动物克隆技术概述精品
动物克隆技术2018
5. 克隆动物若被应用于人类 , 将会导致各种各样
的伦理、法律问题
6.小结
总之，克隆技术尽管存在一些问题，但其有巨大 的发展潜力，我们要用发展的眼光去看待克隆技 术，正确地将这项技术应用于器官移植、拯救濒 危动物等方面，使其真正的造福人类。
THANKS!
2.动物克隆技术原理
克隆技术得以实现的理论基础在于“细胞的 全能性”。细胞的全能性是指细胞包含个体的 全套遗传信息，在特定环境因素的调节下，可 回到受精卵一样的状态，从头开始发育成一个 完整的生物个体。只有具备全能性的动物组织 细胞，才可用于克隆动物。
尚未分化的胚胎细胞具有全能性。基于这种认识， 人们采用胚胎分割及胚胎细胞核移植技术成功克隆出 了许多动物。
胚 胎 细 胞 核 移 植
细 胞 核 移 植 的 方 法
体 细 胞 核 移 植
动物克隆技术分类
3.胚胎干细胞核移植：将胚胎干细胞利用核移植技术导入去除 染色质的成熟卵母细胞内，电融合后发育成胚胎。 4.胎儿成纤维细胞核移植：从早期胎儿分离出单个成纤维细胞， 导入成熟卵母细胞内，电融合后发育成胚胎。
“中中”和“华华”
4.动物克隆技术应用
1.克隆技术与转基因技术结合。体细胞核移植技术和转基因技 术的结合将对解决人类器官移植来源、医药生产和疾病治疗、 生物学基础理论研究等具有非常重要的意义。用基因打靶技术 筛选阳性细胞作供核体进行核移植，得到转基因动物。制备转 基因克隆动物， 进行生物药物生产。 2.动物资源的种质保存包括地球上频危动物的挽救和畜牧业等
3.动物克隆技术历史
目前全世界已经成功克隆的动物有以下几种 蛙（1952 年）；鲤鱼（1963 年）；绵羊 （1996 年）；鼠（1998 年）；猕猴、猪 （2000 年）；牛、猫（2001 年）；兔、骡、 鹿、马（2003 年）；狗（2005 年）；灰狼 （2005年）；骆驼（2009 年）；体细胞克 隆猴（2017 年）等。
动物克隆资料
动物克隆主要结构：四：介绍动物克隆研究的历史（动物克隆研究的三个阶段：胚胎细胞克隆阶段、同种体细胞克隆阶段、异种体细胞克隆阶段；其中可以重点找一些比较有名的克隆动物进行详细介绍，比如”克隆羊多莉”等。
所提到的克隆动物最好都能附上图片）五：介绍中国的动物克隆技术研究历史六：介绍动物克隆技术的方法、环节（看能不能找到视频）七：动物克隆技术存在的问题（主要是技术方面的缺陷）四．动物克隆研究的历史科学家们很早就开始了动物克隆的研究。
早在1938年,德国胚胎学家Spemann 即提出“奇异的实验”的设想。
1952年，英国科学家Briggs和King首次报道了蛙的核移植研究。
1962年，英国剑桥大学的Gurdon获得了成年蛙。
我国已故科学家童第周教授在 20 世纪 60 —70 年代曾用囊胚细胞进行鱼类细胞核移植工作,获得属间和种间移核鱼,使我国鱼类核移植研究居世界领先水平。
早期的动物克隆研究仅限于两栖类和鱼类,直到20世纪80年代,核移植克隆技术才开始应用于哺乳动物。
根据供核细胞的不同,可将动物克隆研究分为三个阶段:1.胚胎细胞克隆阶段1981年，Illmensee和Hoppe报道了他们用小鼠的正常囊胚或孤雌活化囊胚的内细胞团细胞作为核供体,直接注入去掉雌雄原核的受精卵胞质中,重构胚体外发育到桑葚胚或囊胚后移植寄母子宫,获得克隆小鼠,这是第一次用胚胎细胞对哺乳类进行核移植获得成功。
1983年,美国科学家利用核移植技术和细胞融合方法获得了克隆小鼠。
1986年,英国的Willadsen用绵羊的8 —16细胞阶段的胚胎细胞作为供体进行核移植,首次应用电融合的方法克隆出一只小羊。
此后,科学家们又相继克隆出小鼠、绵羊、牛、兔、猪和猴等。
我国科学家也在20世纪90 年代成功开展了胚胎细胞克隆兔、山羊、小鼠、牛和猪等研究。
2.同种体细胞克隆阶段1997年2月，英国罗斯林研究所Wilmut等人宣布,他们用6岁成年羊的高度分化的乳腺细胞进行了核移植,成功地获得了克隆羊“多莉”。
动物克隆技术
• 克隆步骤 • 体细胞克隆的主要技术程序与胚胎细胞基本克隆相同， 主要差别在供体细胞的选择。
• 随着克隆技术的发展和人们对核质关系认识的深 入，自然状态的 G0 期细胞（如卵丘细胞）和 G1 期细胞（胎
儿成纤维细胞），可直接移入去核卵母细胞中生产克隆胚 胎。 • S期的细胞核进入受体卵母细胞后会发生碎片化，而M期 和G2期容易造成多倍体。G0/G 1期细胞的获得常用的方法 是靠血清饥饿培养诱导，但长时间的血清饥饿会导致细胞 凋亡。
• 细胞核移植：
• 常用的核移植方法显微注射有两种，即胞质内注射和 透明带下注射。
பைடு நூலகம்
• 胞质内注射：用一个外径5～8μm 的注核针吸取供体核后直 接注射进卵母细胞胞质内。 • 透明带下注射：把供体细胞核注射在透明带与卵母细胞之 间的卵周隙中，核移植后用电刺激进行细胞融合。 • 细胞融合法。用仙台病毒或PEG介导融合，这种方法效果 很不稳定而
• 2.核受体动物的选择与细胞核的移出。 • 3.供体核的移入及原核的取出。 • 4.胚泡的体外试管培养。 • 5.代母的选择与胚泡移入子宫。 • 6.克隆动物的体内发育与出生。
•
去核卵母细胞常常作为核移植的受体细胞。这是因 为在卵母细胞的细胞质含有某种特定的因子，可以使移植 核中所含有的基因表达程序发生重新排列，使已经分化了 的细胞重新回到发育过程的原点，同受精卵一样开始个体 发育过程。 • 卵母细胞的来源有两种方式：一是用激素对雌体进 行超排处理，从输卵管冲出体内成熟的MⅡ卵母细胞。二是 从屠宰场收集卵巢，吸出滤泡中的卵丘—卵母细胞复合体 (COCs)，在体外培养成熟后作为受体。 • MⅡ期的卵母细胞已经成熟，维持的时间长，并且 有较高MPF(促成熟因子maturation promoting factor)活 性有利于供体细胞核的重编程。
克隆动物技术
克隆动物技术克隆动物技术是一项十分引人注目的科学技术，在动物学领域中具有广泛的应用。
通过克隆技术可以制造出与原始个体有着相同基因组的动物，这些克隆动物在研究生物学、疾病治疗、保护濒危物种等方面都有着巨大的潜力。
一、胚胎分裂克隆技术胚胎分裂克隆技术是克隆动物技术中最常见的一种方法。
它基于一个简单的原理，即在受精卵发育初期，如果将其分裂成两个或更多的细胞团，这些细胞团每一个都能发展成一个完整的个体。
这种方法可以实现同源体克隆，即产生具有完全一致基因组的克隆动物。
这项技术在农业中广泛应用，例如将优良的农场动物进行克隆繁殖，以提高品种质量和产量。
二、核移植克隆技术核移植克隆技术是一种将一个成熟细胞的细胞核移植到一个无核的受体细胞中，然后在合适的条件下使其发育成为一个克隆个体的方法。
这项技术可以通过提取体细胞进行克隆，而不是依赖于胚胎。
核移植克隆技术的突破性在于，它允许科学家从已成年个体中提取细胞，并产生与该个体基本相同的克隆个体。
这项技术在动物学研究和医学领域中有着重要的应用前景。
克隆动物技术的进步为科学界带来了许多潜在的应用。
首先，克隆动物技术有助于研究生物学。
通过克隆动物，科学家们可以更好地了解基因如何影响生物的特征和行为。
此外，它还使得科学家们能够观察到相同基因组不同环境下的生物表现，从而深入研究基因与环境之间的相互作用。
其次，克隆动物技术对医学也具有巨大的潜力。
通过克隆技术，医学研究人员可以制造出与焦点研究相对应的动物模型。
这些克隆动物可以用于疾病模拟实验，加速药物研发进程，为人类疾病的治疗提供更准确的预测。
此外，克隆动物技术还可以用于保护濒危物种。
濒危物种的数量日益减少，为了避免物种灭绝，克隆技术可以用于繁殖那些几近灭绝的物种。
它可以提供重建种群的机会，以确保物种的生存和多样性。
当然，克隆动物技术也引起了许多道德和伦理上的争议。
一些人认为克隆技术可能导致生物多样性的减少，甚至可能导致人类滥用这项技术。
《动物克隆技术》课件
动物克隆技术的挑战与前景
技术难题与挑战
虽然动物克隆技术取得了一定的成果，但仍存在许多技术难题和挑 战，如细胞核移植的成功率、胚胎发育的异常等。
伦理道德问题
动物克隆技术也引发了许多伦理道德问题，如对动物的权益保护、 人类的道德责任等。
前景展望
尽管存在许多挑战，但动物克隆技术的发展前景仍然广阔，未来有望 在繁殖、医学、生物多样性保护等领域发挥更大的作用。
感谢您的观看
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《动物克隆技术》ppt 课件
目录 CONTENT
• 克隆技术简介 • 动物克隆技术的基本原理 • 动物克隆技术的实践与案例 • 伦理和法律问题 • 结论
01
克隆技术简介
克隆技术的定义
克隆技术是一种通过无性繁殖产生与原个体遗传物质完全相同的复制体的技术。
无性繁殖是指不经过生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的生殖方式。
对动物克隆技术的监管和规范
01
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制定技术标准
制定严格的动物克隆技术 标准，确保技术的安全性 和可靠性，减少对动物的 伤害。
建立审查机制
建立独立的审查机制，对 动物克隆项目进行审批和 监督，确保其符合伦理和 法律规定。
加强国际合作
加强国际合作，共同制定 动物克隆技术的国际法律 和监管框架，促进技术的 合理应用和发展。
生物多样性保护
用于保护濒危物种和珍稀动物，通 过克隆技术可以繁殖出更多的个体 ，增加种群数量，降低灭绝风险。
02
动物克隆技术的基本原理
动物克隆技术的定义
动物克隆技术的定义
核移植
动物克隆技术是一种通过核移植、胚胎发 育和生产克隆动物的过程，实现动物的无 性繁殖。
核移植是将动物的一个细胞核转移到另一 个去除了细胞核的卵母细胞中，通过电刺 激使两者融合，形成重构卵。指通过受精或人工受精获得胚胎 ，再经过移植获得新个体的方法；体细胞克隆则是通过核移植技术将体细胞核移植到去核的 卵母细胞中，再经过胚胎发育和移植获得新个体的方法。
动物体细胞克隆
胚胎移植技术
胚胎收集
从重构胚中收集发育至一定阶段 的胚胎，通常在体外培养至囊胚
阶段。
胚胎移植前处理
对收集到的胚胎进行评估和选择， 去除发育异常或质量不佳的胚胎。
胚胎移植
将选定的胚胎移植到受体动物的子 宫内，使其继续发育并诞生克隆动 物。
03 动物体细胞克隆实验步骤
供体细胞的准备
选择供体细胞
选择具有正常生理功能和遗传物质的动物体细胞作为供体细胞， 如皮肤成纤维细胞、乳腺细胞等。
医学领域的应用
人类疾病模型
通过克隆技术，可以创 建具有人类疾病的动物 模型，用于研究疾病的 发生机制和治疗方法。
器官移植
利用克隆技术，可以培 育出与患者基因型相同 的器官供体，解决器官 移植中的免疫排斥问题。
药物研发
克隆技术可用于生产具 有特定功能的细胞或组 织，用于药物筛选和研 发。
生物制药领域的应用
伦理问题
生命的起源和尊严
克隆技术可能引发关于生命起源和尊严的争议，因为它涉及到创造与原有生物体基因相同 的新生命。
动物福利
在克隆过程中，动物可能会遭受痛苦和不适，这引发了关于动物福利和伦理责任的讨论。
人类对自然的干预
克隆技术可能被视为人类对自然的过度干预，从而引发关于人类在自然界中角色的争议。
法规问题
发、疾病治疗等方面的研究。
生物工程领域
克隆技术可以用于生产具有特定 功能的生物制品，例如生产药物、 疫苗等。此外，还可以利用克隆 技术进行基因编辑和基因治疗等
方面的研究。
02 动物体细胞克隆技术原理
细胞核移植技术
细胞核提取
01
从供体动物体细胞中分离出细胞核，通常采用显微操作技术。
动物克隆技术
③建立实验动物模型，探索人类发病 规律。 ④克隆异种纯系动物，提供移植器官。 ⑤拯救濒危动物，保护生态平衡。
有关克隆动物与人存在 的问题
（1）技术不成熟
得到的克隆动物具有极大的偶然性和随机 性。迄今为止，克隆试验的成功率始终很 低。例如，在培育多莉的过程中，科学家 共克隆出２７７个绵羊胚胎，最终成功使 母羊受孕并生产的只有多莉一个。 目前，多莉羊的制备还不能重复，更不能 肯定克隆多莉羊的方法也适用于其它动物 或其它不同组织器官的细胞。
1.2.理论基础
细胞全能性
个体某个器官或组织已 经分化的细胞在适宜的 条件下再生成完整个体 的遗传潜力。
尚未分化的胚胎细胞具有全能性。基于 这种认识，人们采用胚胎分割及胚胎细 胞核移植技术成功克隆出了许多动物。
2.动物克隆的发展历史：
1938年，德国胚胎学家汉斯· 斯皮曼建议用成年的细 胞核植入卵子的办法进行哺乳动物克隆。 1952年，运用斯皮曼的构想，出现世界上第一只克 隆青蛙。 1962年，美国的发育生物学家约翰· 格登宣布他用一 个成年细胞克隆出一只蝌蚪，从而引发了关于克隆 的第一轮辩论。 1984年，英国剑桥大学生物学家斯蒂恩· 威拉德森用 胚胎细胞克隆出一只羊。这是第一例得到证实的克 隆哺乳动物。
使用最多的克隆方法 ——胚胎细胞克隆
3.克隆的基本过程
动物克隆技术的核心是核移植。 核供体动物的选择与细胞核的获得。 核受体动物的选择与细胞核的移出。 供体核的移入及原核的取出。 胚泡的体外试管培养。 代母的选择与胚泡移入子宫。 克隆动物的体内发育与出生。
4.克隆动物的研究价值和发展趋势
2003.2.14日苏格兰向外界宣布：多 莉因早衰并患有肺炎，被迫实施了安 乐死。由于早衰问题，人们怀疑“多 莉是穿着羔羊服装的老羊” 。
动物克隆技术科普
动物克隆技术科普概述动物克隆技术是一种通过人工手段复制动物的生殖细胞或胚胎细胞，从而实现相同基因组的动物繁殖的技术。
它是遗传工程领域的重要研究方向，也是生物科学领域的一项重要突破。
本文将为大家科普动物克隆技术的原理、方法和应用，以及相关的伦理和社会问题。
一、动物克隆技术的原理动物克隆技术的原理是利用体细胞核移植。
首先，从一只成熟个体的体细胞中提取出细胞核，然后将这个细胞核移植到一个去除了细胞核的受体卵母细胞中，经过一系列培养和激活操作，使得受体卵母细胞重新分化和发育，最终形成一个与捐赠个体基因相同的胚胎。
这个胚胎可以继续发育成为一个新的个体，与捐赠个体具有相同的基因组。
二、动物克隆技术的方法动物克隆技术目前主要有两种方法，分别是细胞核移植和胚胎分裂法。
1. 细胞核移植细胞核移植是目前应用最广泛的动物克隆技术方法。
它可以通过将体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞中，形成一个与体细胞相同基因组的胚胎。
这个胚胎可以继续发育成为一个新的个体。
细胞核移植技术的关键是如何使得受体卵母细胞能够重新分化和发育，而不是继续遵循卵母细胞的发育路径。
2. 胚胎分裂法胚胎分裂法是一种较少应用的动物克隆技术方法。
它通过将早期胚胎分裂成多个细胞团，每个细胞团继续发育成为一个新的个体。
这种方法主要应用于某些具有较高再生能力的动物，如蚯蚓和水螅等。
三、动物克隆技术的应用动物克隆技术在科学研究、农业和医学领域都有广泛的应用。
1. 科学研究动物克隆技术可以帮助科学家研究生物发育、基因表达和细胞分化等过程。
通过对克隆胚胎的观察和分析，科学家可以更好地理解生物的发育机制。
2. 农业动物克隆技术可以应用于畜牧业，提高优良品种的繁殖效率。
通过克隆技术，可以复制出优秀的农业动物，提高农产品的质量和产量。
3. 医学动物克隆技术在医学领域有着广泛的应用前景。
例如，通过克隆技术可以制备出与患者组织相匹配的干细胞，用于治疗一些难以治愈的疾病。
此外，动物克隆技术还可以用于生物药物的研发和生产。
《动物克隆技术》PPT课件
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多莉和邦妮
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1998年5月,美国科学家利用胎儿成纤维细胞克隆3 头牛,而且携带了转移的基因。
1998年7月Wakayama等成功地用小鼠的卵丘细 胞克隆和再克隆出小鼠,这是人类第一次用克隆动 物再克隆出克隆动物。
Wilmut博士等建立的一整套绵羊体细胞移植程 序,如恢复体细胞核全能性的“血清饥饿法”、 体细胞传代阶段的确定以及体细胞克隆后代与 亲本核供体间的DNA微卫星分析等技术,成为 全世界同行公认的哺乳动物细胞核移植的基本 程序。
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多莉和威尔穆特
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此后,他们又用绵羊的胚胎细胞进行核移植实 验,成功地获得了整合有人凝血因子XI的转基 因绵羊,取名“波莉(Polly)”，这样波莉成年后 就可能在乳汁中大量表达昂贵的医用人凝血因 子XI。
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2001年3月,英国产生 克隆绵羊“多莉”的 公司成功培育出5只
克隆小猪,期望用于人 体器官移植的研究。 五只克隆猪全为雌性， 最大的一只为Millie， 取 意 于 单 词 millenium （千禧）。
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大老鼠难以复制， 2003年法国复制的名 为“拉尔夫（Ralph）” 的老鼠是第一只。
1986年,英国的Willadsen报道用早期的胚胎细 胞克隆出第一只羊。
此后,其他科学家相继成功地克隆出牛(1987)、 兔(1988)、猪(1989)。
1996年,Campbell等报告用培养传代的羊胚盘 细胞经无血清饥饿法使其进入G0期,移入卵母 细胞后可正常发育到产仔。
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1997年2月,英国罗斯林研究所的Wilmut等利用 5岁绵羊的乳腺上皮细胞进行核移植试验,并成 功地获得了世界上第一只体细胞克隆绵羊“多 莉(Dolly)”,这是克隆技术的一个新的里程碑。
动物克隆技术
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首例体细胞克隆奶牛“顺华” 首例体细胞克隆奶牛“顺华”
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克隆马及其“母亲兼姐姐” 克隆马及其“母亲兼姐姐”
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克隆非洲猫“ 克隆非洲猫“Caty”和“Madge” 和
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克隆人“三剑客” 克隆人“三剑客”： 安蒂诺里、扎沃斯、布瓦瑟里耶
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雷尔教派成员、 雷尔教派成员、法 国女科学家布里吉 特·布瓦瑟利耶在 布瓦瑟利耶在 新闻发布会上称， 新闻发布会上称， 克隆女婴“夏娃” 克隆女婴“夏娃” 已于2002年12月 已于 年 月 26日降生，但她既 日降生， 日降生 没有提供“夏娃” 没有提供“夏娃” 的照片， 的照片，也未能出 示任何其他科学证 据。 39
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二、精子穿过卵丘，与透明带相互作用 精子穿过卵丘， 精子穿过卵丘 1．精子穿过卵丘，与透明带相互作用：这一过程是由ZP3 （卵母细胞特异性糖蛋白3）介导的，是特异性的受体-配 体作用。 2．顶体反应：顶体是暴露于精子头前部的内膜包裹的帽子 结构，内含大量的水解酶，如透明质酸酶、顶体素、蛋白 酶与磷酸酶等。 3．机制：大量Ca2+内流，直接或间接激活顶体素原成为顶 体素，→激活磷脂酶，将精子膜上的磷脂分解为溶血磷脂 和脂肪酸→使精子质膜与顶体外膜形成多处融合→形成小 泡→顶体内容物外流。 • 顶体反应对精子通过透明带，穿过卵母细胞与卵膜融合是 不可缺少的一步。 4．诱导物：] • 体内：①卵泡细胞和透明带是诱发顶体反应的主要因素； ②离子、PH和温度也必须达到一定程度。 • 体外：用钙离子载体A23187可诱导获能精子发生顶体反 应，利用这一原理测定体反应，有助于预测精子的受精能 力；有的中心用顶体反应作为筛查适合作ICSI病人的方法， 16 但它的临床价值还不明确。
动物克隆技术概述
问题1：
克隆人是不是正常的人？怎样看待 克隆人？
不管克隆技术怎样发展，克隆人怎样产生， 都是人，与被克隆人实质上是存在着年龄 差的同胞胎。克隆人生出来就是一个与常 人无异的人。 然而，正是这一点让人们觉得很难应对克 隆人出现的伦理关系。
他或她将如何度过自己不平凡的一生？
问题2：
许多国家支持治疗性克隆， 反对生殖性克隆
1 器官移植：我成了零件
克隆一个小小胚胎，不让它继续长大，然 后根据需要让其中的某一部分长成心脏、 肌肉甚至是毛发，能像零件似的被使用。 将来人类身体各个部分都能得到保修，还 不用担心扰乱日常的生活和伦理，它不过 是个早期的胚胎，就像一个零配件的生产 机器。
2003.2.14日苏格兰向外界宣布：多 莉因早衰并患有肺炎，被迫实施了安 乐死。由于早衰问题，人们怀疑“多 莉是穿着羔羊服装的老羊” 。
技术路线：
芬兰多塞特白品种绵羊 苏格兰黑面母绵羊
具体操作
取处于后三分之一妊娠期的6岁母绵羊（芬 兰多塞特白品种绵羊）的乳腺细胞作核供 体细胞，用“饥饿法”使其进入休眠状态 而使全部基因具有活性。 注射促性腺激素GN促使母羊（苏格兰黑面 母绵羊）排卵，28－33小时取其未受精卵 快速去核，放入10%FCS（小牛血清）、 1%FCS和0.5%FCS连续5天，饥饿使进入 G0期做受体细胞。
问题5： 是否是人类的倒退？
有性生殖是历史进化的结果，利于种族繁 衍和生存，以及优良形状的形成。 选择无性生殖——克隆的方式不利于遗传 多样性的保护。 从有性繁殖到无性繁殖，就进化而言是一 种退化。尽管有人搞克隆人，但人类繁衍 的必然趋势是有性繁殖。
“多利羊”之父反对克隆人
“我认为，已经有足够的证据表明，克隆人 的行动是完全不负责任的。”他说，克隆 技术目前还存在很多不确定因素，他们在 对动物进行实验时经常遇到大量畸形或异 常情况，因此克隆技术目前不适合用于人 类。
经典：第二十五章-克隆动物培育技术
克隆绵羊——多莉（Dolly）的培育示意图
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二、人工诱导雌核发育技术
• 技术关键：一是使精子的遗传物质失活且保持精 子激活卵子发育的能力；二是诱导卵子二倍体形 成。
• 使精子遗传物质失活的办法一般是采用辐射处理 (如γ线、X射线、紫外线等)。
• 诱导卵子二倍体形成的办法，一是在受精后不久 抑制第二极体排出；二是在受精卵第一次卵裂时， 抑制有丝分裂。可以用温度(冷休克或热休克)、 静水压和化学(秋水仙素、细胞松弛素B等)等方法。
供体细胞的准备方面，通常采用建立细胞系的办法 。 包括：① 胚胎干细胞系的建立。② TNT4细胞系的建 立。 将供体细胞的细胞周期做同步法处理，即G0期的诱导。 方法是：在5d内将培养液的血清浓度由10.0%降至 0.5%。
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2、受体细胞的准备
受体细胞有3类：卵母细胞、原核期受精卵和2 细胞期胚胎细胞。 获得卵母细胞多采用活体超排的方法。 卵母细胞的去核目前多采用显微操作法，即在 显微镜下用外径为20μm的微细玻璃管吸管吸 取细胞核。常用的去核方法有盲吸法、半卵法 和功能去核法等。
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• 动物克隆技术方法可分为胚胎分割、胚胎 嵌合、细胞核移植、雌核或雄核发育等。
• 细胞核移植方法又分为胚胎细胞核移植、 胚胎干细胞核移植、胎儿成纤维细胞核移 植和体细胞核移植等。
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一、细胞核移植克隆技术
其基本技术环节除显微操作技术外，主要包括 ： 1. 供体细胞（核供体）的准备。 2. 受体细胞（细胞质受体）的准备。 3. 核移植。 4. 核质融合及卵母细胞质的激活。 5. 重构胚的培养和移植。 6. 重复克隆。 7. 克隆动物的鉴定。
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⑵ 哺乳类的核移植实验
1997年，英国 Roslin研究所的Wilmut等用乳腺细 胞核移植培育克隆绵羊——“多莉 (Dolly)”。 Wilmut等采用6岁母羊（白面）怀孕3个月时的乳 腺细胞进行核移植。供体核在血清浓度从10％降 至0.5％的培养液中诱导至静止期，然后移入去核 卵母细胞，发育为桑椹胚和囊胚再移植到受体母 羊（黑面），结果产羔l头（白面） ，即著名的 “多莉”。 这是世界上首次用体细胞克隆获得的后代，划时 代意义在于证明动物成体细胞核仍具有发育全能 性。