牛肉膏琼脂培养基
几种培养基的配方
几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。
根据微生物的特性和应用需求,可以设计出不同成分和配方的培养基。
以下是几种常见的培养基配方:1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)的配方:-牛肉膏:5g-蛋白胨:5g-水解酵母膏:1.5g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中,添加纯化琼脂,混合并加热直至溶解,然后倒入培养皿中。
2. EMB(Eosin Methylene Blue)培养基的配方:-蛋白胨:17g-明胶胨:3g-乳糖:10g-酵母提取物:3g-果糖:1g- Eosin Y:0.4g-亚甲蓝:0.065g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加Eosin Y和亚甲蓝,最后加入纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
3. 铡锰培养基(Sabouraud Agar)的配方:-葡萄糖:40g-酵母膏粉:5g-水解麦粉:15g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基(TRYPTICASE™SOYBROTH)的配方:-胰蛋白酶胨:15g-大豆酪蛋白胨:5g-食盐:5g-葡萄糖:20g-蒸馏水:1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温。
5. M9盐碱培养基(M9 minimal medium)的配方:-磷酸一氢二钾:3g-硫酸镁:0.5g-氯化钠:0.5g- 氨氯化铁:7.5mg-葡萄糖:4g-去离子水:1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温后添加葡萄糖。
这只是几种常见的培养基配方,实际上还有很多不同成分和配方的培养基。
各种培养基成分
1.营养肉汤成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。
2.营养琼脂培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。
制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。
3.MRS培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。
糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
4.脱脂乳培养基成分:牛奶,蒸馏水。
制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。
5.培养基A成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
6.PTYG培养基成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。
盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。
7H2O 0.48g,NaCO310g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境,其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一,其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下:-琼脂:15g-蔗糖:10g-牛肉膏粉:3g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化镁:0.5g-氯化钾:0.2g-高锰酸钾:0.0001g-蛋白胨:3g-酵母提取物:3g- 菜子油:0.5ml- 蒸馏水:1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基,其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下:-牛肉膏粉:3g-蛋白胨:5g-葡萄糖:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:2g-氯化镁:0.5g- 蒸馏水:1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基,其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下:-紫砂:15g-蔗糖:30g-蛋白胨:2g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基,其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下:-麦芽粉:10g-蔗糖:30g-蛋白胨:5g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g- 蒸馏水:1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基,其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下:-铁蛋白:10g-蔗糖:10g-蛋白胨:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:1g-氯化钙:0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良,以提高微生物的生长和培养效果。
同时,在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作,以避免试验的污染和杂质的干扰。
牛肉膏蛋白胨培养基
1、实验原理
牛肉膏蛋白胨培养基是细菌学研究最常用的天然培养基。
在配方中不加琼脂时称之为肉汤培养基。
加入琼脂配制的固体培养基一般用于细菌的分离、培养和测数等。
2、培养基配方
牛肉膏5.0g、蛋白胨10.0g、NaC1 5.0g、琼脂20.0g、自来水1000 mL、pH7.0。
牛肉膏蛋白胨液体培养基:5g牛肉膏,10g蛋白胨,5gNaCl,1000mL蒸馏水,pH 7.0。
牛肉膏蛋白胨固体培养基:5g牛肉膏,10g蛋白胨,5g NaCl,20g琼脂, 1000mL蒸馏水,pH 7.0。
3、操作步骤
⑴在100 mL小烧杯中称取牛肉膏5.0g、蛋白胨10.0g,加50 mL自来水,置电炉搅拌加热至牛肉膏、蛋白胨完全溶解。
⑵向小铝锅中加入500 mL自来水,将溶解的牛肉膏、蛋白胨倒入铝锅中并用自来水洗2~3次。
加入5.0gNaC1,在电炉上边加热边搅拌。
⑶加入洗净的琼脂条,继续搅拌,加热至琼脂完全熔化,补足水量至1000 mL。
⑷用玻棒沾少许液体,用pH试纸测定pH值。
用NaOH或HC1调至pH7.0。
⑸分装漏斗分装于10mm×180mm试管中,塞好棉塞,装入小铁丝筐,然后用旧报纸将棉塞部分包好。
★是否可以搁置几天后进行灭菌?
⑹高压蒸汽灭菌,121℃灭菌30min。
⑺灭菌后摆放斜面。
各种培养基配方
1.营养肉汤成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。
2.营养琼脂培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。
制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。
3.MRS培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
4.脱脂乳培养基成分:牛奶,蒸馏水。
制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。
5.培养基A成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
6.PTYG培养基成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。
盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。
7H2O 0.48g,NaCO3 10g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595使它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取801小4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
配置牛肉膏蛋白胨培养基的操作步骤
配置牛肉膏蛋白胨培养基的操作步骤
嘿,朋友们!今天咱就来讲讲怎么配置牛肉膏蛋白胨培养基,这可是个很有趣的事儿呢!
先准备好各种材料,就像厨师做菜前要把食材都备好一样。
你得有牛肉膏,这可是培养基的重要成分,就像菜里的盐,少了它可不行。
还有蛋白胨,那也是宝贝呀,能给微生物提供丰富的营养。
然后就是氯化钠,就像是给培养基加点味道。
再加上琼脂,这琼脂啊,就像是给微生物搭个小房子,让它们能舒舒服服地待着。
接下来,就是动手操作啦!把这些材料按照一定的比例放到水里,就像是调一碗特别的汤。
这可不是随便搅和搅和就行的,得仔细点,不然比例不对,培养基可就不完美啦。
然后,把这锅“汤”放到火上加热,让它们慢慢融合在一起。
看着它们咕嘟咕嘟地冒泡,你是不是觉得很有意思呀?就好像在看着一群小精灵在跳舞。
等它们都融合好了,就可以分装啦。
把这热乎乎的培养基分到一个个小瓶子或者培养皿里,可别洒出来哦,就像给小朋友分糖果一样,要公平公正。
然后把它们盖好盖子,就等着它们冷却凝固啦。
凝固后的培养基,就像是一个个小蛋糕,等待着微生物们来大快朵颐。
你想想,那些小小的微生物在上面快乐地生长,是不是很神奇?
这配置牛肉膏蛋白胨培养基呀,说难也不难,说简单也不简单。
就好像骑自行车,一开始可能会摇摇晃晃,但多练几次就熟练啦。
你只要认真去做,肯定能成功的。
而且当你看到自己配置的培养基培养出了好多微生物,那种成就感,简直没法形容!
所以呀,别害怕,大胆去尝试吧!让我们一起在微生物的世界里遨游,感受科学的魅力!。
牛肉膏蛋白胨培养基 接种等
实验一培养基的制备一、目的与要求(一)学习制备培养基的基本技术。
(二)制备牛肉膏蛋白琼脂培养基。
二、原理牛肉膏蛋白培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌培养基,这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,可供作繁殖之用,制作固体培养基时须加2%琼脂,培养细菌时,应用稀酸或稀碱将PH调至中性或微碱性。
牛肉膏蛋白培养基的配方:牛肉膏0.5%,蛋白胨1%,NaCl0.5%,pH7.4~7.6。
三、材料与仪器(一)试剂牛肉膏,蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L NaOH、1mol/L HCl。
(二)其他试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,乳胶管,弹簧夹,纱布,棉花,牛皮纸,线绳,pH试纸,电炉,台称。
四、操作步骤(一)称量根据用量按比例依次称取成分,牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯,蛋白胨易吸湿,称量时要迅速。
(二)溶解在烧杯中加入少于所需要的水量,加热,ZHU一加入各成分,使其溶解,琼脂在溶液煮沸后加入,融化过程需不断搅拌。
加热时应注意火力,勿使培养基烧焦或溢出。
溶好后,补足所需水分。
(三)调PH 用1mol/L NaOH或1mol/L HCl把PH调至所需范围。
(四)过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利于某些实验结果的观察,如无特殊要求时可省去此步骤。
(五)分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三解瓶内,分装装置如实验图8所示;分装时注意,勿使培养基沾染在容器口上,以免沾染棉塞引起污染。
1.液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜,分装三角瓶的量则根据需要而定,一般以不超过三角瓶容积的1/2为宜。
2.固体分装分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,斜面长度不超过管长的1/2。
分装三解瓶,以不超过容积的1/2为宜。
3.半固体分装装置以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
(六)加棉塞分装完毕后,在试管口或三解瓶口塞上棉塞(或泡沫塑料塞及试管帽等,以阻止外界微生物进入培养基而造成污染,并保证有良好的通气性能。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方成分克/升牛肉膏10.0胨5.0酵母粉5.0盐5.0葡萄糖1.0琼脂15.0酚红0.025培养基PH值调整至7.0±0.2,于121℃高压灭菌20分钟即可。
下面解释每个成分的作用和影响:1.牛肉膏:提供氮源、维生素和矿物质,为微生物提供生长所需的营养物质。
3.酵母粉:富含维生素B群和其他营养物质,能够促进微生物的生长。
4.盐:提供微量元素,维持细胞内渗透平衡。
5.葡萄糖:提供微生物的碳源和能量,促进微生物的繁殖。
6.琼脂:用于凝固培养基,使其固化,提供坚固的基质,方便微生物生长。
7.酚红:作为指示剂,用于检测培养基的酸碱度,在碱性条件下呈现红色。
配方中的每个成分都起到了重要的作用,为微生物的生长提供了必要的营养物质。
同时,配方还可以根据需要进行适当的改动和调整,以满足特定微生物的生长需求。
在制备培养基时,需要注意的事项有:1.每个成分的浓度:每个成分的浓度都对微生物的生长产生影响,需要严格按照配方中的比例加入。
2.PH值调整:PH值对微生物的生长也有影响,需要根据具体的需求和微生物的要求进行调整。
3.培养基的制备和高压灭菌:制备培养基时,要注意加热和溶解的过程,确保所有成分充分溶解。
高压灭菌可以杀灭培养基中的细菌和其他微生物,保证培养基的无菌状态。
总结起来,牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的培养基,通过提供丰富的营养物质,可以有效地支持微生物的生长和繁殖。
配方中的每个成分都具有重要的功能和作用,制备时需要注意每个成分的浓度和PH值的调整。
此外,高压灭菌可以保证培养基的无菌状态。
通过合理的制备和使用,牛肉膏蛋白胨培养基可以为微生物学实验和研究提供坚实的基础。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分:牛肉膏或牛肉汤500克,葡萄糖10克,胰蛋白胨10克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分:NaCl300克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分:果胶5克,葡萄糖5克,NaNO32克,K2HPO40.2克,MgSO4·7H2O0.1克,CaCO30.02克,FeSO4·7H2O0.01克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分:土豆提取物4克,蛋白胨2克,乳糖10克,NaCl10克,胆盐0.75克,碱性蓝2克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分:石蜡300克,肉浸膏100克,大豆酪蛋白胨20克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分:肉膏1克,酵母提取物2克,葡萄糖2克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani(LB)培养基成分:酵母提取物5克,酪蛋白胨10克,NaCl10克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖40克,醇20克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分:鱼精膏20克,胆盐胆红素15克,玛琪琼脂25克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分:马加提琼脂50克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖20克,醇30克,琼脂20克,蒸馏水1000毫升。
金黄色葡萄球菌 (牛肉膏蛋白胨培养基)
金黄色葡萄球菌(牛肉膏蛋白胨培养基)耐热核酸酶试验:将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min,用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板,36±1°C培养24小时,在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。
本试验金黄色葡萄球菌为阳性。
2.金黄色葡萄球菌肠毒素检测金黄色葡萄球菌肠毒素的检测主要有动物试验、血清学试验、免疫荧光试验及酶联免疫吸附等方法,在此就不一一赘述。
3.金黄色葡萄球菌的控制主要包括:1)防止金黄色葡萄球菌污染食品防止带菌人群对各种食物的污染:定期对生产加工人员进行健康检查,患局部化脓性感染(如疥疮、手指化脓等)、上呼吸道感染(如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等)的人员要暂时停止其工作或调换岗位。
防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染:如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房,不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶;奶挤出后,要迅速冷至-10℃以下,以防毒素生成、细菌繁殖。
奶制品要以消毒牛奶为原料,注意低温保存。
对肉制品加工厂,患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位,经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。
2)防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成应在低温和通风良好的条件下贮藏食物,以防肠毒素形成;在气温高的春夏季,食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时,并且食用前要彻底加热。
牛肉膏蛋白胨培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
16种培养基配方
9.查(察)氏培养基
成分:
NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO
4. 7H2O
0.5g,KCL
0.5g,FeSO
4.7H2O
0.01g,蔗糖30g,琼脂15~20g,蒸馏水1000mL,pH值自然。
制法:
加热溶解,分装后121℃灭菌20min。
0.025g,水1000mL,pH
7.2~
7.6
制法:
按量将各成分(酚红除外)混合,加热使完全溶解,调pH至
7.4±
0.2。加1%的酚红溶液
2.5mL,混匀。121℃高压灭菌15min
13.高氏一号(淀粉琼脂)培养基(主用于放线菌、霉菌培养)
可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCL
0.5g,K2HPO4
7.豆芽汁液体培养基
成分:
豆芽汁10mL,磷酸氢二铵1g,KCL
0.2g,MgSO
4.7H2O
0.2g,xx20g。
制法:
将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至
6.2~
6.4,分装于三角瓶中,
0.04%的溴甲酚紫酒精溶液(黄色
5.2~
6.8紫色)作为指示剂,115℃灭菌20min。
豆芽汁制备:
7.2~
7.4,121℃灭菌20min。若加入15~20g琼脂即成固体培养基。
15.xx培养基(醋酸钠xx培养基)
葡萄糖
1.0g,KCL
1.8g,酵母汁
2.5g,醋酸钠
8.2g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,pH自然,
0.7kg/cm2灭菌30min。
16.高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用)
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有牛肉膏、蛋白胨和Na Cl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌(荤食),因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15—20g、水 1000ml、pH 7.4—7.6(7.0—8.0)三、器材牛肉膏,蛋白胨,NaCl,琼脂;1mol/L NaOH,1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH 5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
培养基的制作实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的配制原理和方法。
2. 了解培养基在微生物培养中的应用。
3. 熟悉灭菌和消毒的方法及注意事项。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖所必需的营养物质混合物。
根据微生物种类和实验目的,培养基的配方和种类有所不同。
本实验以牛肉膏蛋白胨培养基为例,介绍培养基的配制、灭菌和消毒方法。
三、实验材料与试剂1. 材料:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水、pH试纸等。
2. 试剂:1M HCl、1M NaOH、无菌水等。
四、实验步骤1. 培养基配制(1)称取牛肉膏10g、蛋白胨10g、氯化钠5g,加入1000ml蒸馏水;(2)加入琼脂15g,搅拌均匀;(3)将混合液煮沸,溶解琼脂;(4)用pH试纸检测培养基pH值,调节至7.0-7.2;(5)将培养基冷却至50-60℃,过滤去除杂质;(6)分装至灭菌试管中,每管10ml。
2. 灭菌(1)将装有培养基的试管放入高压蒸汽灭菌锅中;(2)关闭锅盖,加热至压力达到0.1MPa,维持15-20分钟;(3)待压力降至0时,打开锅盖,取出灭菌试管。
3. 消毒(1)将灭菌后的试管置于超净工作台;(2)用无菌镊子取出试管,放入无菌培养皿中;(3)用酒精灯对试管进行消毒;(4)将培养皿放入培养箱中,待培养基凝固。
五、实验结果与分析1. 培养基配制:按照实验步骤,成功配制了牛肉膏蛋白胨培养基。
2. 灭菌:高压蒸汽灭菌法能够有效杀死培养基中的微生物,保证培养基的无菌状态。
3. 消毒:酒精灯消毒可以进一步降低培养基的污染风险。
六、实验讨论1. 在培养基配制过程中,应注意控制pH值,以保证微生物的正常生长。
2. 灭菌和消毒是保证培养基无菌的关键环节,应严格按照操作规程进行。
3. 实验过程中,应注重无菌操作,避免外界微生物的污染。
七、实验结论通过本次实验,掌握了培养基的配制、灭菌和消毒方法,为微生物培养提供了基础条件。
在实验过程中,应严格遵守无菌操作规程,确保实验结果的准确性。
牛肉膏蛋白胨培养基制备实验报告
牛肉膏蛋白胨培养基制备实验报告
学习制备牛肉膏蛋白胨培养基的方法,了解牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂等的作用和用途。
实验原理:
牛肉膏:牛肉膏是从生牛肉中提取的富含营养物质的肉汁,富含氨基酸、矿物质和其他生长因子。
蛋白胨:是一种从鸡蛋中提取的高营养物质,富含多种必需氨基酸和维生素。
氯化钠:是必须添加到培养基中以提供细菌和其他细胞所需的盐类和离子。
琼脂:是一种由红藻属海藻制成的胶质,用于固化液态培养基并在固态培养基上生长细胞。
实验材料:
牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、三角瓶、试管等。
实验步骤:
1. 倒入500毫升的去离子水至三角瓶中。
2. 加入5克牛肉膏和5克蛋白胨,用玻璃棒搅拌均匀。
3. 加入5克氯化钠和2克琼脂,再次搅拌均匀。
4. 将三角瓶放入水浴中,加热至琼脂完全溶解。
5. 关闭火源,将溶液冷却至50℃左右。
6. 倒入培养基到试管中,每个试管约5毫升。
7. 放置试管直至琼脂凝固。
实验结果与分析:
制备完成的牛肉膏蛋白胨培养基呈明亮的黄色透明液体,琼脂凝固后成为浅黄色的固态培养基。
该培养基富含多种必需的营养物质,可满足多种细菌和其他微生物生长的需要,可用于多种微生物培养和研究。
实验中需要注意的问题:
1. 避免使用破损的琼脂;
2. 加热时要注意温度的控制;
3. 做好无菌操作,防止细菌和其他微生物的污染。
肉汤琼脂培养基使用说明
若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最底稀释倍数报告之(见表中例6)。
若有稀释度的平均菌菌落数均不在30-300之间,其中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。
5 27 11 5 —— 270 270或2.7×102
6 0 0 0 —— <1×10 <10
7 多不可计 305 12 —— 30 500 31 000或3.1×104
质量控制:
本品接种下列菌株,置于36±1℃恒温箱中培养48±2h,结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 白色—灰白色,圆形,边缘整齐,表面光滑,湿润。
菌落数的报告:
菌落数在100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位数字后面的有效数值,以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数,也可以用10的指数来表示(见表中“报告方式栏”)。
稀释度选择及菌落数报告方式
例次 稀释液及菌落数 两稀释液之比 菌落总数个/g或mL 报告方式个/g或mL
3、 根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、 稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
A:稀释度的选择:
应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见附表)。
r2a琼脂培养基用途
r2a琼脂培养基用途引言:r2a琼脂培养基是一种广泛应用于微生物学实验室的培养基,它具有多种用途。
本文将详细介绍r2a琼脂培养基的组成、制备方法以及其在微生物学实验中的应用。
一、r2a琼脂培养基的组成r2a琼脂培养基主要由牛肉膏、酵母浸出物、淀粉、葡萄糖、琼脂和蒸馏水等成分组成。
其中,牛肉膏和酵母浸出物提供了微生物所需的氨基酸、维生素和其他营养物质,淀粉和葡萄糖则为微生物提供能量来源。
琼脂的加入使得培养基具有固体的形态,方便微生物的生长和观察。
二、r2a琼脂培养基的制备方法制备r2a琼脂培养基的方法较为简单。
首先,将适量的牛肉膏和酵母浸出物溶解在蒸馏水中,并加热至完全溶解。
然后,将淀粉和葡萄糖加入溶液中,搅拌均匀。
最后,加入适量的琼脂并搅拌至完全溶解。
将制备好的培养基分装到培养皿中,并在高压灭菌器中进行高压灭菌。
待培养基冷却后,即可使用。
三、r2a琼脂培养基的应用1. 微生物定量:r2a琼脂培养基广泛应用于微生物的定量研究中。
由于其成分的合理配置和琼脂的添加,r2a琼脂培养基能够提供丰富的营养物质,使得微生物在上面能够迅速生长形成可见的菌落。
通过对菌落数量的计数,可以对微生物的种类和数量进行定量分析。
2. 环境微生物研究:r2a琼脂培养基也常用于环境微生物的研究中。
环境中存在着各种各样的微生物,而r2a琼脂培养基提供的丰富营养物质可以满足不同微生物的生长需求,从而促进其生长和繁殖。
通过在不同环境样品上使用r2a琼脂培养基进行培养,可以获得环境中微生物的种类和数量信息,对环境微生物进行研究。
3. 食品卫生检测:在食品卫生检测中,r2a琼脂培养基也被广泛应用。
食品中可能存在各种微生物,而r2a琼脂培养基提供的适宜的营养物质能够促进微生物的生长。
将食品样品接种在r2a琼脂培养基上进行培养,可以检测食品中是否存在致病微生物或食品污染。
4. 高需氧微生物研究:r2a琼脂培养基对高需氧微生物的研究也具有重要意义。
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号后,放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌:1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15~30分钟。
牛肉膏 0.3g
蛋白胨 1g
氯化钠 0.5g
琼脂 2g
蒸馏水 100mL
pH 7.0~7.2
灭菌 1.05kg/cm2,22min
配制具体步骤
1.称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3.调pH
在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。
反之,则用1mol/L HCl进行调节。
注意pH值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物,其pH的调节可用酸度计进行(使用方法,可参考有关说明书)。
4.过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果的观察。
一般无特殊要求的情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤)。
5.分装
按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。
分装装置见图Ⅴ-1。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
(2)固体分装分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,如图Ⅴ-2。
分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
6.加塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。
7.包扎
加塞后,将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
三角烧瓶加塞后,外包牛皮纸,用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开,同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8.灭菌
将上述培养基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃, 20分钟高压蒸汽灭菌。
如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。
9.搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷至50℃左右,将试管棉塞端搁在玻棒上,搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10.无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。
简要步骤
在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌:1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15~30分钟。