tris-hcl及其他几种缓冲液配方
各种浓度各种PH的PBS、Tris-HCl缓冲液配制
一、PBS缓冲液1.1 母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水1.2不同PH值PBS配制各种PH值的0.2M PBS(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7以配制100ml 0.2M PBS为例,先配制母液,按照配方表分别取19ml 0.2mol/ L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4,混合即可。
1.3 不同浓度PBS的配制只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PBS(PH=7.4):取500ml 0.2M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PBS(PH=7.4):取50ml 0.2M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PBS(PH=7.4):取100ml 0.2 M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
二、Tris-HCl缓冲液某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.1mol/L HCl混合,加水将体积调至100ml 即可。
Tris-HCl及其他几种缓冲液配方
Tris是什么?有什么作用?Tris-HCl,Tris-EDTA如何配制?Tris:三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。
Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。
例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。
由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris为弱碱,在室温(25℃下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。
Tris碱的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。
但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。
由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。
人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。
如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。
这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。
用途:有机合成中间体。
在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH值。
在凝胶中也起到稳定PH的作用,只不过是Tris-HCl缓冲体系。
Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。
Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。
Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。
Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。
此外,Tris 还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。
Tris也被用作滴定标准物。
1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法:1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
常用缓冲液配方及缓冲范围
常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种水溶液,其中含有在酸性或碱性条件下能够保持pH稳定的化学物质。
缓冲液广泛应用于生物化学、分子生物学、生物技术和医学等领域的实验和研究中。
下面是一些常用的缓冲液配方及其应用范围。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种中性缓冲液,常用于生物化学和分子生物学实验。
它的配方通常为:- 10 mM Tris base-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至7.4Tris缓冲液可用于DNA和RNA的电泳、酶反应、细胞培养等实验中。
2.PBS缓冲液PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物学缓冲液,具有缓冲能力强和与生物体液成分相似的特点。
它的配方通常为:-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-向溶剂中调整pH至7.4PBS缓冲液可用于细胞培养、免疫荧光染色、蛋白质凝胶电泳等实验中。
3.TAE缓冲液TAE(三乙酸缓冲液)是一种常用的核酸电泳缓冲液,其配方为:- 40 mM Tris base-20mM醋酸-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至8.0TAE缓冲液可用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳,如聚丙烯酰胺凝胶电泳()和琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液是一种常用的酸性或碱性缓冲液。
它的配方基于Tris缓冲液,在Tris缓冲液基础上调整pH的方法是在配方中加入稀盐酸或稀氢氧化钠。
例如,对于Tris-HCl缓冲液的配方为:- 50 mM Tris base-向溶剂中加入HCl调整pH至所需的值(通常为7.2至9.0)Tris-HCl缓冲液可用于酶反应、蛋白质组学研究、PCR等实验中。
这只是一些常用的缓冲液配方,根据不同实验需求和物质稀释要求,还有其他许多缓冲液的配方。
对于缓冲液的选择,关键在于根据实验要求选取适当的缓冲体系,并对缓冲液中所需的化学物质浓度、pH值等进行精确调整。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液(Buffer)在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用,它可以维持溶液的稳定性,调节pH值,同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法:- 配制0.1 M Tris缓冲液(pH 7.4):a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane)粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器,并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器,加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌,使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4,直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法:-配制10×PBS缓冲液:a.在1L去离子水中加入80gNaCl,2gKCl,14.4gNa2HPO4,2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液:a.取10×PBS缓冲液100mL,用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法:-配制50×TAE缓冲液:a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base,57.1 mL 0.5 M EDTA,100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液:a.取50×TAE缓冲液20mL,用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
各种浓度各种PH的PBSTrisHCl缓冲液配制
一、PBS 缓冲液1.1 母液的配制:0.2M Na 2HPO 4:称取 71.6g Na 2HPO 4-12H 2O;溶于 1000ml 水0.2M NaH 2PO 4:称取 31.2g NaH 2PO 4-2H 2O;溶于1000ml 水1.2不同PH 值PBS 配制各种PH 值的 0.2M PBS100ml 配方 :pH 0.2M NaH2PO4ml 0.2M Na2HPO4ml5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7以配制100ml 0.2M PBS 为例;先配制母液;按照配方表分别取19ml 0.2mol/L 的 NaH 2PO 4和81ml 0.2mol/L 的 Na 2HPO 4;混合即可..1.3 不同浓度PBS 的配制只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释即可;如:0.1M PBSPH=7.4 :取 500ml 0.2M PBS;加水稀释至 1000ml 即可..0.01M PBSPH=7.4:取50ml 0.2M PBS;加水稀释至 1000ml 即可..0.02M PBSPH=7.4:取100ml 0.2 M PBS;加水稀释至 1000ml 即可..若需要 NaCl的话;加入 NaCl 至0.9%g/100ml即可..二、Tris-HCl缓冲液某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris 碱溶液与配方表中所示相应体积单位:ml的0.1mol/L HCl混合;加水将体积调至100ml 即可..至于配制0.1M HCl 就是8.58ml浓盐酸用蒸馏水定容到1000m l啦。
各种浓度各种PH的PBS、Tris-HCl缓冲液配制
一、PBS缓冲液1.1 母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水1.2不同PH值PBS配制各种PH值的 0.2M PBS(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.5 5.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.3 6.1 85 15 6.2 81.5 18.5 6.3 77.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 37.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51 496.9 45 557.0 38 62 7.1 33 67 7.2 28 727.3 23 77 7.4 19ml 81ml 7.5 16 84 7.6 13 87 7.7 10.5 0.5 7.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7以配制100ml 0.2M PBS为例,先配制母液,按照配方表分别取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4,混合即可。
1.3 不同浓度PBS的配制只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PBS(PH=7.4):取 500ml 0.2M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PBS(PH=7.4):取50ml 0.2M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PBS(PH=7.4):取100ml 0.2 M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
二、Tris-HCl缓冲液某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.1mol/L HCl混合,加水将体积调至100ml 即可。
各种浓度各种PH的PBS、Tris-HCl缓冲液配制
一、PBS缓冲液1.1 母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水1.2不同PH值PBS配制各种PH值的0.2M PBS(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7以配制100ml 0.2M PBS为例,先配制母液,按照配方表分别取19ml 0.2mol/ L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4,混合即可。
1.3 不同浓度PBS的配制只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PBS(PH=7.4):取500ml 0.2M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PBS(PH=7.4):取50ml 0.2M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PBS(PH=7.4):取100ml 0.2 M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
二、Tris-HCl缓冲液某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.1mol/L HCl混合,加水将体积调至100ml 即可。
常用缓冲液配置
常用缓冲液配置Company number:【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl , ,组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低个单位。
2)10×TE Buffer , ,组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量:1 L配制方法:1. 量取下列溶液,置于1 L烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl组份浓度:1.5 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低个单位。
4)3 M 醋酸钠组份浓度:3M 醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至3.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量:1 L配制方法:1. 称量下列试剂,置于1 L烧杯中。
各种浓度各种PH的PBS、Tris-HCl缓冲液配制
一、PBS缓冲液之羊若含玉创作
1.1 母液的配制:
Na2HPO4:称取Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水
NaH2PO4:称取NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
以配制100ml 0.2M PBS为例,先配制母液,依照配方表分离取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4,混杂即可.
1.3 不合浓度PBS的配制
只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释即可,如:
0.1M PBS(PH=7.4):取500ml 0.2M PBS,加水稀释至10 00ml 即可.
0.01M PBS(PH=7.4):取50ml 0.2M PBS,加水稀释至1000 ml 即可.
0.02M PBS(PH=7.4):取100ml 0.2 M PBS,加水稀释至10 00ml 即可.
若需要NaCl的话,参加NaCl 至0.9%(g/100ml)即可.
二、Tris-HCl缓冲液
某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0. 1mol/L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.
1mol/L HCl混杂,加水将体积调至100ml 即可.(至于配制HCl 就是8.58ml浓盐酸用蒸馏水定容到1000ml啦)。
各种缓冲液配方范文
各种缓冲液配方范文缓冲液是一种在化学、生物学和其他实验室应用中常用的溶液,用于稳定试剂的pH值,以保持实验条件的稳定性。
下面列举了几种常见的缓冲液配方。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种非常常见的缓冲液,常用于酶反应和核酸电泳。
它的配方如下:- 200 mM Tris-相应量的盐酸(pH值调节)2.PBS缓冲液PBS缓冲液是一种用于细胞培养和免疫试剂的常用缓冲液。
它的配方参考如下:-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-(pH值调节)3.HEPES缓冲液HEPES缓冲液是一种用于细胞培养和生化实验的常用缓冲液。
它的配方如下:-25mMHEPES-115mMNaCl-5mMKCl-1mMMgCl2-1mMCaCl2-(pH值调节)4.MES缓冲液MES缓冲液是一种用于生化实验和电泳的常用缓冲液。
它的配方如下:-50mMMES- 50 mM Tris-1mMEDTA-相应量的盐酸(pH值调节)5.ACES缓冲液ACES缓冲液是一种用于生化实验和细胞培养的常用缓冲液。
它的配方如下:-10mMACES- 5 mM Tris-10mMCaCl2-(pH值调节)6.TE缓冲液TE缓冲液是一种用于DNA和RNA实验的常用缓冲液。
它的配方如下:- 10 mM Tris-1mMEDTA-(pH值调节)以上列举的是一些常见的缓冲液配方,具体的配方和浓度可能会因实验目的和样品类型而有所不同。
在制备缓冲液时,应该按照实验要求仔细调节pH值,并使用高质量的试剂和纯水来制备缓冲液。
此外,一些缓冲液可能需要在特定的温度下保存或使用,因此在实验之前要对缓冲液的相关要求进行仔细了解和准备。
实验室常用缓冲盐配制
实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
PH值浓HCl7.4约70ml7.6约60ml8.0约42ml4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量:1 L配制方法:1. 量取下列溶液,置于1 L烧杯中。
100ml1M Tris-HCl Buffer(PH7.4,7.6,8.0)500mM EDTA(PH8.0)20ml2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度:1.5 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度:3M 醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。
常用缓冲液配置
实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
值。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量:1 L配制方法:2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度:1.5 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度:3M 醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量:1 L配制方法:2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
各种浓度各种PH的PBS、Tris-HCl缓冲液配制
一、PBS缓冲液1.1 母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水1.2不同PH值PBS配制各种PH值的0.2M PBS(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7以配制100ml 0.2M PBS为例,先配制母液,按照配方表分别取19ml 0.2mol/ L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4,混合即可。
1.3 不同浓度PBS的配制只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PBS(PH=7.4):取500ml 0.2M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PBS(PH=7.4):取50ml 0.2M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PBS(PH=7.4):取100ml 0.2 M PBS,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
二、Tris-HCl缓冲液某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.1mol/L HCl混合,加水将体积调至100ml 即可。
TrisHCl及其他几种缓冲液配方
Tris是什么有什么作用Tris-HCl,Tris-EDTA如何配制Tris:三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。
Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。
例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。
由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris为弱碱,在室温(25℃下,它的pKa为;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在到之间。
Tris碱的水溶液pH在左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。
但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。
由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。
人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。
如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE 缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。
这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。
用途:有机合成中间体。
在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH值。
在凝胶中也起到稳定PH的作用,只不过是Tris-HCl缓冲体系。
Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。
Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。
Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。
Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。
此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。
Tris也被用作滴定标准物。
1 M Tris-HCl ,,组份浓度1 M Tris-HCl配制量1L配制方法:1.称量g Tris置于l L烧杯中。
《实验室常用缓冲液配置方案》
实验室常用缓冲液配置方案实验室常见缓冲液配置方案1) 1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
pH值4. 将溶液定容至1 L。
5. 周温周压火菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高1C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2) 10 x TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量:1 L配制方法:2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3) 1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度:1.5 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 周温周压火菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高1C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4) 3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度:3M醋酸钠配制量:100ml配制方法:1. 称量40.8g NaAc3H2。
置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2. 加入冰醋酸调节pH值至5.23. 加去离子水将溶液定容至100ml4周温周压火菌后,室温保存。
5) PBS Buffer组份浓度:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量:1 L配制方法:1. 称量下列试剂,置于1 L烧杯中。
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Tris是什么?有什么作用?Tris-HCl,Tris-EDTA如何配制?
Tris:三羟甲基氨基甲烷
三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。
Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。
例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。
由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应
Tris为弱碱,在室温(25℃下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。
Tris碱的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。
但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。
由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。
人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。
如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。
这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。
用途:有机合成中间体。
在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH值。
在凝胶中也起到稳定PH的作用,只不过是Tris-HCl缓冲体系。
Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。
Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。
Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。
Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。
此外,Tris 还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。
Tris也被用作滴定标准物。
1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度 1 M Tris-HCl
配制量1L
配制方法:
1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。
pH值浓HCl
7.4 约70 ml
7.6 约60 ml
8.0 约42ml
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
组份浓度 1.5 MTris-HCl
配制量 1 L
配制方法
1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.用浓HCl调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
TE即Tris-EDTA buffer(10mM Tris,1mM EDTA,pH7.4 pH7.6 pH8.0)。
常用分子生物学试剂,用于DNA的溶解等。
配制1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6,8.0)
组份浓度: 100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA
配制量:1 L
配制方法:
1. 量取下列溶液,置于l L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100 ml
500 mM EDTA(pH8.0) 20 ml
2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合。
3.将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4.室温保存。