常用缓冲溶液配制方法

毫升甘氨酸毫升，再加水稀释至毫升

NaHPO- 2HO分子量=,mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7 - H b O分子量=,mol/L 溶液为21.01克/升。

4 .柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液

pH 钠离子浓度

(mol/L) 酸（克）

a - h2O

氢氧化钠

（克）

NaOH 97%

盐酸（毫升）

HCl （浓）

最终

（升）

210 84 160 10 210 83 116 10 210 83 106 10 210 83 45 10 245 144 68 10 285 186 105 10 266

156

126 10

①

体积

使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化

钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（mol/L ）

柠檬酸钠Na C6H5O7 • 2HQ分子量，mol/L 溶液为29.41克/毫升。.乙酸-乙酸钠缓冲液（）

Nc2Ac- 3H2O分子量=,mol/L 溶液为27.22克/升。

7.磷酸盐缓冲液

(1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液()

NaHPO -12^0分子量=,mol/L溶液为克/升。

NaHPQ・2H2O分子量=,mol/L溶液为克/升。

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个

值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：NaHPQ：PKa1 =, pKa2=；NaHPO： pKa1 =,PKa2=

溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的

受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于。

其缺点为：①易与常见的钙Ca24离子、镁Mg24离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。

)磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液()

pH mol/L/15Na 2HPO

（毫升）mol/L

pKa

配酸性缓冲液: 用NaHPO, pH= 1 〜4,

配中性缓冲液: 用混合的两种磷酸盐，pH= 6〜8,

配碱性缓冲液: 用NaHPO, pH= 10〜12。

用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难

pH范围宽；③pH 15M11.876 克15M9.078 克0.05M0.2M

.硼酸-硼砂缓冲液（硼酸根）

pH 0.05M硼砂

（毫升）

0.2M硼酸（毫

升）

pH 0.05M硼砂

（毫升）

0.2M硼酸（毫

升）

硼砂• 分子量溶液（硼酸根）含克升。

硼酸HBO,分子量=,溶液为12.37克/升。

硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。

12•甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05M）

X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升加水稀释至200毫升

pH

甘氨酸分子量=;0.2M溶液含15.01克/升。

13.硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）

毫升硼砂毫升加水稀释至毫升

pH X Y pH X Y

50 50

pH

50

50

50

50

50

50

50

50

50

50

1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。

50 50 50

50

硼砂Na fe B 4O • lOHbO,分子量=;0.05M 溶液为19.07克/升。

14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ）

15. “PBS

缓冲液

pH

H 2O

1000

1000

1000 100ml NaCl

8.5g

NaH PO

2.2g NaH PO

0.4g

C 击、Mg +

存在时不得使用

N 2HCO 分子量=;0.1M 溶液为8.40克/升。

名称

(Name) (Compounding way) 草酸盐C[KH3(C2O4)2 •2H2O] 标准缓为L。称取12.71g 冲溶液四草酸钾

[KH3(C2O4)2 • 2H2O]

溶于无二氧化碳的

水中，稀释至

1000ml

酒石酸在25C时，用无二

盐标准氧化碳的水溶解外

缓冲溶

苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液消旋的酒石酸氢钾

（KHOHO6），并剧烈

振摇至成饱和溶液

C GHCOHCOK)为

L,称取于士C干燥

2〜3h的邻苯二甲

酸氢钾（KHCH4O4）

10.21g ,溶于无CO

的蒸馏水，并稀释

至1000ml

（注：可用于酸度

pH标准缓冲溶液

Stan dard pH Buffer Soluti ons

磷酸盐标准缓冲溶液

硼酸盐标准缓冲溶液计校

准）

分别称取在士C干

燥2〜3h的磷酸氢

二钠（NaHPQ）

(3 . 53 士0 . 01)g

和磷酸二氢钾

(KHPQ) (3 . 39

士0. 01）g，溶于预

先煮沸过15 —

30min并迅速冷却

的蒸馏水中，并稀

释至1000ml (注:

可用于酸度计校

准

）

C(Na2BO - 10H2Q)称

取硼砂

(NaBO z • I0H2Q)

(3 . 80 士0 . 01)g

（注意：不能烘！）,

溶于预先煮沸过

15 —30min并迅速

冷却的蒸馏水中,

并稀释至1000ml。

置聚乙烯塑料瓶中

密闭保存。存放时

要防止空气中的

不同温度时的pH 值(pH in differe nt temp eratures)

10C 15C 30 C 35 C 40 C

45 C

不同温度时的pH 值(pH in differe nt temp eratures)

50 C 55 C 60 C 70 C 80 C 90 C 95 C

不同温度时的pH 值(pH in differe nt temp eratures)

45 C

5C 10C 15C 20 C 25 C 30 C 35 C

不同温度时的pH 值(pH in differe nt temp eratures)

50 C 55 C 60 C 70 C 80 C 90 C 95 C

40 C