芽孢杆菌常用培养基配方

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枯草芽孢杆菌液体培养基生长现象

枯草芽孢杆菌液体培养基生长现象概述在微生物学中，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种常见的革兰氏阳性细菌。

它广泛存在于土壤和水中，并且被广泛应用于食品工业、农业和制药工业等领域。

为了研究枯草芽孢杆菌的生长现象，在实验室中培养其液体培养基成为常见的研究手段。

枯草芽孢杆菌液体培养基的制备培养基成分枯草芽孢杆菌液体培养基的制备需要以下基本成分： 1. 水 2. 碳源：常见的碳源包括葡萄糖、麦芽糖等。

3. 氮源：常见的氮源包括酵母提取物、氨基酸等。

4. 矿盐：如硫酸镁、氯化钠等。

5. 培养基调节剂：如pH调节剂、酒石酸等。

制备步骤1.将适量的水加热至沸腾，然后冷却至室温。

2.在冷却后的水中逐一加入碳源、氮源和矿盐，并搅拌均匀。

3.检查溶液的pH值，并使用pH调节剂进行调整，使其接近中性。

4.在完成以上步骤后，培养基溶液已制备好，可装入适当的容器中。

枯草芽孢杆菌液体培养基的生长现象枯草芽孢杆菌在液体培养基中的生长现象受多种因素的影响，并可呈现出多种特征。

生长曲线枯草芽孢杆菌在液体培养基中的生长通常可分为四个阶段：潜伏期、指数增长期、平稳期和死亡期。

潜伏期潜伏期是细菌在培养基中适应环境的过程，此时细菌数量增长较慢，可持续数小时至数天。

指数增长期指数增长期是细菌数量迅速增加的阶段，细菌以指数倍增长。

平稳期在平稳期，细菌数量达到一定水平，净增长率趋于零。

此时，生长速率与死亡速率之间达到平衡。

死亡期当细菌数量超过一定阈值时，资源的枯竭和毒性物质的积累可能导致细菌数量开始减少，进入死亡期。

形态特征枯草芽孢杆菌在液体培养基中呈现出以下形态特征： 1. 长杆状细胞：在培养基中，枯草芽孢杆菌通常呈现出长杆状的形态。

2. 枯草芽孢的形成：在适宜的条件下，枯草芽孢杆菌可以形成孢子，这些孢子在液体培养基中可观察到。

影响因素枯草芽孢杆菌液体培养基的生长受到多种因素的影响，包括： 1. 温度：枯草芽孢杆菌在不同温度下的生长速率存在差异，适宜的温度有助于细菌的生长。

芽孢杆菌检测方法及注意事项

枯草、地衣芽孢杆菌检测方法及注意事项一、检测方法1.试剂和培养基1.1 样品稀释液：准确移取1mL吐温80，9gNacl用水定溶1000mL，分装400mL每瓶，灭菌备用。

1.2 芽孢杆菌培养基：蛋白胨：10g酵母浸粉：5gNaC1盐：10g琼脂粉：15gPH值：7.0～7.2蒸馏水：1000mL分装，121℃，30分钟蒸汽灭菌后备用。

2.检测步骤2.1样品处理（每个样品至少重复检测2次）a) 称取1～3g(准确至0.0002g)的试样或标样于250 mL内置磁性棒的中性瓶中（1000亿称1 g左右，2000亿称3 g左右，3000亿称2 g左右，5000亿称1.2 g左右，称样量视具体芽孢数而定）。

b) 加100 mL稀释液到已称样的中性瓶内。

c) 把上述中性瓶放在磁力搅拌器平台上,混合15min；之后再猛烈摇动1min，再次磁力搅拌混合15min。

d) 将已混合好的试样放入超声波水浴器中（超声波的水平面与试样液面平齐，试样瓶应放在超声波振源处），共超声20min（10min时停止，猛烈摇动试样瓶1 min，然后再超声10min）。

e)超声之后，再次用磁力搅拌混合60min.2.2样品的稀释a）向无菌试管分别加入4.5mL稀释液(1000亿6支，2000亿、3000亿、5000亿7支)。

b)吸取0.5mL已处理好的试样溶液于第1支试管中，再从第1支试管吸取0.5mL试样溶液于第2支试管，依此进行到倒数第二支试管(每次加液后,需混合均匀，再进行下一次操作)。

c) 将已混好的倒数第二支试管放入70℃水浴锅中水浴30min。

冷却至室温后准确吸取0.5mL该试管试样溶液于最后一支试管，混匀、备用。

每次操作必须使用无菌枪头，枪头不可重复使用。

2.3 涂平板及培养从最后一支试管中准确移取0.1 mL的试样到每个营养琼脂平板中（共4个平板），各平板均标记上分析号、日期、稀释度。

使用1支涂棒，将已放在平板中的试样扩展开（从中心往外移，成辐射状扩展）；在扩展完4个试样平板后，涂棒在1个空白营养琼脂平板上进行涂布（保证涂棒上沾附的活芽胞数也能进行培养、计数）。

短小芽孢杆菌培养基和生长条件

短小芽孢杆菌培养基和生长条件
短小芽孢杆菌（Bacillussubtilis）是一种常见的革兰氏阳性细菌，被广泛应用于工业生产和科学研究中。

为了成功培养短小芽孢杆菌，需要提供适宜的培养基和生长条件。

1.培养基选择：
短小芽孢杆菌可以利用多种培养基进行培养，以下是几种常用的培养基：
营养琼脂培养基：适合一般的短小芽孢杆菌培养，提供必需的营养物质。

TGY培养基：含有大量的蛋白胨、蛋白胨酵解物和酵母浸出物，适用于高密度培养。

埃氏培养基：含有酵母提取物、蔗糖和纽博尔特氯化钠，适用于制备孢子。

亚洲细胞培养基：适用于短小芽孢杆菌的体外培养。

2.生长条件：
短小芽孢杆菌对于生长条件的要求相对宽松，但仍然需要一定的条件进行培养和生长。

以下是几个常用的条件：
温度：适宜的生长温度为3037摄氏度，可以在较宽的温度范围内生长。

pH值：最适宜的pH值为6.57.5，但短小芽孢杆菌可以在pH值为58之间生长。

氧气浓度：短小芽孢杆菌是一种嗜氧菌，需要较高的氧气浓度进行生长。

因此，在培养过程中需要提供充足的通气。

摇床速度：通常在培养液中需要适度的搅拌，以保持培养液的均匀性和氧气的供应。

摇床速度通常为200300转/分钟。

培养时间：短小芽孢杆菌的生长速度相对较快，通常需要2448小时就可以达到最佳生长状态。

以上是短小芽孢杆菌的培养基选择和生长条件的一些简要说明，具体的培养方法还需要根据实际需要和研究目的进行具体调整和优化。

芽孢杆菌分离纯化及保种

芽孢杆菌分离纯化及保种
一、实验目的：从海参池底泥中分离提纯芽孢杆菌并对其进行鉴定保种
二、实验材料：底泥样品，刺激芽抱生长培养基，芽抱菌分离培养基，琼脂培养基，斜面培养基，生理盐水等其他常见微生物实验常用器材
培养基配方：
1.刺激芽抱生长培养基：蛋白胨l0g，酵母膏3g，淀粉3g,MgS040.lg,KHZP04
1.5g,Na2HP042g，水1000mL，琼脂15g，pH7.8
2.芽抱菌分离培养基：蛋白胨3g,葡萄糖5g，酵母膏5g,KZHP044g,
3.08%MnS04 1mL，琼脂18g，水1000mL,pH自然(加热煮好后加3.08%MnS04)
3.琼脂培养基：牛肉膏5g，蛋白胨10g,NaCl5g，18g的琼脂，水1000mI,pH 7.2^-7.4
4.斜面培养基即琼脂培养基
三、实验步骤：
1、配制刺激芽孢杆菌生长的培养基、芽抱菌分离培养基、琼脂培养基、生理盐水
2、对各种实验所需仪器进行灭菌
3、将底泥样品1g放入9ml生理盐水中，震荡，充分混匀分散样品，最后取上清液1ml涂布于刺激芽孢杆菌生长的培养基（液体）上，30℃培养24h
4、将培养好的菌悬液置于80℃水浴锅中加热10---20min，杀死不能形成芽抱的其它菌体，平板涂布法接种于芽抱菌分离培养基，30℃培养24--48h，挑取疑似菌落，30℃培养24h后观察并记录
5、将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2—8℃的冰箱中保藏。

四、实验结果：
芽孢杆菌菌落形态特征:菌落为圆形，直径多在3-10mm之间，淡黄色，中间颜色较深，表面平整不光滑，无光泽，边缘不整齐
配制刺激芽孢杆菌生长的培养基：芽抱菌分离培养基：。

芽孢杆菌常用培养基配方

芽孢杆菌常用培养基配方（按理说，该实验的所有培养基都在这了，后红字更为清楚些。

摘自百度）一、肉汤琼脂培养基：蛋白胨10g ，牛肉膏15g ，NACL15g ，蒸馏水1000ml ，琼脂18g 。

调节PH7.2,0.1MPA20min 灭菌。

如果用液体做培养基，则去掉琼脂即可。

100 mL/组，其中20 mL 液体培养基/250 mL△中（内装玻璃珠10颗）；50 mL固体斜面培养基分装在试管中：5mL/支，10支。

2、或是（J-琼脂培养基：胰蛋白胨5g,酵母膏15g,磷酸氢二钾3g,葡萄糖2g, 琼脂20g, 蒸馏水1000ml。

调节PH7.3—7.5Mpa 30min灭菌。

）二、过氧化氢酶测定1、试剂：3-10%过氧化氢2、接种与培养：一般将测试菌种接种于肉汤琼脂斜面上，30度下培养1-2天。

3、试验方法：取一干净载玻片，在上面加一滴3-10%的双氧水，挑取1环1-2天的的菌苔，在双氧水溶液中涂抹，如有气泡出现（O2），作为过氧化氢酶阳性，无泡为阴性。

也可以将过氧化氢液直接加入斜面上，观察气泡的产生。

三、需氧性测定1、培养基：酪素水解物20g,葡萄糖10g, ,NACL5g,HOCH2SO3Na1g,HSCH2COONa2g,琼脂15g,蒸馏水1L。

调节PH7.2，分装试管，0.06Mpa，30min灭菌，培养基不摆斜面。

2、接种与观察：用一小环的肉汤菌液，穿刺接种到上述培养基中（穿刺管底），一般与30 度培养3-7天观察结果。

若芽孢杆菌在琼脂柱表面生长为好氧菌，沿穿刺线生长则为厌氧菌。

四、酪素水解（用于检测不同种类的芽孢杆菌是否具有分解酪素的特点）1、培养基（1）脱脂牛奶制备取新鲜牛奶，煮沸后去掉上层油脂，再经离心脱脂（3000r/min,10min）,除去上层油脂，即为脱脂牛奶。

（2）牛奶平板的制备取50ml的脱脂牛奶放入一只三角瓶中，另外称1.5g琼脂置于含有50ml蒸馏水的另外3只三角瓶中，然后将两液分开灭菌，0.06Mpa-20min，带冷至45-50摄氏度时，速将两液混匀倒平板，即为牛奶平板。

胶质芽孢杆菌

胶质芽孢杆菌的活化、分离纯化、优良菌株的保藏一、培养基的配方1.硅酸盐细菌培养基：酵母浸膏0.3克，蔗糖10.0克，硫酸铵0.5克，碳酸钙0.5克，七水硫酸镁0.5克，磷酸氢二钾1克，蒸馏水1000毫升，pH值7.0-7.2。

2.无机磷培养基：蒸馏水1000毫升，葡萄糖10.0克，硫酸铵0.5克，七水硫酸镁0.3克，氯化钠0.3克，氯化钾0.3克，硫酸亚铁0.036克，一水硫酸锰0.03克，磷酸三钙2.0克，琼脂15克，pH7.0-7.2。

3.钾细菌筛选培养基：蔗糖（10g），酵母膏（0.5g），Na2HPH4（2g），（NH4）2SO4(1g)，MgSO4.7H2O(0.5g)，CaCO3(1g)，钾长石粉（1g），其中K2O质量分数为9.60%，琼脂（15g），去离子水（1L），调节初始pH值为7.0。

二、菌株活化、培育和挑选：将菌种提前从下层冰箱取出，然后接种到硅酸盐细菌培养基中进行28℃恒温培养2天，每隔12小时观察一次，并选取长势优良菌株，实施分离纯化，直到得到生长优良的纯菌落。

三、解磷、解钾能力的测定：将上述所挑选的优良菌种接种于无磷培养基恒温培养七天，采用溶磷圈法进行解磷能力测定。

用溶磷圈直径与菌落直径的比值（HD/CD）大小分析该菌种的解磷能力，比值越大，解磷性能就越好。

把解磷能力优良的胶质芽孢杆菌采用低温斜面保藏法保藏。

四、菌种扩大培养培养液用5个100ml三角瓶分装，高压灭菌或间歇灭菌后，挑选斜面菌种上的菌苔接种到培养液中，25到28℃下培养3天。

培养期间，每天要定时摇瓶3到5次，每次3分钟，以加速菌体繁殖。

然后接种到5个500ml的三角瓶扩大培养。

最后接种到2000ml的塑料壶中培养并保存。

钾细菌在这种以淀粉为能源的培养基中生长繁殖时，它们的夹馍消失，且能大量生成芽孢。

因此培养液没有粘性，菌体是均匀的悬浮在培养液中的，这样的菌悬液很适合作固体菌剂接种的菌种。

芽孢杆菌的发酵方法

芽孢杆菌的发酵方法
芽孢杆菌是一种常见的细菌，具有很高的产酶能力，被广泛应用于发
酵工业中。

下面我们将介绍关于芽孢杆菌的发酵方法。

一、菌液筛选
首先，需要筛选出优良的芽孢杆菌菌株，进行菌株的培养和培育。

具
体的筛选方法通常包括挑选菌株的活性、产酶能力和耐酸碱性等特性。

二、基础培养基的配制
芽孢杆菌的发酵需要使用到基础培养基，因此，需要针对不同的菌株
配制不同的培养基，以保证菌株能够充分生长和繁殖。

常用的基础培
养基包括磷酸氢二钾、酵母提取物和玉米粉等原料。

三、发酵条件的设定
在芽孢杆菌的发酵过程中，需要对于发酵条件进行调整和设定，以保
证菌株的繁殖和产酶能力都能够充分发挥。

具体的发酵条件包括温度、pH值、氧气含量等参数。

四、产酶的收获
在芽孢杆菌的发酵过程中，需要通过不同的收获方式获取产生的酶，以便后续的应用。

一般来说，可以通过分离菌体、离心沉淀等方式收获酶，然后进行纯化和分离。

五、产酶的应用
最后，通过对产生的酶进行应用和利用，可以获得具有广泛应用价值的商品酶。

例如，芽孢杆菌产生的蛋白酶可以应用于食品加工、药物制剂和皮革加工等领域，具有很大的经济和社会意义。

总之，芽孢杆菌的发酵方法是一项重要的工艺技术，需要全面了解并掌握相关的技术方法和操作技巧，以保证发酵产物的纯度和品质。

同时，还需要不断探索和研发新的发酵技术和应用领域，为经济与社会的可持续发展做出积极贡献。

枯草芽孢杆菌的培养

菌种的培养1.1材料1.1.1 菌种枯草芽孢杆菌。

1.1.2 培养基（1）LB培养基：蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl10g，蒸馏水1000ml，pH为7，（可溶性淀粉20g）琼脂20g。

（2）筛选用培养基：含有2%可溶性淀粉的LB培养基。

（3）种子培养基：豆饼粉4%，玉米粉3%，Na2HPO40.8%，(NH4)2SO40.4%，NH4Cl0.15%，H2O。

（4）发酵培养基：豆饼粉5.6%，玉米粉7.2%，Na2HPO40.8%，(NH4)2SO40.4%，NH4Cl0.13%，CaCl20.13%，α—淀粉酶50g。

【2】1.1.3 主要试剂蔗糖、葡萄糖、淀粉、玉米淀粉、麦芽糖、酵母浸出物、胰蛋白胨、牛肉膏、尿素、氯化铵、硫酸锰、硫酸镁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、硫酸亚铁、氯化钠和氯化钙。

1.1.4 仪器设备控温摇床、高压蒸气灭菌锅、电子天平、pH测定仪、无菌操作台和紫外分光光度计。

1.2方法1.2.1 培养基的制备(1)称量按培养基配比依次准确地称取酵母膏、NaCl、蛋白胨放入烧杯中，并在烧杯中加入少量蒸馏水。

注：酵母膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯，也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，酵母膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片【3】。

(2)溶化可溶性淀粉溶液的配制方法：将所需克数的可溶性淀粉放入一个小烧杯中，加入少量蒸馏水，搅拌成糊状，然后将糊状溶液均匀倒入少于培养基总体积的沸水中，一边搅拌一边加热，待其溶化成透明状后继续在电炉上加热5分即制成可溶性淀粉溶液。

如果配制固体培养基时，将已准备好的可溶性淀粉溶液倒入烧杯中，将称好的琼脂放入已溶的药品中，再加热溶化，补水到所需的总体积。

在制备用三角瓶盛固体培养基时，一般也可先将一定量的液体培养基分装于三角瓶中，然后按2%的量将琼脂直接分别加入各三角瓶中，不必加热溶化，而是灭菌和加热溶化同步进行，节省时间【4】。

常用培养基配方

常用培养基配方1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 调至 6.8适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) pH 调至7.0-7.2适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO40.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1ｇＮa2MoO4.2H2O 微量Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract 微量Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g调pH 至 7.2适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml注意：121℃灭菌1小时,分装入18ⅹ18毫米试管，每管深度达6厘米。

芽孢杆菌培养基配方

芽孢杆菌培养基配方
芽孢杆菌（Bacillus）是一类常见的细菌属，具有广泛的应用和研究价值。

以下是一种常用的芽孢杆菌培养基的配方，称为Luria-Bertani培养基（LB培养基）：
1. 配方：
- 蛋白胨（tryptone）：10 g/L
- 酵母提取物（yeast extract）：5 g/L
- 氯化钠（sodium chloride）：10 g/L
- 琼脂（agar）（如果需要制备琼脂平板）：15 g/L
2. pH调节：
- 使用NaOH或HCl调节pH至约7.0（可以根据需要微调pH值）
3. 制备方法：
- 将蛋白胨、酵母提取物和氯化钠加入适量的蒸馏水中，充分溶解。

- 如果需要制备琼脂平板，将琼脂加入上述溶液中，加热搅拌使其溶解。

- 如果需要琼脂平板，将培养基分装至培养皿中，待凝固后，在室温下保存或在4摄氏度冷藏。

- 如果需要液体培养基，将培养基分装至培养瓶中，用适当的塞子或膜覆盖。

- 对于液体培养基，可通过高压灭菌或自动厌氧培养等
方法进行无菌处理。

LB培养基是一种常用的通用培养基，适用于很多细菌的培养和研究。

需要注意的是，具体的芽孢杆菌培养基配方可能因研究需求和菌株特性而有所不同。

因此，在具体的实验或应用中，建议根据需要进行适当的调整和优化。

胶冻样芽孢杆菌工艺

胶冻样芽孢杆菌是一种常见的细菌，广泛存在于自然界中。

它可以利用多种有机化合物作为碳源和能量源生长，同时具有较强的产酶能力和抗生素产生能力，在生物技术领域中有着广泛的应用前景。

下面我们将介绍胶冻样芽孢杆菌的工艺。

一、菌种选用胶冻样芽孢杆菌是一种常见的土壤细菌，因此可以从自然环境中分离得到。

在实验室中，也可以通过购买或者向相关单位索取获得该菌株。

选择高质量的菌种对于后续的工艺操作具有重要意义。

二、培养基配方培养基是细菌生长的重要环境，不同的菌株需要不同的培养基。

对于胶冻样芽孢杆菌来说，适宜的培养基配方是：（1）碳源：葡萄糖、淀粉、木质素等。

（2）氮源：蛋白胨、酵母提取物、尿素等。

（3）矿物质：NaCl、KCl、MgSO4等。

（4）微量元素：FeSO4、MnSO4、ZnSO4等。

（5）pH值：7.0-7.5。

三、培养条件胶冻样芽孢杆菌适宜在30℃左右进行培养，最适温度为37℃。

在培养过程中，需要注意以下几点：（1）通气性：胶冻样芽孢杆菌需要良好的通气环境，因此需要配备透气性好的培养瓶或者使用摇床培养。

（2）培养时间：胶冻样芽孢杆菌生长周期较长，一般需要在培养基上培养24-48小时。

（3）培养条件：胶冻样芽孢杆菌喜欢微酸性条件，因此需要控制培养基的pH值在7.0-7.5之间。

四、发酵工艺胶冻样芽孢杆菌的发酵工艺可以分为两个阶段：预培养和主发酵。

（1）预培养：将胶冻样芽孢杆菌接种到含有适宜营养物质的液态培养基中，经过一定时间的培养，使其达到一定的菌量。

预培养的温度为30℃，通气性良好。

（2）主发酵：将预培养好的胶冻样芽孢杆菌接种到发酵罐中，进行主发酵。

主发酵的条件如下：①温度：37℃。

②pH值：7.0-7.5③通气性：良好通气。

④搅拌速度：150rpm。

⑤发酵时间：24-72小时。

五、产物收获在主发酵结束后，需要对发酵液进行离心分离、过滤等操作，得到目标产物。

收获的产物可以在后续的实验中用于酶学研究、抗生素开发等领域。

蜡样芽孢杆菌显色培养基

蜡样芽孢杆菌显色培养基蜡样芽孢杆菌显色培养基(ChromogenicBacillusCereusAgar) 用途：用于食品样本中蜡样芽孢杆菌的快速分离和鉴定。

原理：蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素；磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂；琼脂是培养基的凝固剂；混合色素与蜡样芽孢杆菌酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上蜡样芽孢杆菌产生绿~蓝绿色的菌落，。

配方（每升）：蛋白胨15g酵母膏粉4g磷酸氢二钠2.52g磷酸二氢钾0.28g琼脂15g混合色素3.25g最终pH7.2±0.2使用方法：1、取瓶内干粉40克，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃15min高压灭菌，冷至50℃，每瓶添加剂(SR0210)中加入1ml无菌水，使之完全溶解，然后加入100毫升培养基中，混匀，倾注灭菌平皿。

2、用无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液配制10-1~10-5的样本稀释液按GB/T4789.2测定。

3、取各稀释液0.1ml接种至蜡样芽孢杆菌显色琼脂平板上涂布或划线。

4、37℃培养24小时，选取适当菌落数的平板进行计数。

5、通过验证试验进一步确认假定性蜡样芽孢杆菌，如氧化酶、革兰氏染色等。

6、报告每克(毫升)食品样本中蜡样芽孢杆菌的数目。

质量控制：本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后于36±1℃培养18~24h生长情况如下表。

菌名菌号生长状况培养特征蜡样芽孢杆菌CMCC(B)63303良好菌落绿~蓝绿色蕈状芽孢杆菌ATCC10206良好线上淡绿色，单菌落无色枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501受抑制菌落蓝绿色金黄色葡萄球菌ATCC6538受抑制-----贮存：旋紧瓶盖，贮存于10-30℃、避光、干燥处。

贮存期二年。

规格：可配置1L的培养基干粉。

枯草芽孢杆菌的培养基配方

枯草芽孢杆菌的培养基配方枯草芽孢杆菌，听起来是不是有点儿陌生？但是别担心，今天咱们就来聊聊这种小家伙的培养基配方，保证让你听了之后会心一笑。

咱们得明白，这种细菌可不是随便找块土壤就能长出来的，得有个合适的“家”。

想象一下，咱们如果要聚会，当然要找个舒服的地方对吧？所以，咱们的培养基就得“精心准备”。

咱们的枯草芽孢杆菌喜欢的培养基可不是随便的，得是个“营养丰富”的配方。

咱们需要一些蛋白胨，像是给细菌准备的“营养餐”。

这玩意儿能提供它们所需的氨基酸，简直就像是给它们开了个“补给站”。

别忘了添加酵母提取物，这可是细菌们的“能量饮料”，里面含有维生素，细菌们喝了可开心了。

然后，咱们得说说碳源的问题。

这个枯草芽孢杆菌可喜欢糖哦，所以加点葡萄糖，简直是它们的“甜蜜蜜”。

有了这些，小家伙们就能充分发挥它们的“潜力”，快速生长。

再加点无机盐，比如氯化钠，别小看这盐，给细菌们的生活带来了一丝“咸味”，让它们更有精神。

这个培养基可不能缺水，毕竟细菌也跟咱们一样需要水分。

水就像是它们的“生命之源”，没有水，细菌们可就没法茁壮成长了。

想象一下，咱们在干燥的沙漠中生活，连口水都没有，那日子得多难熬啊。

不禁让人想起了“水是生命之源”，可见这句话一点儿都没错。

培养基准备好后，咱们可得考虑一下pH值了，枯草芽孢杆菌可是有自己的“小脾气”。

理想的pH值在6.8到7.2之间，这个范围就像是细菌们的“舒适区”，能够让它们觉得“安逸自在”。

一旦偏离了这个范围，小家伙们可能就会闹情绪，生长速度直线下降。

这时候，你可能会问，怎么才能做到呢？其实很简单，可以通过添加一些缓冲剂，来调整培养基的pH。

比如磷酸盐缓冲液，细菌们见了这玩意儿，简直就像见到了老朋友，心里踏实多了。

等到这些准备都搞定，咱们就可以把培养基放进高压灭菌器里，来个“高温消毒”。

这一步可不能省，保证培养基干干净净，细菌们才能放心“入住”。

高压灭菌的时间一般在15到20分钟，别着急，耐心点儿，毕竟好事多磨。

多粘芽孢杆菌检测方法

多粘芽孢杆菌检测方法一、检测用培养基配方与培养条件1.培养基：酵母浸膏培养基配方：蔗糖：1.0%酵母浸膏：0.45%KH2PO4:0.05%MgSO4：0.05%NaCl：0.05%琼脂粉：2%--2.5%PH：7.2--7.42. 培养条件：温度：33℃-37℃；时间：24--30小时。

二、检测与计数方法1. 系列稀释取250ml锥形瓶一个，加入适量玻璃珠，100ml无菌水，3滴吐温80（分散剂：分散菌团用），塞上棉塞并放入到70℃水浴锅中预热，待锥形瓶中水温达到70℃后，称取适量样品加入锥形瓶中，摇匀，70℃水浴20分钟。

水浴结束后迅速冷却到30—40℃左右，上旋转式摇床200 r/min充分振荡40 min，即成母液菌悬液（基础液）。

2. 用10mL无菌移液管分别吸取10mL上述母液菌悬液加入90 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……1:k稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。

3. 加样及培养取1个适宜的稀释度，用移液枪吸取菌悬液0.1ml (菌悬液加入量)，加至预先制备好的固体培养基平板上，用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀地涂于琼脂表面。

此稀释度重复3次，同时以空白作对照，于适宜的条件下培养。

4. 菌落识别根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。

当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。

5. 菌落计数以出现20—300个菌落数的稀释度的平板为计数标准，分别统计有效活菌数目和杂菌数目。

有效菌平均菌落数（x）在20—300之间时，则以该菌落数计算。

有效活菌数按式（1）计算，同时计算杂菌数：nm = x kv1/(m0v2) ×10-8或 nv = x kv1/(v0v2) ×10-8（1）式中：nm —质量有效活菌数，亿/gnv —体积有效活菌数，亿/mLx—有效菌落平均数，个k —稀释倍数v1—基础液体积， mLv2—菌悬液加入量， mLv0—样品量， mLm0—样品量， g重点需要注意的部分在菌悬液的制备及震荡过程上，因为固态发酵的的产品大部分为聚集状态不容易分散开来，这点与液态发酵产品不同。

芽孢杆菌活菌数含量的测定操作规程

目的：建立芽孢杆菌活菌数含量的测定标准操作规程范围：本方法适用于的芽孢杆菌活芽孢的测定责任人：QC内容：1.仪器与工具：电子天平、生物显微镜、摇床、18×180mm试管、500ml三角瓶、10ml刻度吸管、1ml刻度吸管2．试剂与试液：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠、无菌蒸馏水、吐温80等。

3.检测培养基配方：牛肉膏3g、蛋白胨10g、琼脂16g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml，调至PH7.2，121℃灭菌30min。

4.检测步骤：4.1 菌液制备：采样量不少于500g，从所采的样品中精确称取10.00g试样，加入已灭菌的带玻璃珠（玻璃珠在80个左右）的500ml锥形瓶中，加入30ml已灭菌的无菌水，在摇床上200r/min摇动30min，再加入60ml已灭菌的无菌水，在摇床上200r/min摇动30min，即成母液的菌悬液。

4.2 用1ml无菌吸管吸取1ml上述母液的菌悬液，加入9ml无菌水混匀成1：1×101稀释的菌悬液，这样依此稀释，直至得到1：106；1：107；1：108；1：109等浓度（每个稀释度必须更换无菌吸管）。

4.3 用1ml无菌吸管分别吸取不同稀释浓度菌悬液1ml，加至已灭菌的平皿中，再加入50℃左右的培养基，向每个培养平皿中倒入约12ml培养基，混合均匀，待凝固后，倒置于36℃的恒温培养箱内培养18h—24h。

每个样品取3个连续适宜稀释度，每个稀释度重复3次，同时加入无菌水的空白对照，每个稀释度取5个到10个菌落的菌体，涂片染色，显微镜观察识别后计数菌落。

5.菌落计数： 5.1 以平板上出现30个——300个菌落数的稀释度平板为记数标准，并确定为稀释倍数。

5.2 当只有一个稀释度，其平均菌落数在30个-300个之间时，则以该平均菌落数乘以其稀释倍数。

5.3若有两个稀释度，其平均菌落数30个-300个之间时，应按两者菌落总数之比值来决定。

若其比例小于2应计数两者的平均数，若大于2则计数其中稀释较小的菌落总数。

凝结芽孢杆菌培养基形态

凝结芽孢杆菌培养基形态
凝结芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种常见的细菌，通常生长在含有适当营养物质的培养基上。

这里简要介绍一种常用于培养凝结芽孢杆菌的基本培养基形态。

常见的培养凝结芽孢杆菌的培养基是固体培养基，称为普通富集培养基，也称为通用富集培养基。

它由一些基本成分组成，如蛋白质、糖类和盐等。

下面是该培养基的基本形态：
1.成分：基本成分通常包括蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和琼脂。

2.形态：普通富集培养基为固体培养基，通常呈现为琼脂平板。

当凝结芽孢杆菌在此培养
基上生长时，会形成圆形或不规则的菌落。

菌落通常呈白色或乳白色，直径约为1-3毫米，边缘整齐。

3.营养：该培养基富含营养物质，为凝结芽孢杆菌的生长提供充足的营养。

4.特点：凝结芽孢杆菌是一种革兰氏阳性细菌，因其产生孢子而得名。

孢子具有耐热性和
抗干扰性，使得该菌在环境中有很好的存活能力。

值得注意的是，不同的研究目的和实验要求可能会使用不同的培养基。

普通富集培养基是一种最基本的培养基，常用于细菌的常规培养和观察。

如果需要特定的培养条件或选择性培养，可能需要使用其他不同配方的培养基。

枯草芽孢杆菌发酵培养基配方

枯草芽孢杆菌发酵培养基配方1. 引言大家好，今天咱们聊聊一个很有意思的话题，那就是枯草芽孢杆菌的发酵培养基配方。

听起来好像有点高大上，其实就是让小细菌们在一个舒适的环境里茁壮成长嘛！说到这里，你可能会问：“这枯草芽孢杆菌到底是个啥？”别急，咱慢慢来。

枯草芽孢杆菌，顾名思义，跟“枯草”有点关系，它能在各种环境下生存。

说白了，就是个“生存达人”。

咱们用它来做发酵，能够帮助咱们在农业、医药等领域有更好的应用，比如促进植物生长、提高土壤肥力等。

这可是个大忙人，嘿嘿！2. 培养基的组成2.1 基本成分那咱们要怎么调配这个培养基呢？其实挺简单的，先来看看基本成分都有哪些。

主要的配方有：1. 水：这是培养基的灵魂，少了水可不行，细菌可是“水中精灵”。

2. 营养琼脂：这个东西就像细菌的“营养快线”，能给它们提供成长所需的各种营养素。

3. 葡萄糖：别小看这糖，细菌可是特别喜欢这个，吃了能让它们“嗨”起来，分分钟活力四射。

4. 氮源：比如蛋白胨，帮助细菌合成蛋白质，细菌们得有营养才行啊。

这几个成分调配好，就像调制一杯完美的鸡尾酒，嘿嘿！2.2 其他成分除了基本成分，咱们还可以加入一些“调味剂”。

比如：1. 磷酸盐：帮助细菌更好地利用能量，别小看这个，重要得很呢。

2. 微量元素：铁、锰这些，虽然含量不多，但对细菌来说可是大补品，简直是“细菌的维生素”。

3. pH调节剂：有时候环境酸碱度不对，咱们得调调，保证细菌在最佳状态下发酵。

配方就像是做饭，想要味道好，就得多尝试，多调整，找到那个完美的平衡点！3. 制备步骤3.1 具体步骤好啦，现在咱们来聊聊怎么把这些成分变成培养基吧。

其实步骤很简单：1. 准备好所有材料：一切准备就绪，像个小厨师一样。

2. 称量成分：按比例把营养琼脂、葡萄糖、氮源等称好，别马虎，量要准。

3. 溶解：把称好的成分放进水里搅拌，直到完全溶解，就像搅拌奶茶一样，直到没有颗粒。

4. 灭菌：这一点特别重要，得把细菌们的“敌人”消灭干净，才能让咱的枯草芽孢杆菌尽情生长。