巨大芽孢杆菌
巨大芽孢杆菌形态特征
巨大芽孢杆菌形态特征巨大芽孢杆菌是一种常见的细菌，其形态特征是其细胞呈杆状，长度可达到20微米以上，直径约为1微米左右。
此外，巨大芽孢杆菌在生长过程中会产生孢子，这些孢子可以抵抗高温、低温、辐射等极端环境条件。
一、巨大芽孢杆菌的形态特征1. 细胞形态巨大芽孢杆菌的细胞形态呈长条状或圆柱状，并且具有一定的弯曲度。
在不同的培养条件下，它们的形态也会有所不同。
例如，在富含营养物质的培养基中，细胞通常呈现出长而直的形态；而在缺乏营养物质的环境中，则会出现分枝和弯曲。
2. 细胞大小巨大芽孢杆菌的细胞大小相对较大，通常为1-2微米左右。
但是，在某些情况下，它们也可以达到20微米以上。
3. 鞭毛和纤毛巨大芽孢杆菌没有鞭毛和纤毛，因此它们不能进行运动。
4. 细胞壁巨大芽孢杆菌的细胞壁由多糖和蛋白质组成。
这种细胞壁可以保护细胞免受环境中的不利因素的影响。
5. 孢子巨大芽孢杆菌在生长过程中会产生孢子。
这些孢子可以抵抗高温、低温、辐射等极端环境条件，并且可以在不利条件下存活很长时间。
二、巨大芽孢杆菌的生长特征1. 生长速度巨大芽孢杆菌的生长速度相对较慢，通常需要24-48小时才能达到最佳生长状态。
2. 生长环境巨大芽孢杆菌可以在各种环境中生长，包括土壤、水体和人体内部。
它们通常是厌氧细菌，也就是说它们需要缺氧环境才能够生长。
3. 营养需求巨大芽孢杆菌对营养物质的需求相对较高，特别是对氮源和碳源的需求。
在富含营养物质的培养基中，它们的生长速度会更快。
4. 温度和pH值巨大芽孢杆菌对温度和pH值的适应范围相对较广。
它们可以在不同的温度和pH值下生长，但是在不同的条件下，其生长速度和形态也会有所不同。
三、巨大芽孢杆菌的应用1. 食品工业巨大芽孢杆菌可以被用作食品添加剂。
由于它们可以抵抗高温、低温、辐射等极端环境条件，因此可以被用于保护食品免受微生物污染。
2. 医药工业巨大芽孢杆菌可以被用来制造一些药物。
例如，它们可以被用来制造抗生素、酶等。
巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB 8508蔗糖磷酸化酶的分离鉴定
１ ２ 微 生 物 与 培 养 条 件 ．
巨大芽 孢 杆 菌 Ｂ ｃ ｌｓｍｅ ａｅｉｍ ＮＣ Ｍ ０ ７ ａ ｉ ｕ ｇ ｔｒｕ Ｉ ２ ８ ｌ
（ 巨 大 芽 孢 杆 菌 Ｂ ｃｌ ｓ ｇ ｔｒｕ Ｉ ５ ８ 即 ａ ｉ ｕ ａｅｉｍ ＮＣ Ｂ ８ ０ ） ｌ ｍｅ 购 于 印度 浦 那 国 家 化 学 实 验 室 。
酸 化酶 ， 以蔗糖 为 原 料 直接 合 成 三 氯 蔗 糖关 键 中 间 为
体 Ｓ ６ａ奠 定 了理 论 基 础 。 一一 ．
１ 实验
１ １ 试 剂 ．
ＮＣ Ｂ ８ ０ Ｉ ５ ８能 以 葡 萄 糖 为 底 物 发 酵 生 成 葡 萄 糖一一 ６乙
酸 酯（ 一一） ９ ２年 ，ｏ ｎ等 也 利 用 该 菌 以葡 萄 糖 Ｇ ６ａ 。１ ９ Ｊａ 为底 物发 酵生 成 Ｇ一一 ， 经果 糖基 转移 酶合 成 Ｓ ６ａ ６ａ 并 一一 ；
反 应 ， 子 量 大 小约 为 ５ Ｄａ 最 适 ｐ 值 为 ７ ５， 适 温度 为 ５ ￣ 分 ６ｋ ， Ｈ ． 最 ０Ｃ。 为 利 用 巨 大 芽 孢 杆 菌 Ｂａ ｉｌ ｓ ｇ ｔｒｕ ＮＣＩ ｃｌｕ ｍｅ ａｅ ｉ ｍ Ｂ
８ ０ 以 蔗 糖 为 原 料 直 接 合 成 蔗 糖 ６ 乙 酸 酯 提 供 了新 的 研 究 思 路 。 ５８ 一
同 时 尝 试 利 用 该 菌 以 蔗 糖 为 原 料 直 接 发 酵 合 成 Ｓ６ａ 一一 ，
标 准蔗 糖 磷 酸 化 酶 Ｓ ９ ７（ Ｃ： ． ． ． ） ＳＧ— ０３ Ｅ ２４ １７ ，Ｉ
Ｍ Ａ ＡＬ ＲＩ Ｈ 公 司 ； 丙 烯 酰 胺 凝 胶 Ｓ ｐ ａ ｒｌ — Ｄ Ｃ 聚 ｅ ｈ ｃｙ丁 Ｓ Ｍ一 ３ ０ｈｇ ｅｏｕｉｎ ＧＥ Ｈｅ ｌ ｃｒ 公 司 ； 烯 酰 胺 一 ０ ｉｈｒｓ ｌｔ ， ａｔ ａｅ ｏ ｈ 丙 双 丙 烯 酰 胺 （ ９：１ 质 量 浓 度 ４ ） 上 海 生 工 生 物 工 ２ ， Ｏ ， 程 ； 甲基 己 二 胺 （ ＭＥ ， 四 ＴＥ Ｄ） ＡＭＲ Ｓ Ｏ 公 司 ； 马 Ｅ Ｃ 考
巨大芽孢杆菌表达外源蛋白的特点及其研究进展
中国生物工程杂志ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，２８（４）：９３－９７巨大芽孢杆菌表达外源蛋白的特点及其研究进展牟琳１王红宁２＋邹立扣１（１四川农业大学生命科学学院雅安６２５０１４）（２四川大学生命科学学院动物疾病防控生物工程研究中心成都６１００６４）摘要巨大芽孢杆菌是一种很有潜力的分泌型基因工程宿主茵，现已广泛应用于工业和学术研究领域，它具有表达率高、遗传稳定、产物可分泌、发酵工艺成熟等优点。
综述了其自身的优点、表达载体的特点、巨大芽孢杆茵的转化方法、外源蛋白的表达、高效表达的策略以及表达系统的应用。
关键词巨大芽孢杆菌外源蛋白高效表达中图分类号Ｑ７８９巨大芽孢杆菌表达系统是一种很好的表达外源基因的系统。
由于其分布广泛，生化功能多样，以及能表达、分泌、加工外源蛋白而不降解外源蛋白，巨大芽孢杆菌越来越多地作为表达外源基因的宿主菌，在工业以及学术研究领域得到了广泛的应用。
１巨大芽孢杆菌概述巨大芽孢杆菌体型巨大，超过６０斗ｍ３（２．５×２．５×ｌＯ），是大肠杆菌体积的１００倍以上¨ｏ。
其能依靠多种碳源生长，因而分布十分广泛。
同时，巨大芽孢杆菌能降解一些顽固的难降解的杀虫剂∞’３３，因此对环境具有十分重要的作用。
一些巨大芽孢杆菌的蛋白质具有重要的作用。
例如：其细胞色素Ｐ－４５０单加氧酶系同真核细胞色素Ｐ一４５０单加氧酶系相似，在许多疾病中发挥着类似的作用。
另外，在工业上，巨大芽孢杆菌分泌的酶应用也十分广泛，如淀粉酶应用于面包生产、青霉素酰胺酶应用于合成新型人工抗生素等。
很多基因在该菌中都得到了较好的表达及分泌。
２巨大芽孢杆菌在表达外源蛋白中的优点２．１能利用多种碳源巨大芽孢杆菌能利用多种碳源，营养要求低，生长收稿日期：２００７．１１彩修回１３期：２００７—１２－２７・国家“十五”重点科技攻关资助项目（２００２ＢＡ５１４Ａ・１２）・十通讯作者，电子信箱：ｗｈｏｎｇｎｉｎｇ＠１６３．ｃｏｒｎ快。
巨大芽孢杆菌D01吸附金(Au3+)的研究
! 结果和讨论
,"! 菌体吸附 12#’的条件试验
,"!"! IJ 的影响：溶液的IJ 值对溶液中金属的化学性质、生物体上官能团的活性，以
及金属离子对结合位点的竞争都有影响。为了研究IJ 对 K#(菌体吸附金离子的影响， 用 J:M或 V5@J 将 12&3—菌体接触液（含("#$>12&3／%和!",$>干重菌体／%）调至不
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微生物学报
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液体种子培养：培养基除不加琼脂外，其他成份与斜面培养基相 同，!"#$% 三 角 瓶 装 培养基"#$%，&#’下振荡培养()*。
三角瓶扩大培养：培养基与液体种子培养基相同。"##$% 三角瓶装培养基(##$%， 接种子液"+，&#’下振荡培养!,*。 !"# 菌体的制备
培养物经离心（&"##-／$./，("$./）弃培养基，然后用灭菌的重蒸水洗涤!!&次，湿菌 体贮存于,’备用。 !"$ %&#’的生物吸附试验
!"#"$ 温度的影响：结果表明，在#、/)、!)、#)和0#1下，吸附量分别为!"!$)、!"!$"、
!/2$2、!!)$!和!!)$!（&’／’），未检测到明显的变化。说明菌体对金离子的吸附作用是 非依赖温度的过程。其他研究者在金［"］、铀［0］和铅［3］等的生物吸附研究中也得到类似的
结果。为了达到较好的吸附效果和从实际应用考虑，选择!)1较为适宜。 !"#"% 菌体浓度的影响：用不同的菌体浓度 （F/!2")&’／G）在 ,-!. 起 始 浓 度 "))&’／G、 @H!5)和!)1下吸附作用!)&*+。结果（图"） 表明，菌体对金离子的吸附率随着菌浓度的提
211153416_巨大芽孢杆菌表达系统研究进展综述
引言蛋白质是重要的生物大分子，蛋白质种类繁多，功能各异。
生物体内的许多蛋白质的含量都非常少，为了大量获得具有某种特定用途的蛋白质，可以通过基因克隆将目的蛋白的核酸序列导入某种宿主细胞中，使宿主细胞大量合成该种蛋白质。
这种将基因与合适质粒载体重组后转入宿主细胞以大量合成蛋白质的技术称为蛋白质表达。
蛋白质表达在生物技术、食品、医药卫生、养殖和环保等行业均有广泛的应用。
蛋白质表达技术所涉及的各个要素（表达载体、宿主、启动子和信号肽等）可以统称为蛋白质表达系统。
蛋白质表达系统的常用表达宿主包括属于真核生物的酵母菌、昆虫细胞、哺乳动物细胞和植物细胞以及属于原核生物的大肠杆菌、芽孢杆菌和链霉菌。
其中大肠杆菌是被研究最早、最深入、应用最广的。
巨大芽孢杆菌作为革兰氏阳性杆菌，其无内毒素和胞外蛋白酶，能高效地将蛋白质分泌到胞外，在蛋白表达方面具有较大的优势。
本文介绍了巨大芽孢杆菌的生理特征和表达系统各关键元素的研究现状，为进一步开展巨大芽孢杆菌表达系统及其应用的研究提供参考。
一、巨大芽孢杆菌概述巨大芽孢杆菌（Priestia megaterium）是革兰氏阳性杆菌，属于需氧芽孢杆菌。
如图1所示，它的体积约是大肠杆菌的100倍，由此在1884年被命名为巨大芽孢杆菌[1]。
它广泛存在于植物、土壤、海水和人类口腔等各种环境中[2]。
它可以利用的碳源包括单糖、二糖、多糖、甘油以及甘蔗糖蜜等，基于其体积大、高渗透耐受性、可适应多种环境和利用多种碳源的特点，巨大芽孢杆菌可作为蛋白质和细胞各组成部分的生产宿主或载体[3]。
巨大芽孢杆菌是革兰氏阳性杆菌，缺乏外细胞膜，则巨大芽孢杆菌表达系统研究进展综述◎ 姚婉议 刘 欣 杨晓雯 林伯坤* 邹堂斌*（广东医科大学公共卫生学院东莞市环境医学重点实验室，广东 东莞 523808）【摘 要】蛋白质表达系统是大量制备目的蛋白质的主要技术手段。
巨大芽孢杆菌不产生内毒素和胞外蛋白酶，能高效地分泌蛋白质到胞外，具有体积大、高渗透耐受性、环境适应性强、可利用多种碳源以及可以稳定地维持各种质粒载体等特点，是理想的蛋白质表达系统宿主，目前已得到较系统地开发，用于生产重组蛋白质以及其他大分子和小分子。
不同条件下巨大芽孢杆菌BM1259的生长特性研究
不同条件下巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的生长特性研究陈玉粮(扬州大学ꎬ江苏扬州㊀２２５００９)㊀㊀摘㊀要:本试验以巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９为实验材料ꎬ探究巨大芽孢杆菌在不同环境条件下的生长情况ꎮ实验设４种不同条件:不同碳源㊁不同装液量㊁不同接菌量㊁不同ｐＨ值ꎬ每个处理重复三次ꎬ摇床培养４８小时ꎬ在１２小时㊁２４小时㊁３６小时分别用波长６６０ｎｍ的分光光度计记录数据ꎬ取数据的平均值ꎮ结果表明:葡萄糖和蔗糖对巨大芽孢杆菌的生长曲线没有明显影响ꎻ相同装液量中接菌量３μＬ巨大芽孢杆菌的生长曲线最快达到峰值ꎻ不同ｐＨ值中ꎬｐＨ为７时巨大芽孢杆菌的生长曲线最快达到峰值ꎮ关键词:巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９ꎻ生长特性ꎻ碳源ꎻ接菌量作者简介:陈玉粮(１９９７－)ꎬ女ꎬ山东招远人ꎬ毕业于扬州大学ꎬ本科学历ꎬ研究方向:反刍动物饲料添加剂ꎮ㊀㊀１㊀巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的研究进展巨大芽孢杆菌是芽孢杆菌属ꎬ属于好氧革兰氏阳性杆菌ꎬ是一种有益菌ꎬ具有对环境和人畜无害等特点而受到人们的关注与研究ꎮ１９３５年苏联科学家孟吉娜从土壤里分离到了一株可以解磷的巨大芽孢杆菌并开始投入生产与继续的深入研究ꎮ农作物对化肥的利用有限ꎬ大量没有被利用的磷源在土壤中与土壤的某些成分发生反应ꎬ变成了植物难以利用的形态ꎬ我们通常称这种磷为无效态磷ꎮ为了保持农作物的产量ꎬ人们依然会运用大量的化学肥料和有机肥来给予土壤充足的养分ꎬ日渐积累便使土壤污染状况加重ꎮ人们不得不开始寻找其他解决方法ꎮ实验证明ꎬ微生物对土壤中物质的循环有重要的意义ꎬ对磷素循环也是如此(邱旭ꎬ２０１６)ꎮ巨大芽孢杆菌就是其中的一种ꎮ巨大芽孢杆菌在水产上可以起到净化水体的作用ꎬ主要体现在对水体中的有机物和磷降解㊁改善水体的富营养化以及水产养殖的应用ꎮ菌株在２４ｈ内氨碳降解率达到９５％以上ꎬ并且还具有硝酸还原与亚硝酸的还原能力ꎬ其中的海藻胶裂解酶㊁蛋白酶㊁纤维素酶活性会把构成海藻的大分子物质逐渐降解为小分子和水溶性物质ꎬ保留了海藻生物活性与营养物质ꎬ作为水产生产过程中的有益菌进行添加可以解决水体中氨碳污染的问题ꎮ在水中添加巨大芽孢杆菌不仅可以分解池塘中残留的饲料以及排泄物等有机污染物ꎬ起到净化水体的作用ꎬ还避免了利用化学制剂会引起的第二次水体污染的问题ꎬ也可以通过人工的调控来优化水体环境中的微生物组成和数量ꎬ降低成本ꎬ提高养殖产量ꎬ对水产的生产非常具有意义ꎮ在畜牧生产上巨大芽孢杆菌不仅能减少蛋鸡肠道和排泄物中的氨气和硫化氢的排放(张艳云ꎬ２００８)ꎬ也能使蛋鸡对日粮中营养物质的吸收利用提高ꎬ使蛋鸡的采食量减少ꎬ提高蛋鸡的产蛋率ꎬ增加蛋鸡血清钙磷含量(万国福ꎬ１１ 陈玉粮:不同条件下巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的生长特性研究２００９)ꎮ有研究表明巨大芽孢杆菌会分泌一种可以降解羽毛角蛋白㊁酪蛋白的水解酶ꎬ可以释放羽毛中角蛋白和酪蛋白ꎬ这对动物蛋白质饲料的生产具有很大的意义ꎬ还可以解决畜牧场畜禽排泄物㊁废弃垫料的问题ꎬ遏制污染气体的源头ꎬ改善我国的畜牧生产环境ꎬ使畜牧养殖成本降低ꎬ增加利润(曹国文ꎬ２００４)ꎮ２㊀材料与方法２.１㊀实验设计本试验以巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９为实验材料ꎬ探究巨大芽孢杆菌在不同环境条件下的生长情况ꎮ实验设４种不同条件:不同碳源㊁不同装液量㊁不同接菌量㊁不同ｐＨ值ꎬ每个处理重复三次ꎬ摇床培养４８小时ꎬ在１２小时㊁２４小时㊁３６小时分别用波长６６０ｎｍ的分光光度计记录数据ꎬ取数据的平均值ꎮ比较巨大芽孢杆菌在各个条件下的生长情况ꎬ找到最佳的生长条件ꎮ２.２㊀材㊀料２.２.１㊀供试杆菌本试验所用的ＢＭ１２５９制剂是由扬州大学动物科学与技术学院动物营养系提供ꎬ含活孢子数１００亿个/ｇꎮ２.２.２㊀培养基配制称取营养肉汤培养基２２ｇꎬ成分(ｇ/Ｌ):蛋白胨１０.０ｇꎬ牛肉膏３.０ｇꎬＮａＣｌ５.０ｇꎬ葡萄糖４.０ｇꎬ蒸馏水１０００ｍＬꎬｐＨ值７.２~７.４ꎬ分装于１５０ｍＬ的三角瓶中ꎬ每瓶１００ｍＬꎬ１２１ħ条件下灭菌１５ｍｉｎꎮ用于巨大芽孢杆菌１２５９生长特性原始数据的检测ꎮ２.２.３㊀培养基营养物质蒸馏水㊁碳源ꎮ不同的碳源有葡萄糖㊁蔗糖ꎮ主要的碳源是葡萄糖ꎮ２.２.４㊀碳源培养基碳源５.０ｇꎬＮａＣｌ０.１ｇꎬ磷酸氢二钾０.０５ｇꎬ七水硫酸镁０.０２５ｇꎬ水１０００ｍＬꎬ蛋白胨０.５ｇꎬ蒸馏水１０００ｍＬꎬｐＨ值７.０ꎬ分装于２５０ｍＬ三角瓶中ꎬ每瓶１００ｍＬꎬ１２１ħ条件下灭菌１５ｍｉｎꎮ蔗糖和葡萄糖用于不同碳源对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长特性数据的测定ꎮ葡萄糖作为唯一的碳源ꎬ对不同条件下巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长特性数据检测ꎮ２.２.５㊀仪器设备压力蒸汽灭菌器㊁超净工作台㊁摇床器㊁分光光度仪㊁实验室ｐＨ计㊁电子分析天平㊁蒸馏装置㊁０.５~１０μＬ的移液枪㊁２０~２００μＬ的移液枪㊁酒精灯㊁１０μＬ的枪头㊁１００μＬ的枪头㊁分离试管㊁１５０ｍＬ三角瓶㊁２５０ｍＬ三角瓶㊁１００ｍＬ烧杯㊁量筒ꎮ２.３㊀实验方法选取营养肉汤培养基ꎬ培养液封口ꎬ分装于１００ｍＬ的三角瓶中三组重复ꎬ做好标记分别１㊁２㊁３ꎮ高压灭菌后在超净台下分装培养液ꎬ接种巨大芽孢杆菌ꎬ摇床培养４８小时后ꎬ使用比色皿在波长６６０ｎｍ下测定吸光度ꎬ记录数据ꎬ作为数据对照ꎮ选取碳源培养基ꎬ培养液封口ꎬ分装与１００ｍＬ的三角瓶中三组重复ꎬ做好标记分别４㊁５㊁６ꎮ高压灭菌后ꎬ调节培养液不同ｐＨ值㊁不同装液量㊁不同接菌量后在超净台下接种巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９ꎬ进行摇床４８小时后ꎬ使用比色皿在波长６６０ｎｍ下测定吸光度ꎬ记录数据ꎮ３㊀结果与讨论３.１㊀巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的生长曲线巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的生长特性随时间变化如图１所示ꎬ１０ｈ内巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长迟缓ꎻ１０~３０ｈ时间段内细菌处于对数生长期ꎬ活菌数呈现对数直线上升ꎬ生长快速ꎻ３０~５０ｈ内细菌处于稳定期ꎬ此期间细菌数量处于动态平衡ꎻ５０ｈ之后进入衰亡期ꎬ死菌数超过活菌数ꎬ活菌数量呈下降趋势ꎮ３.２㊀添加葡萄糖和蔗糖对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长特性的影响由图２可知巨大芽孢杆菌在葡萄糖培养基中的生长特性随时间变化ꎬ其中０~１０小时内巨大芽孢杆菌生长缓慢属于适应期ꎻ１０~３０小时内活菌呈现对数直线上升处于对数期ꎻ３０小时后活菌的数开始呈下降趋势ꎮ由图３可知巨大芽孢杆菌在蔗糖培养基中２１ 中国饲料添加剂㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀２０１９年第８期(总第２０８期)图１㊀巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的生长曲线图２㊀葡萄糖对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响的生长特性随时间变化ꎬ其中０~１０小时内巨大芽孢杆菌生长缓慢属于适应期ꎻ１０~３０小时内活菌呈现对数直线上升处于对数期ꎻ３０小时后活菌的数开始呈下降趋势ꎮ图３㊀蔗糖对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响３.２.１㊀装液量对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的影响巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９按装液３ｍＬ㊁５ｍＬ㊁７ｍＬ的不同体现出不同的生长特性分别如图４㊁图５㊁图６所示ꎬ０~１２ｈ内巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长迟缓ꎻ１２~３０ｈ内细菌处于对数生长期ꎬ活菌数呈现对数直线上升ꎬ生长快速ꎬ３０ｈ达到细菌生长的最高峰ꎻ３０~４０ｈ内细菌呈现下降趋势ꎬ此期间活细菌有所下降ꎻ４０~４８ｈ之后进入稳定期ꎬ细菌处于动态平衡的状态ꎮ以接菌量㊁ｐＨ值为定量ꎬ装液量为变量ꎬ可以看出装液量对巨大芽孢杆菌生长特性的影响大ꎮ图４㊀装液量３ｍＬ对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响图５㊀装液量５ｍＬ对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响图６㊀装液量７ｍＬ对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响３.２.２㊀接菌量对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的影响巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９按接菌量液３μＬ㊁５μＬ㊁７μＬ的不同体现出不同的生长特性如图７㊁３１ 陈玉粮:不同条件下巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的生长特性研究图８㊁图９所示ꎬ０~１２ｈ内巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长迟缓ꎻ１２~３０ｈ内细菌处于对数生长期ꎬ活菌数呈现对数直线上升ꎬ生长快速ꎬ３０ｈ达到细菌生长的最高峰ꎻ３０~４８ｈ此期间活细菌有所下降ꎻ４８ｈ之后会进入稳定期ꎬ细菌将会处于动态平衡的状态ꎮ以装液量㊁ｐＨ值为定量ꎬ接菌量为变量ꎬ可以看出接菌量对巨大芽孢杆菌生长特性的影响大致相同ꎮ图７㊀接菌量３μＬ对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响图８㊀接菌量５μＬ对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响图９㊀接菌量７μＬ对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响３.２.３㊀ｐＨ对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９的影响巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９按酸碱度的不同体现出不同的生长特性ꎬ当ｐＨ值是５时ꎬ如图１０所示ꎬ０~８ｈ内巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长迟缓ꎬ菌体增大ꎬ代谢活跃ꎻ８~１２ｈ时间段内细菌处于对数生长期ꎬ活菌数呈现对数直线上升ꎬ生长期时间比较长ꎬ生长快速ꎻ１２~３０ｈ内细菌处于稳定期ꎬ此期间细菌数量处于动态平衡ꎮ根据其酸碱度对巨大芽孢杆菌的影响比较明显ꎮ所以选取其作为研究对象进行讨论ꎮ图１０㊀ｐＨ５对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响当ｐＨ值是７时ꎬ如图１１所示ꎬ０~２ｈ内巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长迟缓ꎻ２~５ｈ时间段内细菌呈现线性生长ꎬ细菌代谢非常活跃ꎬ生长飞快ꎻ５ｈ后细菌开始衰退ꎬ细菌数降低ꎮ当ｐＨ值是９时ꎬ如图１２所示ꎬ０~２ｈ内巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长迟缓ꎻ２~６ｈ时间段内细菌呈现线性生长ꎬ细菌代谢非常活跃ꎬ生长飞快ꎻ６ｈ后细菌开始衰退ꎬ细菌数降低ꎮ图１１㊀ｐＨ７对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响(下转第３４页)Ｚｎ水平更敏感ꎮ更重要的是ꎬＰｅｔｒｏｖｉｃ等[３６]报道ꎬ与接受相当剂量的亚硒酸钠相比ꎬ通过在蛋鸡中补充富硒酵母ꎬ在肾脏㊁肝脏和胰腺组织中的总Ｓｅ浓度更高ꎬ并且在我们的研究中也观察到类似的统计趋势ꎮ正如预期的那样ꎬ无机矿物质添加最多的ＩＴＭ处理组显示粪便中矿物质排泄量最大ꎮ这与先前的几个研究相一致ꎬ即粪便中矿物质含量与日粮矿物质含量呈正相关[３７ꎬ３８]ꎮ即使与Ｌ－ＩＴＭ中添加较低的无机来源矿物质相比ꎬ三种有机矿物质日粮粪便中Ｃｕ㊁Ｚｎ和Ｍｎ的排泄也减少了ꎮ这些结果证实了ＯＴＭ的高生物利用度ꎮ其他研究表明ꎬ当在产蛋后期母鸡日粮中ꎬ用部分有机形式矿物质替代相应高剂量ＩＴＭ时ꎬ观察到粪便中矿物质水平的降低[１９]ꎬ同时ꎬ在１日龄肉鸡日粮添加甘氨酸或氨基酸的金属螯合矿物元素(Ｆｅ㊁Ｃｕ㊁Ｚｎ和Ｍｎ)ꎬ可降低粪便中矿物质含量[７]ꎮＢｏｒｕｔａ等[３９]表明ꎬ以有机形式饲喂８％㊁１７％或３３％的ＮＲＣ矿物质水平的母鸡与１００％无机形式的ＮＲＣ矿物质水平相比ꎬ可使锰㊁锌㊁铜和铁的排泄减少ꎮ在我们的研究中ꎬ与Ｌ－ＩＴＭ处理相比ꎬＬ－ＯＴＭ组粪便中矿物质的减少可能是由于表观吸收的改善[３]ꎮＺｎ还被证明可以激活胰腺消化酶的分泌ꎬ然后刺激营养的消化[４０]ꎬ因此ꎬ减少排泄并控制了环境的污染ꎮ根据我们的研究ꎬ较低水平的有机矿物质可能有利于控制密集的家禽养殖场所造成的环境污染ꎮ５㊀结㊀论日粮添加不同形式和水平的矿物元素影响血清㊁组织和粪便中矿物质的含量ꎮ胸肌和胰腺的差异最为明显ꎮ通常ꎬ有机微量矿物质比无机矿物质具有更高的沉积率ꎮ在基础日粮中添加商业推荐水平的６２.５％的有机矿物质ꎬ使得血清和组织中的沉积率最高ꎬ同时还将粪便中的矿物质排泄量减少到等于或低于两种无机矿物质处理的水平ꎮ参考文献[略]ꎮ(本文译自:ＧｅｎｇＷａｎｇꎬＬｕｊｉｅＬｉｕꎬＺｈｏｎｇｐｅｉＷａｎｇꎬｅｔａｌ.ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＩｎｏｒｇａｎｉｃａｎｄＯｒｇａｎｉ￣ｃａｌｌｙＢｏｕｎｄＴｒａｃｅＭｉｎｅｒａｌｓｏｎＴｉｓｓｕｅＭｉｎｅｒａｌＤｅｐ￣ｏｓｉｔｉｏｎａｎｄＦｅｃａｌＥｘｃｒｅｔｉｏｎｉｎＢｒｏｉｌｅｒＢｒｅｅｄｅｒｓ.Ｂｉ￣ｏｌｏｇｉｃａｌＴｒａｃｅＥｌｅｍｅｎｔＲｅｓｅａｒｃｈ(２０１９)１８９:２２４–２３２.)(上接第１４页)图１２㊀ｐＨ９对巨大芽孢杆菌ＢＭ１２５９生长曲线的影响４㊀结㊀论本次研究主要针对不同条件对巨大芽孢杆菌生长特性的影响ꎬ从图表中可以看出不同的条件对巨大芽孢杆菌的生长曲线有着不同的表现ꎮ根据实验结果:１)葡萄糖和蔗糖对巨大芽孢杆菌的生长曲线没有明显影响ꎮ２)相同装液量中接菌３μＬ的巨大芽孢杆菌生长曲线最快达到峰值ꎮ３)不同ｐＨ值中ｐＨ＝７时巨大芽孢杆菌的生长曲线最快达到峰值ꎮ由此可知ꎬ碳源相同㊁装液量相同㊁培养基的ｐＨ值＝７的条件下接菌量少的巨大芽孢杆菌的生长状况最好ꎬ可以作为发酵生产参考的依据ꎮ参考文献[１]邱旭ꎬ崔俊涛ꎬ程伟.解磷微生物的研究进展浅谈[Ｊ].科技视界ꎬ２０１６ꎬ(７):７４.[２]张艳云ꎬ霍永久ꎬ戴承墉ꎬ等.巨大芽孢杆菌制剂对蛋鸡舍氨和硫化氢产生量的影响[Ｃ].第二届全国畜禽和水产养殖污染监测与控制治理技术交流研讨会ꎬ２００８.[３]万国福.微生态制剂及其在养鸡业中的应用[Ｊ].生物教学ꎬ２００９ꎬ３４(１):６－８.[４]曹国文ꎬ姜永康.动物微生态制剂及其在畜禽生产中的应用[Ｊ].畜禽业ꎬ２００２ꎬ(４):２２－２３.。
不同条件下巨大芽孢杆菌BM1259的生长特性研究
不同条件下巨大芽孢杆菌BM1259的生长特性研究陈玉粮（扬州大学;江苏扬州225009）摘要：本试验以巨大芽孢杆菌BM1259为实验材料，探究巨大芽孢杆菌在不同环境条件下的生长情况㊂实验设4种不同条件：不同碳源㊁不同装液量㊁不同接菌量㊁不同pH值，每个处理重复三次，摇床培养48小时，在12小时㊁24小时㊁36小时分别用波长660nm的分光光度计记录数据，取数据的平均值㊂结果表明：葡萄糖和蔗糖对巨大芽孢杆菌的生长曲线没有明显影响；相同装液量中接菌量3ul巨大芽孢杆菌的生长曲线最快达到峰值；不同pH值中，pH为7时巨大芽孢杆菌的生长曲线最快达到峰值㊂关键词：巨大芽孢杆菌BM1259；生长特性；碳源；接菌量一㊁巨大芽孢杆菌BM1259的研究进展巨大芽孢杆菌是芽孢杆菌属.属于好氧革兰氏阳性杆菌.是一种有益菌.具有对环境和人畜无害等特点而受到人们的关注与研究㊂1935年苏联科学家孟吉娜从土壤里分离到了一株可以解磷的巨大芽孢杆菌并开始投入生产与继续的深入研究㊂农作物对化肥的利用有限.大量没有被利用的磷源在土壤中与土壤的某些成分发生反应.变成了植物难以利用的形态.我们通常称这种磷为无效态磷㊂为了保持农作物的产量人们依然会运用大量的化学肥料和有机肥来给予土壤充足的养分.日渐积累便使土壤污染状况加重㊂人们不得不开始寻找其他解决方法㊂实验证明.微生物对土壤中物质的循环有重要的意义.对磷素循环也是如此㊂巨大芽孢杆菌就是其中的一种㊂巨大芽孢杆菌在水产上可以起到净化水体的作用.主要体现在对水体中的有机物和磷降解㊁改善水体的富营养化以及水产养殖的应用㊂菌株在24h内氨碳降解率达到95%以上.并且还具有硝酸还原与亚硝酸的还原能力.其中的海藻胶裂降解酶㊁蛋白酶㊁纤维素酶活性会把构成海藻大分子的物质逐渐降解为小分子和水溶性物质.保留了海藻生物活性与一个样物质.作为水产生产过程中的有益菌进行添加可以解决水体中氨碳污染的问题㊂在水中添加巨大芽孢杆菌不仅可以分解池塘中残留的饲料以及排泄物等有机污染物起到净化水体的作用.还能避免利用化学制剂引起的第二次水体污染的问题.也可以通过人工的调控来优化水体环境中的微生物组成和数量.降低成本.提高养殖产量.对水产的生产非常具有意义㊂34在畜牧生产上巨大芽孢杆菌不仅能减少蛋鸡肠道和排泄物中的氨气和硫化氢的排放也能使蛋鸡对日粮中营养物质的吸收利用提高.使蛋鸡的采食量减少提高蛋鸡的产蛋率.增加蛋鸡血清钙磷含量㊂有研究表明巨大芽孢杆菌会分泌一种可以降解羽毛角蛋白㊁酪蛋白的水解酶㊂可以释放羽毛中角蛋白和酪蛋白使动物蛋白质饲料的生产具有很大的意义.还可以解决畜牧场畜禽排泄物㊁废弃垫料的问题遏制污染气体的源头.改善我国的畜牧生产环境.使畜牧养殖成本降低.增加利润㊂二㊁材料与方法本试验以巨大芽孢杆菌BM1259为实验材料.探究巨大芽孢杆菌在不同环境条件下的生长情况㊂实验设4种不同条件:不同碳源㊁不同装液量㊁不同接菌量㊁不同pH 值.每个处理重复三次.摇床培养48小时.在12小时㊁24小时㊁36小时分别用波长660nm 的分光光度计记录数据.取数据的平均值㊂比较巨大芽孢杆菌在各个条件下的生长情况.找到最佳的生长条件㊂本试验所用的BM1259制剂是由扬州大学动物科学与技术学院动物营养系提供.含活孢子数100亿个/g㊂2㊁培养基配制称取营养肉汤培养基22g.成分（g/L）:蛋白胨10.0g.牛肉膏3.0g.NaCl 5.0g.葡萄糖4.0g 蒸馏水1000mL.PH 值7.2-7.4.分装于150mL 的三角瓶中.每瓶100mL.121ħ条件下灭菌15min㊂用于巨大芽孢杆菌1259生长特性原始数据的检测㊂3㊁培养基营养物质蒸馏水㊁碳源㊂不同的碳源有葡萄糖㊁蔗糖㊂主要的碳源是葡萄糖㊂4㊁碳源培养基碳源5.0g,NaCl 0.1g,磷酸氢二钾0.05g 七水硫酸镁0.025g 水1000ml 蛋白胨0.5g 蒸馏水1000mL.pH 值7.0.分装于250mL 三角瓶中,每瓶100mL.121C 条件下灭菌15min㊂蔗糖和葡萄糖用于不同碳源对巨大芽孢杆菌BM1259生长特性数据的测定㊂萄糖做为唯一的碳源对不同条件下巨大芽孢杆菌BM1259生长特性数据的检测㊂5㊁仪器设备压力蒸汽灭菌器㊁超净工作台㊁摇床器㊁分光光度仪㊁实验室pH 计㊁电子分析天平㊁蒸馏装置㊁0.5-10ul 的移液枪㊁20-200ul 的移液枪㊁酒精灯㊁10ul 的枪头㊁100ul 的枪头㊁分离试管.150mL 三角瓶㊁250mL 三角瓶㊁100mL 烧杯㊁量筒㊂选取营养肉汤培养基.培养液封口.分装与100mL 的三角瓶中三组重复.做好标记分别1㊁2㊁3㊂高压灭菌后在超净台下分装培养液.接种巨大芽孢杆菌.摇床培养48小时后.使用比色皿在波长660nm 下测定吸光度.记录数据.作为数据对照㊂选取碳源培养基.培养液封口.分装与100mL 的三角瓶中三组重复.做好标记分别4㊁5㊁6㊂高压灭菌后.调节培养液不同pH 值.不同装液量.不同接菌量后在超净台下接种巨大芽孢杆菌BM1259.进行摇床48小时后.使用比色皿在波长660nm 下测定吸光度.记录数据㊂三㊁结果与讨论巨大芽孢杆菌BM1259的生长特性随时间变化如图1所示.10h 内巨大芽孢杆菌BM1259生长迟缓;10-30h 时间段内细菌处于对数生长期.活菌数呈现对数直线上升.生长快速;30-50h 内细菌处于稳定期.此期间细菌数量处于动态平衡;35图5装液量5ml 对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响50h 之后进入衰亡期.死菌数超过活菌数.活菌数量呈下降趋势㊂由图2可知巨大芽孢杆菌在葡萄糖培养基中的生长特性随时间变化.其中0~10小时内巨大芽孢杆菌生长缓慢属于适应期;10~30小时内活菌呈现对数直线上升处于对数期;30小时后活菌的数开始呈下降趋势㊂由图3可知巨大芽孢杆菌在蔗糖培养基中的生长特性随时间变化.其中0~10小时内巨大芽孢杆菌生长缓慢属于适应期;10~30小时内活菌呈现对数直线上升处于对数期;30小时后活菌的数开始呈下降趋势㊂1㊁装液量对巨大芽孢杆菌BM1259的影响巨大芽孢杆菌BM1259按装液3ml㊁5ml㊁7ml 的不同体现出不同的生长特性分别如图4㊁图5㊁图6所示.0-12h 内巨大芽孢杆菌BM1259生长迟缓;12-30h 内细菌处于对数生长期.活菌数呈现对数直线上升.生长快速.30h 达到细菌生长的最高峰;30-40h内细菌呈现下降趋势.此期间活细菌有所下降;40-48h 之后进入稳定期.细菌处于动态平衡的状态㊂以接菌量㊁pH 值为定量.装液量为变量.可以看出装液量对巨大芽孢杆菌生长特性的影响大㊂图1巨大芽孢杆菌BM1259的生长曲线图图2葡萄糖对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响图3蔗糖对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响图4装液量3ml 对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响362㊁接菌量对巨大芽孢杆菌BM1259的影响巨大芽孢杆菌BM1259按接菌量液3ul㊁5ul㊁7ul 的不同体现出不同的生长特性如图7㊁图8㊁图9所示.0-12h 内巨大芽孢杆菌BM1259生长迟缓;12-30h 内细菌处于对数生长期.活菌数呈现对数直线上升.生长快速.30h 达到细菌生长的最高峰;30-48h 此期间活细菌有所下降;48h 之后会进入稳定期.细菌将会处于动态平衡的状态㊂以装液量㊁pH 值为定量.接菌量为变量.可以看出接菌量对巨大芽孢杆菌生长特性的影响大致相同㊂3㊁pH 对巨大芽孢杆菌BM1259的影响巨大芽孢杆菌BM1259按酸碱度的不同体现出不同的生长特性.当pH 值是5时.如图10所示.0-8h 内巨大芽孢杆菌BM1259生长迟缓.菌体增大.代谢活跃;8-12h 时间段内细菌处于对数生长期.活菌数呈现对数直线上升.生长期时间比较长.生长快速;12-30h 内细菌处于稳定期.此期间细菌数量处于动态平衡㊂根据其酸碱度对巨大芽孢杆菌的影响比较明显㊂所以选取其作为研究对象进行讨论㊂当pH 值是7时.如图11所示.0-2h 内巨大芽孢杆菌BM1259生长迟缓;2-5h 时间段内细菌呈现线性生长.细菌代谢非常活跃.生长飞快;5h 后细菌开始衰退.细菌数降低㊂当pH 值是9时.如图12所示.0-2h 内巨大芽孢杆菌BM1259生长迟缓;2-6h 时间段内细菌图6装液量7ml 对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响图7接菌量3ul 对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响图8接菌量5ul 对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响图9接菌量7ul 对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响图10pH5对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响37其平均日增重和饲料效率均有所下降.推迟出栏㊂李进杰等研究选取2月龄新西兰幼兔120只.随机分为6组.经60天的饲喂试验.各组的耗料㊁增重和屠宰率均无显著差异.表明平菇菌糠代替麸皮是可行的.并能降低饲养成本.提高经济效益㊂邹知明等研究表明发酵后的菌糠饲料有改善日增质量和饲料转化率的趋势;发酵菌糠可以降低家兔的腹泻率51.85%和病死率50.0%;添加20%菌糠饲养家兔效果好于添加40%;菌糠饲喂家兔.能降低饲养成本㊂发酵平菇菌糠养兔值得推广㊂4小结平菇菌糠是一种重要的非常规饲料原料.其在动物中应用有很重要的前景㊂但目前关于平菇菌糠的营养成分尚未建立标准的数据库以及平菇菌糠中的抗营养因子的限制导致其在动物生产中的应用目前仅存在于生产性能等相对较浅的层次.关于平菇菌糠对动物机体理化性质的影响以及其机制还需要进一步探讨㊂参考文献（略）呈现线性生长.细菌代谢非常活跃.生长飞快;6h后细菌开始衰退.细菌数降低㊂四㊁结论本次研究主要针对不同条件对巨大芽孢杆菌生长特性的影响.从图表中可以看出不同的条件对巨大芽孢杆菌的生长曲线有着不同的表现㊂根据实验结果:1.葡萄糖和蔗糖对巨大芽孢杆菌的生长曲线没有明显影响㊂2.相同装液量中接菌3ul的巨大芽孢杆菌生长曲线最快达到峰值㊂3.不同pH值中pH=7时巨大芽孢杆菌的生长曲线最快达到峰值㊂由此可知.碳源相同㊁装液量相同.培养基的pH值=7的条件下接菌量少的巨大芽孢杆菌的生长状况最好.可以作为发酵生产参考的依据㊂参考文献（略）图11pH7对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响图12pH9对巨大芽孢杆菌BM1259生长曲线的影响（上接第25页）38。
巨大芽孢杆菌形态特征
巨大芽孢杆菌形态特征巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）是一种常见的芽孢形成菌，属于芽孢杆菌属（Bacillus）的一员。
它的形态特征引人注目，不仅因为其巨大的细胞尺寸，还因为其独特的细胞结构和特殊的芽孢形态。
1. 巨大芽孢杆菌的细胞形态特征巨大芽孢杆菌的细胞通常呈长杆状，相对于其他细菌，其细胞尺寸更大。
一般而言，其细胞长度可达到3-5微米，直径为0.5-1微米。
这种长杆状的细胞形态使得巨大芽孢杆菌在显微镜下较为容易观察和识别。
巨大芽孢杆菌的细胞壁具有很高的抗原性，这也为其在实验室中的培养和鉴定提供了便利。
通过染色和显微镜观察，我们可以清晰地看到细胞壁的结构，进一步验证其为巨大芽孢杆菌。
2. 巨大芽孢形态特征与其他芽孢杆菌相比，巨大芽孢杆菌形成的芽孢具有独特的形态特征。
芽孢是细菌的休眠和耐受环境压力的结构，具有较高的抗逆性和存活能力。
巨大芽孢杆菌的芽孢相对较大，成熟时呈圆形或椭圆形。
其直径一般在1-1.5微米左右，相对于细胞本身的大小而言，芽孢可算是相对较大的。
这种较大的芽孢形态有助于巨大芽孢杆菌在外界环境中的存活和繁殖。
另外，巨大芽孢杆菌的芽孢表面通常光滑，没有突起或毛状结构。
这使得芽孢在较为恶劣的环境下更难被外界因素破坏，也有助于芽孢的传播和定植。
3. 观点和理解巨大芽孢杆菌的形态特征在科研领域和工业应用中具有重要意义。
由于其较大的细胞尺寸和芽孢形态，在实验室研究中往往能够较容易地与其他菌种进行区分，并且便于进行鉴定和分离。
巨大芽孢杆菌广泛应用于工业生产中。
其形成的芽孢可以用于生物农药和微生物制剂的生产。
芽孢的抗逆性可以保证微生物制剂在储存和运输过程中的稳定性，进而提高产品的质量和有效性。
巨大芽孢杆菌的芽孢也可以用于生物肥料的制备，有助于提高农作物的产量和品质。
总结回顾：巨大芽孢杆菌是一种细菌，其形态特征包括较大的细胞尺寸和特殊的芽孢形态。
巨大芽孢杆菌的细胞通常呈长杆状，细胞壁具有高的抗原性。
巨大芽孢杆菌生产流程
巨大芽孢杆菌生产流程
朋友！今天来跟你唠唠巨大芽孢杆菌的生产流程。
这玩意儿我可是搞了 20 多年啦，经验那是相当丰富！
先说这第一步啊，准备培养基。
哇，这可太关键了！就像做饭得有好食材一样。
我记得刚开始弄的时候，我还搞错过配方，唉，那叫一个惨！不过后来长记性啦。
说到这培养基的配置，材料可得选好喽。
有一次，我用了一批不太靠谱的原料，结果你猜怎么着？那菌长得歪七扭八的！嗯...这可得小心。
然后就是接种啦。
这一步就像给种子找个好地儿种下去。
我跟你说，有一回我手一抖，接种量弄错了，那结果真是让我哭笑不得！
培养的时候，温度和湿度可得控制好。
我记得有一次，设备出了点小毛病，温度忽高忽低的，把我急得哟！
对了，说到这设备，前几年新出的那些高级玩意儿，我一开始还真不太会用，不过慢慢也就琢磨明白了。
你说这生产流程难不难？其实啊，只要细心点，多琢磨，也没那么可怕。
就像我当年，也是一路磕磕绊绊走过来的。
哦，差点忘了说，培养过程中还得时刻观察，要是发现有啥不对劲，得赶紧调整。
有一回啊，我出去玩了一会儿，回来一看，差点没把我气晕，菌的生长情况完全不对头！
这生产过程中啊，还有好多小细节。
比如说，有时候会闻到一股怪怪的味道，那可能就是哪里出问题啦。
还有啊，听说隔壁厂的老王，因为操作不当，损失惨重呢！咱可不能学他。
我这东一榔头西一棒槌的，不知道你听明白没有？要是有啥不明白的，尽管问我！说不定我还能想起点啥新的东西跟你分享分享。
总之呢，这巨大芽孢杆菌的生产流程，只要用心，肯定能搞定！加油吧！。
巨大芽孢杆菌功能简介
巨大芽孢杆菌
【适用范围】生物肥料、水产养殖的应用。
【产品特点】
1、强烈的溶磷作用，巨大芽孢杆菌代谢过程中产生的碱性或酸性磷酸酶、脱氢酶、植酸酶等物质使有机磷酸盐矿化，成为植物可以吸收利用的可溶性磷；另外巨大芽孢杆菌可在代谢过程中分泌乳酸、氨基酸、柠檬酸等有机酸，直接溶解土壤中难溶性磷酸盐，释放出磷及铁、铝、钙等中微量元素。
2、广谱的抑菌效果，巨大芽孢杆菌代谢过程中可产生伊枯草菌素、几丁质酶等抑菌物质，对不同植物的细菌和真菌病害具有防治作用，是植物病害生物防治的主要生防菌种。
3、显著的促生效果，巨大芽孢杆菌作为植物根际促生菌(PGPR)，代谢过程中可产生多种植物激素(吲哚乙酸、细胞分裂素等)、酸性物质、生物酶类及维生素等生理活性物质，刺激调节植物生长。
4、高效的降解作用，巨大芽孢杆菌能够产生亚硝酸盐还原酶，对水体中的亚硝酸盐具有较强的降解能力；繁殖速度快，产酶能力强，耐低温、微好氧，能够有效去除水体中的有机物、氮、磷，控制藻类生长，起到净化富营养化水体的作用。
【主要成分】巨大芽孢杆菌活芽孢、发酵代谢产物、固态发酵基质。
巨大芽孢杆菌分解有机磷的过程
巨大芽孢杆菌分解有机磷的过程
巨大芽孢杆菌是一种常见的土壤细菌，它具有分解有机磷的能力。
有机磷是一种土壤中常见的磷源，但大多数植物无法直接利用它。
巨大芽孢杆菌通过一系列酶的作用来将有机磷化合物分解成无机磷，从而使其更容易被植物吸收利用。
首先，巨大芽孢杆菌分泌一种叫做有机磷酸酶的酶。
有机磷酸酶能够将有机磷化合物水解成磷酸盐和有机物。
这是一个关键的步骤，因为磷酸盐是植物可以直接利用的形式，而有机物则可以成为细菌自身的营养来源。
接下来，巨大芽孢杆菌利用另一种酶，称为磷酸酶，将磷酸盐进一步水解成无机磷。
这种无机磷可以被土壤中的植物根系吸收，从而提供它们生长所需的营养。
除了这些酶的作用，巨大芽孢杆菌还可能通过其他代谢途径参与有机磷的分解过程。
例如，一些菌株可能具有亚硝酸盐还原酶和亚硝酸酶等酶，通过硝酸盐代谢途径来促进有机磷的分解。
总的来说，巨大芽孢杆菌分解有机磷的过程涉及多种酶的协同
作用，这些酶能够将有机磷化合物逐步分解成植物可利用的无机磷形式。
这一过程不仅有助于提高土壤中磷的有效性，也促进了植物的生长和发育。
希望这些信息能够对你有所帮助。
巨大芽孢杆菌形态特征(一)
巨大芽孢杆菌形态特征(一)巨大芽孢杆菌形态特征巨大芽孢杆菌是一类广泛存在于土壤、水体和活性污泥等地方的芽孢杆菌，其名称源于其细胞形态的特殊性质。
下面我们就来了解一下巨大芽孢杆菌的形态特征。
–营养型巨大芽孢杆菌一般为厌氧性细菌，可以利用多种有机物质作为营养源进行生长繁殖，其中以各种简单糖类和脂肪酸为主要碳源。
–形态特征巨大芽孢杆菌细胞形态特殊，主要表现为菌体呈不规则状，体长与直径不一致，从而形成了一种多形性的特点。
此外，巨大芽孢杆菌的细胞壁厚度较大，具有较强的抵抗压力和耐高温、耐干旱的能力。
–芽孢形态巨大芽孢杆菌的形态特征在芽孢形态上表现得更为明显。
巨大芽孢杆菌的芽孢呈束形、长棒形或梭形。
此外，巨大芽孢杆菌的芽孢数量也较多，单个细胞可以形成多个芽孢结构。
–运动能力巨大芽孢杆菌不具备运动能力，但其营养和繁殖速度较快，容易在厌氧环境中大量繁殖并形成团状结构。
–应用价值巨大芽孢杆菌的形态特征和环境适应性质使其在农业、工业等领域具有重要应用价值。
巨大芽孢杆菌可以应用于食品、饮料、化妆品、纺织、制药等多个行业的生产中，而其优异的应用效果也得到了广泛的认可。
以上就是关于巨大芽孢杆菌形态特征的一些介绍。
巨大芽孢杆菌的独特形态和多样化的应用前景，为我们深入了解土壤微生物提供了有益参考。
–芽孢产生条件巨大芽孢杆菌的芽孢产生通常发生在环境恶劣或生存条件不适宜的情况下。
因此，细胞产生芽孢是一种保护性反应，有利于细胞的生存和传播。
巨大芽孢杆菌的芽孢产生条件主要包括菌落状态、营养缺乏、温度、湿度、氧气气氛等，不同条件下芽孢的产生数量和形态都有所不同。
–巨大芽孢杆菌的分类巨大芽孢杆菌属于芽孢杆菌科(Bacillaceae)的一种，其属名为Bacillus megaterium，同属芽孢杆菌科的还有枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、安氏芽孢杆菌(Bacillus anthracis)、木杆菌(Bacillus cereus)等。
一株巨大芽孢杆菌多功能生防降解菌株及其应用
专利名称：一株巨大芽孢杆菌多功能生防降解菌株及其应用专利类型：发明专利
发明人：王金花,温胜芳,朱鲁生,王军,王兰君,杜仲坤
申请号：CN202111546121.2
申请日：20211216
公开号：CN114058557A
公开日：
20220218
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一株巨大芽孢杆菌多功能生防降解菌株及其应用，属于农业微生物技术领域。
所述巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)CW‑6，其保藏编号为：CCTCCNO：M20211133，该该巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)对部分土传病原菌有生防效果，同时具有促进植物生产的作用，可应用于水体、土壤中，以达到修复毒死蜱和泰乐菌素污染土壤、防治土传病害以及促生的目的。
申请人：山东农业大学
地址：271018 山东省泰安市岱宗大街61号
国籍：CN
代理机构：济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业)
代理人：尚久恒
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巨大芽孢杆菌应用于改善茄芯香气品质的研究
１．２ 试验方法
１．２．１ 木质素降解菌株的筛选。
１．２．１．１ 初筛。 取烟叶提取液 ５ ｍＬ，在无菌条件下，用无菌
生理盐水进行梯度稀释，取 １０ 、１０ 、１０ 的稀释液各１００ μＬ
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条件下，茄芯烟叶木质素降解率达到 ２３．０２％，且发酵后中性香气总量较发酵前提高了 ３０．２２％。
关键词 巨大芽孢杆菌；茄芯烟叶；木质素降解酶；响应面试验；中性香气
中图分类号 Ｑ ８１５ 文献标识码 Ａ
文章编号 ０５１７－６６１１（２０２３）１０－００１０－０６
ｄｏｉ：１０．３９６９ ／ ｊ．ｉｓｓｎ．０５１７－６６１１．２０２３．１０．００３
ｌｅａｖｅｓ， ａｎｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｐｒｏｃｅｓｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａｎｄ ｃｅｎｔｒａｌ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ： ｔｈｅ ｉｎｏｃｕｌｕｍ ｓｉｚｅ ｗａｓ ７％， ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３７ ℃ ， ｔｈｅ ｉｎｉｔｉａｌ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ２５％， ａｎｄ ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ
了真菌在烟叶中很难存活，近年来对于木质素降解的研究也
大多是细菌［２］ 。 如李灵灵等［８］ 从土壤中筛选出一株变色栓
菌，该菌可降解水稻秸秆中 ３５％的木质素；Ｘｕ 等［９］ 研究了细
巨大芽孢杆菌
巨大芽孢杆菌巨大芽孢杆菌为革兰氏阳性菌，属于芽孢杆菌，工业上用于生产葡萄糖异构酶，在农业上可用于制造磷细菌肥料。
基本信息中文学名巨大芽孢杆菌拉丁学名 Bacillus megaterium二名法 Bacillus megaterium界细菌界门厚壁菌门纲杆菌纲目芽孢杆菌目科芽孢杆菌科属芽孢杆菌属种巨大芽孢杆菌生物简介巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium)，为革兰氏阳性菌，属于芽孢杆菌属（Bacillus)。
它能够形成芽孢，其芽孢的抗辐射能力是E.coli的36倍。
工业上用于生产葡萄糖异构酶，同时也是有机磷的分解菌，因此，在农业上可用于制造磷细菌肥料。
应用作物：生姜、兰花；防治对象：生姜细菌性青枯病、兰花炭疽病病。
形态特征杆状，末端圆。
单个或呈短链排列。
1.2～1.5×2.0～4.0微米。
能运动。
革兰氏阳性。
芽孢1.0～1.2×1.5～2.0微米，椭圆形，中生或次端生。
液化明胶慢、胨化牛奶、水解淀粉、不还原硝酸。
[1] 巨大芽孢杆菌为产孢杆菌，且为革兰氏阳性菌及好氧菌，也为常见的油中腐生菌。
生防特点从生姜田土分离的细菌B1301鉴定为巨大芽孢杆菌。
在盆栽条件下，B1301处理种姜能够有效地防治由茄伯克氏菌引起的生姜细菌性青枯病，在种姜带菌率小于5%的情况下，防治效果在75%以上；B1301可在生姜块茎周围有效定殖，并能有效地降低青枯病菌的群体数量；也能从老块茎向新块茎转移。
B1031通过抗菌物质以及竞争作用达到防治病害的目的。
[3] 生防菌主要通过在植物根际定殖、分泌抗菌物质和营养竞争而拮抗病原菌。
芽孢是细菌在其生长后期在细胞内形成的一个圆形或椭圆形的抗逆性休眠体。
芽孢具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等一些特殊的性质。
由于芽孢较其营养体细胞易保藏、复活率高，是制备生防菌制剂的理想存在形式，因此对芽孢形成条件的研究具有重要的实际意义。
本实验室以胶胞炭疽菌(C. gloeosporioides)为指示菌筛选得到了一系列对兰花炭疽病具拮抗作用的细菌菌株，对其中活性较高的巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium1-12菌株产芽孢条件进行摸索，以提高其对不良环境因素的抗性，延长制剂保存期，稳定活性，为防治兰花炭疽病的拮抗细菌进入工业化生产提供理论依据。
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巨大芽孢杆菌
巨大芽孢杆菌为革兰氏阳性菌，属于芽孢杆菌，息
中文学名 巨大芽孢杆菌
拉丁学名 Bacillus megaterium
二名法 Bacillus megaterium
界 细菌界
门 厚壁菌门
纲 杆菌纲
目 芽孢杆菌目
形态特征
杆状，末端圆。单个或呈短链排列。1.2～1.5×2.0～4.0微米。能运动。革兰氏阳性。芽孢1.0～1.2×1.5～2.0微米，椭圆形，中生或次端生。液化明胶慢、胨化牛奶、水解淀粉、不还原硝酸。[1] 巨大芽孢杆菌为产孢杆菌，且为革兰氏阳性菌及好氧菌，也为常见的油中腐生菌。
生防特点
科 芽孢杆菌科
属 芽孢杆菌属
种 巨大芽孢杆菌
生物简介 巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium)，为革兰氏阳性菌，属于芽孢杆菌属（Bacillus)。它能够形成芽孢，其芽孢的抗辐射能力是E.coli的36倍。工业上用于生产葡萄糖异构酶，同时也是有机磷的分解菌，因此，在农业上可用于制造磷细菌肥料。应用作物 ：生姜、兰花；防治对象 ：生姜细菌性青枯病、兰花炭疽病病。