API质量标准制定和分析方法开发
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• 色谱法 GC衍生法：半胱胺与氯甲酸甲酯反应，正戊烷萃取，空气干燥，乙酸乙酯 溶解，FID检测器测定 HPLC：柱前衍生生成荧光物质，液相检测；与水合乙醛酸反应，十六烷 基三甲基硫酸氢铵为离子对试剂在反相离子对色谱上分离，检测波长 265nm 离子色谱-电化学检测器（积分安培模式）
• 高效薄层色谱 • 毛细管电泳
供应商的检测项目及方法
• 性状 • 含量：99% 碘量法滴定 • 铁离子：20ppm • 干失：0.5% • 硫酸根：0.5% • pH：3-5 • 熔点：62-70℃
半胱胺有关物质方法
• 色谱柱：Waters Xselect CHS C18 250*4.6mm 5μm • 检测波长：200nm • 进样量：20µl • 柱温：30℃ • 流动相A：0.1%全氟丁基磺酸∶乙腈=85：15 • 流动相B：0.1%全氟丁基磺酸∶乙腈=70：30 • 梯度洗脱： • 稀释剂：0.01N盐酸水溶液 • 流速：1.0ml/min • 进样盘温度：2～8℃ • 样品浓度：1.5mg/ml
半胱胺盐酸盐工艺流程
NH2CH2CH2OH H2SO4
CS2 NH2CH2CH2OSO3H NaOH
H N
SH S
H2O HCl
HSCH2CH2NH2 HCl
半胱胺文献资料的检测方法
• 氧化还原法 直接碘量法 返还滴定法
• 光谱法 半胱胺与亚硝酸反应形成S-亚硝基衍生物，破坏剩余亚硝酸，以Hg2+水解 S-亚硝基衍生物，释放的亚硝酸与磺胺试剂生成偶氮染料，544nm亚硝基 衍生物 原子吸收测定硫原子
• TLC简单方便，常作为中间体及起始物料的 检测，一般不作为成品的检测方法。
• IC是离子色谱（严格讲也属于HPLC），适 用于检测各种阴阳离子，单糖，多糖，以 及氨基酸的检测，具备色谱法的所有优点， 在药品分析方法中有越来越多的应用。 主要有戴安及万通两家，各有优缺点。
GC的优点及适用范围
• 灵敏度高，理论塔板数高，分离度好 • 方法开发较为简便 • 技术成熟 • 一般用于具有挥发性物质或经过衍生具有
检测器
• FID：氢离子火焰检测器。通用检测器，碳氢含量 较高的化合物信号强，灵敏度高，适用于大多数 挥发性物质
• ECD：电子捕捉器，适用于含卤素的化合物检测。 残留溶剂检测氯仿尽量采用此检测器，FID灵敏度 较差，很难达到限度要求
• 氮磷检测器：含氮磷硫等元素的化合物灵敏度高， 在残留农药的检测方面有很广的应用
• 对高于ICH要求的，可基于下列理由做适当的限度调整 药典专论或科学文献 主要代谢产物 与原研要进行杂质对比 药理毒理研究
相关文献
• 法定药典 • 原研厂家标准 • 专利文献 • 学术论文
制剂对API的相关要求
• 剂型： 注射剂：内毒素、澄清度 口服制剂：晶型及颗粒度对制剂的溶出曲 线（即生物利用度）影响很大 但速释药物晶型和颗粒度可不做要求，比 如口崩片
• 根据化合物的机型选择合适的色谱柱，达到最佳的分离效果。不同的溶剂 组合采用不同的色谱柱，最常用为HP-5和DB624。气相色谱法采用保留时 间进行结构确认时，一定要用不同极性的色谱柱进行定位，同时保留时间 一致，才可判定为同一物质。
• 涂膜厚度：0.1um到1um等多种规格，一般涂膜厚度越大，保留性越强， 色谱柱寿命越长；拖尾严重，热稳定性较差，气质联用（柱流失更少，干 扰小）一般采用涂抹厚度较小的色谱柱
• 文献参考 USP论坛，专利文献等，对于发 酵类的药物，杂质谱研究很难，一般最好 在已有注册方法基础进行微调，以免发生 严重问题
• 类似化合物的方法等
色谱方法的开发
• 液相方法包括流动相组成（包括缓冲液的 类型，盐浓度，pH值，有机溶剂的种类， 比例等），梯度程序，色谱柱型号，柱温， 以及检测器的选择，通常这些配置相互关 联；同时还包括样品浓度的设定，稀释液 选择，样品溶液制备的振摇或超声时间， 溶解所采用的量瓶材质等较多参数。
质量标准建立的依据
1.QBD理念、TQC、ICH指导原则 2.相关文献 3.验证批API的实际质量情况 4.制剂对API的相关要求 5.最终的质量标准
• QBD：质量源于设计，根据工艺情况制定 合理的检测项目，分析方法及质量标准
• TQC：全面质量管理，从原料，中间体到 成品的全程控制 杂质谱
• ICH：人用药品国际协调会议 分析研发的 指导性原则
.验证批API的实际质量情况
有关物质 对涉及到的已知杂质进行研究分析 工艺中存在的杂质根据实际情况列入质量标准 降解杂质根据长期稳定性结果订入 成品中没有的且不会降解产生的的进行不存在验证，存在 的列入标准
晶型：根据晶型制定合理的检测方法 其它项目 稳定性的各检测项目的趋势及结果
分析方法开发与验证
• 热导检测器：通用型检测器，灵敏度低，应用较 少。元素分析仪采用此检测器，可检测CO2， H2O等其他检测器无法检测的化合物。
进样方式
• 直接进样法：灵敏度低，干扰大，重现性也较差， 进样体积一般1ul以下，主要应用于高沸点物质以 及归一化法测定纯度
• 顶空进样：干扰小，灵敏度高，重现性好。低沸 点物质的分析的首选方法。 参数设置：顶空温度一般90℃，特殊情况可升高， 一般要求低于溶剂沸点。顶空平衡时间一般15分 钟左右，太短未达平衡，重现性差；太长药物降 解，产生未知峰，同时顶空瓶密闭性变差，影响 重现性
• 水溶性药物的pH值 • 结构中含手性官能团药物的比旋度 • 成盐药物的酸碱离子含量 • 微生物限度 • 口服药物的颗粒度分布 • 作为注射剂原料药的澄清度，内毒素 • 药品中添加的辅料稳定剂的含量 • 晶型药物的晶型分析检测项目，如DSC，X衍射，红外等 • 含结晶水药物的结晶水分析：加测TGA，确定结晶水的个数 • 非日常检测的项目（成品研究项目）
杂质危害性：信号杂质，一般杂质，高危害性毒性（基因毒性及致癌性物质） 信号杂质：如钠离子，氯离子等本身无危害性，对成品稳定性也无影响，是 考察工艺的控制水平的一类杂质 潜在基因杂质在最后一步引入，需列入最重质量标准，不是最后一步引入的 可在中间环节控制 若样品中含量小于30%限度可不列入最终标准，检测样品以可采用中试6批或 成品商品化三批
pKa，LgP，结构确证的一些检测项目如NMR，元素分析，MS，单晶衍射 发酵产品的蛋白残留，降压物质等 特定物质的残留研究 潜在基因杂质，高毒性物质，中间体残留，可能副反应杂质研究，催化剂残留，树脂 残留等等
杂质分类
杂质性质：有机杂质，无机杂质 杂质产生途径来源：工艺杂质，降解杂质
工艺杂质包括起始原料，中间体，副产物，对映体等 降解杂质包括氧化，酸碱水解，光，高温，高湿等
检测项目
• 起始物料：鉴别、含量测定、有关物质、 水分、残渣、重金属等
• 中间体： 经过处理得到的固体：含量，水分，有关 物质 反应液：监控反应的完成情况，反应过程 的杂质不是其主要的考察项目
成品检测项目
• 常规的检测项目：性状，溶解度，熔点，鉴别，含量测定，有关物质，残渣，残留溶 剂，水分以及一些特殊的检测项目
验证，同时进行稳定性考察，作为新药注册申报 的质量研究部分的资料上报，是新药申报核心内 容。
主要的检测手段
• 色谱方法、滴定法、比色法、光谱法、质谱法、核磁共振以及方法之 间的联用
• 色谱法：HPLC（UPLC）、IC、TLC、GC • 滴定法：酸碱中和、非水滴定法、氧化-还原滴定、络合滴定、沉淀
如何合理选择检测方法
• GC ，HPLC，离子色谱，电位滴定 • 原则：根据待检物质的结构性质，选择合适的检测方法 • 有紫外吸收物质，尽量采用LC-UV检测有关物质及含量，
滴定法测定含量可做为液相方法的补充或印证 • 无紫外吸收的残留溶剂尽量采用GC，热不稳定或样品易
降解产生的物质可考虑离子色谱或液相衍生方法进行检测， 有挥发性有紫外吸收的稳定化合物可酌情选择GC或LC • 不挥发，无紫外吸收物质可采用示差或蒸发光散射检测器， 含特定基团可考虑衍生检测 • 对映异构体：尽可能采用手性柱直接检测
挥发性的物质的检测 • API残留溶剂的主要检测方法
GC方法开发的要点
• 色谱柱 • 载气 • 柱温 • 检测器 • 进样方式 • 稀释溶液的选择
色谱柱的选择
• 色谱柱：填充柱，毛细管柱，一般采用毛细管柱 柱极性：极性柱innowax，FFAP，DB23中等级性DB624 ，HP-50非极性 HP-1，HP-5
• 内径：0.13mm到0.53mm • 柱长度：30m，60m，120m，增加长度可增加分离度，提高柱效
内径和长度不同，载气流量设置也不同
• 手性柱：商品化的手性色谱柱主要有β、γ环糊精填料的色谱柱，随聚合度 的增加，分离能力增强。较主流的品牌为supelco、 agilent。
• 载气：氮气、氦气
有关物质方法的评价
• 专属性：工艺杂质（包括中间体、副反应杂质，起始物料，以及杂质 在反应过程中引入的杂质等），降解杂质与API之间分离效果良好， 同时各杂质在同一方法中均能被检出（洗脱并检测） 。特别要求：主 峰相邻杂质尽量分开，主峰后杂质分离度最好在3以上。
• 柱效及保留时间：API成品非UPLC的方法保留时间在10-20min之间， 尽量提高理论塔板数，同时具有较好的对称性，尽量小的半峰宽
残留溶剂检测稀释剂的选择
溶解性：样品须完全溶解，必要时可加热 稳定性：不与待测溶剂反应，样品在此溶剂条件下不降解
产生干扰检测的降解峰 待测溶剂的溶解性：待测溶剂在稀释剂中有较好的溶解性，
必要时可采用混合溶剂 干扰：溶剂中的杂质峰不干扰待测溶剂检测，尽量采用色
谱纯的溶剂 溶剂酸碱性：不与待测溶剂反应成盐影响待测溶剂挥发性
杂质的可知性：已知杂质，未知杂质
API有关物质
• 哪些杂质要列入已知杂质 文献中提到的杂质一般均须进行研究 工艺中的中间体，副反应产物，潜在的高毒性物质 成品中大于0.10%的杂质
• 杂质的限度： 已知杂质限度参考原研厂家标准，同时还须用原研样品质量比较 没有文献特别说明的，杂质含量一般需控制在0.15%以内，未知杂质一般需控制在 0.10%以内；大于0.10%杂质需进行结构确证
• 分析研发在新药研发的地位 • 主要的检测手段 • 已有相关药典药物的分析研究（主要指国
外药典） • 不足信回复的相关研究及策略 • 分析与其它部门的配合问题
分析研发在新药研发的地位
• 建立控制药品质量的分析方法 • 优化工艺参数，确定工艺条件；提高收率与质量，
减少副反应（确定设计空间 与正常操作范围） • 建立起始物料、中间体及成品分析方法，并进行
• 灵敏度：杂质LOQ至少要在限度的30%以下 • 回收率：杂质回收率要求在80%以上 • 方法的重现性：开发过程中尽量对不同品牌的色谱柱，流动相的pH值，
柱温，流动相比例等参数进行充分研究，确定其耐用范围，以保证方 法的重现性 • 方法的简便性与仪器的要求：尽量采用比较简单的方法，采用最为稳 定的稀释液，尽量避免现配现做的方法；尽量采用较为普及的仪器 • 色谱柱的稳定性：流动相与柱温等参数设置尽量在色谱柱的耐受范围， 避免采用色谱柱不稳定的检测方法
• 氮气有较好的经济性，氦气有更高的分离 效果。
柱温及进样口温度的选择
• 进样口温度高于柱温20℃ 需考虑测定物质气化温度以及样品的稳定性
• 柱温：一般采用程序升温法检测，柱温越高，洗 脱能力越强。一般根据待测物质的沸点以及极性 选择合适的柱温程序。 优点：可同时检测多个物质，同时还可老化色谱 柱，避免前后两次分析的残留干扰。
气相残留溶剂遇到的常见问题
• 回收率不佳：基质效应、溶剂的酸碱性、降解反应 • 未知溶剂峰：降解反应，样品本身污染、遗漏的检测溶剂 • 重现性差：待测溶剂与稀释剂互溶性差，溶液浓度不均一；
样品在稀释液中溶解不完全
有关物质方法的开发
• 查阅相关资料 化合物的结构：紫外吸收，pKa，极性大小， 紫外吸收，稳定性，溶解性等 工艺路线：确定需要研究的已知杂质
滴定、热量滴定 • 光谱法：红外、紫外、荧光、原子吸收及发射、X-衍射 • 质谱：电离方式
检测模式 • 核磁共振：Baidu Nhomakorabea谱、氢谱 • 联用：HPLC-MS、 HPLC-UV 、HPLC-FL 、HPLC-MS ICP-MS GC-
MS • 液相色谱的其它检测器：示差、蒸发光散射、电导、电化学（后面为
ＩＣ中使用到） • ＧＣ检测器：热导、电子捕捉器、氢离子火焰、氮磷检测器
• 高效薄层色谱 • 毛细管电泳
供应商的检测项目及方法
• 性状 • 含量：99% 碘量法滴定 • 铁离子：20ppm • 干失：0.5% • 硫酸根：0.5% • pH：3-5 • 熔点：62-70℃
半胱胺有关物质方法
• 色谱柱：Waters Xselect CHS C18 250*4.6mm 5μm • 检测波长：200nm • 进样量：20µl • 柱温：30℃ • 流动相A：0.1%全氟丁基磺酸∶乙腈=85：15 • 流动相B：0.1%全氟丁基磺酸∶乙腈=70：30 • 梯度洗脱： • 稀释剂：0.01N盐酸水溶液 • 流速：1.0ml/min • 进样盘温度：2～8℃ • 样品浓度：1.5mg/ml
半胱胺盐酸盐工艺流程
NH2CH2CH2OH H2SO4
CS2 NH2CH2CH2OSO3H NaOH
H N
SH S
H2O HCl
HSCH2CH2NH2 HCl
半胱胺文献资料的检测方法
• 氧化还原法 直接碘量法 返还滴定法
• 光谱法 半胱胺与亚硝酸反应形成S-亚硝基衍生物，破坏剩余亚硝酸，以Hg2+水解 S-亚硝基衍生物，释放的亚硝酸与磺胺试剂生成偶氮染料，544nm亚硝基 衍生物 原子吸收测定硫原子
• TLC简单方便，常作为中间体及起始物料的 检测，一般不作为成品的检测方法。
• IC是离子色谱（严格讲也属于HPLC），适 用于检测各种阴阳离子，单糖，多糖，以 及氨基酸的检测，具备色谱法的所有优点， 在药品分析方法中有越来越多的应用。 主要有戴安及万通两家，各有优缺点。
GC的优点及适用范围
• 灵敏度高，理论塔板数高，分离度好 • 方法开发较为简便 • 技术成熟 • 一般用于具有挥发性物质或经过衍生具有
检测器
• FID：氢离子火焰检测器。通用检测器，碳氢含量 较高的化合物信号强，灵敏度高，适用于大多数 挥发性物质
• ECD：电子捕捉器，适用于含卤素的化合物检测。 残留溶剂检测氯仿尽量采用此检测器，FID灵敏度 较差，很难达到限度要求
• 氮磷检测器：含氮磷硫等元素的化合物灵敏度高， 在残留农药的检测方面有很广的应用
• 对高于ICH要求的，可基于下列理由做适当的限度调整 药典专论或科学文献 主要代谢产物 与原研要进行杂质对比 药理毒理研究
相关文献
• 法定药典 • 原研厂家标准 • 专利文献 • 学术论文
制剂对API的相关要求
• 剂型： 注射剂：内毒素、澄清度 口服制剂：晶型及颗粒度对制剂的溶出曲 线（即生物利用度）影响很大 但速释药物晶型和颗粒度可不做要求，比 如口崩片
• 根据化合物的机型选择合适的色谱柱，达到最佳的分离效果。不同的溶剂 组合采用不同的色谱柱，最常用为HP-5和DB624。气相色谱法采用保留时 间进行结构确认时，一定要用不同极性的色谱柱进行定位，同时保留时间 一致，才可判定为同一物质。
• 涂膜厚度：0.1um到1um等多种规格，一般涂膜厚度越大，保留性越强， 色谱柱寿命越长；拖尾严重，热稳定性较差，气质联用（柱流失更少，干 扰小）一般采用涂抹厚度较小的色谱柱
• 文献参考 USP论坛，专利文献等，对于发 酵类的药物，杂质谱研究很难，一般最好 在已有注册方法基础进行微调，以免发生 严重问题
• 类似化合物的方法等
色谱方法的开发
• 液相方法包括流动相组成（包括缓冲液的 类型，盐浓度，pH值，有机溶剂的种类， 比例等），梯度程序，色谱柱型号，柱温， 以及检测器的选择，通常这些配置相互关 联；同时还包括样品浓度的设定，稀释液 选择，样品溶液制备的振摇或超声时间， 溶解所采用的量瓶材质等较多参数。
质量标准建立的依据
1.QBD理念、TQC、ICH指导原则 2.相关文献 3.验证批API的实际质量情况 4.制剂对API的相关要求 5.最终的质量标准
• QBD：质量源于设计，根据工艺情况制定 合理的检测项目，分析方法及质量标准
• TQC：全面质量管理，从原料，中间体到 成品的全程控制 杂质谱
• ICH：人用药品国际协调会议 分析研发的 指导性原则
.验证批API的实际质量情况
有关物质 对涉及到的已知杂质进行研究分析 工艺中存在的杂质根据实际情况列入质量标准 降解杂质根据长期稳定性结果订入 成品中没有的且不会降解产生的的进行不存在验证，存在 的列入标准
晶型：根据晶型制定合理的检测方法 其它项目 稳定性的各检测项目的趋势及结果
分析方法开发与验证
• 热导检测器：通用型检测器，灵敏度低，应用较 少。元素分析仪采用此检测器，可检测CO2， H2O等其他检测器无法检测的化合物。
进样方式
• 直接进样法：灵敏度低，干扰大，重现性也较差， 进样体积一般1ul以下，主要应用于高沸点物质以 及归一化法测定纯度
• 顶空进样：干扰小，灵敏度高，重现性好。低沸 点物质的分析的首选方法。 参数设置：顶空温度一般90℃，特殊情况可升高， 一般要求低于溶剂沸点。顶空平衡时间一般15分 钟左右，太短未达平衡，重现性差；太长药物降 解，产生未知峰，同时顶空瓶密闭性变差，影响 重现性
• 水溶性药物的pH值 • 结构中含手性官能团药物的比旋度 • 成盐药物的酸碱离子含量 • 微生物限度 • 口服药物的颗粒度分布 • 作为注射剂原料药的澄清度，内毒素 • 药品中添加的辅料稳定剂的含量 • 晶型药物的晶型分析检测项目，如DSC，X衍射，红外等 • 含结晶水药物的结晶水分析：加测TGA，确定结晶水的个数 • 非日常检测的项目（成品研究项目）
杂质危害性：信号杂质，一般杂质，高危害性毒性（基因毒性及致癌性物质） 信号杂质：如钠离子，氯离子等本身无危害性，对成品稳定性也无影响，是 考察工艺的控制水平的一类杂质 潜在基因杂质在最后一步引入，需列入最重质量标准，不是最后一步引入的 可在中间环节控制 若样品中含量小于30%限度可不列入最终标准，检测样品以可采用中试6批或 成品商品化三批
pKa，LgP，结构确证的一些检测项目如NMR，元素分析，MS，单晶衍射 发酵产品的蛋白残留，降压物质等 特定物质的残留研究 潜在基因杂质，高毒性物质，中间体残留，可能副反应杂质研究，催化剂残留，树脂 残留等等
杂质分类
杂质性质：有机杂质，无机杂质 杂质产生途径来源：工艺杂质，降解杂质
工艺杂质包括起始原料，中间体，副产物，对映体等 降解杂质包括氧化，酸碱水解，光，高温，高湿等
检测项目
• 起始物料：鉴别、含量测定、有关物质、 水分、残渣、重金属等
• 中间体： 经过处理得到的固体：含量，水分，有关 物质 反应液：监控反应的完成情况，反应过程 的杂质不是其主要的考察项目
成品检测项目
• 常规的检测项目：性状，溶解度，熔点，鉴别，含量测定，有关物质，残渣，残留溶 剂，水分以及一些特殊的检测项目
验证，同时进行稳定性考察，作为新药注册申报 的质量研究部分的资料上报，是新药申报核心内 容。
主要的检测手段
• 色谱方法、滴定法、比色法、光谱法、质谱法、核磁共振以及方法之 间的联用
• 色谱法：HPLC（UPLC）、IC、TLC、GC • 滴定法：酸碱中和、非水滴定法、氧化-还原滴定、络合滴定、沉淀
如何合理选择检测方法
• GC ，HPLC，离子色谱，电位滴定 • 原则：根据待检物质的结构性质，选择合适的检测方法 • 有紫外吸收物质，尽量采用LC-UV检测有关物质及含量，
滴定法测定含量可做为液相方法的补充或印证 • 无紫外吸收的残留溶剂尽量采用GC，热不稳定或样品易
降解产生的物质可考虑离子色谱或液相衍生方法进行检测， 有挥发性有紫外吸收的稳定化合物可酌情选择GC或LC • 不挥发，无紫外吸收物质可采用示差或蒸发光散射检测器， 含特定基团可考虑衍生检测 • 对映异构体：尽可能采用手性柱直接检测
挥发性的物质的检测 • API残留溶剂的主要检测方法
GC方法开发的要点
• 色谱柱 • 载气 • 柱温 • 检测器 • 进样方式 • 稀释溶液的选择
色谱柱的选择
• 色谱柱：填充柱，毛细管柱，一般采用毛细管柱 柱极性：极性柱innowax，FFAP，DB23中等级性DB624 ，HP-50非极性 HP-1，HP-5
• 内径：0.13mm到0.53mm • 柱长度：30m，60m，120m，增加长度可增加分离度，提高柱效
内径和长度不同，载气流量设置也不同
• 手性柱：商品化的手性色谱柱主要有β、γ环糊精填料的色谱柱，随聚合度 的增加，分离能力增强。较主流的品牌为supelco、 agilent。
• 载气：氮气、氦气
有关物质方法的评价
• 专属性：工艺杂质（包括中间体、副反应杂质，起始物料，以及杂质 在反应过程中引入的杂质等），降解杂质与API之间分离效果良好， 同时各杂质在同一方法中均能被检出（洗脱并检测） 。特别要求：主 峰相邻杂质尽量分开，主峰后杂质分离度最好在3以上。
• 柱效及保留时间：API成品非UPLC的方法保留时间在10-20min之间， 尽量提高理论塔板数，同时具有较好的对称性，尽量小的半峰宽
残留溶剂检测稀释剂的选择
溶解性：样品须完全溶解，必要时可加热 稳定性：不与待测溶剂反应，样品在此溶剂条件下不降解
产生干扰检测的降解峰 待测溶剂的溶解性：待测溶剂在稀释剂中有较好的溶解性，
必要时可采用混合溶剂 干扰：溶剂中的杂质峰不干扰待测溶剂检测，尽量采用色
谱纯的溶剂 溶剂酸碱性：不与待测溶剂反应成盐影响待测溶剂挥发性
杂质的可知性：已知杂质，未知杂质
API有关物质
• 哪些杂质要列入已知杂质 文献中提到的杂质一般均须进行研究 工艺中的中间体，副反应产物，潜在的高毒性物质 成品中大于0.10%的杂质
• 杂质的限度： 已知杂质限度参考原研厂家标准，同时还须用原研样品质量比较 没有文献特别说明的，杂质含量一般需控制在0.15%以内，未知杂质一般需控制在 0.10%以内；大于0.10%杂质需进行结构确证
• 分析研发在新药研发的地位 • 主要的检测手段 • 已有相关药典药物的分析研究（主要指国
外药典） • 不足信回复的相关研究及策略 • 分析与其它部门的配合问题
分析研发在新药研发的地位
• 建立控制药品质量的分析方法 • 优化工艺参数，确定工艺条件；提高收率与质量，
减少副反应（确定设计空间 与正常操作范围） • 建立起始物料、中间体及成品分析方法，并进行
• 灵敏度：杂质LOQ至少要在限度的30%以下 • 回收率：杂质回收率要求在80%以上 • 方法的重现性：开发过程中尽量对不同品牌的色谱柱，流动相的pH值，
柱温，流动相比例等参数进行充分研究，确定其耐用范围，以保证方 法的重现性 • 方法的简便性与仪器的要求：尽量采用比较简单的方法，采用最为稳 定的稀释液，尽量避免现配现做的方法；尽量采用较为普及的仪器 • 色谱柱的稳定性：流动相与柱温等参数设置尽量在色谱柱的耐受范围， 避免采用色谱柱不稳定的检测方法
• 氮气有较好的经济性，氦气有更高的分离 效果。
柱温及进样口温度的选择
• 进样口温度高于柱温20℃ 需考虑测定物质气化温度以及样品的稳定性
• 柱温：一般采用程序升温法检测，柱温越高，洗 脱能力越强。一般根据待测物质的沸点以及极性 选择合适的柱温程序。 优点：可同时检测多个物质，同时还可老化色谱 柱，避免前后两次分析的残留干扰。
气相残留溶剂遇到的常见问题
• 回收率不佳：基质效应、溶剂的酸碱性、降解反应 • 未知溶剂峰：降解反应，样品本身污染、遗漏的检测溶剂 • 重现性差：待测溶剂与稀释剂互溶性差，溶液浓度不均一；
样品在稀释液中溶解不完全
有关物质方法的开发
• 查阅相关资料 化合物的结构：紫外吸收，pKa，极性大小， 紫外吸收，稳定性，溶解性等 工艺路线：确定需要研究的已知杂质
滴定、热量滴定 • 光谱法：红外、紫外、荧光、原子吸收及发射、X-衍射 • 质谱：电离方式
检测模式 • 核磁共振：Baidu Nhomakorabea谱、氢谱 • 联用：HPLC-MS、 HPLC-UV 、HPLC-FL 、HPLC-MS ICP-MS GC-
MS • 液相色谱的其它检测器：示差、蒸发光散射、电导、电化学（后面为
ＩＣ中使用到） • ＧＣ检测器：热导、电子捕捉器、氢离子火焰、氮磷检测器