结核病痰涂片及质量保证
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（3）载玻片只允许一次性使用，严禁清洗 后重复使用。
（4）载玻片只允许左侧1/3处标注实验室 序号。
（5）载玻片正面右侧2/3中央处均匀涂抹 成面积为10× 20mm的卵圆形痰膜。
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4、染色
（1）肉眼观察染色后的痰膜应呈均匀亮蓝 色，无红色斑块。
（2）将染色后的玻片放置在报纸上，如果 透过痰膜不能分辨报纸上的文字，则表明 该玻片涂抹过厚。
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（一）室内质量控制
室内质量控制(Quality
Control,QC)指实验室内部的操作规程、
设备和耗材、痰标本收集、染色剂制备、
涂片制备和染色、显微镜维护、显微镜镜
检、结果登记和报告、以及痰片保存等整
个过程的内部检查和监测。
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1、痰标本的收集
（1）容器：采用WHO推荐的国际通用螺旋盖痰 瓶，或可密封塑料盒、蜡纸盒收集痰标本（参考 规格：直径4厘米，高度2厘米）。痰容器应标明 病人姓名、日期、编号（初诊病人门诊序号或随 访病人登记号）和容器序号1、2、3（1=当日 即时痰，2=夜间痰，3=次日晨痰）。
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3、基层只从事涂片镜检的实验室只拥有 一间独立房舍的情况下，相对洁净区（镜 检区、登记区）与污染区（涂片、染色区） 要有明显区分。
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（二）痰标本的收集和运送
干酪痰、血痰或粘液痰为合格标本，量应 为3-5毫升。
难以获得合格标本时，也应进行细菌学检 查，但应注明标本性状，以供分析结果时 参考。
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2、抗酸染色液制备
（1）有染色液制备配方和配制纪录。 （2）染色液试剂瓶须标明染色液名称、浓
度和制备时间。 （3）染色液置于棕色瓶内存放，避光保存。
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3、载玻片
（1）新载玻片应经95%乙醇脱脂，检查 无划痕后，方可使用。
（2）一张载玻片只能涂抹1份痰标本。
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（四）细菌学常规检查的注意事项
选择痰标本中脓性、血样、干酪样的部分涂 片阳性率较高；
一张玻片只涂一份标本，玻片一次性使用， 防止交叉污染；
打开痰盒、涂抹痰膜、烧灼接种环时容易产 生气溶胶，应注意正确操作和自身防护；
石炭酸复红初染时必须加温。
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常见误差原因
见下表
握差
3.镜检技术能力差 医学课件ppt
4.显微镜存在问题
建议 1.对技术人员复训 2.对假阳性涂片重新染 色并复检
1.2.3.对技术人员复训 4.现场检查显微镜状态 5.重新购置质量合格的 染料并重新配制染液
1.2.3.对技术人员复训 4.现场检查显微镜工作 状态
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(六)废弃标本和污染物的处理
废弃标本、痰盒和污染物均须经高压蒸汽 灭菌后方能丢弃或清洗；
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常见类型 可能原因
假阳性 （FP）
1.例如染料沉渣或结晶等被误 识为抗酸杆菌
2.原始报告后着色的抗酸杆菌 退色
假阴性 （FN）
1.观察涂片的视野数量不够 2.镜检技术能力差 3.染色操作不规范 4.显微镜存在问题 5染液质量差
量化误差 1.观察涂片的视野数量不够 （QE） 2.阳性涂片的分级报告标准掌
结核病 痰涂片检查及
质量保证
一、痰涂片检查
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（一）结核病细菌实验室布局原则
1、结核病细菌学检查要有独立的实验室， 不得与其他实验室混用，最好为P3级实验 室；
2、培养基制备、洗刷等相对洁净的操作与 涂片镜检、培养前处理、药敏试验等污染 操作要有独立分开的场所，最好分别在专 用的房间进行；
收集标本的容器应采用国家参比室推荐的 标准痰瓶，或采用直径4厘米、高2厘米的 广口塑料（或蜡纸）的或密闭容器。
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容器上应注明与检验单一致的病人姓名、 编号及日期。
需送上一级实验室检查的痰标本应置4℃冰 箱保存，外送前认真核对检验单与痰瓶上 标注，放专用的冰盒内运送，或用纸袋、 塑料袋封扎牢后顺序放入包装盒，盒外注 明请勿倒置标志。
（2）痰标本性质：干酷痰、血痰、粘液痰为合 格标本；唾液或口水为不合格标本，除照常进行 涂片检查外，应要求患者重新送检。
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（3）初诊病人应收集3份痰标本（当日即 时痰、夜间痰或次日晨痰），治疗中或复 诊随访病人按期每次收集2份痰标本（当日 即时痰、当日痰或次日晨痰）。
（4）对当日不能进行涂片检查的痰标本， 须置于4℃冰箱保存，注意防止痰液干涸或 污染。
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（三）痰涂片操作流程及显微镜检 报告方式
直接涂片法操作流程：
1、涂痰膜（大小10×20㎜），自然干燥
2、复红加热初染5分钟
3、流水冲洗
4、盐酸酒精脱色3分钟(必要时重复脱色，但不 要过度）
5、流水冲洗
6、美兰复染30秒
7、流水冲洗
8、自然干燥，镜检
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（3）染色后的痰膜脱落部分应小于整个涂 抹面积的10%。
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5、镜检要求
如需焚烧处理，须置于焚烧炉内彻底焚化。 焚化不彻底或暴露焚烧是危险的；
专业处理：
试验操作工作面应以3%石炭酸或其他可 靠的消毒液擦拭，再用紫外线灭菌灯照射 30分钟。
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二、痰涂片镜检的实验室质量 保证
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按照世界卫生组织（World Health Organization)和国家结核病防治规划 (Nationaltuberculosis programme）的要求，在我国已全面推 行DOTS策略或DOTS策略得到良好的贯 彻执行的地区，为了持续提高结核病实验 室痰涂片检查的工作效率和可靠性，必须 建立我国结核病实验室质量保证系统网络。 在实验室内部质量控制的基础上，应用实 验室间质量检查和评估的方法，进行实验 室检查系统的评价，并通过采用一系列措 施改进和不断提高实验室业务总体水平。
显微镜检报告方式： 0条/300视野：萋-尼氏抗酸杆菌阴性 1-8条/300视野：实报菌数并重检 3-9条/100视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（+） 1-9条/10视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（2+） 1-9条/1视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（3+） ≥ 10条/1视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（4+）
（4）载玻片只允许左侧1/3处标注实验室 序号。
（5）载玻片正面右侧2/3中央处均匀涂抹 成面积为10× 20mm的卵圆形痰膜。
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4、染色
（1）肉眼观察染色后的痰膜应呈均匀亮蓝 色，无红色斑块。
（2）将染色后的玻片放置在报纸上，如果 透过痰膜不能分辨报纸上的文字，则表明 该玻片涂抹过厚。
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（一）室内质量控制
室内质量控制(Quality
Control,QC)指实验室内部的操作规程、
设备和耗材、痰标本收集、染色剂制备、
涂片制备和染色、显微镜维护、显微镜镜
检、结果登记和报告、以及痰片保存等整
个过程的内部检查和监测。
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1、痰标本的收集
（1）容器：采用WHO推荐的国际通用螺旋盖痰 瓶，或可密封塑料盒、蜡纸盒收集痰标本（参考 规格：直径4厘米，高度2厘米）。痰容器应标明 病人姓名、日期、编号（初诊病人门诊序号或随 访病人登记号）和容器序号1、2、3（1=当日 即时痰，2=夜间痰，3=次日晨痰）。
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3、基层只从事涂片镜检的实验室只拥有 一间独立房舍的情况下，相对洁净区（镜 检区、登记区）与污染区（涂片、染色区） 要有明显区分。
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（二）痰标本的收集和运送
干酪痰、血痰或粘液痰为合格标本，量应 为3-5毫升。
难以获得合格标本时，也应进行细菌学检 查，但应注明标本性状，以供分析结果时 参考。
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2、抗酸染色液制备
（1）有染色液制备配方和配制纪录。 （2）染色液试剂瓶须标明染色液名称、浓
度和制备时间。 （3）染色液置于棕色瓶内存放，避光保存。
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3、载玻片
（1）新载玻片应经95%乙醇脱脂，检查 无划痕后，方可使用。
（2）一张载玻片只能涂抹1份痰标本。
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（四）细菌学常规检查的注意事项
选择痰标本中脓性、血样、干酪样的部分涂 片阳性率较高；
一张玻片只涂一份标本，玻片一次性使用， 防止交叉污染；
打开痰盒、涂抹痰膜、烧灼接种环时容易产 生气溶胶，应注意正确操作和自身防护；
石炭酸复红初染时必须加温。
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常见误差原因
见下表
握差
3.镜检技术能力差 医学课件ppt
4.显微镜存在问题
建议 1.对技术人员复训 2.对假阳性涂片重新染 色并复检
1.2.3.对技术人员复训 4.现场检查显微镜状态 5.重新购置质量合格的 染料并重新配制染液
1.2.3.对技术人员复训 4.现场检查显微镜工作 状态
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(六)废弃标本和污染物的处理
废弃标本、痰盒和污染物均须经高压蒸汽 灭菌后方能丢弃或清洗；
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常见类型 可能原因
假阳性 （FP）
1.例如染料沉渣或结晶等被误 识为抗酸杆菌
2.原始报告后着色的抗酸杆菌 退色
假阴性 （FN）
1.观察涂片的视野数量不够 2.镜检技术能力差 3.染色操作不规范 4.显微镜存在问题 5染液质量差
量化误差 1.观察涂片的视野数量不够 （QE） 2.阳性涂片的分级报告标准掌
结核病 痰涂片检查及
质量保证
一、痰涂片检查
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（一）结核病细菌实验室布局原则
1、结核病细菌学检查要有独立的实验室， 不得与其他实验室混用，最好为P3级实验 室；
2、培养基制备、洗刷等相对洁净的操作与 涂片镜检、培养前处理、药敏试验等污染 操作要有独立分开的场所，最好分别在专 用的房间进行；
收集标本的容器应采用国家参比室推荐的 标准痰瓶，或采用直径4厘米、高2厘米的 广口塑料（或蜡纸）的或密闭容器。
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容器上应注明与检验单一致的病人姓名、 编号及日期。
需送上一级实验室检查的痰标本应置4℃冰 箱保存，外送前认真核对检验单与痰瓶上 标注，放专用的冰盒内运送，或用纸袋、 塑料袋封扎牢后顺序放入包装盒，盒外注 明请勿倒置标志。
（2）痰标本性质：干酷痰、血痰、粘液痰为合 格标本；唾液或口水为不合格标本，除照常进行 涂片检查外，应要求患者重新送检。
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（3）初诊病人应收集3份痰标本（当日即 时痰、夜间痰或次日晨痰），治疗中或复 诊随访病人按期每次收集2份痰标本（当日 即时痰、当日痰或次日晨痰）。
（4）对当日不能进行涂片检查的痰标本， 须置于4℃冰箱保存，注意防止痰液干涸或 污染。
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（三）痰涂片操作流程及显微镜检 报告方式
直接涂片法操作流程：
1、涂痰膜（大小10×20㎜），自然干燥
2、复红加热初染5分钟
3、流水冲洗
4、盐酸酒精脱色3分钟(必要时重复脱色，但不 要过度）
5、流水冲洗
6、美兰复染30秒
7、流水冲洗
8、自然干燥，镜检
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（3）染色后的痰膜脱落部分应小于整个涂 抹面积的10%。
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5、镜检要求
如需焚烧处理，须置于焚烧炉内彻底焚化。 焚化不彻底或暴露焚烧是危险的；
专业处理：
试验操作工作面应以3%石炭酸或其他可 靠的消毒液擦拭，再用紫外线灭菌灯照射 30分钟。
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二、痰涂片镜检的实验室质量 保证
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按照世界卫生组织（World Health Organization)和国家结核病防治规划 (Nationaltuberculosis programme）的要求，在我国已全面推 行DOTS策略或DOTS策略得到良好的贯 彻执行的地区，为了持续提高结核病实验 室痰涂片检查的工作效率和可靠性，必须 建立我国结核病实验室质量保证系统网络。 在实验室内部质量控制的基础上，应用实 验室间质量检查和评估的方法，进行实验 室检查系统的评价，并通过采用一系列措 施改进和不断提高实验室业务总体水平。
显微镜检报告方式： 0条/300视野：萋-尼氏抗酸杆菌阴性 1-8条/300视野：实报菌数并重检 3-9条/100视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（+） 1-9条/10视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（2+） 1-9条/1视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（3+） ≥ 10条/1视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（4+）