PCR实验室区域划分、压差设计【最新版】
PCR实验室各房间的压差见解
PCR实验室各房间的压差见解对于实验室有所了解的人相信大家都知道，PCR实验室最主要的还是各房间的气流压差控制，特别是扩增和产物区的气流是不能相互串通的，以免引起交叉污染，检测提取数据重叠失效等。
(对于房间的洁净度要求可以定位准洁净室标准和十万级标准即可);所以根据PCR操作流程方向，试剂准备，标准制备，扩增区，产物分析区。
相对压差也应从试剂准备至产物分析方向由高到低的过程。
不过在实际的使用调剂过程中我们会遇到缓冲的气压很难调到设定值，若扩增和产物缓冲区的-5~-10Pa，在调试过程中会出现压差不平衡的问题，比如洁走廊往缓冲方向流入缓冲就是小负压室，缓冲再被动流入负压内室就应变为正压，从而缓冲间排风大于送风量，也就是送风设置为关闭状态后基本可以实现负压的设定值，因此关闭送风维持负压状态是不其实我们只要了解PCR关键性能后也可以取另外的方式来实现气流合理性的控制，比如PCR缓冲间理解为第二气阀室(室内与缓冲间是两层隔离屏障，洁净走廊对外是第一层屏障)，所以缓冲间的设置为相对或者绝对的正压值是很有必要也是符合使用标准的。
对于无菌负压洁净间我们经常会碰到尘埃粒子检测不达标的问题，本人经过多次的现场考察和多年的检测技术经验可以得出以下两个问题:尘埃粒子问题，房间的负压设定值越高其洁净难度也就会越高，对于我们施工的工艺要求也就越高，顾名思义负压洁净间的大气压要比室外空气大气压力低，洁净间根据要求设计负压值越高，相对室外大气压值就会相差越大，如果施工工艺不到位就会导致负压洁净间的墙壁接缝，照明灯具电源线孔，吊顶板材开孔的高翔箱体缝隙，墙壁开孔的强弱电插座即插座孔等都是室外非经过处理的气压空气进入负压洁净间的路径，从而导致负压洁净间的尘埃粒子超标的现象。
负压洁净间的洁净级别和缓冲间洁净级别应一致或更高，缓冲间和负压间的洁净级别一致或更高级别后刘瑞负压洁净间的洁净气体才会一致，洁净级别才会有保障。
PCR实验室
PCR实验室PCR实验室设计方案一、设计要求1.概述PCR实验室是用于临床基因扩增实验的专门实验室，可检测艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病。
该实验方法具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点，但需要配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。
本文主要从实验室平面布局、空调通风系统设计、气流控制和污染防制几个方面对PCR实验室进行设计。
2.PCR实验室平面布局为避免交叉污染，实验室应分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。
各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。
3.实验室空调通风系统设计及压力控制为保证各实验区的压力要求和避免交叉污染，宜采用全送全排的气流组织形式，并严格控制送、排风的比例。
4.污染的预防与控制实验室应采用防护措施，如安装紫外线灯、使用消毒剂等，避免污染的发生。
二、设计方案根据设计要求，实验室平面布局应分为四个单独的工作区域。
各区域之间应通过传递窗进行试剂及样品传递，避免交叉污染的可能性。
空调通风系统应采用全送全排的气流组织形式，并严格控制送、排风的比例，以保证各实验区的压力要求。
同时，实验室应采用防护措施，如安装紫外线灯、使用消毒剂等，避免污染的发生。
三、设计图纸1.平面布局图2.风口平面图3.通风管道布局图4.照明线路分布图5.插座线路分布图6.电力系统图1.严格控制实验室人员进出，非实验相关人员禁止随意进出，必要时应设置独立通道和进出门。
2.实验区域应使用带有明显标志的工作服，不得将本区工作服带至其他区域。
3.尽量减少在实验区内不必要的走动，以减少交叉污染的可能性。
4.扩增产物分析区是最主要的污染来源，废液和一次性材料应经消毒液浸泡后远离实验室处理。
5.扩增产物分析区可能用到有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护。
完备的实验室配套设施是保证实验工作必要条件，应根据实验内容配备相应设备和仪器，如超净工作台、离心机、加样器等。
PCR实验室设计说明分析
PCR实验室设计说明PCR实验室分为四个区域，进入各工作区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。
工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出，四区域分别为：1.试剂配制区n2.样品处理区n3.核酸扩增区n4.产物分析区n如使用全自动分析仪，区域可适当合并, 三四区可合并为扩增产物分析。
各区的功能是：1.1. 1 试剂准备区：扩增试剂的配制、分装和保存。
1.1. 2 样品处理区：样品登记、分装；核酸提取、保存和加样。
1.1.3扩增产物分析区：扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
1.2 扩增前区与扩增后区应严格分开，须使用不同的房间，两区之间最好有一定的间隔。
1.3 使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
1.4 在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内1.4. 1 在生物安全柜内操作。
1.4. 2 每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材。
1.4. 3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。
1.4.4用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
设计要求：PCR实验室可以是分散形式，也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。
完成一组PCR实验，通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程，若实验工艺需要，还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式PCR实验室所谓分散形式PCR实验室，是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远，呈分散布置形式。
对于这种布置形式的PCF实验室，由于各个实验之间不易相互干扰，因此无需特殊条件要求。
二、组合形式PCF实验室所谓组合形式PCR实验室，是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置，组成独立实验区域的形式。
对于组合形式PCF实验室，由于各个实验间集中布置，容易造成相互干扰，因此，对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。
各室在入口处设缓冲间，以减少室内外空气交换。
临床PCR实验室的分区设计及工作流程
标本制备区
经高温温育后的标本，应冷至室温后再离心。 标本制备的全过程中都应戴一次性手套，并经常 更换（感觉有污染时）。 设备都应定期或在有明显已知污染后，使用中性 消毒剂如异丙醇、戊二醇等或10%次氯酸钠溶液 消毒，使用10%次氯酸钠溶液消毒后，应再用 70%乙醇洗涤去除残留的次氯酸钠。 生物安全：洗眼器，并配备一个急救箱，箱内可 放置75%酒精、络合碘、棉签、创可贴等必要的 急用药具。
门 产物分析区
门 试剂准备区
门
外走廊
门
B
扩增及产物 分析区
标本制备区
试剂准备区
门
门
门
外走廊
门
标本制备区
空气流向
门
扩增及产物分 析区
空气流向
空气流向
试剂准备区
门 门
门
扩增和产 物分析区
其他实验室
空气流向
试剂准备区
其他实验室
空气流向
其他实验室
走廊
走廊
其他实验室
空气流向
其他实验室
其他实验室
其他实验室
标本制备区
“十六字口诀”
方便工作
产物分析区
扩增区
标本制备区
试剂准备区
传递窗
传递窗
传递窗
空气流向
空气流向
空气流向
空气流向
缓冲间
缓冲间
缓冲间
专用走廊
工作流向
符合基本要求的临床PCR实验室的条件
（1）试剂准备区、标本制备区和扩增及产物分析区等三 个或四个区域在物理空间上，必须是完全相互独立的，各 区域无论是在空间还是在使用中，应始终处于完全的分隔 状态，不能有空气的直接相通。 （2）各区的可移动的仪器设备及各种物品包括实验记录 本、记号笔、试管架及清洁用具等必须专用。 （3）应在标本制备区、扩增及产物分析区等相对有可能 出现“污染物”的区域安装排风扇或其它排风和有效的装置， 以使空气按试剂准备区标本制备区扩增（及产物分析） 区方向流动。
PCR实验室平面图
PCR实验室平面图注：传递窗; ; ：排风路线；分子诊断室平面布局示PCR前准备区:离心机、混匀器、冰箱（4℃、—20℃）、微量加样器一套、离心管架、消耗品(一次性手套、带滤芯吸头、离心管、玻璃器皿）、紫外线灯、专用工作服、办公用品、试剂样本处理区：台式高速离心机、混匀器、冰箱(4℃、—20℃)、微量加样器一套、通风柜、紫外线灯、离心管架、消耗品（一次性手套、带滤芯吸头、离心管、玻璃器皿)专用工作服、办公用品、试剂检测区：荧光PCR检测仪、紫外线灯、专用工作服、办公用、一次性手套*注：1、有关实验室管理规范请严格按照行业行政主管部门颁布的有关基因扩增检验实验室的管理规范执行。
2、实验室应按试剂配制区、样本处理区、扩增检测区分隔使用.工作流程:各区物品均为专用，不得交叉使用，避免污染。
操作过程应工作服、帽、鞋、手套等穿戴齐全，避免各种试剂或样品与皮肤接触,应及时通知当地卫生防疫部门。
3、试剂盒不适用于肝素抗凝的血浆，因为肝素是公认的对PCR反应有抑制作用的物质.4、反应液分装时应尽量避免产生气泡，并注意防止泄漏，以免荧光物质污染仪器。
5、实验中用过的吸头请直接打入盛有1％次氯酸钠的废物缸内，与其他废弃物品一同在指定的地点进行焚烧或毁弃。
6、实验结束后应立即清洁工作台，工作台及各种实验用品应定期用1%次氯酸钠、75％酒精或紫外线进行消毒。
7、所有的待检测样本均应视为传染性物质并严格执行实验室生物安全要求进行操作和处理。
8、试剂盒的阴性对照、强阳性对照在使用过程中均应视为潜在的传染源并严格按照实验室生物安全要求进行操作。
9、离心管、吸头一次性耗材等在实验前应全部高压灭菌。
10、建议不使用溶血、高胆红素样本。
PCR实验室区域划分、压差设计【最新版】
PCR实验室区域划分、压差设计目前PCR应用已得到长足的发展，已成为疫病诊断，疫情控制等方面的有力工具，为了避免在PCR方法中出现污染及出现假阳性和假阴性结果等现象，保证结果的准确性，在实验室环境安全控制上严格做到实验室独立区域设计，功能分区明确，保证实验室洁净环境，人流物流严格分流，设计合理的压力梯度，形成有序的气流组织方向，切实做到避免交叉污染。
PCR是聚合酶链式反应(POIymeraSeChainReaCtiOn)的简称，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA 复制。
避免污染是PCR实验室设计建设首要考虑重点由于PCR技术的高度敏感性，PCR技术要求高、影响因素多，从样品制备到结果的产生，任何一处细微的失误均会造成结果的偏差，导致样品的假阳性和假阴性结果。
PCR实验室研究过程中，很多操作都会产生气溶胶，比如离心、混匀等操作闵。
为保证环境安全，PCR实验室设计建设需独立区域设计，避免与其余环境的交叉混杂，下面SICo1AB根据我们做过的工程实例从平面布局、净化区域划分，人物流设计和压差控制等方面具体介绍。
一、标准规范《实验室生物安全通用要求》国家标准GB19489-2008《临床基因扩增检验实验室工作规范》卫医发[2002]8号文《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》卫医发[2002]10号文《临床基因扩增检验实验室设计标准》卫医发[2002]10号文附件《基因检验实验室技术要求》国家质监检验总局SN/T1193-2003《洁净室及相关受控环境-生物污染控制》国际标准ISO14698《洁净厂房设计规范》国家标准GB500732013《洁净室施工及验收规范》GB50591-2010《室内空气质量标准》国家标准GB/T18832002《生物安全实验室建筑技术规范》国家标准GB50346-2011《病原微生物实验室生物安全管理条例》卫生部（2004・11.12）二、PCR实验室区域划分1、功能划分试剂准备区、标本制备区、扩增反应一区、纯化区、扩增反应二区、后纯化区（如上布局图）。
pcr实验室分区设计原则
pcr实验室分区设计原则PCR实验室分区设计原则PCR实验室是进行聚合酶链反应（PCR）的重要场所，为了保证实验的准确性和可靠性，实验室的分区设计十分重要。
合理的实验室分区设计可以有效避免交叉污染，确保实验结果的准确性。
在PCR实验室的分区设计中，需要考虑以下几个原则。
1. 分区目标PCR实验室的分区设计应该根据实验室所需达到的目标进行规划。
通常情况下，PCR实验室需要分为样品处理区、试剂配制区、PCR反应区、放射性PCR区和后PCR处理区等。
每个区域都有特定的功能和要求，不能混淆使用。
2. 分区布局PCR实验室的分区布局应该合理，使得各个区域之间的流动方便，并且避免交叉污染。
通常情况下，样品处理区和试剂配制区应该位于实验室的最远端，以防止可能的交叉污染。
PCR反应区和放射性PCR区应该位于离样品处理区和试剂配制区较远的位置，以确保实验结果的准确性。
3. 材料和设备分区PCR实验室的分区设计还需要考虑材料和设备的分区。
样品处理区应该配备有必要的实验台和设备，如离心机、冰箱等。
试剂配制区应该配备有必要的试剂和溶液配制设备，如电子天平、磁力搅拌器等。
PCR反应区应该配备有PCR仪、电动注射器等PCR相关设备。
放射性PCR区应该配备有放射性同位素操作台和辐射防护设备。
每个区域的设备和材料应该明确分区，避免混用。
4. 分区操作规范PCR实验室的分区设计还需要考虑操作规范。
样品处理区应该采取一定的操作规范，如戴手套、使用一次性试剂盒等，以避免样品污染。
试剂配制区应该采取严格的试剂配制操作规范，保证试剂的准确性和纯度。
PCR反应区和放射性PCR区应该有严格的操作规范，包括操作人员的防护措施和设备的消毒等。
5. 清洁与消毒PCR实验室的分区设计还需要考虑清洁与消毒。
样品处理区和试剂配制区应该定期进行清洁和消毒，以防止交叉污染。
PCR反应区和放射性PCR区应该定期进行辐射消毒，确保实验结果的准确性。
6. 安全措施PCR实验室的分区设计还需要考虑安全措施。
PCR实验室分区设置和要求
PCR实验室分区设置和要求PCR实验室是进行聚合酶链反应（PCR）技术的地方，是分子生物学研究和基因工程的重要仪器设备之一、PCR实验室的分区设置和要求对实验室的正常运行和安全保障起着重要的作用。
下面将对PCR实验室的分区设置和要求进行详细的介绍。
一、PCR实验室的分区设置2.试剂配制区：用于准备PCR反应所需的试剂配制工作。
该区域应有充足的工作台、洗手盆和排气设施，同时应有专门的储存柜用于存放化学试剂和药品。
3.核酸提取区：用于提取样品中的核酸。
该区域应设有抽风机、超净台等设备，并应配备足够数量的离心机、沉淀机等设备和试剂。
4.PCR扩增区：用于进行PCR反应。
该区域应设有PCR仪、聚合酶、核酸保护酶等设备，并应配备PCR工作站和PCR反应管架。
5.扩增产物分离区：用于扩增产物的分离和检测。
该区域应设有电泳仪、紫外线透射仪、电源电压源等设备，并应配备足够数量的电泳槽、电泳胶和电极。
6.数据分析区：用于PCR反应产物的测序和数据分析。
该区域应设备计算机和相关软件，并应配备打印机和其他科学仪器。
7.消毒区：用于对实验室器材和废弃物的消毒处理。
该区域应设有自动消毒器、高温高压灭菌器、生物废弃物处理设施等设备，并应有防护用品和标识，确保实验室的安全操作。
二、PCR实验室的要求1.安全性要求：实验室应具备必要的安全防护设施，如气体检测报警设备、紫外线灯、抽风设备等，确保实验人员的安全。
同时，实验室的进出口应设有安全门禁系统，确保只有经过授权的人员才能进入实验室。
2.净化要求：PCR实验室应具备净化空气的能力，以保证PCR反应的准确性和可靠性。
实验室应装备高效过滤器，以去除空气中的微粒和有害气体，并定期对过滤器进行更换和清洁。
3.温度和湿度控制：PCR实验室应控制在恒定的温度和湿度范围内，以保证PCR反应的稳定性。
实验室应安装空调和除湿设备，并设置合适的温湿度控制系统。
4.设备要求：实验室应配备PCR反应仪、离心机、水浴锅、超净台、电泳仪、冷冻离心机等必要的仪器设备，并且要保证这些设备的正常运行和及时维护。
(完整版)实验室分区
实验室分区以PRC 实验室为例（PCR 即聚合酶链式反应），是分子生物学研究和实验的常规方法，也是生物学、医学临床等领域广泛应用的实验技术。
其特点是能将微量的DNA 大幅增加，实验室通常分为四个区域，即：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区（如使用全自动分析仪，区域可适当合并）。
进入各个区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。
工作人员离开时，不得将工作服带出。
1.试剂储存和准备室（标本制备区），仪器主要配置有：冷冻离心机、生物安全柜、冰箱、可移动紫外灯、全自动力核酸蛋白纯化仪、专用工作服和工作鞋等。
2.扩增反应混合物配制和扩增区配置有：冰箱、高速离心机、超净工作台、PCR 仪（要求负压状态）可移动紫外灯、微量加样器、核酸扩增仪等。
3.扩增产物分析区主要配置有：移液器、振荡器、超净工作台、毛细管电泳仪、冰箱、离心机、微量加样器、可移动紫外灯等。
通风柜是安全处理有害、有毒气体或蒸汽的通风设备，作用是用来捕捉、密封和转移污染物以及有害化学气体，防止逃逸到实验室内，这样通过吸入工作区域的污染物，使其远离操作者，来达到吸入接触的最小化。
通风柜内的气流是通过排风机将实验室内的空气吸进通风柜，将通风柜内污染的气体稀释并通过排风系统排到户外后，可以达到低浓度扩散；1、风量的计算方法：根据面风速来确定排风量（面风速的一般取值为：0.3~0.5 m3/h）计算公式：G=S·V·h·μ=L·H·3600·μ其中 G：排风量S：操作窗开启面积V：面风速h: 时间（1 小时）L: 通风柜长度H: 操作窗开启高度μ: 安全系数（1.1~1.2）例：1200L 的通风柜其排风量计算如下：G：1.2*0.75/2*0.8*3600*1.2=1555 m3/h经验值：1200L 通风柜排风量一般为1500 m3/h1500L 的通风柜排风量一般为1800 m3/h1800L 的通风柜排风量一般为2000 m3/h。
PCR工作区域划分及仪器设备配置标准
工作区域仪器设备配置标准
一．试剂储存和准备区
1.2-8C和-15C冰箱
2.混匀器
3.微量加样器（覆盖1-1000ul）
4.移动紫外灯（近工作台面）
5.消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带
滤心）
6.专用工作服和工作鞋
7.专用办公用品
二．标本制备区
1.2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱
2.高速台式冷冻离心机
3.混允器
4.水浴箱或加热模块
5.微量加样器（覆盖1-1000ul）
6.可移动紫外灯（近工作台面）
7.超净工作台
8.消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带
滤心）
9.专用工作服和工作鞋
10.专用办公用品
如需处理大分子DNA，应具有超声波水浴仪。
三．扩增反应混合物配制和扩增区
1.核酸扩增仪
2.微量加样器（覆盖1-1000ul）
3.可移动紫外灯（近工作台面）
4.消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带
滤心）
5.专用工作服和工作鞋
6.专用办公用品
四．扩增产物分析区
视检验方法不同而定。
基本仪器设备如下：
1.微量加样器（覆盖1-1000ul）
2.可移动紫外灯（近工作台面）
3.消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头（带滤心）
4.专用工作服和工作鞋
5.专用办公用品。
pcr实验室压差设计要求
pcr实验室压差设计要求PCR实验室压差设计要求PCR（聚合酶链反应）是一种常用的分子生物学技术，用于扩增DNA片段。
PCR实验室是进行PCR实验的关键环境，其中压差的设计要求对实验结果的准确性和稳定性有着重要影响。
压差是指PCR实验室内外的气压差异。
在PCR实验中，为了防止污染和误差，实验室内部应保持正压状态，即实验室内的气压高于外部环境气压。
设计PCR实验室压差时，需要考虑以下几个方面的要求。
1. 气密性要求：PCR实验室应具备良好的气密性，确保实验室内部气压稳定。
实验室门窗、通风系统以及其他设备的密封性应达到要求，以防止气压泄漏。
2. 压差控制要求：为了保持PCR实验室内正压状态，需要控制实验室内外的气压差异。
通常使用空气处理设备，如空调、过滤器、新风系统等来控制气压差。
这些设备应具备稳定的控制性能，能够根据实验室内部情况进行调整。
3. 进出室要求：为了避免气压泄漏，PCR实验室的进出室通道应设计合理。
通常采用气密门、风淋室等设施来控制气压差的变化。
在实验室门口和进出室通道的设计中，需要考虑气压平衡、气流方向和速度等因素。
4. 实验室布局要求：PCR实验室的布局应合理，以保证气压差的控制。
实验室内应有明确的区域划分，如样品处理区、PCR反应区、放射性物质区等。
不同区域之间应设置适当的隔离设备，以防止交叉污染和气压泄漏。
5. 环境要求：PCR实验室的环境应满足一定的要求，以保证实验的准确性和稳定性。
实验室内部应保持适宜的温度、湿度和洁净度。
特别是温度和湿度的控制对PCR实验影响较大，需要使用恒温器和湿度调节设备来控制环境条件。
6. 设备要求：PCR实验室的设备应符合标准化要求，并具备良好的性能。
例如，PCR仪、离心机、电源等设备应经过校准和质量控制，以保证实验结果的准确性和可靠性。
总结起来，PCR实验室压差设计要求包括气密性要求、压差控制要求、进出室要求、实验室布局要求、环境要求和设备要求等方面。
PCR分区图及介绍
接样室实验员进入接样室后，更换实验室专业服及手套等。
外来送样人员通过传递窗传递样品，接收样品时，实验员做好样品登记（如养殖场信息，血清类型，检测项目，检测数量等）。
对接收的样品进行消毒处理，先在外包装四周喷洒消毒剂。
如果外包装是纸箱子，则打开纸箱子，露出泡沫箱，然后在纸箱子内侧和泡沫箱四周全部喷洒消毒剂，作用30分钟（为防止喷洒的消毒液干燥，中途再喷洒一次），将消毒后的样品放入样品制备室。
配液室配置：1. 至少为-20℃及2-8℃双层冰箱，用于储存试剂(此屋不可存放样品)；2.一套移液器（10ul、50ul及200ul），用于配制反应液及加阴性对照；3.一台离心机，用于对反应液瞬时离心，防止泄露；4.其他相关耗材，如手套，1.5ml离心管，PCR仪配套反应管、盖，大小载板架，废液桶等。
备注：明确今天所做试验后在配液室拿出所需项目试剂盒，在该室按照说明书配制反应体系，配制完成后进行分液，加阴性对照。
然后将反应管放入传递窗。
不同区域内移液器及手套等不能混区，阳性对照放入传递窗。
样品制备室配置：1. 至少为-20℃及2-8℃双层冰箱，用于储存样品；配液室配好的反应液可先放置2-8℃冰箱冷藏（勿开管盖）。
2.一套移液器（10ul、200ul及1000ul），用于样品处理；3.一台离心机，用于对样品的提取等；4.研磨仪：研磨组织样品；5.生物安全柜：样品预处理及提核酸时需在安全柜内进行；6.紫外灯：实验结束后照射环境可防止气溶胶污染；7.其他相关耗材，如手套，1.5ml离心管，大小载板架，废液桶等。
备注：接收到的样品如无需立即检测可放入冰箱低温保存；需立即检测时则再次对自封袋消毒放入生物安全柜，进行样品处理，处理后的样品放入新的自封袋中，提取后的核酸及反应液放入传递窗进行下一环节。
不同区域内移液器及手套等不能混区。
加样室配置：1.一套移液器（至少一把10ul量程），用于加样品核酸及阳性对照；2.一台离心机，用于对样品核酸及阳性对照管瞬时离心，防止开盖时污染环境等；3.生物安全柜：加样（样品核酸及阳性对照）需在安全柜内进行；4.紫外灯：实验结束后照射环境可防止气溶胶污染；5.其他相关耗材，如手套，1.5ml离心管，大小载板架，废液桶等。
PCR实验室分区设置及要求,
用于RNA扩增检测的样本制备好以后，应 立即进行cDNA合成，因为cDNA链较RNA 稳定，保存相对容易。为保证逆转录反应 的需要，应在标本制备区设置一个以上的 温育装置。 cDNA合成的理想温度依所使用的酶而定， 倾向于使用一步法：即使用在扩增反应缓 冲液条件下具有逆转录活性的热稳定的 DNA聚合酶进行逆转录，其较cDNA合成后 再开盖以调节缓冲液或加入聚合酶进行扩 增发生污染的可能性降低。 待测RNA的cDNA拷贝须保存在标本制备区， 不得在本区对样本进行PCR扩增。
产物分析区
产物分析区工作细则 1. 操作者应穿本区工作服，戴双层手套、口罩。工作时关闭隔断门。 2. 电泳区备有小型、大型水平电泳槽，垂直电泳槽，以及 8×12 孔 HLA 基因分型专业电泳槽， 可作各种琼脂糖凝胶电泳， 聚丙烯酰胺 凝胶电泳检测，定性、定量检测核酸及蛋白质。 3. 200ul、20ul 加样器各 1 把，此外还备有 8 道排枪 1 把，均为电泳 区专用，不得拿出电泳区。 4. 电泳所用缓冲液与配胶所用缓冲液同期配制。 5. 上样缓冲液为 6×，使用时，取 1 份上样缓冲液，加 5 份样品，可 在封口膜上混均，也可在样品管中进行。注意：当对提取核酸进 行检测时，切不可将样品直接拿到电泳区检测，应在试剂准备区 外间把上样缓冲液点道封口膜上，取适量样品混均并记下样品顺 序，将点有样品的封口膜拿到电泳区检测。 6. 电泳缓冲液用量要合适，以刚好浸没过胶面为宜。过多溢出可能 有触电危险，过少影响电泳质量。 7. 电泳结束关闭电泳仪后才可取出凝胶成像。 8. 凝胶放入暗箱，关好暗箱门。电脑和凝胶成像仪上方的摄像设备 是清洁的，应摘下手套调节。 9. 按照凝胶成像仪操作规程调节获取满意的图象，照相后立即关闭 紫外灯并将凝胶取出，切勿使其在暗箱中干燥板结。 10.珍惜打印用纸，只在必要时打印图象。 11.每天工作结束后打开紫外灯照射 30 分钟。 12.每周一，三除尘并倒垃圾。 13.当机器发生故障时，立即上报负责人。
PCR实验室设计过程中如何合理划分区域
PCR实验室设计的分区通常包括试剂配置区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区，这四个重要区间可以是分散形式，也可以是组合形式；根据不同的实验工艺需求，还可增加样品粉碎过程，或对区域进行适当合并。
PCR实验室设计通常分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。
下面教你合理的进行实验室的区域划分，管理好你的实验室。
1、试剂准备区：用于试验试剂的准备。
该区域为正压，目的是防止污染物质溢入。
该区域内部又可分为3个区域：普通提取试剂的准备区、PCR试剂准备区和PCR主反应液准备区。
在普通提取试剂的准备区内准备一些样品核酸提取时所需的裂解液、提取液等；PCR试剂准备区用于PCR试剂的制备和保存。
例如准备引物、探针等PCR试剂。
为了防止交叉污染，避免反复冷冻和解冻，试剂存贮溶液应该被平均为小的工作体积，储存在这个房间以备后用：PCR主反应液准备区将进行主反应混合液(除了样品。
所有PCR所需试剂的混合)添加到PCR管的操作。
重要提示：不能将其它房间的材料(包括扩增、模板和目标核酸或阳性对照、供应品、或设备)带进试剂准备区。
2、样品准备区：该区域无压力设置要求。
该区域是用于对样品进行分样，将样品进行研磨、粉碎、匀浆的区域。
由于在这些粉碎、研磨和匀浆处理过程中会产生气溶胶，因此，存在阳性样品污染后续操作的可能性。
该区域与后面的区域应严格隔离，应放在与后面的三个区域隔开的独立的房间中。
在样品准备区内还可设立一个专用的封闭区或房间用于样品的接收和储存。
这个房间可以放置冰箱用于样品储存，应该和样品准备区其它区域隔离开。
样品准备区域的人员不得进入试剂准备区。
3、核酸提取区：核酸提取区是进行样品核酸提取的区域。
该区域为负压，目的是防止核酸溢出造成污染。
样品准备区又包括从样品中进行核酸提取和纯化的区域以及将核酸加到包含PCR主反应混合液管中的操作区域。
添加完样品后，PCR管的盖子要尽可能快地盖好。
PCR实验室要求
PCR实验室设计要求及功能分区PCR实验室分为四个区域，进入各工作区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。
工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出，四区域分别为：1.试剂配制区n2.样品处理区n3.核酸扩增区n4.产物分析区n如使用全自动分析仪，区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。
各区的功能是：1.1.1 试剂准备区：扩增试剂的配制、分装和保存。
1.1.2 样品处理区：样品登记、分装；核酸提取、保存和加样。
1.1.3 扩增产物分析区：扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
1.2 扩增前区与扩增后区应严格分开，须使用不同的房间，两区之间有一定的间隔。
1.3 使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
1.4 在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内：1.4.1 在生物安全柜内操作。
1.4.2 每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材。
1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。
1.4.4 用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
设计要求：PCR实验室可以是分散形式，也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。
完成一组PCR实验，通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程，若实验工艺需要，还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式PCR实验室所谓分散形式PCR实验室，是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远，呈分散布置形式。
对于这种布置形式的PCR实验室，由于各个实验之间不易相互干扰，因此无需特殊条件要求。
二、组合形式PCR实验室所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置，组成独立实验区域的形式。
对于组合形式PCR实验室，由于各个实验间集中布置，容易造成相互干扰，因此，对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。
各室在入口处设缓冲间，以减少室内外空气交换。
PCR实验室设计过程中如何合理划分区域
PCR实验室设计的分区通常包括试剂配置区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区，这四个重要区间可以是分散形式，也可以是组合形式；根据不同的实验工艺需求，还可增加样品粉碎过程，或对区域进行适当合并。
PCR实验室设计通常分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。
下面教你合理的进行实验室的区域划分，管理好你的实验室。
1、试剂准备区：用于试验试剂的准备。
该区域为正压，目的是防止污染物质溢入。
该区域内部又可分为3个区域：普通提取试剂的准备区、PCR试剂准备区和PCR主反应液准备区。
在普通提取试剂的准备区内准备一些样品核酸提取时所需的裂解液、提取液等；PCR试剂准备区用于PCR试剂的制备和保存。
例如准备引物、探针等PCR试剂。
为了防止交叉污染，避免反复冷冻和解冻，试剂存贮溶液应该被平均为小的工作体积，储存在这个房间以备后用：PCR主反应液准备区将进行主反应混合液(除了样品。
所有PCR所需试剂的混合)添加到PCR管的操作。
重要提示：不能将其它房间的材料(包括扩增、模板和目标核酸或阳性对照、供应品、或设备)带进试剂准备区。
2、样品准备区：该区域无压力设置要求。
该区域是用于对样品进行分样，将样品进行研磨、粉碎、匀浆的区域。
由于在这些粉碎、研磨和匀浆处理过程中会产生气溶胶，因此，存在阳性样品污染后续操作的可能性。
该区域与后面的区域应严格隔离，应放在与后面的三个区域隔开的独立的房间中。
在样品准备区内还可设立一个专用的封闭区或房间用于样品的接收和储存。
这个房间可以放置冰箱用于样品储存，应该和样品准备区其它区域隔离开。
样品准备区域的人员不得进入试剂准备区。
3、核酸提取区：核酸提取区是进行样品核酸提取的区域。
该区域为负压，目的是防止核酸溢出造成污染。
样品准备区又包括从样品中进行核酸提取和纯化的区域以及将核酸加到包含PCR主反应混合液管中的操作区域。
添加完样品后，PCR管的盖子要尽可能快地盖好。
pcr实验室 分区
pcr实验室分区
PCR实验室通常被分成多个区域，以确保实验的准确性和安全性。
以下是常见的PCR实验室分区：
1. 样品准备区：用于准备PCR反应液、样品处理和
DNA/RNA提取。
这个区域通常是无菌和干净的，以防止扩增反应中的污染。
2. PCR工作区：用于进行PCR反应，包括制备PCR反应物、装填样品到PCR板或管中，设置PCR仪等。
该区域需要保持无菌和干净，以防止外部DNA污染样品。
3. PCR扩增区：用于扩增PCR反应，通常是PCR仪所在的区域。
该区域需要保持无菌和准确的温度，以确保PCR反应的准确性和保真度。
4. 电泳区：用于分离和检测PCR扩增产物。
该区域通常包括电泳仪、凝胶制备和电泳装置等设备。
该区域需要保持清洁、无菌和电安全。
5. 数据分析区：用于分析PCR实验结果，包括读取和解释凝胶图像、计算扩增效率和产物浓度等。
该区域通常需要计算机和数据分析软件等设备。
此外，PCR实验室还需要设置样品存储区、试剂储存区、垃圾处理区等等，以确保实验材料和废物的正确处置和储存。
不
同实验室的分区设置可能会有所不同，具体的分区设计会根据实验室的实际情况和需求进行规划。
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PCR实验室区域划分、压差设计
目前PCR应用已得到长足的发展，已成为疫病诊断，疫情控制等方面的有力工具，为了避免在PCR方法中出现污染及出现假阳性和假阴性结果等现象，保证结果的准确性，在实验室环境安全控制上严格做到实验室独立区域设计，功能分区明确，保证实验室洁净环境，人流物流严格分流，设计合理的压力梯度，形成有序的气流组织方向，切实做到避免交叉污染。
PCR是聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)的简称，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。
避免污染是PCR实验室设计建设首要考虑重点
由于PCR技术的高度敏感性，PCR技术要求高、影响因素多，从样品制备到结果的产生，任何一处细微的失误均会造成结果的偏差，导致样品的假阳性和假阴性结果。
PCR实验室研究过程中，很多操作都会产生气溶胶，比如离心、混匀等操作闵。
为保证环境安全，PCR实验室设计建设需独立区域设计，避免与其余环境的交叉混杂，下面SICOLAB根据我们做过的工程
实例从平面布局、净化区域划分，人物流设计和压差控制等方面具体介绍。
一、标准规范
《实验室生物安全通用要求》国家标准GB19489-2008
《临床基因扩增检验实验室工作规范》卫医发[2002]8号文
《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》卫医发[2002]10号文
《临床基因扩增检验实验室设计标准》卫医发[2002]10号文附件
《基因检验实验室技术要求》国家质监检验总局SN/T1193-2003
《洁净室及相关受控环境-生物污染控制》国际标准ISO14698
《洁净厂房设计规范》国家标准GB50073 2013
《洁净室施工及验收规范》GB50591-2010
《室内空气质量标准》国家标准GB/T1883 2002
《生物安全实验室建筑技术规范》国家标准GB50346-2011《病原微生物实验室生物安全管理条例》卫生部(2004-11-12)
二、PCR实验室区域划分
1、功能划分
试剂准备区、标本制备区、扩增反应一区、纯化区、扩增反应二区、后纯化区(如上布局图)。
2、SICOLAB设计原则
按国家卫生部的要求，各实验区域必须是相互独立的，不能直通，每个独立实验区设有专门的闸间供工作人员换工作服和鞋，进入各工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从左边试剂准备区，标本制备区，扩增反应一区，纯化区，扩增反应二区到后纯化区，避免发生交叉污染。
3、为避免样本间的交叉污染，房间采取净化控制，总体设计为10万级。
闸间(缓冲间)设计为正压区，保证与外界环境隔离，避免从邻近区域进入本区域的气溶胶污染。
三、气流设计
人流物流设计各行其道，避免交叉混杂，整个区域设计一个公用走廊，工作区域之间设计试剂物品传递专用窗，做到人物分流。
1、物流:在试剂准备区与标本制备区、标本制备区与PCR扩增区之间，以及扩增区域和纯化区之间设计有电子连锁不锈钢传递窗，以单向进行试剂、标本等物品传送，配制的试剂通过单向传递窗由试剂准备区传递到标本制备区，处理过的标本通过单向传递窗由标本制备区传递到PCR扩增区，按照工艺流程逐次传递，避免返流。
单向物品传送系统既保障了标本试剂不受污染，又保障了标本试剂不污染环境。
2、人流:人员通过闸间分别进入各自实验区域，进出各实验区域需要在闸间区域更换洁净工作服，手消毒等。
三、压差设计
PCR实验室应设计为负压洁净室，通过压差控制，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染，并且降低扩增产物对人员和环境的污染。
各个实验室与非洁净区之间的闸间保持正压，＞10Pa，实验与闸间之间的气流组织方向为:试剂准备区空气流向闸间，标本制备区流向闸间，而PCR扩增区气流方向由闸间流向PCR扩增区，纯化区同理;
同时按照试剂单向流方向，各个实验室之间设计不同压力梯度来实现单向气流组织方向，由试剂准备区(+20Pa)、标本制备区(+15Pa)、扩增反应一区(-5Pa)、纯化区(-10Pa)、扩增反应二区(-20Pa)、到后纯化区(-25Pa)压力逐渐降低，形成单向负压压力梯度。
四、其它安全设施
PCR实验室为洁净空调系统，系统形式采用直流系统不回风，防止交叉污染;试剂准备间设计超净台，保证试剂免受空气环境污染;标本制备间设计生物安全柜，保证标本不污染室内环境，并保证标本免受环境污染。