海洋基因工程复习题
基因工程结课考试 复习题
20
DNA 片段的容量最大的是( )。
A
B
C
(YAC) D
21
DNA
( )。
A oc DNA sc DNA 1DNA B sc DNA 1DNA oc DNA
C 1DNA oc DNA sc DNA D sc DNA oc DNA 1DNA
22
确?( )
A
B
C
a、b
D
子质量也相同
23
?( )
A
B
C
D
27 质粒提取后,在琼脂糖电泳出现一条带时说明质粒提取纯度高,当为三条带时为纯度
不高。
()
28、同聚物加尾法构建重组体,不仅连接效率高,而且也很容易回收插入的片段。 ( )
29、限制与修饰现象是宿主的一种保护体系,它是通过对外源 DNA 的修饰和对自身 DNA
的限制实现的。
()
30、用免疫化学法筛选重组体需要外源基因的表达。
31
( )。
A
B
CDBiblioteka 32DNA?( )
A
DNA 添加适当的酶切位点 B
CD33 cDNA 包括该种生物的( )。AB
C
D
34
( )。
A Southern 印迹 B Northern 印迹
C Western 印迹 D
35
( )。
A
B
C
D
36
IPTG 的作用是( )。
A
-半乳糖苷酶的羧基端
B
-半乳糖苷酶的氨基端
PCR 产物的______克隆法。
27
PCR 主要是依据蛋白质的氨基酸序列设计______引物来扩增相应的基因。
基因工程试题
基因工程试题基因工程是一门研究如何改变、操控和利用生物体的基因结构和功能的学科。
它可以通过改变生物体的基因组,从而改变其遗传性状,并对其进行精确的调控。
基因工程技术的广泛应用在医学、农业、环境、工业等领域具有重要作用。
下面是一些关于基因工程的试题,供大家参考和学习。
试题一:基因编辑技术基因编辑技术是一种通过直接修改生物体基因组DNA序列来实现精确遗传编辑的技术,请简要介绍CRISPR-Cas9系统及其应用。
试题二:转基因作物安全性评价转基因作物是指通过基因工程技术将外源基因导入植物的基因组中,使其获得一定的优势特性。
请简要介绍转基因作物的安全性评价内容和方法。
试题三:基因药物的开发与应用基因药物是通过基因工程技术制备的一类新型药物,具有针对性强、疗效持久等特点。
请以人类胰岛素为例,简要介绍基因药物的开发和应用。
试题四:基因工程在环境修复中的应用基因工程技术在环境修复中有着重要地位,可以利用生物体修复受到污染的土壤、水体等环境。
请以重金属污染土壤修复为例,简要介绍基因工程在环境修复中的应用。
试题五:基因工程在动物育种中的应用基因工程技术在动物育种中有着广泛的应用,可以加速优良基因的传播和培育出具有特定优势的新品种。
请以瘦肉型猪育种为例,简要介绍基因工程在动物育种中的应用。
试题六:基因工程伦理问题基因工程技术的发展也带来了一系列伦理问题,如基因改造的人类是否具有平等的生存权利等。
请简要讨论基因工程伦理问题,并提出你自己的观点。
试题七:基因工程在抗疾病治疗中的前景基因工程技术在抗疾病治疗中具有广阔的前景,包括基因治疗、基因诊断等。
请简要介绍基因工程在抗疾病治疗中的前景和应用。
试题八:基因工程与传统育种的比较基因工程技术与传统育种方法相比,具有许多优势和特点。
请以粮食作物的改良为例,比较基因工程技术和传统育种方法在作物改良中的差异和优势。
以上是关于基因工程的一些试题,希望能够帮助你了解和学习基因工程技术的相关知识。
基因工程复习题及答案
基因工程复习题及答案一、选择题1. 基因工程是指:A. 基因的自然突变B. 基因的人工重组C. 基因的自然选择D. 基因的自然进化答案:B2. 基因工程中常用的载体是:A. 噬菌体B. 质粒C. 病毒D. 所有以上选项答案:D3. 以下哪个不是基因工程中常用的受体细胞?A. 细菌B. 酵母C. 植物D. 动物答案:C4. 基因枪法属于哪种基因转移技术?A. 化学介导法B. 电穿孔法C. 微注射法D. 粒子轰击法答案:D5. 基因编辑技术CRISPR-Cas9中,Cas9蛋白的主要作用是:A. 识别目标DNA序列B. 切割目标DNA序列C. 连接DNA片段D. 转录mRNA答案:B二、填空题6. 基因工程的基本操作步骤包括:目的基因的________、________、检测与表达。
答案:提取、重组7. 基因工程在医学领域的应用包括________、________和基因治疗。
答案:基因诊断、基因疫苗8. 在基因工程中,________技术可以用于快速繁殖转基因植物。
答案:组织培养9. 基因工程中,________是将目的基因导入植物细胞的常用方法。
答案:农杆菌介导法10. 基因工程在农业上的应用包括提高作物的________、________和改良品质。
答案:抗病性、抗虫性三、简答题11. 简述基因工程在环境保护方面的应用。
答案:基因工程在环境保护方面的应用主要包括:- 利用基因工程改造微生物,以降解环境中的有毒物质,如石油污染物。
- 通过基因工程改良植物,使其能够耐受重金属污染,从而净化土壤。
- 利用基因工程改造的微生物处理工业废水,减少水体污染。
12. 阐述基因工程在生物制药领域的主要应用。
答案:基因工程在生物制药领域的主要应用包括:- 生产重组蛋白质药物,如胰岛素、干扰素等。
- 利用转基因动物生产药物,如转基因羊产生的抗凝血酶。
- 利用基因工程改造的微生物生产抗生素等药物。
- 开发基因治疗药物,用于治疗遗传性疾病。
基因工程原理练习题及其答案
基因工程复习题题型:名词解释(10个)30分;填空(每空1分) 20分;选择题(每题1分)10分;简答题(4个)20分;论述题(2个)20分。
第一章绪论1.名词解释:基因工程:按照预先设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义:指以改变生物有机体性状为目标,采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作,以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义:基因工程。
克隆:无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2.什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。
A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现(标志着DNA重组时代的开始);B) 载体的使用;C) 1970年,逆转录酶及抗性标记的发现。
4.基因工程研究的主要内容是什么?基础研究:基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究:基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释:限制性核酸内切酶:一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
回文结构:双链DNA中的一段倒置重复序列,当该序列的双链被打开后,可形成发夹结构。
同尾酶:来源不同、识别序列不同,但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶:不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端:DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合,这样的DNA末端,称为粘性末端。
平末端:DNA片段的末端是平齐的。
《基因工程》各章内容及参考答案(42页).docx
复习题1 (包括分子生物学基础知识)(请各位同学将所有题目翻译成英文后再做!)一、解释下列名词1.Gene manipulation2.Promotor3.Cloning:4.Subcloning二、填空题:将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内,两者用“;”隔开。
1.基因操作(Gene manipulation)的核心部分是基因克隆(gene cloning), gene cloning的基本要点有(),()和()。
2.()是遗传物质的基木单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的,也可以是();可以是(),也可以是RNA;可以存在于染色体上,也可以()3.基因操作并不是一个法律概念,除了包括基因克隆外,还包括基因的()、()、()和()等与基因研究相关的内容。
4.启动子(Promo(or)是指()。
通常一个Gene是否表达,()是关键的一步,是起决定作用的。
在转录过程屮,Promoter还是()的结合位点。
5.原核生物的RNApolymerase主要由两部分组成:()和(),其屮。
■因子并不参与RNA 的合成,它的作用主要是()。
6.从()到()的这一段距离称为一个转录单位,或者一个转录产物,其屮可包括一个或者多个Gene。
7.转录终止子主要有两种,一种是(),另一种是()。
8.重叠基因(Overlapping gene)是指(),间隔基因(Interrupted gene)是指()三、选择题:从备选答案中选出正确的结果,正确答案是唯一的。
四、简答题:1.简述基因克隆的两个基本特征?参考答案:基因克隆的两个基本特征是一是强调外源核酸分子(一般情况下都是DNA)在不同宿主屮的繁殖,打破自然种的界限将来自于不相关物种的基因放入一个宿主中是基因操作的一个重要特征,基因操作的另一个重要特征是繁殖。
2.什么是gene cloning ?什么是亚克隆(subcloning) ?参考答案:基因克降:一定程度上等同于基因的分离,即从复杂的生物体基因组中,经过酶切,消化等步骤,分离带有目的基因的DNA片段。
基因工程期末复习题(含答案)
一、填空题1、基因文库的构建通常采用cDNA法和鸟枪法两种方法。
2、限制性内切酶识别序列的结构一般为具有 180度旋转对称的回文结构。
3、DNA连接酶主要有两种:T4噬菌体和大肠杆菌DAN连接酶。
4、根据质粒在宿主细胞中所含拷贝数的多少,可以把质粒分为两种类型:紧密型质粒和松弛型质粒。
5、原核受体细胞通常包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和蓝细菌。
6、原核生物或低等真核生物,将外源重组 DNA导入受体细胞的方法有借助生物载体的转化、转染、转导。
7、对细菌细胞进行转化的关键是细胞处于感受态。
8、基因工程是_____1970’____年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
9、部分酶切可采取的措施有:(1)减少酶量;(2)缩短反应时间;(3)增大反应体积等。
10、第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK;而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是EcoRl。
11、DNA聚合酶 I的 Klenow大片段是用枯草杆菌蛋白酶切割 DNA聚合酶I得到的分子量为 76kDa的大片段,具有两种酶活性:(1)5'-3'合成酶的活性;(2)3'-5'外切核酸酶的活性。
12、为了防止 DNA的自身环化,可用_碱性磷酸酶__去双链 DNA_5’端的磷酸基团_。
13、测序酶是修饰了的 T7DNA聚合酶,它只有5'-3'合成酶的活性,而没有 3'-5'外切酶的活性。
14、切口移位(nick translation)法标记 DNA的基本原理在于利用 DNA聚合酶 I的5'一 3'合成酶和 5'一 3'合成酶的作用。
15、欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA分子转变成平末端的双链形式,通常可采用S1核酸酶切割或DNA聚合酶补平。
16、反转录酶除了催化 DNA的合成外,还具有核酸水解酶 H的作用,可以将DNA-RNA杂种双链中的 RNA水解掉。
17、 pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于pMBl,它的四环素抗性基因来自于pSCl01,18、pSCl01是一种严紧复制的质粒。
基因工程简答题总结
基因工程原理复习题思考题5、简单叙述同尾酶和同裂酶的差别。
同尾酶:来源不同,识别的序列不同,但能切出相同的粘性末端,连接后不能被相关的酶同时切割。
同裂酶:识别序列相同,切割位点有些相同,有些不同。
分完全同裂酶和不完全同裂酶(PS:完全同裂酶:识别位点和切点完全相同。
不完全同裂酶:识别位点相同,但切点不同。
)6、连接酶主要有哪些类型?有何异同点?影响连接酶连接效果的因素主要有哪些?类型:DNA连接酶和RNA连接酶异同点:相同点:都能以DNA为模板,从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点:DNA聚合酶识别脱氧核糖核苷酸,在DNA复制中起作用;而RNA聚合酶聚合的是核糖核苷酸,在转录中起作用。
7、试分析提高平端DNA连接效率的可能方法。
(传说中的网上答案)1、低温下长时间的连接效率比室温下短时间连接的好。
2、在体系中加一点切载体的酶,只要连接后原来的酶切位点消失。
这样可避免载体自连,应该可以大大提高平端连接的效率。
3、足够多的载体和插入片段是最重要的。
4、平端的连接对于离子浓度很敏感5、尽可能缩小连接反应的体积6、建议放在四度冰箱连接两天效率更高比14度好8、基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些?1)大肠杆菌DNA聚合酶2)Klenow fragment3)T7 DNA聚合酶4)T4 DNA聚合酶5)修饰过的T7 DNA聚合酶6)逆转录酶7)Taq DNA聚合酶第四章基因克隆的载体系统1、作为基因工程载体,其应具备哪些条件?具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性(可转移性);具有合适的筛选标记;具有较高的外源DNA的载装能力;具有多克隆位点(MCS);具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点。
3、载体的类型主要有哪些?在基因工程操作中如何选择载体?基因工程中常用的载体(vector)主要包括质粒(plasmid)、噬菌体(phage)和病毒(virus)三大类。
这些载体均需经人工构建,除去致病基因,并赋予一些新的功能,如有利于进行筛选的标志基因、单一的限制酶切点等。
基因工程复习(含答案)
基因工程复习题一、名词解释: (10~20%)基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶得Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交: 将细胞或组织得核酸固定保持在原来得位置上, 然后用探针与之杂交得一种核酸分子杂交技术, 该方法可较好地反映目得基因在细胞或组织中得分布与表达变化。
粘性末端: 双链DNA被限制性内切酶切割后, 形成得两条链错开几个碱基, 而不就是平齐得末端。
Northern印迹杂交: 将RNA进行变性电泳后, 再转移到固相支持物上与探针杂交得一种核酸分子杂交技术, 可用于检测目得基因得转录水平。
转位: 一个或一组基因片段从基因组得一个位置转移到另一个位置得现象。
基因工程: 在体外, 用酶学方法将各种来源得DNA与载体DNA连接成为重组DNA, 继而通过转化与筛选得到含有目得基因得宿主细胞, 最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子得过程称为基因工程, 又称基因克隆、DNA克隆与重组DNA等。
目得基因:基因工程中, 那些被感兴趣得、被选作研究对象得基因就叫作目得基因。
连接器: 人工合成得一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段, 连接到目得基因得两端, 便于基因重组中得切割与连接。
转化: 受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变得过程。
停滞效应: PCR中后期, 随着目得DNA扩展产物逐渐积累, 酶得催化反应趋于饱与, DNA扩增产物得增加减慢, 进入相对稳定状态, 即为停滞效应, 又称平台期。
逆转录PCR: 以mRNA为原始模板进行得PCR反应。
PCR: 即聚合酶链式反应。
在模板, 引物, 4种dNTP与耐热DNA聚合酶存在得条件下, 特异性地扩增位于两段已知序列之间得DNA区段地酶促合成反应。
α-互补(α-complementation):指在M13噬菌体DNA或PUC质粒序列中, 插入了lac 启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸得核苷酸序列(又称α-肽), 该序列不能产生有活性得β-半乳糖苷酶。
基因工程复习题及参考答案
【基因工程复习题及参考答案】绪论、基因工程基础一、填空题1. 基因工程是20 世纪70 年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
基因工程技术的诞生使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代,走向按人们的需要定向地改造和创造具有新的遗传性品种的时代。
2.Cohen 等在1973 年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。
3.基因工程的两个基本特点是:(1)分子水平上的操作,(2)细胞水平上的表达。
4.基因克隆中三个基本要点是:克隆基因的类型、受体的选择和载体的选择。
5.克隆基因的主要目的有四个:①扩增DNA ;②获得基因产物;③研究基因的表达调控;④改造生物的遗传特性。
6.基因工程的基本程序包括DNA 制备、体外DNA 重组、遗传转化、转化细胞的筛选等方面。
7.基因工程又称重组DNA 技术/基因操作技术/基因克隆/分子克隆/遗传修饰/新遗传学。
8.克隆的进行依赖于各种参与DNA 新陈代谢的酶的使用,它们主要是从原核细胞中分离的。
限制性内切核酸酶能够将DNA 切割成特定大小的片段。
各种各样的DNA 聚合酶也是克隆所必需的,包括将RNA 转录出单链DNA 的反转录酶。
DNA 连接酶用于连接限制性片段。
克隆也需要来源于微生物的DNA 序列,包括用来运载被被克隆DNA 的克隆载体。
质粒载体来源于天然细菌质粒,通常携带有抗生素抗性基因。
其他载体来源于噬菌体,如λ噬菌体,它们经过修饰后可以运输外源DNA。
要想克隆一个感兴趣的真核生物的基因就必须先制作一个能与该基因杂交的探针。
人们已经发展了很多有效而精细的技术来分析克隆的DNA。
例如,极微量的DNA 片段可以通过PCR 得到扩增。
在感兴趣基因的启动子上连接,如CAT 或LacZ 之类的报告基因能够定量检测基因的活性。
二、选项题(单选或多选)1.因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是(C )。
A. Kornberg AB. Gilbert WC. Berg PD. McClintock2.第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是(A )。
基因工程复习题答案
基因工程复习题答案1. 基因工程的定义是什么?基因工程是指通过体外DNA重组和转基因等技术,按照人类的设计,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的技术。
2. 基因工程的基本操作步骤有哪些?基因工程的基本操作步骤包括:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
3. 基因工程中常用的运载体有哪些?常用的运载体包括质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
4. 基因工程中目的基因的检测方法有哪些?目的基因的检测方法包括分子水平上的检测和个体水平上的鉴定。
分子水平上的检测包括DNA分子杂交技术、分子杂交技术和免疫学方法等;个体水平上的鉴定包括抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
5. 基因工程在农业上的应用有哪些?基因工程在农业上的应用主要包括:提高农作物的抗病虫能力、提高农作物的耐逆境能力、改良农作物的品质、提高农作物的产量等。
6. 基因工程在医学上的应用有哪些?基因工程在医学上的应用主要包括:生产药物、基因治疗、生产疫苗、诊断疾病等。
7. 基因工程的安全性问题主要有哪些?基因工程的安全性问题主要包括:对生物多样性的影响、对生态系统的影响、对人类健康的潜在影响等。
8. 基因工程产品如何进行安全性评价?基因工程产品的安全性评价需要从分子、细胞、个体、种群和生态系统等多个层次进行,包括对基因工程产品的分子特征、生物学特性、生态学特性等方面的评价。
9. 基因工程的伦理问题主要有哪些?基因工程的伦理问题主要包括:对人类尊严的挑战、对生物多样性的影响、对环境的潜在威胁、对人类健康的潜在风险等。
10. 如何平衡基因工程的利弊?平衡基因工程的利弊需要综合考虑其在经济、社会、环境和伦理等方面的影响,通过科学合理的管理和监管,确保基因工程的健康发展。
海洋生物基因编辑技术考核试卷
B.基因编辑在多个基因座的协同效应
C.基因编辑对生物发育的影响
D.基因编辑技术在跨物种中的应用可能性
(请在此处继续添加其他题型和题目)
三、填空题(本题共10小题,每小题2分,共20分,请将正确答案填到题目空白处)
1. CRISPR-Cas9技术中的Cas9蛋白来源于一种叫做“______”的细菌免疫机制。
8.生态模型
9.生物伦理
10.经济价值和生态适应性
四、判断题
1. ×
2. √
3. ×
4. √
5. ×
6. ×
7. √
8. ×
9. ×
10. ×
五、主观题(参考)
1. CRISPR-Cas9通过引导RNA识别特定DNA序列,Cas9蛋白切割DNA,实现基因编辑。在海洋生物中,可用于改良经济物种,治疗遗传病,研究基因功能等。
A.法律法规限制
B.技术成熟度
C.社会接受度
D.研究经费
18.以下哪些基因编辑技术可以实现基因的插入或替换?()
A. CRISPR-Cas9
B. TALEN
C. ZFN
D.同源重组
19.以下哪些方法可以用于提高基因编辑技术的传递效率?()
A.病毒载体
B.转座子
C.纳米粒子
D.电穿孔
20.以下哪些是海洋生物基因编辑研究中需要关注的科学问题?()
D.染色体重排
12.以下哪些技术可用于提高基因编辑的精确性?()
A.高通量测序
B.单细胞测序
C. CRISPR-Cas9的改进版本
D.碱基编辑技术
13.以下哪些方法可以用于检测基因编辑后的DNA修复情况?()
A. PCR
基因工程易错题
2022年高考生物总复习:基因工程复习题易错点1误认为目的基因的插入是“随机”的点拨目的基因的插入位点不是随意的:基因表达需要启动子与终止子的调控,所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位,若目的基因插入到启动子内部,启动子将失去原功能。
易错点2混淆启动子与起始密码子,终止子与终止密码子,不明确标记基因的作用点拨启动子≠起始密码子,终止子≠终止密码子(1)启动子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端。
它是RNA聚合酶识别、结合的部位。
(2)终止子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。
作用是使转录过程停止。
(3)起始密码子和终止密码子位于mRNA上,分别控制翻译过程的启动和终止。
(4)标记基因:一般为抗生素抗性基因或荧光基因等,其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(目的基因是否导入成功),从而将含目的基因的细胞筛选出来。
易错点3误认为切取目的基因与切取载体时“只能”使用“同一种酶”点拨(1)在获取目的基因和切割载体时通常用同种限制酶,以获得相同的黏性末端。
但如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同时,在DNA连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。
(2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”可用不同的限制酶分别处理目的基因和载体,使目的基因两侧及载体上具有两个不同的黏性末端。
易错点4误认为基因工程可导致受体细胞或生物产生“新基因”或“新蛋白质”点拨基因工程的实质是“基因重组”,它是将外源基因导入受体细胞,使该基因在受体细胞中表达——由于“外源基因”是自然界已存在的“现成”基因,故基因工程并未产生新基因,由此目的基因表达时也未产生新蛋白质,基因工程只不过是让受体细胞(或生物)“实现了外源基因的表达”。
[规范答题]下图表示培育“华恢1号”抗虫水稻的主要流程,据图回答下列问题:(1)杀虫基因通过①~④过程,最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做________。
基因工程训练题
基因工程复习题第一套一、名词解释(每题2分共20分)1.SD序列:2.双元载体:3.融合蛋白:5.穿梭载体:6.YAC:7.阻遏蛋白:8.考斯质粒(cosmid):9.T-A克隆10.DNA 接头:二、选择题(每题1分,共10分)1. 末端转移酶是合成酶类,具有()活性。
A 3'→5'DNA聚合酶B 5'→3DNA聚合C 5'→3'DNA内切酶D 5'→3D NA外切2. 下列含有内含子的生()D. 蓝藻 C. 放线菌 ) C.分子 A. 大肠杆菌 B. 青霉 3. 基因工程的设计施工是在什么水平上进行的 B.细胞器 4. 某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使 RNA 加入到大肠杆菌的提取液中,在这个 细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白,这个事实说明 A .蛋白质合成是在核糖体上进行的 C .兔子和大肠杆菌的基因发生了重组 5. 能够用于鉴定载体中基因方向的限制性内切酶是 A B C D 6.人类基因组是指人体 DNA 分子所携带的全部遗传信息 测定人类基因组的核苷酸序列。
其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、 序列图和转录图。
工作艰巨可见一斑。
科学家应对多少染色体进行分析 A.46条 B.24条 C.23条 7.下列不属于获取目的基因的方法是 A. “鸟枪法” B.转录法 C.反转录法 8. 基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是 ( A .质粒、线粒体、噬菌体 B . C .质粒、噬菌体、动植物病毒 9.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是 A .限制酶和连接酶 B .限制酶和水解酶 C .限制酶和运载体 D .连接酶和运载体10.下面几种序列中你认为哪一个最有可能是Ⅱ类酶的识别序列: ( A. GAATCG ,B. AAATTT , C. GATATG , D. ACGGCA 。
A.细胞 D.原子 B . D . ( ( ) 各种生物共用一套遗传密码 兔子的基因发生了突变) 只在载体上有酶切位点的 只在基因上有酶切位点的酶 在载体和基因上都有酶切位点,且位于基因中间 在载体和基因上都有酶切位点,且不位于基因中间 人类基因组计划就是分析 物理图、 ( ) D.22条 D.根据已知氨基酸序列合成法 )染色体、叶绿体、线粒体 D .细菌、噬菌体、动植物病毒( ) 三、填空题(每空 1分,共 10分) 1. 为了防止 DNA 的自身环化,可用 _____ 去双链DNA ________________ 2. 除具有较低的分子量外,一个理想的质粒载体必需包括 、 ________ _________ 三个部分。
基因工程原理与技术复习题
《基因工程原理与技术》复习题第一章绪论一、名词解释·基因工程技术:以分子生物学、分子遗传学和生物化学等学科为基础,在分子水平对基因或基因组进行改造,使物种获得新的生物性状,并且能够稳定遗传的一种技术。
·性状:是指生物体所表现的形态结构、生理生化特性、细胞形态或动态过程、解剖构造、器官功能或精神特性、和行为方式等的统称。
·基因:核酸中储存遗传信息的遗传单位,也是储存有功能的蛋白质多肽链或功能RNA序列信息以及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。
·基因表达:基因经过转录、翻译,产生具有特异生物学功能的蛋白质分子或功能性RNA的过程。
二、简答题1.什么是基因工程技术?请简要描述基因工程技术的基本操作步骤。
答:基因工程技术是指以分子生物学、分子遗传学和生物化学等学科为基础,在分子水平对基因或基因组进行改造,使物种获得新的生物性状,并且能够稳定遗传的一种技术。
广义的基因工程技术是指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分,狭义的基因工程是指上游技术。
基因工程技术基本操作步骤:①分离目的基因②将载体与目的基因进行限制性酶切③将外源基因与载体连接起来④重组后的载体转化受体菌⑤转化后对重组子的筛选⑥使外源基因在宿主体内稳定遗传表达2. 请分别描述原核生物和真核生物基因的结构特征。
答:原核生物基因:基因组较小,具有操纵子结构,基因密度高,结构基因中无内含子结构,多为单拷贝,遗传物质载体内部不形成细胞核结构,基因转录产物为多顺反子。
真核生物基因:DNA与蛋白质相结合形成染色体储存在细胞核中,基因转录产物为单顺反子,存在大量的重复序列,基因并不连续,存在内含子结构三、论述题1、什么是基因工程技术?试从理论和技术两个方面谈谈基因工程诞生的基础,并结合基因工程在生物技术中的地位,谈谈基因工程在生物产业中的重要性及发展前景?答:基因工程技术是指以分子生物学、分子遗传学和生物化学等学科为基础,在分子水平对基因或基因组进行改造,使物种获得新的生物性状,并且能够稳定遗传的一种技术。
基因工程复习题汇总(研究生课程)
名词解释:1.鸟枪法:随机克隆供体细胞的全基因组DNA片段,然后通过快速有效的筛选程序从众多克隆中分离出含有目的基因的目的重组子,进而获得目的基因。
2.cDNA法:互补DNA(Complementary DNA,cDNA)是一种利用逆转录酶,以RNA(通常是mRNA)为模板作成的复制品,经常用来将真核生物的基因(以mRNA 形式)复制到原核生物细胞中。
3.PCR法:又称为聚合酶链反应或PCR扩增技术,是一种高效快速的体外DNA聚合程序。
4.基因库:特定生物体全基因组的集合(天然存在)。
5.基因文库:从特定生物个体中分离的全部基因,这些基因以克隆的形式存在(人工构建)6.PCR(多聚酶链反应):是一种在体内快速扩增特定基因或DNA序列的方法,故又称为基因的体外扩增法。
在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2n倍。
7.原位PCR技术:即聚合酶原位扩增技术。
将PCR技术与原位杂交技术结合起来,不改变周围组织的原有位置,直接在组织、细胞或病原体原位研究基因变化的技术。
8.荧光定量PCR:在普通PCR的基础上加入非特异性的嵌入荧光染料或者特异性荧光探针,来反映或者更具特异性和专一性地反映PCR反应体系中总的核酸量。
9.实时定量PCR技术:是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,使每一个循环变得“可见”,最后通过Ct值和标准曲线对样品中的DNA(或cDNA)的起始浓度进行定量的方法。
10.质粒:通过不同途径将承载的外源DNA片段(基因)带入受体细胞且能在其中维持的DNA分子。
也成为DNA克隆载体。
11.同尾酶:识别位点不同,酶切后产生同样的粘性末端的两种酶。
12.同裂酶:识别序列相同,对甲基化位点敏感性不同的两种酶。
13.转化:重组质粒DNA分子通过细胞膜进入受体细胞,并在受体细胞内稳定维持和表达的过程。
14.转导:转导是指通过病毒将一个宿主的DNA转移到另一个宿主的细胞中而引起的基因重组现象。
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基因工程:通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身,并具有明确应用目的的活动称为基因工程。
广义基因工程:DNA重组技术的产业化开发与应用。
上游技术:外源基因重组、克隆和表达方式的设计与构建。
基因操作:对基因进行分离、分析、改造、转移、重组、表达和检测等操作总称。
内含子:存在于真核生物基因中无编码意义而被切除的序列。
外显子:能够翻译成蛋白质的任一间断的基因片段。
粘性末端:识别位点为回文对称结构的序列劲限制酶切割后产生的互补末端。
平末端:在回文对称轴上同时切割DNA的两条链所得平整的切口。
Taq DNA聚合酶:一种耐热的DNA聚合酶,发现于水生栖热菌内,顾称之Taq DNA聚合酶。
质粒:独立于染色体之外的、能自主复制的双链环状脱氧核糖核酸物质。
质粒的不相容性:两个质粒在同一宿主中不能工程的现象。
转化:借助于人工方法有目的的将异源DNA分子引入另一细胞品系使受体细胞获得新遗传性状的一种手段。
克隆载体:用于扩增或保存DNA片段的载体。
细菌的溶源化:柯斯质粒载体:人工构建的含有λ噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。
插入型载体:通过特定的酶切位点允许外源DNA片段插入的载体。
置换型载体:允许外源DNA片段替换非必须DNA片段的载体。
人工染色体载体:基于ARS、CEN、TEL是线性染色体保持稳定的功能序列,人们利用这些序列构建载体,重组后的DNA可以线性状态存在,既稳定又提高了插入外源基因的能力且可像天然染色体一样在寄主细胞中稳定复制和遗传。
包涵体:外源基因的表达产物在大肠杆菌中积累并致密地集中在一起形成无膜的裸露结构。
穿梭载体:能够在两种或多种宿主之间进行复制或表达的载体。
整合载体:承担着将某个基因或某些基因插入到染色体中的工作的载体。
分子杂交:具有互补序列的两条核酸单链按碱基配对原则形成双链的过程。
DNA复性:指变性DNA两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象。
Northern印迹杂交:通过RNA/DNA杂交检测RNA的方法。
Western杂交印迹法:将电泳分离的非标记蛋白质转移到固相载体上,用特异的抗血清对蛋白质进行鉴定及定量的方法。
Ct值:PCR扩增过程中扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数。
基因组文库:是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上而形成的集合。
cDNA:指某生物某一发育时期所转录的mRNA全部经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。
基因组学:对物种的所有基因进行定位、作图、测序和功能分析以获得生物体全部的基因组序列。
序列标签位点STS:STS是一段已知核苷酸序列的DNA片段,是基因组中任何单拷贝的短DNA序列,长度在100~500bp之间,易于识别,仅存在于待研究的染色体或基因组中。
表达序列标签(EST):EST是一个cDNA克隆快速大规模测序后所获得的3’端和5’端部分cDNA随机片段,每个EST长度约200~600bp,代表了一个单拷贝基因的部分cDNA表达序列。
基因组工程:以基因组为基础对物种进行大范围修饰和改造,用以产生新的生命力、改造物种和实现人类其他目的的工程。
脂质体:一种人造的脂质小泡,外部是脂双层,内部是水腔。
诱导型启动子P lac:在某些特定的物理或化学信号刺激下,可大幅度提高基因的转录水平的启动子。
藻类基因工程:以海藻为研究对象将某种生物基因通过基因载体或其他手段运送到海藻活细胞中,并使之增殖(克隆)和行使正常功能(表达),从而创造出藻类新品种的遗传学技术。
宏基因组:泛指某一自然环境中全部微生物的基因组群。
基因漂流:转基因作物中含有从不相关的物种转入的外源基因,这些外源基因有可能通过花粉风扬或虫媒传授等途径扩散到其他物种。
基因操作的主要内容有哪些?基因操作是对基因进行分离、分析、改造、转移、重组、表达和检测等操作的总称。
基因操作是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。
因此,供体、受体、载体是基因操作的三大基本元件。
基因操作的目的是力争外源基因的高效表达,可从哪几方面实现该目的?1、利用载体DNA在受体细胞中独立于染色体DNA而自主复制的特性与载体分子重组,通过载体分子的扩增提高外源基因在受体细胞中的含量,借此提高宏观表达水平。
2、筛选、修饰重组基因表达的转录调控元件:启动子、增强子、转录调控序列、操作子、终止子。
3、修饰和构建蛋白质生物合成的翻译调控元件:翻译调控序列、密码子。
4、外源基因在工程菌中的稳定生产及增殖。
限制酶识别的序列特征是什么? 1.限制酶识别序列的长度限制酶识别序列的长度一般为4-8 bp,最常见的为6个bp。
当识别序列为4个和6个碱基时,它们可识别的序列在完全随机的情况下,平均每256个和4096个碱基中会出现一个识别位点。
2.限制酶识别序列的结构:限制酶识别的序列大多数为回文对称结构,切割位点在DNA 两条链相对称的位置。
原核细胞DNA聚合酶的种类及主要功能。
原核细胞有3种DNA聚合酶,都与DNA链的延长有关。
聚合酶Ⅰ是单链多肽,可催化单链或双链DNA的延长;聚合酶Ⅱ则与低分子DNA链的延长有关;聚合酶Ⅲ在细胞中存在的数目不多,是促进DNA 链延长的主要酶。
一个理想的载体应具备哪些条件?具备:1.能在宿主细胞中存在并繁殖,有功能良好的复制子和启动子,使插入基因复制和表达; 2.具有多个限制性内切酶的切点,且切点是单一的;3.具有容易检测的筛选标记用于后期筛选;4.载体DNA的分子量适当,可容纳较大的外源DNA片段,又可在受体细胞内扩增较多的拷贝;5.胞内稳定性高,使重组体可以稳定传代而不易丢失。
选择标记与筛选标记各指什么?选择标记用于鉴别载体的存在,将成功转化了载体的细菌菌落挑选出来。
筛选标记用于从含有载体的细菌菌落中进一步挑选携带外源DNA的重组载体。
筛选标记主要用来区别重组质粒与非重组质粒,当一个外源DNA 片段插入到一个质粒载体上时,可通过该标记来筛选插入了外源片段的质粒,即重组质粒。
α-互补(α-complementation)原理以及在载体构建中的应用。
大肠杆菌的lac乳糖操纵子中的lacZ 基因编码β-半乳糖苷酶,如果lacZ 基因发生突变,则不能合成有活性的β-半乳糖苷酶。
缺失了编码β-半乳糖苷酶的lacZ 基因,无酶学活性;对于只编码N-端氨基酸的lacZ 基因(称为lacZ’),其产物也没有酶学活性。
但这两个无酶学活性的产物混合在一起时,可恢复β-半乳糖苷酶的活性,实现基因内α-互补。
α-互补是基于在两个不同的缺陷β-半乳糖苷酶之间可实现功能互补而建立的。
X-gal也是β-半乳糖苷酶的一种底物,经降解后可生成溴氯吲哚,使大肠杆菌菌落呈蓝色。
当无β-半乳糖苷酶时,X-gal不被分解,菌落呈白色。
当外源基因插入到LacZ′基因内部,则LacZ′基因受到破坏,便不能再和缺陷型受体菌中生成有活性的β-半乳糖苷酶,因此,菌落呈白色。
反之,非重组体为蓝色菌落。
这种颜色标志的变化就很容易区分和挑选含有和不含有插入序列或基因的转化菌落,称为“蓝白斑筛选法”。
大肠杆菌表达载体的基本表达元件有哪些? 1.启动子:是一段能被宿主RNA聚合酶特异性识别和结合并指导目的基因转录的DNA序列,是基因表达调控的重要元件。
要求是:①应为强启动子;②最好是诱导性的,如热诱导或化学诱导。
2.转录终止子:一段终止RNA聚合酶转录的DNA序列。
使转录终止,增强mRNA的稳定性,提高蛋白质产物的表达水平。
3.核糖体结合位点:是指基因转录起始位点下游的一段DNA序列,即Shine-Dalgarno序列(简称SD序列)。
4.筛选标记基因:微生物表型选择标记显性标记营养缺陷型标记在基因克隆中采用的质粒载体的选择标记,包括有新陈代谢特性、对大肠杆菌素E1的免疫性,以及抗菌素抗性等多种 5. 翻译起始密码子:起始密码子是翻译的起始位点,通常为AUG(ATG),编码甲硫氨酸(MET),是首选的起始密码子。
也有极少数生物利用其它密码子作为翻译的起始位点,如GUG、UUG等。
翻译终止密码子:翻译终止密码子与核糖体相遇时,能使核糖体从mRNA模板上脱落下来,终止蛋白质的翻译过程。
影响线状双链DNA分子的电泳迁移距离的因素。
1.分子量的大小: 迁移距离与分子量的常用对数成反比 2. 凝胶浓度: 浓度越高,移动距离越短,适合分离低分子量DNA;浓度越低,移动距离越长,适合分离高分子量DNA;3.电压: 低电压时,迁移率与电压成正比;电压增高时,不同大小DNA片段迁移率增大是不同的。
4.碱基组成与温度: 不受影响,温度高可导致DNA带变形或解链。
影响染色体DNA电泳的主要因素。
1.DNA的分子大小及构型: 不同构型DNA的移动速度次序为:共价闭环DNA>直线DNA>开环的双链环状DNA。
2.琼脂糖浓度:DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。
3.DNA分子的构象 4.嵌入染料的存在 5.电源电压:电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。
电场强度不宜高于5V/cm。
6.离子强度影响:电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。
在没有离子存在时,电导率最小,DNA几乎不移动。
什么是生物芯片?生物芯片有哪些类型?生物芯片有何特点? 1.生物芯片指一切采用生物技术制备或应用于生物技术的微处理器。
2.按载体材料分类:玻璃芯片、硅芯片、陶瓷芯片;按点样方式分类:原位合成芯片、微阵列芯片、电定位芯片;按芯片固定的生物分子类型分类:基因芯片、蛋白质芯片和芯片实验室;按芯片的使用功能分类:测序芯片、表达谱芯片、基因差异表达分析芯片。
3.生物芯片主要特点是高通量、微型化和自动化。
生物芯片的分类PCR的基本原理。
类似于DNA的体内复制。
首先待扩增DNA?模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。
?这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
PCR反应体系有哪些成分?标准的PCR反应体系:10×扩增缓冲液10ul;4种dNTP混合物各200umol/L;引物各10~100pmol ;模板DNA0.1~2ug;TaqDNA聚合酶2.5u;Mg2+1.5mmol/;加双或三蒸水至100ul。
大规模DNA测序中的随机测序策略指的是什么?随机测序战略又称鸟枪法策略,此策略是在一定作图信息基础上,绕过大片段连续克隆系的构建而直接将基因组分解成小片段随机测序,利用超级计算机进行组装。