荷叶活性化学成分及药理研究进展

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第 ７ 卷 第 ６ 期 ２００５ 年 ６ 月
Research & Information on Traditional Chinese Medicine
Ｖｏｌ．７，ＮＯ．６ Ｊｕｎ． ２００５
乙醇试剂，待乙醇挥干后，于紫外 量线性关系良好（r ＝ 0.9996），回 用。荷 叶 黄 酮 对 小 鼠 高 胆 固 醇
酸 （ 1 ∶ 1 ）； 检 测 波 长 ： 组灌等量蒸馏水。结果显示在中 作 用 较 弱 。主 要 活 性 部 位 集 中
360nm，流速：1.0mL·min-1，进 药毒性分析指标——小毒的7项指 在 黄 酮 上 ， 其 次 是 生 物 碱[1 0 ]。
样量：2 0 μ L ，柱温：室温[5 ]。 标中，荷叶符合其中 5 项指标，
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S ummar izin g
综 述
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荷叶活性化学成分及药理研究进展
孔文琦，李严巍 （中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所， 北京 １０００５０）
12g、何首乌 15g、绞股蓝 10g） 低 抑 菌 浓 度 ） 值 小 于 或 等 于 可提取、分离出荷叶中有效的抑
用于临床治疗高脂血症 30 例与多 8%。实验结果同时表明荷叶提 菌成分，建立合理的工艺流程和
烯康胶囊治疗高脂血症 3 0 例相 取物在中、弱碱性条件下抑菌活 严格的质量标准。
比，血清总胆固醇以山荷汤组下 性最强，并能耐受超高温瞬时的 4.3 止 血 作 用 的 应 用 中医药中有
显示荷叶碱在 0.5~5ìg 范围内呈 分的提取物功效不完全相同。
降低，低密度脂蛋白胆固醇
现良好线性关系，平均回收率为
杜力军等人以急性高脂血症 （L D L － C ）显著下降，同时荷
97.4％，RSD ＝ 3.83%(n=5)[7]。 小 鼠 为 整 体 模 型 ，观 察 荷 叶 水 叶水煎剂能降低全血比黏度、红
于模型组（100%）；体重值较模 抑制效果最为显著，但对米根霉 成分，并探讨其降脂减肥机理。
型组显著降低，P<0 . 0 1 [13]。
抑制作用较弱。荷叶的乙醇提取 4.2 抑 菌 作 用 的 应 用 前面的研究
山荷汤（山楂 1 0 g 、荷叶 物对大多数供试菌的 M IC （最 成果已表明荷叶具有抑菌作用，
并且荷叶的甲醇提取物的抗氧化
症 及 相 关 指 标 的 实 验 观 察 中 显 3. 2. 1 食品方面 用 80% 乙醇荷 性与 B HA 相当，略高于 á－ 生育
示：荷叶饮组大鼠的 TC 、TG 、 叶提取液对常见的几种食品微生 酚 [19]。
LDL－C、动脉硬化指数（AI）均 物 进 行 抑 菌 活 性 研 究 。 结 果 表 ４ 对荷叶应用的展望
显著低于模型组(P ＜ 0.01~0.05)； 明，对各种供试菌种均有抑菌活 4.1 降 脂 减 肥 的 应 用 研究表明荷叶
全血比粘度、红细胞压积明显低 性。其中对细菌及酵母菌，特别 有较强的降脂减肥功效，且毒性
于模型组；脂肪肝数（25 %）少 是大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的 小，应进一步分离出降脂减肥活性
成具体含量。具体色谱条件为： 价 。
荷叶黄酮在使肝细胞内 TC 降低
色谱柱选用Nova-pak C18柱(3.9mm × 150mm), 预柱 C18(3. 9mm × 15mm)，流动相：甲醇 －0.4% 磷
有人用荷叶水提物最大饱和 浓度最大耐受量，给实验组小鼠 灌胃以造成急性毒性模型，对照
的同时又使培养液 TC 明显升 高。其作用主要表现在促进脂 类代谢方面，对其合成的抑制
也可用UV－8453型可见－紫外分光 提取物对血清胆固醇及甘油三脂 细胞压积（% ），从而改善血液
光度计，以荷叶碱为对照，溴甲 的 影 响 。研 究 结 果 显 示 ：荷叶 浓 粘 状 态 [12]。
酚绿为显色剂，在 415nm 波长下 黄 酮 、生 物 碱 部 分 对 急 性 高 脂 3.1.2 荷叶复方的降脂减肥作用 荷
回流 2.0 h，提取 2 次即可[6]。 对医药的研究也提出了新的要
陶波等人用荷叶水煎剂灌
1.3.2 荷叶生物碱含量测定 用薄 求，对降血脂、减肥方面药物研 胃高脂血症大鼠，观察其血脂及
层扫描法测定，采用 0.5％氢氧化 究和开发较以前明显增多。
wenku.baidu.com
血液流变学的影响。结果显示荷
钠溶液制备的硅胶 G F 2 5 4 薄层 3.1.1 单味荷叶的降脂减肥效果 用 叶 水 煎 剂 能 使 高 脂 血 症 大 鼠 的
1.1.3 大孔树脂吸附分离法 有人 用 7 种吸附树脂进行荷叶水提物 吸取性能比较实验。结果发现以 比表面积大、孔径大的 1400 非极 性树脂和中等极性的YPTR－66树 脂对荷叶黄酮吸附容量大，解吸 附效果好[2]。 1.1.4 醇溶液 / 微波和树脂提取分离 法 实验结果显示以60%乙醇溶液作 溶剂，固液比 1 ∶3 0 、微波照射 1.5min、浸提 2.5h，荷叶黄酮类化 合物浸出最多，吸光度可达 0.26。 当提取液（荷叶中黄酮类化合物浓 度＜25g·L-1）以4.7BV·h-1 流速下过 DA201树脂柱，再用4.5BV·h-1 流速 的丙酮洗脱，黄酮类化合物能得到 较好的分离纯化[3 ]。 1.2荷 叶 中 黄 酮 类 化 合 物 的 检 测 荷叶中黄酮类化合物的含量较 高，成分复杂，目前用于检测其 黄酮的方法主要有薄层色谱法、 高效液相色谱法。 1.2.1薄层色谱法 取荷叶的甲醇提取 液 5 μ L，芦丁对照品溶液 5 μ L， 槲皮素对照品溶液5 μ L，分别点于 同一硅胶薄层板上，以乙酸乙酯 － 甲醇 － 水（8 ∶1 ∶1 ）为展开剂， 展开，取出，晾干，喷三氯化铝 /
量的 3 0 倍，提取温度为 9 0 ℃， 入脂肪、糖的量较 20 世纪 70、80 碱 有 较 好 的 减 肥 作 用 。 但 药 理
提取时间 1.5h，提取液 pH 值为 年 代 明 显 增 加 ，冠 心 病 、高血 效应发生缓慢，给药 3 周才出现
2~ 3[1]。或采用 0.5％盐酸，加热 脂、肥胖症患者不断增加，因而 较明显的药理作用[11 ]。
进行测定，结果显示吸光度与含 血症小鼠的 TG 有明显的抑制作 叶在降脂减肥的复方中应用也极
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涂长春等人单以荷叶生物碱
1.3 荷 叶 生 物 碱 类 化 合 物 的 提 取 荷叶水提物 LD50 ＞ 5000mg·kg-1。 灌喂肥胖大鼠，结果显示反映机
与测定
由此可见荷叶水提物基本无毒[9]。 体肥胖程度的增长指标如 Lee ， s
1.3. 1 荷叶生物碱类化合物的提 ３ 荷叶药理作用研究
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为 广 泛 。由 苍 术 、何 首 乌 、泽 3.2 抑 菌 作 用 荷叶具有抑菌的功 抗氧化剂，在较低的浓度下即可
泻、荷 叶 、绞 股 蓝 、生 大 黄 等 能，目前主要进行抑制食品及口 显示出非常强的抗氧化能力[18 ]。
组成的荷叶饮对预防大鼠高脂血 腔细菌的研究。
用 偏 酸 性 的 水 溶 液 提 取 。实验 之 ， 令 人 瘦 劣 。”《 本 草 拾 遗 》 在减肥作用的同时，动物活动正
结果显示荷叶生物碱水提的最佳 中 亦 云：“ 久 食 令 人 瘦 。”如今 常，无 明 显 腹 泻 和 抑 制 食 欲 的
工 艺 条 件 为：水 提 取 量 为 荷 叶 随着生活水平的提高，人们日摄 现 象 发 生 ，可 认 为 荷 叶 生 物 总
[摘 要 ] 综述了国内对荷叶中主要活性成分 —— 总黄酮和总生物碱提取的研究近况，并阐述了荷叶提取物的药理 作用 —— 降血脂、减肥、抗菌、清除自由基。荷叶在我国分布广泛，既可作为食品也可作为药品，具有良好 的开发潜力和前景。 [关 键 词 ] 荷叶；黄酮；生物碱；提取分离；药理作用
荷叶为睡莲科植物莲Nelumbo nucifera Gaertn 的叶，又名莲叶， 藕叶，在我国南北方均有种植， 民间广泛用于食物及药物中。因 其使用价值较大且来源广泛，近 来人们加大对其活性化学成分和药 理方面的研究，进一步明确其所 含化学成分（如黄酮、生物总碱 等）与药效之间的关系。这些研 究成果将为荷叶在食品、药品中 的应用提供科学依据。 １ 荷叶总黄酮和总生物碱的研究
荷叶化学成分复杂，含有生 物碱、黄酮、精油、鞣质、维 生素 C 、酒石酸、枸橼酸、苹果 酸、草酸等，其中生物碱和黄酮 类化合物的生物活性较高，因而 近年来人们加大了对这两种化学 成分的研究。 1.1 荷 叶 中 黄 酮 类 化 合 物 的 提 取 黄酮类化合物提取主要根据提取 物的特性及伴存的杂质来选择合 适的提取溶剂。苷类和极性较大 的苷元，一般可用乙酸乙酯、丙 酮、乙醇、甲醇、水或某些极 性较大的混合溶剂，例如甲醇 － 水（1 ∶1 ）进行提取。大多数 的苷元宜用极性较小的溶剂，如
灯下（36 5n m）观察[4 ]。
收率为 98.82％，RSD ＝ 2.94%[8]。 表 现 出 明 显 的 抑 制 作 用 。荷叶
1.2.2 高效液相色谱法 荷叶中黄酮 ２ 荷叶的毒性研究
水提取部分、生物碱部分及黄
类化合物结构复杂，很难进行分
荷叶为药食两用植物，是人 酮部分对 TG 均没有表现出明显
析，用酸水解法将黄酮苷水解为 们经过几千年的实践而得出的经 的 量 效 关 系 ， 且 出 现 大 剂 量 无
苷元后，用高效液相色谱法测定 验。从人们的健康出发，任何一 效 而 小 剂 量 有 效 的 现 象 。体外
苷元含量，以槲皮素为标准折换 种药物及保健品都应进行毒理学评 培养肝细胞合成 T C 实验显示：
指数、体脂及血脂都有明显下
取 因荷叶生物碱碱性较弱，不 3.1 降 血 脂 、 减 肥 作 用 明代戴 降，肥胖大鼠的体重受到明显抑
能 直 接 溶 解 于 水 ，但 能 与 酸 作 元礼的《秘传证治要决》中对于 制，与模型组比较具显著差异性
用 生 成 盐 溶 于 水 ，故 荷 叶 碱 可 荷 叶 减 肥 功 效 记 载 ：“ 荷 叶 服 （P ＜ 0 . 0 5 ，P ＜ 0 . 0 1 ）。而且
板，氯仿 － 醋酸乙酯 － 甲醇 － 水 含有不同荷叶成分的提取物对高脂 TC 下降 25. 6%~ 39. 3%，TG 下
（3 0 ∶4 0 ∶2 0 ∶1 0 ） 为 展 开 血症模型大鼠进行灌胃研究，结果 降 18. 9%~39. 2%，对 HDL－C 未
剂，检测波长为 2 7 2 n m 。结果 表明均有降脂的功效，只是不同成 见明显影响，但随 T C 、T G 的
降为明显，血清甘油三脂下降两 热处理[1 5 ]。荷叶的超临界 C O 2 许多著名的止血方剂，如《十药
乙醚、氯仿、乙酸乙酯等来提 取。其中常用的有乙醇（或甲 醇）提取法、热水提取法、碱 性水（或碱性稀醇）提取法、系 统溶剂提取法等。黄酮类化合物 的分离方法主要以色谱柱为主。
目前常用于荷叶总黄酮的提 取分离方法有以下几种：水提取 法、乙醇 / 水溶剂提取法、大孔 树脂吸附分离法、乙醇 / 水溶液加 微波和树脂提取分离法。 1.1.1 水提取法 实验结果显示荷叶 黄酮的提取率随着温度的升高及 提取时间的延长而提高，达到一 定程度后提取率的增加就不明 显。这个最佳的提取条件是提取 水量为荷叶的 30 倍，提取温度为 80℃，提取时间为 1.5h，采用此 方法的黄酮提取率为 1.57%[1]。 1.1.2 醇溶液提取法 实验结果表明 因荷叶中有水溶性的物质（由带 糖苷键的黄酮苷类及花色苷组 成）和易溶于乙醇的物质（主要 是黄酮苷元或黄酮醇类化合 物），以 5 0 % 乙醇溶液为溶剂， 分别以固液比 1 ∶25 和 1 ∶15 两 次浸提，沸点回流 2h，荷叶中黄 酮浸出率最佳[2 ]。