梅毒的实验室诊断与临床意义
梅毒的实验室诊断与临床意义课件
梅毒的分子生物学诊断
辅助诊断方法：分子生物学诊断是通过检测病原体核酸的方 法来辅助诊断梅毒。
常用的分子生物学诊断方法包括聚合酶链式反应（PCR）和 基因测序。这些方法可以检测梅毒螺旋体的核酸，对潜伏期 梅毒和神经梅毒的诊断有一定帮助。
梅毒的影像学诊断
辅助诊断方法：影像学诊断是通过影 像学技术观察患者器官和组织的形态 和结构，辅助诊断梅毒。
03
梅毒的临床意义
梅毒对个体的影响
01
02
03
影响生理健康
梅毒感染可导致多系统器 官的损害，如心血管、神 经、骨骼等，严重影响患 者的生理健康。
心理压力
梅毒感染可能导致患者产 生羞耻、焦虑、抑郁等心 理压力，影响心理健康。
降低生活质量
梅毒感染可能导致患者社 会活动受限，影响工作和 生活质量。
梅毒对家庭的影响
家庭关系紧张
梅毒感染可能导致家庭成 员间的关系紧张，甚至产 生矛盾和冲突。
家庭经济负担
梅毒治疗需要一定的经济 投入，可能给家庭带来经 济负担。
儿童受影响
家庭中如有儿童，梅毒感 染可能对儿童的生长发育 产生不良影响。
梅毒对社会的危害
传播风险
梅毒是一种性传播疾病，具有传 染性，对社会人群的健康构成威
胁。
社会负担加重
梅毒患者增多将导致医疗资源紧张 ，社会负担加重。
影响公共卫生安全
梅毒的传播可能引发公共卫生安全 问题，对社会稳定造成影响。
04
梅毒的治疗与预防
梅毒的治疗方法
药物治疗
首选青霉素类药物，如长效青霉素、 普鲁卡因青霉素等，通过注射给药， 可有效杀死梅毒螺旋体。
替代疗法
跟踪治疗
治疗期间及治疗后需定期进行临床和 实验室检查，以监测疗效和预防复发 。
梅毒的实验室诊断与临床意义
详细描述
患者因头痛、恶心等症状就诊，经实验室检 测和脑脊液检查确诊为神经梅毒。治疗首选 青霉素类药物，如水剂青霉素G和高浓度青 霉素，每周一次，连续注射2-3周。同时， 患者需接受对症治疗和康复训练，以促进神 经功能的恢复。
病例三：妊娠合并梅毒的母婴传播阻断
总结词
妊娠合并梅毒需及早诊断和治疗，以降低母 婴传播的风险。治疗以青霉素类药物为主， 同时需对孕妇和胎儿进行密切监测。
03 梅毒实验室诊断的临床意义
CHAPTER
诊断与分期
诊断依据
梅毒的诊断主要依靠实验室检测，包括梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPA、TPHA等）和梅毒非螺旋体抗原血清 学试验（RPR、TRUST等）。当TPPA或TPHA阳性，且RPR或TRUST滴度升高时，可诊断为梅毒。
分期判断
根据梅毒血清学试验结果，结合临床表现和病史，可将梅毒分为一期、二期、潜伏期和三期梅毒。不同分期的梅 毒治疗方案和预后有所不同，因此准确的分期对治疗和预后评估具有重要意义。
02
梅毒螺旋体主要通过性接触传播 ，也可通过血液传播和母婴传播 。
梅毒的流行病学
全球范围内，梅毒的发病率呈上升趋势，尤其在性活跃人群 中更为常见。
梅毒的流行与性行为习惯、社会经济状况和地区分布密切相 关。
梅毒的分类与分期
早期梅毒
感染后2年内的梅毒，包括一期和二期梅毒。
晚期梅毒
感染后超过2年的梅毒，通常为三期梅毒。
VS
详细描述
患者早期出现硬性下疳、淋巴结肿大等症 状，通过实验室检测确诊为早期梅毒。治 疗首选青霉素类药物，如长效青霉素、普 鲁卡因青霉素等，每周一次，连续注射23周。同时，患者需接受性伴侣的治疗和 追踪观察，以防止再次感染。
梅毒血清学检查的方法和临床意义的简述
梅毒血清学检查的方法和临床意义的简述梅毒血清学检查是一种常见且有效的检测方法，用于诊断和监测梅毒感染。
通过检测人体对梅毒螺旋体所产生的抗体反应，可以确定是否存在梅毒感染，并评估感染的程度和治疗效果。
本文将对梅毒血清学检查的方法和临床意义进行简要介绍。
一、梅毒血清学检查的方法梅毒血清学检查主要包括结核试验（Treponemal tests）和非结核试验（Non-treponemal tests）两类。
1. 结核试验结核试验是通过测量患者体内特异性的抗体反应来确认梅毒感染。
最常用的结核试验方法包括：（1）梅毒螺旋体颗粒凝集试验（Treponema pallidum particle agglutination assay，TPPA）：该试验基于抗体和抗原的凝聚反应，通过检测血清中是否存在梅毒抗体来确定感染情况。
（2）补体结合试验（Complement fixation test，CFT）：该试验通过补体结合反应来检测患者血清中特异性抗体的存在。
阳性结果显示患者体内存在梅毒抗体，可能存在梅毒感染。
（3）荧光抗体试验（Fluorescent treponemal antibody-absorption test，FTA-ABS）：该试验通过检测患者体内的抗梅毒抗体，使用荧光标记的抗体来确认感染情况。
2. 非结核试验非结核试验主要用于初筛梅毒感染和监测治疗效果。
最常用的非结核试验方法包括：（1）梅毒血清反应素试验（Venereal Disease Research Laboratory test，VDRL）：该试验基于血清中患者对梅毒螺旋体组织破坏产生的反应素，通过测量血清的滴度来评估感染的程度。
（2）快速测定试验（Rapid Plasma Reagin test，RPR）：该试验与VDRL类似，通过观察血清与梅毒抗原接触后是否发生凝集反应来判断感染情况。
需要注意的是，结核试验（Treponemal tests）通常被认为是高度特异性的，但对于监测治疗效果并不敏感；而非结核试验（Non-treponemal tests）则具有较高的敏感性，但特异性较低。
梅毒的实验室诊断和临床意义PPT讲稿
暗视野显微镜下的苍白螺旋体
镀银染色检查法
• 溃疡部位取材，镀银染色查找苍白螺旋体。 • 取材方法：1.清洗干净
2.取组织液或渗出液 3.刮取或压片 4.送实验室镀银染色
实验室普通显微镜下查找染成棕褐色的梅 毒螺旋体。
镀银染色梅毒螺旋体镜下形态
梅毒显微镜检查的临床意义
• 阳性：有诊断价值,可确认梅毒感染。 • 阴性：无否定价值，无诊断价值。 • 方法学优点：1.取材方便
非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
1.适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的 检查；
• 2.抗体水平与疾病严重程度成正比； • 3.评价、监测治疗效果，此抗体治愈后可消失。 • 4.此抗体不具有特异性,全身性疾病的活动期如:
红斑狼疮,风湿病,类风湿关节炎，病毒性肝炎,麻 风病,自身免疫性疾病等，都有可能出现。
53043例，是全国第一 。
• 2012年，在甲乙类传染病上报病例中梅毒
位居第三。（病毒性肝炎、结核、梅毒）
梅毒的疫情分析
• 梅毒发病率呈逐年大
幅上升趋势，疫情形 势严竣。
• 也说明实验室的检测
范围扩大和技术水平 的提高，从而发现确 诊了更多梅毒病例。
• 中国预防与控制梅毒
规划2010—2020年， 要把梅毒病例每年的 增速控制在5%以下。
梅毒显微镜检查法 • 梅毒显微镜检查法可分二类： • 1.暗视野显微镜检查法 • 2.镀银染色检查法
暗视野显微镜检查法
• 溃疡部位取材，查找苍白螺旋体。 • 取材方法：1.清洗干净
2.取组织液或渗出液 3.刮取或压片 4.加一滴生理盐水 5.送实验室检查 注意：取材后需十分钟内立即送检
• 实验室暗视野显微镜直接查找活动的苍白
检测梅毒的四种方法及其临床意义
近年来．紫杉醇作为主要的抗肿瘤化疗药物在消化道恶 性肿瘤的治疗上受到重视。Ｋｉｍ等应用紫杉醇，联合氟尿嘧啶 和顺铂治疗晚期胃癌取得５１％的有效率［２１。美国ＭＤ Ａｎｄｅｒｓｏｎ 癌症治疗中心Ａｊａｎｉｄ等将其用于治疗上消化道肿瘤，取得很 好的疗效１３１。紫杉醇用于治疗食管癌的单药有效率町达１６％－ ３１％。王瑞林教授采用醛氢叶酸．氟尿嘧啶，顺铂治疗晚期食 管癌，具有较好治疗效果１４１。紫杉醇与顺铂、氟尿嘧啶无交叉 耐药性，联合应用ＨＴ以明显提高疗效。初治患者的有效率为 ６２．５％～７７．０％阁。
１２０例非梅毒对照组中．经１１Ｐ地ＬＩＳＡ检测阴性例数为１１４ 例，特异性为９５％。 ３讨论
据文献报道｜ｌｌ。人体感染梅毒螺旋体后血清中产生的抗 螺旋体抗体比抗类脂质抗体出现早。且特异性抗体出现早、 消失迟，即使经过正规抗梅毒治疗，仍可检测出其特异性抗 体。甚至可终生检出。ＥＬＩＳＡ采用双抗原夹心法，即在聚乙烯 微孔条上预标记基因表达梅毒抗原，用辣根过氧化物酶（ＨｆｕＰ） 标记基因重组梅毒抗原，检测血清中１１Ｐ－－ＩｇＧ抗体和早期的ＩｇＭ 抗体。该法利用抗原的不同特性，联合使用可得到更高的敏 感性和特异性嘲。ＴＰ—ＥＬＩＳＡ有结果客观准确，操作简便，试 剂成本低等优点。可作为早期梅毒诊断的方法，尤其适用于 二期梅毒的诊断。但ＴＰ—ＥＬＩＳＡ本身也存在问题，如标本中 一些类过氧化物酶样物质的增高，血浆蛋白紊乱等，会造成 假阳性１４ｔ。而当标本梅毒螺旋体抗体滴度低于试剂检测限时， 又可出现假阴性。从上述结果中可看到，对于对照组的检测， １２０例中出现６例假阳性。ＳＹＰ采用纯化重组基因的梅毒抗 原，以胶体金作为指示标记于硝酸纤维素膜上进行反应，以 双抗原夹心法原理快速定性检测梅毒螺旋体抗体。灵敏度也 较高，见表１。但血清／浆中浓度过低时，ＳＹＰ会产生假阴性反 应。ＳＹＰ成本低，操作简便。结果明了快速，但不适于批量检 测。ＴＰＰＡ为梅毒确证试验，其特异性和敏感性相当高１３ｔ，但操 作较复杂，对操作人员水平要求也较高。有资料表明ＨＩ，ＴＰＰＡ 对早期梅毒的检出率较低，有可能是梅毒患者血清梅毒螺旋 体抗体滴度未达到试剂盒的检测范围。而产生假阴性反应的 原因。这点从表１中也可看出。
梅毒实验室诊断(刘利洪)
暗视野检查法
临床意义 1、检测阳性，在临床上可确证梅毒； 2、如未能发现梅毒螺旋体，不能排除诊断； 3、无论暗视野显微镜检查的结果如何，都应进一步 进行血清学检测。
镀银染色检查
检测原理 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染成棕黑色， 可以从普通高倍显微镜下观察到梅毒螺旋体。
镀银染色检查
仪器器材 1、普通显微镜 2、加拿大树胶 3、罗吉固定液 4、鞣酸媒染剂 5、Fontana银溶液 6、无水乙醇 7、无菌纱布等取材用品
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
定性试验 （1）试剂准备：复室温30分钟 （2）加标本：样本量50ul； （3）加抗原：抗原量（60±1滴/ml，约17ul/滴） （4）反应：反应时间8min （5）读取结果
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
定量试验
抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴
如何就目前高发的性病，尤其是对梅毒进行有效监测 和控制？ 如何对高危人群及潜在易感人群进行筛查，主动发现 无症状的性病感染者？ 如何确定感染的病原体种类？
——需要完善的实验室检测工作，包括检测能力建设 和质量控制
性病防治工作的重点 两个系统 疫情监测系统 实验室检测系统-实验室检测能力和质量控制 一个服务 规范化医疗服务
注意：应把每一份样本当作强阳性样本来处置和对待！！
பைடு நூலகம்
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
仪器：水平旋转仪（要求？） 试剂盒： （1）含有活性碳的抗原悬液； （2）一个标定的9号针头（0.9mm）； （3）压印有18mm直径圆圈的封塑环状卡 片； （4）内部对照； 为了保证试验结果的可靠性，以及 每批试剂间的可比性，应制备外部对照 血清 （5）50ul量程移液器和吸头 （6）0.9%无菌生理盐水
TP抗体的测定及临床意义
梅毒血清学试验的假阳性生物学基础
梅毒螺旋体抗体试验所测为抗T. pa llidum的 IgG/ IgM类抗体。试验中所用抗原 FTA2ABS：T. pallidum subsp pallidum 的 Nichols株冻干悬液 TPPA：Nichols株超声处理 EL ISA：纯化的/基因重组的分子量(MW) 47 000、45500、17000、15500的T. pa llidum 特异抗原
梅毒的血清学试验
非特异性类脂质抗原血清试验：
是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反 应素，用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试 验，原理基本相同： 1、性病研究实验室玻片试验（VDRL) ：由于试剂需现配 现用，故而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用 于神经性梅毒诊断的血清学方法
胎儿在宫内感染梅毒螺旋体后，胚胎晚期（6～ 9个月）已能合成 IgM型抗体，出生后第 3个月 开始形成 IgG 型抗体； IgM 抗体不能通过胎盘， 而 IgG 抗体能通过胎盘，如患儿血清中检侧出 19S-IgM抗梅毒螺旋体抗体是诊断先天梅毒的 有力证据
一种是非特异性抗体---反应素（reagin）
2、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)：在特制的纸片 上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现 凝集，用肉眼可观察结果。
3、甲苯胺红试验（TRUST)：在试剂中加入甲苯胺红代替 炭粉 颗粒，使结果更易于观察。 4、不加热血清反应素试验（USR)
梅毒的血清学试验
非特异性类脂质抗原血清试验的缺陷：
检
梅毒的血清学试验
梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA IgG） 原理：用超声裂解的梅毒螺旋体为抗原，致敏惰性明胶颗 粒，此致敏明胶颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋 体抗体结合，产生肉眼可观察的凝集反应。是TPHA 的升级产品。 优点： 1、试剂稳定，批间差小 2、结果判读清晰明确 3、敏感性和特异性高 不足：结果判定主观，不易保存.
梅毒的实验室诊断及临床应用
性 。但这些疾病的抗体滴度多较低 ， 一般＜ ：， １ 常在 ６个月 内 ８
转 为阴性 。一些 自身免 疫性疾病 ， 如系统性 红斑狼疮 、 干燥 综合征 、 盘状红斑狼疮 、 自身免 疫性 溶血性贫血 、 桥本 甲状腺 炎、 慢性 肾炎 、 麻风 、 类风 湿关 节炎 、 湿性 心脏病 、 风 系统 性 硬化征 、 醉品成瘾 ； 麻 孕妇 和老年人 ；％～ ％的一般人 群 ， １ ２ 可
增： 常采用 Ｔ 外 噤抗原设计弓 物 ， Ｐ Ｉ 检测样本中 Ｔ 。 Ｐ
Hale Waihona Puke 假 阳性 反应 ， 即生 物学假阳性 。一些感染性疾 病 ， 如麻疹 、 风 疹、 水痘 、 牛痘疹 、 病毒 性肝炎 、 上呼吸道感染 、 传染性单核细 胞增 多症 、 肺炎链球 菌肺炎 、 亚急性细菌性心 内膜炎 、 活动性
动活跃 的 Ｔ 。③镀银染色或 墨汁染色镜检 ： Ｐ 同暗视野显微镜 观察取材 ， 经镀银 染色或墨 汁染色后 ， 普通光学 显微镜 镜 用 检， 可见固定的 Ｔ 。 Ｐ ④多功能显微镜诊 断仪 ： 可直接观察 ｒ ， ｒ Ｐ 但仪器较贵 ， 以普及 。⑤直接荧光试验 ： 难 用异硫氰酸荧光素 标记 １ ’ Ｐ外膜 蛋自制备的单 克隆抗体 ，用荧光 显微镜 观察抗 原抗体复合物 ， 出现黄绿色荧光 ， 表明样本中含 ｒ 。 Ｉ ⑥基 因扩 ’ Ｐ
清学检测。 １ 梅毒病原体检测
梅毒病原体检测适宜诊断早期梅毒 ，特别是在一期梅毒 早期 ，当 ｒ ｆ Ｐ非特异性抗体和特异性抗体还 未产生或量较少
时 ， 断梅毒不可或缺 的方法 。常用 的方法如下 ： Ｔ 培 是诊 ① Ｐ
养： 虽然实验室培养可 以取得成 功 ， 但培 养条件要求较高 ， 难
梅毒实验室检测
其原理和成分与RPR试 验相同 用红色的甲苯胺红替 代了碳颗粒
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
RPR
TRUST
非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点
非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、 敏感性和特异性较好。适用于大量人群的初筛。
经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗
效观察、判愈、复发或再感染的指征。
特异性梅毒血清试验假阳性的主要原因有自身免 疫病、心血管病、麻风、莱姆病、地方性密螺旋 体病及老年人等。
梅毒螺旋体抗原血清学试验的意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验初筛阳性标本的 确证试验。 梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA等梅毒螺旋体 抗体试验试验仍可阳性，故TPPA等试验阳性不
能作为疗效观察的指标。
克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合物 与酶标记物结合，用酶联检测仪判定试验 阳性反应。
梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
FTA-ABS试验是检测梅毒的“金标准”。其原
理是将有完整形态的梅毒螺旋体作为抗原，加上经吸
收剂（用Reiter螺旋体制备而成）吸收过的梅毒患者 血清形成抗原抗体复合物，再加入荧光素（FTIC） 标记的抗人免疫球蛋白，与抗梅毒螺旋体抗体结合， 形成荧光的抗原抗体复合物。在荧光显微镜下，螺旋
TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染，应
结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
谢
ห้องสมุดไป่ตู้
谢
另外，TP破坏人体组织，使组织释放一种抗原性心磷脂酶 ，刺激机体产生反应素，在感染TP后5～7周或出现硬下 疳后2～3周转阳性。
梅毒血清学检测分类
(1)非梅毒螺旋体抗原血清学试验 ---非特异性梅毒抗体 (2)梅毒螺旋体抗原血清学试验 ---特异性梅毒抗体
梅毒检测方法的临床诊断意义
梅毒检测方法的临床诊断意义目的:分析两种方法对梅毒病人诊断的敏感性和准确性。
方法:应用螺旋体明胶颗粒凝集实验(1PPA)和环状卡片反应素实验(RPR)两种方法对我院皮肤病性病门诊65例梅毒病人进行检测分析。
结果:TPPA法的阳性率为90.77%、RPR法的阳性率为56.92%。
结论:TPPA法是检测梅毒螺旋体抗体的特异性方法,在梅毒感染初期,患者未产生抗体时RPR法检出率较高,因此两种方法同时使用可提高诊断率。
标签：梅毒;检测方法;临床意义梅毒(Syphilis)是一种慢性接触性传染病。
梅毒的病原体是苍白螺旋体(Treponema pallidum),是一种对人有严重致病性的螺旋体,能侵犯任何器官,产生各种症状。
梅毒螺旋体只感染人类,故梅毒是唯一的传染源[1]。
其传染途径,后天性梅毒主要通过性交传染,少数可通过接吻传染,也偶有通过胎盘传给胎儿而致病。
得不到治疗的梅毒患者,在感染后一年内,其传染性最大,病期越长,传染性越小。
感染四年后,通过性接触一般已无传染性,但仍可胎传[2]。
本研究选用常用的RPR和TPPA2种方法同时对87例早期梅毒血清进行检测,比较梅毒检测实验方法的灵敏度和特异性。
1材料和方法1.1一般资料:本组资料根据经我院皮肤性病科自2006年7月-2009年2月收治的65例确诊患者,其中男性患者42例,占64.62%,女性患者23例。
最小年龄21d,最大年龄53岁,平均年龄为32±4.2岁。
I期梅毒29例,Ⅱ期梅毒22例,III期梅毒10,潜伏梅毒4例。
病程:最短1d,最长3个月,其中梅毒硬下疳溃破1～4d者7例,5～10d者20例,>10d者27例。
1.2试剂:TPPA试剂盒(富士瑞必株式会社日本东京);RPR试剂盒(上海荣盛生物有限工司)。
1.3方法:取患者血清,采用TPPA利用纯化的致病性梅毒螺旋体(Nmhol 株)SEBODIA抗原包被明胶颗粒和RPR两种试验方法进行对比检测分析。
TP-ELISA、RPR与TPPA检测诊断梅毒的临床意义
TP-ELISA、RPR与TPPA检测诊断梅毒的临床意义李瑛;李军【摘要】目的：探讨梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（T P‐ELISA ）、梅毒螺旋体抗体快速血浆反应素试验（RPR）和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（T PPA ）3种不同梅毒检测方法对梅毒诊断的临床价值。
方法：2681例梅毒患者，分别对其血清标本用T P‐ELISA、RPR和T PPA方法进行检测，检测方案分为单项目、双项目和3项目共18种，用四格表卡方检验比较3种检测方法的结果。
结果：在各单项检测方案中T PPA方法的灵敏度（98．13％）和特异度（96．21％）最高（ P＜0．05）。
在联合检测中，TP‐ELISA＋ RPR＋ TPPA 的灵敏度（88．87％）和特异度（99．98％）最高（P＜0．01）；（TP‐ELISA＋ TPPA）／（TP‐ELISA＋RPR）／（RPR＋ TPPA）的灵敏度（87．76％）和特异度（99．17％）也较高（P＜0．01）。
结论：TPPA 检测方法在辅助梅毒诊断中具有重要价值，联合检测方案TP‐ELISA＋RPR＋ T PPA对梅毒诊断最有价值。
【期刊名称】《陕西医学杂志》【年(卷),期】2016(045)010【总页数】2页(P1398-1399)【关键词】梅毒/诊断;梅毒血清诊断;酶联免疫吸附测定【作者】李瑛;李军【作者单位】陕西中医药大学附属医院检验科咸阳712000;陕西中医药大学附属医院检验科咸阳712000【正文语种】中文【中图分类】R759.1梅毒(Syphilis)是由梅毒螺旋体(Treponema Pallidum, TP)引起的一种系统性、慢性传播疾病,其病程长、危害大, 且临床表现复杂多样，时隐时现，已成为我国重点防治的性传播疾病之一，近年来发病率有上升趋势[1-2]。
梅毒螺旋体感染后机体产生两种抗体: 非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体[3]。
梅毒血清学试验对梅毒诊断具有重要意义，现在实验室最常用的为螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体抗体快速血浆反应素试验(RPR)和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)等检测方法,本研究对3种方法在梅毒检测中的应用结果进行分析比较,以便为临床提供更准确、更合理的诊断依据。
TP抗体的测定及临床意义讲解
25µl
孔号
25µl
4
1
2
3
4
孔号
1
2
3 1:40
最终稀释倍数
1:80
5、混匀，加盖，孵育2个小时
6、结果判读
Serodia TPPA的结果判读（定性试验）
胎儿在宫内感染梅毒螺旋体后，胚胎晚期（6～ 9个月）已能合成 IgM型抗体，出生后第 3个月 开始形成 IgG 型抗体； IgM 抗体不能通过胎盘， 而 IgG 抗体能通过胎盘，如患儿血清中检侧出 19S-IgM抗梅毒螺旋体抗体是诊断先天梅毒的 有力证据
一种是非特异性抗体---反应素（reagin）
二. 传播途径
1、性接触传播 占95%。 主要通过性交或其他性行为，如同性恋、 接吻等。梅毒密螺旋体大量存在于一、二 期梅毒患者的生殖器和其他部位的皮肤粘 膜表面，也存在于唾液、精液、乳汁、尿 液和血液等体液中。未经治疗的梅毒患者 在感染1～2期内最具传染性。随着病期延 长，传染性越来越小，4年后通过性接触 无传染性。
技术操作上也是最困难的，故常不被临床实验室作为首选 方法
2、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）国内使用的商品化
TPHA试剂盒均未通过国家的批批检
3、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA)确证试验方法 4、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）
5、梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RT）未通过国家的批批
成本较高，
不适合大批量检测
Serodia TPPA的操作步骤
1、加入样品稀释液
100µl 25µl 25µl 25µl
3、样品的倍比稀释
25µl 25µl 25µl 25µl
弃去
孔号 1 2 3 4 孔号 1 2 3 1:20 4 1:40
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暗视野显微镜下的苍白螺旋体
精品课件
镀银染色检查法
▪ 溃疡部位取材，镀银染色查找苍白螺旋体。 ▪ 取材方法：1.清洗干净
2.取组织液或渗出 液
3.刮取或压片 4.送实验室镀银染 色
实验室普通显微镜精品下课色梅毒螺旋体镜下形态
精品课件
梅毒显微镜检查的临床意义
精品课件
梅毒病原体
▪ 梅毒病原体为：梅毒螺旋体(TP) ▪ 由德国的霍夫曼和谢文定在1905年首先发
现. ▪ 因透明不易染色，所以又称为苍白螺旋体。
精品课件
梅毒流行病学统计
▪ 梅毒是世界三大慢性传染病之一（梅毒、 麻风、结核）。
▪ 1999年全国报告梅毒80406例。 ▪ 2009年全国报告梅毒327433例。 ▪ 2010年全国报告梅毒385678例. ▪ 2012年全国报告梅毒448620 例. ▪ 2012年广东全省报告新发梅毒病例数为
梅毒血清学检验结果判读总结
▪ 现在临床医学实验室基本上都采用TRUST或RPR来 做梅毒螺旋体的非特异性抗体检测。
精品课件
梅毒螺旋体抗原血清试验
▪ 梅毒螺旋体抗原血清试验包括以 下几种：
▪ FTA-ABS 荧光螺旋体抗体吸收（试验）
▪ TPHA 梅毒螺旋体血凝试验
▪ TPPA 梅毒螺旋体颗粒凝集试验
▪ 原理：都是以梅毒螺旋体为抗原，与患者血 清中的抗体作抗原抗体结合反应试验，来检 测患者体内的特异性梅毒螺旋体抗体。以上 各试验只是抗原的制备方法和结果显示方法 上略有不同，基本原理都相同。
梅毒实验室血清学检查
▪ 梅毒的实验室血清学检查方法有很多，可 分为二类：
▪ 1.非梅毒螺旋体抗原血清试验
▪ 2. 梅毒螺旋体抗原血清试验
▪ 这二类试验都是以检测梅毒患者体内产生 的相应梅毒抗体，从而推断是否感染梅毒 螺旋体。
精品课件
梅毒螺旋体抗体的产生
▪ 人感染梅毒螺旋体后， ▪ 第14天产生第一次感染后的体液免疫应答，特异
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梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
▪ 1.适用于梅毒筛查、及非梅毒螺旋体抗原 血清试验阳性的确证试验。
▪ 2.特异性抗体可终生存在，故试验阳性 不能作为疗效观察的指标。
▪ 3. 试验阳性不能区分既往感染和现症感 染，需结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结 果进行现症确认诊断。
▪ 现在绝大多数医学实验室采用TPPA来做梅 毒螺旋体的特异性精抗品课体件 检测。
梅毒的实验室诊断与临床意义
东方俪人医院检验科 张义超
2013年11月14日
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梅毒的历史
▪ 梅毒的起源地：美洲 ▪ 梅毒的传播：1492年哥伦布第一次
航行到美洲带回欧洲，然后传向全 世界。 ▪ 进入中国时间：1505年葡萄牙商 人进入广州，将此病传遍大江南北。 ▪ 中国旧称此病为：霉疮或杨梅疮
▪ 原理：用一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物 作为非特异性梅毒螺旋体抗原，与患者血清中的抗体 作抗原抗体结合反应试验，来检测患者体内的抗类脂 类抗原的抗体（即非特异性梅毒螺旋体抗体）
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非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
1.适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染 的检查； ▪ 2.抗体水平与疾病严重程度成正比； ▪ 3.评价、监测治疗效果，此抗体治愈后可消失。 ▪ 4.此抗体不具有特异性,全身性疾病的活动期如: 红斑狼疮,风湿病,类风湿关节炎，病毒性肝炎, 麻风病,自身免疫性疾病等，都有可能出现。
梅毒螺旋体 抗原血清试验
VDRL
FTA-ABS
USR
TPHA
RPR
TPPA
TRUST
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各期梅毒取材部位与检查方法
▪ 临床表现
取材部位
检查方法
▪ 一期梅毒
溃疡、淋巴结
显微镜检查
血液
血清学检查
▪ 二期梅毒
皮损、淋巴结
显微镜检查
血清学检查
血液
▪ 隐性梅毒
血液
血清学检查
▪ 三期梅毒 精品课件血液、脑脊液
性抗体lgM,四周左右达到高峰，以反应素抗体为 主，此抗体治疗后可消失。
▪ 第3周开始产生出现特异性抗体lgG,4—5周达到高 峰，可保留终生。
▪ 第30天开始产生出现非特异性抗体lgM，很快达到 高峰，以反应素抗体为主，治疗后可消失。
▪ 第40天开始产生出现非特异性抗体lgG,很快上升， 1年后达到高峰，治疗后可消失.
梅毒显微镜检查法
▪ 梅毒显微镜检查法可分二类： ▪ 1.暗视野显微镜检查法 ▪ 2.镀银染色检查法
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暗视野显微镜检查法
▪ 溃疡部位取材，查找苍白螺旋体。 ▪ 取材方法：1.清洗干净
2.取组织液或渗出液 3.刮取或压片 4.加一滴生理盐水 5.送实验室检查 注意：取材后需十分钟内立即送检 ▪ 实验室暗视野显微镜直接查找活动的苍白 螺旋体。
53043例，是全国第一 。 ▪ 2012年，在甲乙类传染病上报病例中梅毒
位居第三。（病毒性肝炎、结核、梅毒）
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梅毒的疫情分析
▪ 梅毒发病率呈逐年大 幅上升趋势，疫情形 势严竣。
▪ 也说明实验室的检测 范围扩大和技术水平 的提高，从而发现确 诊了更多梅毒病例。
▪ 中国预防与控制梅毒 规划2010—2020年， 要把梅毒病例每年的 增速控制在5%以下。
450000 400000 350000 300000 250000 200000 150000 100000
50000 0 1999年
梅毒病例 数
2012年
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梅毒实验室检查示意图
梅毒实验室检查
显微镜检查法
暗视野显微镜检查法
镀银染色检查法
血清学检查
核酸DNA检测-PCR
非梅毒螺旋体 抗原血清试验
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梅毒抗体的产生时间与波峰图
▪ 人感染梅毒后，各抗体出现的时间与波峰图
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非梅毒螺旋体抗原试验
▪ 非梅毒螺旋体抗原试验包括以下几种：
▪ VDRL 性病研究实验室（玻片试验）
▪ USR
血清不需加热的反应素（玻片试验）
▪ RPR
快速血浆反应素（环状卡片试验）
▪ TRUST 甲苯胺红血清不需加热试验
▪ 阳性：有诊断价值,可确认梅毒感染。
▪ 阴性：无否定价值，无诊断价值。
▪ 方法学优点：1.取材方便
2.制作简单
3.结果快速
方法学缺点：1.阳性率仅30—60%，漏检率高，且只适
于一期、二期梅毒的筛查.
当等因素。
2.受制于取材不当、制片不
院一般无此
3.需暗视野显微镜，基层医
设备。
精4品.课对件检验技师技术经验水平