色素分层实验现象及原理

色素分层实验现象及原理

研磨液迅速倒入以及用棉塞是因为研磨要加入丙酮，丙酮很容易挥发，丙酮是用来溶解提取叶绿体中的色素，因为叶绿素能溶解在丙酮里。单层尼龙布是为了过滤充分吧，因为叶片的研磨有残渣。

分离要用的主要试剂是层析液。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿憨氦封教莩寄凤犀脯篓体中的色素在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。

层析分离叶绿体中的色素：将纸条画有滤液细线的一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中，否则会使色素溶解而导致试验失败。层析液是挥发性较强的有机溶剂，并且具有一定的毒性，所以在操作中要尽量用培养皿盖住烧杯口。

观察实验结果：最后滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a 和叶绿素b。

该实验属于分配层析，纸层析。纸层析是以滤纸为惰性支持物。滤纸纤维和水有较强的亲和力，能吸收22％左右的水，而且其中6~7％的水是以氢键形式与纤维素的羟基结合，在一般条件下较难脱去，而滤纸纤维与有机溶剂的亲和力甚弱，所以一般的纸层析实际上是以滤纸纤维的结合水为固定相，以有机溶剂为流动相，当流动相沿纸经过样品（这里为叶绿素）时，样品点上的溶质在水和有机相之间不断进行分配，一部分样品随流动相移动，进入无溶质区，此时又重新分配，一部分溶质由流动相进入固定相（水相）。随着流动相的不断移动，各种不同的部分按其各自的分配系数不断进行分配，并沿着流动相移动，从而使物质

得到分离和提纯。