多，使发酵液的pH下降到以下，当加入甲基红试剂后，时发酵液变红色，为甲基红反应阳性。
某种微生物能以某种糖类为碳源，产酸产气，则判断为发酵这种糖。
【实验材料和用具】1.菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌。
2.培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂3.仪器：酒精灯、接种环、超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液枪、滴管、杜氏小管。
【实验方法】（一）V-P反应1.试管标记取5只装有葡萄糖蛋白胨水培养基的试管，分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。
2.接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至上述相应试管的培养基中。
空白对照不接种。
置37度恒温培养箱中培养24-48h。
3.观察记录去除以上培养物，分别取出2ml培养液加入另外5支相应编号的空试管中，加入与培养液等量的V-P试剂，充分震荡2min。
放置37度恒温培养箱中培养30min观察记录结果。
（二）甲基红实验于V-P实验留下的培养液中，分别加入2-3滴甲基红指示剂，立即观察培养液的颜色变化（三）吲哚实验1.试管标记取5只装有蛋白胨水培养基的试管，分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。
生理生化实验报告
微生物实验报告微生物的生理生化实验侯汶青201300140031 组别：周四下午五组同组者：李璇、李倩茜实验完成时间：2014年12月6号一、实验目的1、证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2、掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。
3、了解糖发酵的原理，掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
4、了解吲哚和甲基红试验的原理以及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。
5、熟习生理生化反应培养基的配制原理和一般方法步骤。
6、巩固无菌实验操作。
二、实验器材1、菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌（大分子水解实验）；大肠杆菌、变形杆菌（糖发酵实验）；大肠杆菌、产气杆菌（吲哚实验）；大肠杆菌、产气杆菌（甲基红实验）；2、培养基：（1）固体淀粉培养基，固体油脂培养基（淀粉和油脂的大分子水解实验）；（2）葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基试管每组共5支，而且内装有倒置的德汉氏小管（糖发酵实验）；（3）蛋白胨水培养基（吲哚实验）（4）葡萄糖蛋白胨水培养基（甲基红实验）3、溶液和试剂：卢戈氏碘液，乙醚，吲哚试剂，甲基红试剂，蒸馏水，去离子水、氢氧化钠溶液、中性红试剂、溴甲酚紫乙醇溶液等4、仪器或其他用具：成套培养皿，试管，玻璃棒、酒精灯，烧杯，德汉氏小管，接种环、吸管、滴管、洗耳球、无菌操作台、量筒、试管架等三、实验原理1、微生物的生理生化反应原理：在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢。
代谢过程主要是酶促反应过程。
许多细菌产生胞外酶，这些酶从细胞中释放出来，以催化细胞外的化学反应。
各种细菌由于具有不同的酶系统，致使它们能利用不同的底物，或虽然可以利用相同的底物，却产生不同的代谢产物，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别细菌。
微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，因此使得微生物在自然界的物质循环中起着重要的作用，同时也为人类开发利用微生物资源提供更多的机会与途径。
实验八微生物生理生化试验
伏－普试验用于测定某些细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产 物的能力,如丙酮酸,丙酮酸进行缩合、脱羧生成乙酰甲基甲醇,此化合 物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的 精氨酸的呱基作用,生成红色化合物,即伏－普试验阳性,不产生红色化 合物为反应阴性,
实验八 微生物生理生化试验
一 实验器材 1 菌种 大肠杆菌,普通变形杆菌,金黄色葡萄球菌,产气肠杆菌 2 培养基 尿素琼脂试管,蛋白胨水培养基,葡萄糖蛋白胨水培养基,葡萄糖发酵管 和乳糖发酵管各3支, 3 溶液和试剂 甲基红指示剂,5％萘酚,乙醚和吲哚试剂 4 仪器和其他用品 接种针
二 目的要求 1 大分子物质水解试验
三 糖发酵试验 1 在发酵管上标明所接种的细菌名称, 2 取葡萄糖发酵管3支,分别接入大肠杆菌、普通变形杆菌,第三支不接 种,作为对照,另取乳糖发酵管3支,同样操作, 3 将接种和对照的发酵管置37 ℃培养24－48h, 4 观察发酵管的颜色和有无气泡,
各试验需接种的菌种:
1 明胶水解试验：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 20 ℃ 2－5 d
3 尿素试验 1 取2支尿素培养基试管,用记号笔表面各管欲接种的菌名, 2 分别接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌 两种细菌对尿素的分解速
度不同 ,需要观察2次, 3 将接种后的试管置35 ℃培养24－48h, 4 观察培养基颜色变化, 尿素酶存在时为红色,无尿素酶时为黄色,
二 IMViC试验
1 接种与培养 1 用接种针将大肠杆菌和产气肠杆菌分别穿刺接入2支醋酸铅培养基中
温15－30 min,红色为阳性,大肠杆菌阴性,产气肠杆菌阳性
思考题
1. 为什么尿素实验可用于鉴定变性杆菌属 细菌
生化反应鉴定实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解生化反应在微生物鉴定中的重要性。
2. 掌握常见生化反应的原理和方法。
3. 通过实验，对给定的微生物进行鉴定。
二、实验原理生化反应是指微生物在生长过程中，通过酶的催化作用，将营养物质转化为自身所需的物质，同时产生一些代谢产物。
这些代谢产物可以用来鉴定微生物的种类。
常见的生化反应包括糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验等。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。
- 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂等。
- 试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水等。
- 仪器：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管等。
2. 仪器：- 酒精灯- 接种环- 超净工作台- 恒温培养箱- 高压灭菌锅- 试管- 移液枪- 滴管四、实验方法1. 菌种培养：将菌种接种于葡萄糖蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
2. 糖发酵试验：- 将培养好的菌种接种于糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖），置于恒温培养箱中培养24小时。
- 观察培养基颜色变化，记录发酵结果。
3. 吲哚试验：- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
- 加入吲哚试剂，观察颜色变化，记录结果。
4. 甲基红试验：- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
- 加入甲基红试剂，观察颜色变化，记录结果。
五、实验结果与分析1. 糖发酵试验：- 大肠杆菌：发酵葡萄糖、乳糖，不发酵蔗糖。
- 金黄色葡萄球菌：不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
- 枯草芽孢杆菌：不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
- 变形杆菌：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
2. 吲哚试验：- 大肠杆菌：吲哚试验阳性。
- 金黄色葡萄球菌：吲哚试验阴性。
- 枯草芽孢杆菌：吲哚试验阴性。
- 变形杆菌：吲哚试验阳性。
细菌生化实验报告
一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应的基本原理和实验方法。
2. 掌握常见细菌生理生化反应的检测方法，如糖发酵、吲哚产生、甲基红反应等。
3. 学会通过生理生化反应对细菌进行初步鉴定。
二、实验原理细菌生理生化反应是指细菌在生长繁殖过程中，利用酶催化底物发生的一系列化学反应。
通过检测细菌对特定底物的利用能力、酶的产生以及代谢产物的生成，可以判断细菌的种类和特性。
三、实验材料1. 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。
2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、吲哚试剂、甲基红试剂等。
3. 仪器：酒精灯、接种环、培养皿、试管、试管架、滴管等。
四、实验方法1. 糖发酵实验：将待测菌接种于糖发酵培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
观察菌落周围是否出现透明圈，判断细菌是否能发酵该糖。
2. 吲哚产生实验：将待测菌接种于蛋白胨水培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
取培养液滴加吲哚试剂，观察是否产生红色沉淀，判断细菌是否能产生吲哚。
3. 甲基红反应实验：将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
取培养液滴加甲基红试剂，观察颜色变化，判断细菌是否能产生有机酸。
五、实验结果与分析1. 糖发酵实验结果：- 大肠杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 金黄色葡萄球菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 枯草芽孢杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 变形杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阳性。
2. 吲哚产生实验结果：- 大肠杆菌：吲哚产生阴性。
- 金黄色葡萄球菌：吲哚产生阳性。
- 枯草芽孢杆菌：吲哚产生阴性。
- 变形杆菌：吲哚产生阳性。
3. 甲基红反应实验结果：- 大肠杆菌：甲基红反应阴性。
- 金黄色葡萄球菌：甲基红反应阴性。
- 枯草芽孢杆菌：甲基红反应阳性。
- 变形杆菌：甲基红反应阳性。
根据实验结果，我们可以初步判断：- 大肠杆菌为革兰氏阴性菌，发酵葡萄糖，不产生吲哚和有机酸。
实验六微生物的生理生化反应(精)
实验六微生物的生理生化反应一、实验目的：掌握细菌鉴定中常规生理生化反应的原理与方法。
二、实验原理：由于各种细菌具有不同的酶系统，所以代谢时利用的底物不同，或利用相同的底物而代谢产物不同，因此可利用不同的生理生化反应来鉴别不同的细菌。
常规的鉴别肠杆菌科细菌的生理生化反应有：1、大分子物质水解试验，包括淀粉水解试验和明胶水解试验。
如果细菌能利用淀粉大分子作为碳源，则淀粉被水解后菌落周围遇碘呈蓝色，不能水解淀粉时加入碘菌落周围有透明圈。
明胶如果能被细菌分解作为碳源，培养后明胶溶解，否则不溶。
2、糖发酵试验。
有的细菌发酵分解某些糖产酸产气，有的分解糖只产酸不产气，故可利用分解糖的能力来鉴别细菌。
如果细菌糖酵解产酸，加入溴甲酚紫指示剂培养液PH降低颜色由紫变黄，如果产气，德汉氏小管闭口端产生气泡。
3、吲哚、甲基红、伏-普、柠檬酸盐试验，主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌，吲哚试验由于实验室原料中蛋白胨色氨酸含量太低不做。
1) 甲基红试验（MR）：由于不同细菌糖酵解产生丙酮酸后分解产物不同，有些细菌可将其分解为甲酸、乙酸、乳酸等多种有机酸，加入甲基红指示剂后PH降至4左右而使培养液成红色。
2) 伏-普试验（VP）：即检测细菌代谢是否经过2，3-丁二醇途径，该途径为：丙酮酸——乙酰乳酸——乙酰甲基甲醇——2，3-丁二醇，代谢中间产物乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰培养基中含胍基物质反应成红色复合物。
1) 柠檬酸盐试验，有些细菌以柠檬酸盐作为唯一碳源生成碳酸盐，培养基PH升高成碱性，加入溴麝香草酚蓝指示剂后培养基由绿；变为蓝色。
三、实验用品（1）菌种：枯草杆菌1、大肠杆菌5，产气杆菌7。
（2）培养基：糖发酵培养基（乳糖）、淀粉培养基平板、明胶培养基试管、葡萄糖蛋白胨水培养基、柠檬酸盐培养基斜面。
（3）试剂:甲基红试剂、4%KOH、5%荼酚、碘液等。
（4）其他：恒温箱、接种针、酒精灯、标号笔等。
四、实验步骤：1、淀粉水解试验制淀粉固体培养基——倒平板——分区标记（菌种代号、组别、日期，下同）——接种——培养2天——观察（加碘液观察有无透明圈）。
微生物生理生化实验报告
实验十一IMViC与硫化氢试验指导教师：李海花周六第三组学号：060122010041 姓名：宋天佳专业：2010级水产养殖学号：030212010025 姓名：皇昊专业：2010级化学1班学号：060122010055 姓名：续鹏辉专业：2010级水产养殖一、实验目的了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。
二、实验原理IMViC是I－吲哚（indol test）、M－甲基红（methyl red test）、V－伏-普（Voges-Prolauer test）和C－柠檬酸盐（citrate test）4个实验的缩写。
这4个实验主要用来快速鉴别产气杆菌与大肠杆菌，多用于水的细菌检查。
大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水时若超过一定指标，则表示水质受粪便污染。
产气杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水是要将两者分开。
硫化氢（H2S）实验也是检查肠道细菌的生化实验。
（一）吲哚试验（indol test）吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生，有些细菌分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色。
色氨酸＋H2O色氨酸酶吲哚＋NH3＋丙酮酸吲哚+ 对二甲基氨基苯甲醛玫瑰吲哚（红色）只有部分细菌能产生色氨酸酶，从而具有分解色氨酸产生吲哚的能力，因此吲哚实验可以作为一个生化检测指标。
大肠杆菌产色氨酸酶实验结果为阳性（红色），产气肠杆菌不产色氨酸酶实验结果为阴性（无色）。
（二）M-甲基红试验（methyl red test）用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。
细菌代谢糖产生酸使培养基变酸（pH下降），使甲基红指示剂变色：橘黄色（pH6.3）红色（pH4.2）尽管，所有肠道微生物都能发酵葡萄糖产生有机酸，但大肠杆菌和产气肠杆菌有区别：两者在培养早期产生有机酸，但大肠杆菌在培养后仍能维持酸性pH4，而产气肠杆菌则将有机酸转化为非酸性产物，使pH上升至6左右。
微生物生理生化反应实验报告
微生物的生理生化反应一、实验目的1.掌握细菌鉴定中常用生理生化反应的测定方法。
2.了解细菌代谢类型的多样性。
3.了解细菌生长现象及代谢产物在鉴别中的意义。
4.学习接种技术。
二、实验原理在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程，由于各种微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌。
1.糖发酵试验：糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸,醋酸,丙酸等)和气体(如氢气,甲烷,二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气.例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气。
产酸后再加入溴甲酚紫指示剂后会使溶液呈黄色，且杜氏小管中会收集到一部分气体。
若细菌不能使糖产酸产气，则最后溶液为指示剂的紫色，且杜氏小管中无气体。
2.甲基红试验（MR）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸，后者进而被分解产生甲酸，乙酸和乳酸等多种有机酸，培养基就会变酸，使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色，即甲基红反应。
大肠杆菌为阳性，产气肠杆菌为阴性。
3.伏-普试验（VP）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成非酸性或中性末端产物，某些细菌产生丙酮酸，再将丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇，在碱性条件下被氧化成二乙酰，二乙酰与胍基作用，生成红色化合物，为阳性。
4.靛基质（吲哚）试验：是用来检测吲哚的产生，在蛋白胨培养基中，若细菌能产生色氨酸酶，则可将蛋白胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚，吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。
但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力，所以吲哚实验可以作为一个生物化学检测的指标。
大肠杆菌吲哚反应阳性，产气肠杆菌为阴性。
5.硫化氢实验：某些细菌分解含硫的氨基酸，产生硫化氢，硫酸铵亚铁等铁盐可与硫化氢反应生成不溶性硫化亚铁之黑色沉淀，为硫化氢实验阳性。
细菌生化反应实验报告
一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应的基本原理。
2. 掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。
3. 熟悉生理生化反应在细菌鉴别中的实际应用。
二、实验原理细菌生理生化反应是指细菌在生长代谢过程中，通过酶催化作用，将底物转化为产物的化学反应。
这些反应能够反映细菌的代谢类型和生理特性，从而用于细菌的鉴定。
常见的细菌生理生化反应包括吲哚试验、甲基红试验、V-P试验、糖发酵试验等。
三、实验材料与仪器1. 菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌。
2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂。
3. 仪器：酒精灯、接种环、超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液枪、滴管。
四、实验步骤1. 接种：将菌种接种于相应的培养基中，37℃恒温培养箱中培养24小时。
2. 吲哚试验：取少量培养液，加入吲哚试剂，观察颜色变化。
3. 甲基红试验：取少量培养液，加入甲基红试剂，观察颜色变化。
4. V-P试验：取少量培养液，加入V-P试剂，观察颜色变化。
5. 糖发酵试验：将不同糖类培养基分别接种菌种，观察颜色变化。
五、实验结果与分析1. 吲哚试验：大肠杆菌和产气肠杆菌呈现阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌呈现阴性反应。
2. 甲基红试验：大肠杆菌和产气肠杆菌呈现阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌呈现阴性反应。
3. V-P试验：大肠杆菌和产气肠杆菌呈现阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌呈现阴性反应。
4. 糖发酵试验：大肠杆菌和产气肠杆菌对葡萄糖、乳糖和蔗糖均呈现阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌对葡萄糖和乳糖呈现阴性反应。
六、实验结论通过本次实验，我们掌握了细菌生理生化反应的基本原理和实验方法。
通过对吲哚试验、甲基红试验、V-P试验和糖发酵试验的结果分析，我们可以初步判断出大肠杆菌和产气肠杆菌为阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌为阴性反应。
这表明生理生化反应在细菌鉴别中具有重要的实际应用价值。
生物生化实验报告
一、实验目的1. 探究不同微生物对有机大分子物质的水解能力，分析其酶系统的差异。
2. 掌握微生物大分子物质水解试验的原理和方法。
3. 了解糖发酵的原理及其在肠道细菌鉴定中的重要作用。
4. 学习通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
5. 理解吲哚和甲基红试验的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。
二、实验原理微生物的生理生化反应是微生物生命活动的重要组成部分。
微生物通过酶促反应将有机大分子物质分解为小分子物质，以获取能量和营养。
不同微生物具有不同的酶系统，对底物的水解能力存在差异。
糖发酵试验和吲哚、甲基红试验是常用的微生物鉴定方法。
三、实验仪器与试剂菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌培养基：- 固体淀粉培养基- 固体油脂培养基- 葡萄糖发酵培养基- 乳糖发酵培养基- 蛋白胨水培养基- 葡萄糖蛋白胨水培养基试剂：- 卢戈氏碘液- 乙醚- 吲哚试剂- 甲基红试剂- 蒸馏水仪器：- 酒精灯- 接种针- 培养皿- 试管- 试管架- 烧杯- 量筒- 德汉氏小管四、实验方法1. 菌种接种：将待测菌种接种于相应的培养基上，置于适宜的条件下培养。
2. 糖发酵试验：将培养好的菌液接种于葡萄糖发酵培养基和乳糖发酵培养基中，观察培养基颜色变化。
3. 吲哚试验：将培养好的菌液加入吲哚试剂，观察颜色变化。
4. 甲基红试验：将培养好的菌液加入甲基红试剂，观察颜色变化。
五、实验结果与分析1. 糖发酵试验：- 枯草芽孢杆菌：葡萄糖发酵培养基变黄，乳糖发酵培养基不变色。
- 大肠杆菌：葡萄糖发酵培养基变黄，乳糖发酵培养基变红。
- 金黄色葡萄球菌：葡萄糖发酵培养基不变色，乳糖发酵培养基变红。
- 铜绿假单胞菌：葡萄糖发酵培养基不变色，乳糖发酵培养基变红。
- 普通变形杆菌：葡萄糖发酵培养基变黄，乳糖发酵培养基变红。
- 产气肠杆菌：葡萄糖发酵培养基变黄，乳糖发酵培养基变红。
2. 吲哚试验：- 枯草芽孢杆菌：呈阳性反应。
微生物生理生化实验报告
实验十一IMViC与硫化氢试验指导教师：李海花周六第三组学号：060122010041 姓名：宋天佳专业：2010级水产养殖学号：030212010025 姓名：皇昊专业：2010级化学1班学号：060122010055 姓名：续鹏辉专业：2010级水产养殖一、实验目的了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。
二、实验原理IMViC是I－吲哚（indol test）、M－甲基红（methyl red test）、V－伏-普（Voges-Prolauer test）和C－柠檬酸盐（citrate test）4个实验的缩写。
这4个实验主要用来快速鉴别产气杆菌与大肠杆菌，多用于水的细菌检查。
大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水时若超过一定指标，则表示水质受粪便污染。
产气杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水是要将两者分开。
硫化氢（H2S）实验也是检查肠道细菌的生化实验。
（一）吲哚试验（indol test）吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生，有些细菌分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色。
色氨酸＋H2O色氨酸酶吲哚＋NH3＋丙酮酸吲哚+ 对二甲基氨基苯甲醛玫瑰吲哚（红色）只有部分细菌能产生色氨酸酶，从而具有分解色氨酸产生吲哚的能力，因此吲哚实验可以作为一个生化检测指标。
大肠杆菌产色氨酸酶实验结果为阳性（红色），产气肠杆菌不产色氨酸酶实验结果为阴性（无色）。
（二）M-甲基红试验（methyl red test）用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。
细菌代谢糖产生酸使培养基变酸（pH下降），使甲基红指示剂变色：橘黄色（pH6.3）红色（pH4.2）尽管，所有肠道微生物都能发酵葡萄糖产生有机酸，但大肠杆菌和产气肠杆菌有区别：两者在培养早期产生有机酸，但大肠杆菌在培养后仍能维持酸性pH4，而产气肠杆菌则将有机酸转化为非酸性产物，使pH上升至6左右。
实验6-微生物的生理生化反应
实验六微生物的生理生化反应1、实验目的探究菌株在碳源同化、氮源利用、乙醇发酵和抗生素效价分析等方面不同的生长特性，观察并简要分析不同微生物的生理生化特征及其形成机理。
2、实验过程简述2.1 培养基与试剂准备2.1.1碳源同化培养基准备碳源为葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、棉籽糖、蜜二糖、纤维二糖、海藻糖、松三糖、可溶性淀粉、α-甲基葡萄糖苷的YNB 培养基，放入一根杜氏管。
2.1.2氮源同化培养基准备氮源为硫酸铵，尿素，蛋白胨，硝酸钾，无氮源YNB 的固体、液体培养基。
2.1.3 乙醇发酵用种子培养基：YPD 培养基2.1.4乙醇发酵用发酵培养基葡萄糖，酵母粉，蛋白胨，尿素，磷酸二氢钾，硫酸镁，氯化钙。
2.1.5抗生素效价测定用培养基：LB 培养基2.1.6青霉素：用pH 6.0 磷酸缓冲液配制，浓度为100 mg/ml，0.22μm 孔径过滤灭菌。
2.2 微生物的碳源同化和发酵1、从菌体斜面接一环菌于1 ml 无菌水中，室温静置2 h。
2、取200 μl 菌悬液，分别转接于含杜氏管的小试管中，静置培养48 h。
3、每24 h 观察记录生长和产气情况。
4、根据实验结果判断不同菌株对不同碳源的同化或发酵。
2.3 微生物的氮源利用1、从菌体斜面接一环菌于1 ml 无菌水中，室温静置2 h。
2、取200μl 菌悬液，分别转接于上述培养基小试管中，30℃或37℃静置培养48 h。
3、各取20μl 菌悬液，分别划线于不同氮源的固体平板上，待菌液被吸收后，培养皿倒置，静置培养48 h。
4、每24 h 观察记录生长情况，48 h 测定液体培养物的OD 600。
5、根据实验结果判断不同菌株对不同氮源的利用能力或偏好性。
2.4 酵母菌的乙醇发酵1、种子液培养：将酿酒酵母从菌种斜面上接一接种环至YPD 种子培养基中，30℃，200rpm，培养18 h。
2、乙醇发酵：按照10%（v/v）的比例将培养好的种子液接入100 ml 发酵培养基中，用无菌塑料布将封口密封，30℃，静置培养，每24 h 手摇1 次，发酵3-4 d。
实验八微生物生理生化实验
例一 1大格=16中格 =16 X 25小格 =400小格
（3）解释在细菌培养中吲哚试验的化学原理，为什么在这个试验 中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂，而不用丙酮酸？
酵母菌大小的测定和细胞计数
材料：酵母菌，血球计数板
内容： 细胞数量测定数板的分区与分格
* * # # * * # 例二 1大格=25中格 =25 X 16小格 =400小格 # #
2. 糖类发酵试验：（含碳化合物的分解利用）
（1）以液体接种的方式分别接种B.S和E.C于葡萄糖、蔗 糖、乳糖培养基中。 （2）接种后置于37℃恒温培养箱，培养2d。 （3）观察结果时，看各管颜色变化及杜氏小管有无气 泡。产酸产气用“⊕”表示；只产酸不产气用“+” 表示；不产酸也不产气用“—”表示。
糖 发 酵 试 验
3. 吲哚试验：（含氮化化合物的分解利用）
（1）以液体接种的方式分别接种枯草杆菌和大肠杆菌于蛋 白胨水培养基中。 （2）接种后置于37℃恒温培养箱，培养2d。 （3）观察结果时，在培养液中加入乙醚约1毫升（使呈明 显的乙醚层）。充分振荡，使吲哚溶于乙醚中，静置片 刻，待乙醚浮于培养液上面时，沿管壁慢慢加入吲哚 试剂10滴。如吲哚存在，则乙醚层呈玫瑰红色 （注意：加入吲哚试剂后，不可再摇动，否则红色不 明显）。以“+”、“—”表示有无红色的玫瑰吲哚。
实验八
微生物的生理生化反应
一、目的要求
学习检测微生物代谢特性的试验方法
掌握淀粉水解试验、糖发酵试验、吲哚试验、石蕊 牛乳试验的反应原理
二、基本原理
代谢：在所有生活细胞中存在的化学反应 应（酶促反应 ） 生理生化反
微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，因 此使得微生物在自然界的物质循环中起着重要的作用，同时 也为人类开发利用微生物资源提供更多的机会与途径。
细菌生理生化实验报告
一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应的基本原理。
2. 掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。
3. 通过实验操作，学会观察和分析细菌的生理生化特性。
4. 培养实验操作技能和科学思维。
二、实验原理细菌生理生化反应是指细菌在生长代谢过程中，通过各种酶的作用，对营养物质进行分解、合成和转化的一系列化学反应。
这些反应反映了细菌的代谢类型、生长速度和代谢能力等特性，对于细菌的分类、鉴定和生理研究具有重要意义。
三、实验材料与仪器1. 菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等。
2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基、吲哚试剂、甲基红试剂、V-P试剂等。
3. 仪器：酒精灯、接种环、培养皿、试管、移液枪、滴管、显微镜等。
四、实验方法1. 菌种培养：将待测菌种接种于相应培养基中，在适宜温度下培养一定时间。
2. 生理生化反应检测：- 吲哚试验：将菌液接种于吲哚试剂中，观察是否产生红色沉淀。
- 甲基红试验：将菌液接种于甲基红试剂中，观察颜色变化。
- V-P试验：将菌液接种于V-P试剂中，观察是否产生红色沉淀。
- 糖发酵试验：将菌液接种于糖发酵培养基中，观察颜色变化和气体产生情况。
五、实验结果与分析1. 吲哚试验：大肠杆菌和枯草芽孢杆菌产生红色沉淀，金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌不产生红色沉淀。
2. 甲基红试验：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌呈红色，枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌呈黄色。
3. V-P试验：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌产生红色沉淀，枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌不产生红色沉淀。
4. 糖发酵试验：大肠杆菌和枯草芽孢杆菌发酵葡萄糖，产生红色沉淀和气体；金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌不发酵葡萄糖。
六、实验结论通过本次实验，我们了解了细菌生理生化反应的基本原理和实验方法，掌握了细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。
实验结果表明，不同细菌具有不同的生理生化特性，这些特性可以用于细菌的分类、鉴定和研究。
实验八微生物生理生化反应
三、实验原理和步骤
大分子水解实验
不同微生物分解利用生物大分子能力各有不 同。只有那些能够产生并分泌跑外酶的微生
物才能利用大分子有机物。
油脂水解、淀粉水解、明胶液化 脂肪酶、 淀粉酶、 蛋白酶
糖发酵实验 细菌在分解糖或醇(如葡萄糖、乳糖、蔗 糖、甘露醇、甘油)的能力有很大的差异。
由于微生物代谢类型多样性，使得微生物在自然 界的物质循环中起着重要作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。
此外，微生物代谢类型多样性具体表现在生化反 应的多样性，因此人们在微生物的分类鉴定工作 中，常利用其生化反应作为重要依据。
二、实验器材
培养基：油脂培养基、淀粉培养基、明 胶培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳 糖）、
IMV 验
培养基
iC反 V.P实验 葡萄糖蛋白胨水
应
培养基
柠檬H2S培养基
菌种
金黄葡、枯 草 枯草、大肠
接种 方式 平板
平板
大肠、枯草、穿刺 绿脓
大肠、变形 试管
大肠、变形 大肠、产气 大肠、产气
试管 试管 试管
大肠、产气 试管
大肠、产气 斜面
大肠、产气 穿刺
现象
实验八 微生物的生理 生化反应
何伟 2006－04
一、实验目的
微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处， 也有不同之处。微生物代谢重要持征之一，就是 代谢类型的多样性。即使同属化能异养菌中的不 同微生物，它们分解生物大分子的能力，分解利 用含碳化合物、含氮化合物的途径和产生代谢产 物也各不相同等等。
IMViC反应： 吲哚实验 甲基红实验 V.P.实验 柠檬酸盐实验 H2S实验
实验九微生物的生理生化反应
一、实验目的
通过不同细菌（以细菌为代表来说明微生物）
对不同含碳、氮化合物分解利用的情况不同来
了解不同细菌碳、氮代谢类型的多样性。
二、实验原理
不同微生物对同种碳、氮化合物利用情况不 同，而同一微生物对不同碳、氮化合物分解利 用情况也不相同，反映出微生物具有不同酶系 导致代谢类型的差异（酶系包括胞外酶系及胞 内酶系）。因此，不同的微生物具有不同的酶 系，利用不同物质作为底物进行反应后，产生 不同的产物，在添加适当指示剂的条件下会显 示不同的结果，所以可以利用微生物的不同生 理生化反应来作为对微生物分类和鉴定的重要 依据。
思考题
1. 假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发 酵试验应该出现什么结果？（P120，2 ） 2. 解释在细菌培养中吲哚检测的化学原理， 为什么在这个试验中用吲哚的存在作为色 氨的酶活性的指示剂，而不用丙酮酸? P123，2（2）
3. 说明在硫化氢试验中，醋酸铅的作用。可 以用哪种化合物代替醋酸铅 ? P123，2（4）
大肠杆菌
√
√
√
√
√
产气杆菌
变形杆菌 培养基
√
√
√
√
√
√
√ 蛋白胨 水 培养基 葡萄糖蛋白胨水 培养基 柠檬酸 盐斜面 乳糖 发酵
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ接种方式
液体
液体
液体
斜面
葡 萄 糖 发 液体酵
醋酸铅 培养基
穿刺
2. 培养37℃ 24- 48h 3. 结果观察： ①吲哚试验： 1ml 乙醚萃取，剧烈摇晃静置分层， 沿壁缓加吲哚试剂，观察玫瑰环。 ② M.R 试验：加入 2 滴甲基红试剂，阳性为红色。 ③ VP 试验 : 加 40 ％ KOH 约 10 滴，再加等量 5 ％ α －奈酚,酒精灯加热，阳性红色。 ④柠檬酸盐试验：直接观察，阳性蓝色。 ⑤糖发酵试验：直接观察，产酸黄色 ; 产气，杜 氏小管中有气泡。 ⑥H2S试验：直接观察，阳性有黑色沉淀。
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对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术关，系电，力根通保据过护生管高产线中工敷资艺设料高技试中术卷资，配料不置试仅技卷可术要以是求解指，决机对吊组电顶在气层进设配行备置继进不电行规保空范护载高与中带资负料荷试下卷高问总中题体资，配料而置试且时卷可，调保需控障要试各在验类最；管大对路限设习度备题内进到来行位确调。保整在机使管组其路高在敷中正设资常过料工程试况中卷下，安与要全过加，度强并工看且作护尽下关可都于能可管地以路缩正高小常中故工资障作料高；试中对卷资于连料继接试电管卷保口破护处坏进理范行高围整中，核资或对料者定试对值卷某，弯些审扁异核度常与固高校定中对盒资图位料纸置试，.卷保编工护写况层复进防杂行腐设自跨备动接与处地装理线置，弯高尤曲中其半资要径料避标试免高卷错等调误，试高要方中求案资技，料术编试交写5、卷底重电保。要气护管设设装线备备置敷4高、调动设中电试作技资气高，术料课中并3中试、件资且包卷管中料拒含试路调试绝线验敷试卷动槽方设技作、案技术，管以术来架及避等系免多统不项启必方动要式方高，案中为；资解对料决整试高套卷中启突语动然文过停电程机气中。课高因件中此中资，管料电壁试力薄卷高、电中接气资口设料不备试严进卷等行保问调护题试装，工置合作调理并试利且技用进术管行，线过要敷关求设运电技行力术高保。中护线资装缆料置敷试做设卷到原技准则术确：指灵在导活分。。线对对盒于于处调差，试动当过保不程护同中装电高置压中高回资中路料资交试料叉卷试时技卷，术调应问试采题技用，术金作是属为指隔调发板试电进人机行员一隔，变开需压处要器理在组；事在同前发一掌生线握内槽图部内 纸故，资障强料时电、，回设需路备要须制进同造行时厂外切家部断出电习具源题高高电中中源资资，料料线试试缆卷卷敷试切设验除完报从毕告而，与采要相用进关高行技中检术资查资料和料试检，卷测并主处且要理了保。解护现装场置设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。
细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能分 解某种糖产生有机酸(如乳酸,醋酸,丙酸等)和气体(如氢气,甲烷,二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气.例 如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气。产酸后再加入溴甲酚指示剂后会使溶液呈黄色，且 德汉氏小管中会收集到一部分气体。若细菌不能使糖产酸产气，则最后溶液为指示剂的紫色，且 德汉氏小管中无气体。 5.IMVC 实验主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌。
发酵培养基（内装有倒置的德汉氏小管）（糖发酵试验）；蛋白胨水培养基（吲哚试验）；葡
萄糖蛋白胨水培养基；
试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水、
仪器：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管
三、【实验原理】
1.在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程，由于各种 微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不 同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化 试验占有重要的地位。 2.淀粉的水解：由于微生物对淀粉这种大分子物质不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质
图二：油脂水解试验接种示意图
对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术关，系电，力根保通据护过生高管产中线工资敷艺料设高试技中卷术资配，料置不试技仅卷术可要是以求指解，机决对组吊电在顶气进层设行配备继置进电不行保规空护范载高与中带资负料荷试下卷高总问中体题资配，料置而试时且卷，可调需保控要障试在各验最类；大管对限路设度习备内题进来到行确位调保。整机在使组管其高路在中敷正资设常料过工试程况卷中下安，与全要过，加度并强工且看作尽护下可关都能于可地管以缩路正小高常故中工障资作高料；中试对资卷于料连继试接电卷管保破口护坏处进范理行围高整，中核或资对者料定对试值某卷，些弯审异扁核常度与高固校中定对资盒图料位纸试置，.卷编保工写护况复层进杂防行设腐自备跨动与接处装地理置线，高弯尤中曲其资半要料径避试标免卷高错调等误试，高方要中案求资，技料编术试5写交卷、重底保电要。护气设管装设备线置备4高敷动调、中设作试电资技，高气料术并中课3试中且资件、卷包拒料中管试含绝试调路验线动卷试敷方槽作技设案、，术技以管来术及架避系等免统多不启项必动方要方式高案，中；为资对解料整决试套高卷启中突动语然过文停程电机中气。高课因中件此资中，料管电试壁力卷薄高电、中气接资设口料备不试进严卷行等保调问护试题装工，置作合调并理试且利技进用术行管，过线要关敷求运设电行技力高术保中。护资线装料缆置试敷做卷设到技原准术则确指：灵导在活。分。对线对于盒于调处差试，动过当保程不护中同装高电置中压高资回中料路资试交料卷叉试技时卷术，调问应试题采技，用术作金是为属指调隔发试板电人进机员行一，隔变需开压要处器在理组事；在前同发掌一生握线内图槽部纸内故资，障料强时、电，设回需备路要制须进造同行厂时外家切部出断电具习源高题高中电中资源资料，料试线试卷缆卷试敷切验设除报完从告毕而与，采相要用关进高技行中术检资资查料料和试，检卷并测主且处要了理保解。护现装场置设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。
线接种于平板相对应部分的中心，如图二所示，并贴好标签，标签上注明菌种的名称。
（4）培养：将平板倒置，在 28℃温箱中培养两天。
（5）观察：取出平板，观察菌苔颜色，如果出现红斑点，说明脂肪水解，为阳性反应。记录实验结果。
3.葡萄糖发酵实验 （1）培养基的配制：按照糖发酵培养基配置葡萄糖发酵培养基，分装至试管中，用胶头滴管往德汉 氏小管中注满培养基，再把德汉氏小管倒置放入试管中，注意不要让德汉氏小管中进入空气， 每组五只试管，灭菌。
2.油脂水解试验
图一：淀粉水解试验接种示意图
（1）倒平板：按照油脂培养基配方配制固体油脂培养基，灭菌，待培养基冷却至 50℃左右，充分振荡，
使油脂均匀分布，在酒精灯火焰下倒平板，每组两个平板。
（2）用记号笔在在平板底部划成四部分。
（3）接种：在无菌操作台上将枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌分别划十字
（1）吲哚试验：是用来检测吲哚的产生，在蛋白胨培养基中，若细菌能产生色氨酸酶，则可将蛋白
胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚，吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。但并
非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力，所以吲哚实验可以作为一个生物化学检测
的指标。大肠杆菌吲哚反应阳性，产气肠杆菌为阴性。 （2）甲基红试验（MR）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸，后者进而被分解产生甲
2.掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。 3.了解糖发酵的原理和在肠细菌坚定中的重要作用。 4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 5. 了解吲哚和甲基红试验的原理以及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。
二、【实验仪器与试剂】
菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌 培养基：培养基：固体淀粉培养基、固体油脂培养基（大分子水解试验）；葡萄糖发酵培养基、乳糖
（2）接种：待培养基冷却至常温时，在无菌操作台上，取葡萄糖发酵培养基试管 2 支接入大肠杆菌，
再取两只接入普通变形杆菌，接种后轻摇试管，使其均匀，防止倒置的小管进入气泡，第五支 不接种，作为对照。在各试管外壁上贴上标签，标签上分别标明发酵培养基的名称和所接种的 细菌菌名。 （3）培养：把接种后的试管放在试管架上，把试管连同试管架放入培养箱中于 28℃下培养两天。 （4）观察：观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡，并记录实验结果。 4.乳糖发酵实验 （1）培养基的配制：按照糖发酵培养基配置乳糖发酵培养基，分装至试管中，用胶头滴管往德汉氏小 管中注满培养基，再把德汉氏小管倒置放入试管中，注意不要让德汉氏小管中进入空气，每组 五只试管，灭菌。 （2）接种：待培养基冷却至常温时，在无菌操作台上，取乳糖发酵培养基试管 2 支接入大肠杆菌，再 取两只接入普通变形杆菌，接种后轻摇试管，使其均匀，防止倒置的小管进入气泡第五支不接种， 作为对照。在各试管外壁上贴上标签，标签上分别标明发酵培养基的名称和所接种的细菌菌名。 （3）培养：把接种后的试管放在试管架上，把试管连同试管架放入培养箱中于 28℃下培养两天。 （4）观察：观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡，并记录实验结果。 5.吲哚试验 （1）培养基的配制：按照蛋白胨水培养基配方配制培养基，分装至试管中，每组五只试管，在高压蒸 气锅内灭菌。 （2）接种：待培养基冷却后，在无菌操作台上将大肠杆菌接入 2 支蛋白胨水培养基，产气肠杆菌接入 2 支蛋白胨水培养基，剩余一只试管不接种，作为空白对照，贴好标签。 （3）培养：把接种后的试管放在试管架上，把试管连同试管架放入培养箱中于 28℃下培养两天。 （4）观察：往培养后的蛋白胨水培养基内加入 3~4 滴乙醚，摇动数次，静置 1min，待乙醚上升后，沿 试管避徐徐加入 2 滴吲哚试剂。在乙醚和培养物之间产生红色环状物为阳性反应。观察加入试剂后 试管内的颜色反应并记录实验结果。 6.甲基红试验 （1）培养基的配制：按照葡萄糖蛋白胨水培养基配方配制培养基，分装至试管中，每组五只试管，在高 压蒸气锅内灭菌。 （2）接种：待培养基冷却后，在无菌操作台上将大肠杆菌接入 2 支葡萄糖蛋白胨水培养基，产气肠杆 菌接入 2 支葡萄糖蛋白胨水培养基，剩余一只试管不接种，作为空白对照，贴好标签。 （3）培养：把接种后的试管放在试管架上，把试管连同试管架放入培养箱中于 28℃下培养两天。 （4）观察：培养两天后后，将每支葡萄糖蛋白胨水培养基培养物内加入 2 滴甲基红试剂，培养基变为 红色者为阳性，变为黄色者为阴性。观察试管内的颜色变化，并记录实验结果。