金黄色葡萄球菌的检测方法的ppt课件

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检测方法 1.纸片法 2.免疫学方法 3.分子生物学方法 4.直接平板计数法
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一.纸片法
目前广泛应用的一种方法
用纸片、膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显 色物质附着在上面，通过观察微生物在测试片上面的生长、 显色来测定食品中微生物。
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采用快速测试片检测具有显著的优点：a.可测定少量检品，不 需要配制试剂，不需要大量的玻璃器皿，操作简便迅速 b. 易于消毒保存，便于运输携带方便，价格低廉；c.除纸片外 无其他任何废液废物，大大减少了工作量；d.可以在取样时 同时接种，结果更能反映当时样本中真实细菌数，防止延长
上述免疫学技术应用最多的是酶联免疫技术和胶体金侧向层析 技术。
酶联免疫技术广泛应用于实验室检测，由于一次可以检测多个 样本，此技术多用于体外诊断，目前也广泛用于食品安全。
（酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者ELISA法）
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三 分子生物学方法
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和 侵袭性酶
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技术优点：操作简单使用方便，避免了繁琐的操作。
技术缺点：用时间比较长，无法准确定性及计数。
此方法现在应用于快速检测领域，美国3M公司Petri film 为载体的测试片应用最为广泛。但其也存在一些问题： Petri film测试片上覆盖了一层薄膜，当样品粘液过多时会 出现菌落的扩散和融合，影响计数；Petri film测试片面积 较小，当菌量大于250cfu时，准确计数较困难；待测样品中 含有的某些有机物可能使显色减缓。使目视效果下降，导致 计数偏低。
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免疫学方法包括下面两个部分 （1）抗原抗体技术
（2）免疫学方法技术
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（1）抗原抗体技术分析：
抗原抗体技术是免疫技术中的核心部 分，对于金黄色葡萄球菌检测全菌免 疫筛选抗体是很困难的事情，现在目 前市场有的大多都是对金黄色葡萄球 菌毒素类进行免疫得到的抗体
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（2）免疫学方法技术分析：
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二.免疫学方法 ※ 免疫学方法的基本原理都是抗原抗
体反应。
※抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合 反应。
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金黄色葡萄球菌特异的抗原能激发机体产生相应的特异性抗 体。
在免疫检测中，可利用单克隆抗体检测金黄色葡萄球菌的特 异抗原
也可利用金黄色葡萄球菌抗原检测体内产生的特异抗体，两 种方法均能判断机体的感染状况。
金黄色葡萄球菌的检测方法
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简介
一·生物学特性 （1）典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径 0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄 色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革 兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高， 在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧， 最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。平板上 菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。
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检测方法：将待检测食品取10g食物样品在10%NaCl溶液中涮 洗5次，加入增菌液增菌（配合37℃手持小仪器使用可缩短 增菌时间），加入菌裂解液摇匀，取3滴点板。结果判断如
下图示：
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（2）血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高 度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、 麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反 应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐， 液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药
物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
接种时间时细菌繁殖造成的污染。
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分子生物学方法的技术主要分为：聚合酶链式反应PCR技术 和实时荧光定量PCR（rtPCR）技术、生物芯片技术、测序技 术。
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分子生物学检测技术由于检测方法复杂，需要仪器设备及专 业人员操作，对实验室环境有要求，检测成本高等因素，目 前该技术没有广泛应用。
通过不断的研究和总结金黄色葡萄球菌快速增殖的环境和条 件，在增菌液中进行扩增，使菌数达到胶体金的检测下限， 用胶体金方法检测，操作简单，不用任何实验室仪器设备， 检测试剂盒价格低廉，比较适合金黄色葡萄球菌检测初筛。