药物定量分析

2．仪器校正和检定
波长校正：仪器使用前校正
吸收度准确度的检定： 用重铬酸钾的硫酸溶液检定 杂散光的检查：
3. 对溶剂的要求
• 溶剂在所选波长附近的吸收度应不
超过一定值 • 空气为空白
4．测定法
核对:
供试品的实际吸收峰波长是否与药 典给出的波长一致(±1nm) 如果不一致，可能与试样的真伪、 纯度及仪器波长的准确度有关.
（砷、汞） • 常加入无水碳酸钠或轻质氧化镁助灰化
（三）氧瓶燃烧法
oxygen flask combustion method
-----是一种能将有机化合物中的待测 元素定量分解成离子的快速有机破坏方 法
应注意的有关问题：


氧气要充足，确保燃烧完全
燃烧产生的烟雾应被完全定量吸收

样品点燃放入燃烧瓶后，应用手按紧瓶 塞（最好用少量水封闭瓶口），直到火 焰熄灭，以防燃烧产生的热气将瓶塞顶 动； 测定氟化物，应用石英燃烧瓶。 生成的HF腐蚀玻璃，且与玻璃中的硼生 成BF3 (BF3在水溶液中仅部分解离成氟 离子，使氟的测定结果偏低)；
同上
3．利用药物中可游离的金属离子的氧化 性测定含量
含Sb5+药物，含Fe3+药物
三．经有机破坏的分析方法
适用于结合状态牢固的有机金属药物和含卤 素有机药物
（一）湿法破坏
利用强氧化剂将有机金属转变成金属
离子。
1．硝酸-高氯酸法
• 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏。 • 破坏后的金属离子以高价态存在。 • 对含氮杂环药物的破坏不够完全。
(V0 VB ) TB F 含量% = 100% W
V0：空白试验消耗滴定液B的体积 VB：样品测定试验消耗滴定液B的体积
二．光谱分析法
（一）UV-Vis分光光度法
1．Lambert-Beer 定律
•ε：摩尔吸收系数
• E% ：百分吸收系数 1cm
• ε= E% 1cm ×(M/10)
2．含卤素的有机药物
卤素和芳环相连：
结合牢固
卤素和脂肪链的碳原子相连：
结合不牢固
二．不经有机破坏的分析方法 （一）直接测定法
适用于：水溶液中可以电离的药物 金属原子不直接与碳原子相连的含 金属药物 某些C-M键结合不牢固的有机金属 药物 如富马酸亚铁的含测
（二）经水解后测定法
直接回流后测定法：
M: 滴定液的毫摩尔浓度(mmol/ml)； B: 被测药物的毫摩尔质量(mg/mmol)
百分含量计算：
• 直接滴定：
V T F 含量% = 100 % W
F =滴定液的实际摩尔浓度/滴定液 的规定摩尔浓度
• 剩余滴定（做空白实验）：
先加入定量过量的滴定液A,当与被测
药物反应完全后,再用另一滴定液B回滴剩 余的滴定液A
F F F F
x s
0
0.5-2.0
0
荧光强度与药物浓度成正比关系
三.色谱分析法
1．HPLC法
最常用固定相：
octadecylsilane-bonded silica gel
十八烷基硅烷键合硅胶（ODS或C18）
柱温、检测器：
室温、紫外检测器
药典正文中各品种项下规定的条件除固定
相种类、流动相组分和检测器类型不得任 意改变外，其余条件如色谱柱内经、长度、 固定相牌号、流动相流速及各组分比例等 可适当改变，以适应具体样品品种及达到
选择合适的定量方法测定
• 校正曲线法 • 对照法 • 吸收系数法: 仪器应仔细校对、检定
• 计算分光光度法
以配制供试品溶液的同批溶剂为空白
（二）荧光分析法
1．特点
应在低浓度溶液中进行

高浓度：产生内滤光效应和自吸收现象
线性偏离 内滤光效应：溶液中存在能吸收激发光和 荧光的物质，使荧光强度减少。
3．滴定误差：
滴定液与被测药物 完全作用，反应达到化学 滴定终点与等当点之间的误差 计量点即等当点
4．特点：
• 简便，快速，精密、准确
• 专属性、灵敏度较差
• 常用于测定高含量或中含量组 分
1%以上的含量
5．计算问题
滴定度T：
指每ml某摩尔浓度的滴定液所相当的 被测药物的重量 aA + bB ⇌ cC + dD T = M × (b/a) × B （mg/ml）
适用于卤素原子结合不牢固的含卤素
有机药物
三氯叔丁醇的含测/六氯对二甲苯
硫酸水解后测定法：
适用于金属原子不直接与碳原子相连
的含金属的有机药物。 硬脂酸镁的含测
（三）经氧化还原后测定法
1．碱性还原后测定
• 适用于卤素原子和芳环结合的含卤素有机药物。
• 生成的无机卤化物用银量法测定.
2．酸性还原后测定

干扰多，需做空白试验
校正仪器灵敏度：

供试品对激发光稳定：
可用样品的对照品溶液校正

供试品对激发光不稳定：
采用发射光谱与供试品近似的物质校正 蓝色荧光---硫酸奎宁的稀硫酸溶液 黄绿色荧光---荧光素钠水溶液 红色荧光---罗丹明B水溶液
2．含量测定
Fx F0 Cx = × Cs Fs F0


燃烧瓶洗净；防爆。
第二节 定量分析方法特点
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
一．容量分析法 二．光谱分析法 三．色谱分析法
一．容量分析法
1．方法：
2．关键：
将已知浓度的滴定液由滴定管加 到待测药物的溶液中，直到所加滴定液 与被测药物按化学计量反应完全为止， 然后根据滴定液的浓度和消耗的体积， 就可以计算出被测药物的含量
准确地确定等当点
第一节
含金属或卤素有机药物 的前处理方法
一．有机药物中金属或卤素的结合状态
二．不经有机破坏的分析方法
三．经有机破坏的分析方法
一．有机药物中金属或卤素的结合状态
1．含金属的有机药物
金属原子不直接与碳原子相连
----结合不牢固
有机酸及酚的金属盐或配位化合物。
金属原子直接与碳原子以共价键相连 ----结合牢固 有机金属药物
2．硝酸-硫酸法
• 适用于大多数有机药物的破坏，但不 适用于含碱土金属有机药物的破坏。 （生成硫酸盐沉淀） • 破坏后的金属离子以高价态存在。 ３．硫酸-硫酸盐法
常用于含砷或锑有机药物的破坏，得到 低价态的三价砷或锑离子。
（二）干法破坏
---- 将有机物灼烧灰化 • 适用于湿法不易破坏完全的有机药物及 某些不能用硫酸破坏的有机药物 • 不适用于含易挥发金属有机药物的破坏
系统适用性试验的要求。
系统适用性试验
色谱柱的理论塔板数