地中海贫血基因检测的临床应用
血红蛋白电泳联合地中海贫血基因检测在地中海贫血早期诊断中的应用价值及准确性分析
CHINESE COMMUNITY DOCTORS 地中海贫血是一种隐性基因遗传疾病，又称之为珠蛋白生成障碍性贫血、海洋性贫血，具有危害严重、发病率高、分布范围广等特点，早期可因为遗传基因缺陷导致血红蛋白肽链的完全受抑制或合成部分受抑制，进而引起病理状态或贫血状态，若得不到及时有效治疗，可严重影响日后生活质量和生命安全。
为了尽早治疗，还需注重早期诊断工作[1]。
目前诊断正确率较高的一项技术为基因检测，虽具有较高诊断价值，但价格昂贵、操作繁琐，且对设备要求较高，导致难以广泛开展，随着相关研究增多，临床学者发现血红蛋白电泳分析可发挥一定作用，包含毛细管电泳法、醋酸纤维薄膜电泳法、琼脂糖凝胶电泳法，可更好地发现机体异常现象[2]。
而本文进一步探索血红蛋白电泳联合地中海贫血基因检测在地中海贫血中的应用价值，现报告如下。
资料与方法选取2018年3月-2019年10月健康体检者85例，作为对照组；选取同期疑似地中海贫血患者85例，作为观察组。
观察组男44例，女41例；年龄35～74岁，平均(52.49±13.54)岁；体质量52～68kg，平均(60.48±5.49)kg。
对照组男43例，女42例；年龄34～75岁，平均(52.28±13.31)岁；体质量51～69kg，平均(60.55±5.67)kg。
两组一般资料比较，差异无统计学意义(P ＞0.05)，具有可比性。
纳入标准：①各项资料齐全；②本研究经伦理委员会批准。
排除标准：①镰状细胞贫血、遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、小细胞低色素性贫血等其他类型溶血性贫血者；②其他系统性疾病者；③存在抵触情绪。
方法：(1)血红蛋白电泳：抽取受检者5mL 空腹静脉血，进行乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝后保持5000r/min 进行离心，维持5min，离心半径13.5cm，随后采用10倍体积的0.9%氯化钠溶液进行洗涤，反复进行3次血浆祛除，完成后取10μL 红细胞加入溶血液(130μL)中，震荡混匀10s 后保持5min 的室温培育。
基因检测技术在地中海贫血诊断中的意义
于基因的点突变，少数为基因缺失；α 珠蛋白生成障碍性贫
二分之一的机会成为轻型贫血患者，四分之一的机会成为中
血（ α 地中海贫血） 。 大多数 α 珠蛋白生成障碍性贫血（ 地
型或重型贫血患者。 鉴于本病缺少根治的方法，临床中、重
病理相当复杂，已知有 １００ 种以上的 β 基因突变，主要是由
轻型或轻型地贫患者，子女将有四分之一的机会完全正常、
血胎儿的价值分析［ Ｊ］ ．中国当代医药，２０１５（１０） ：４－６．
［５］ ．唐爽．绵阳地区孕前人群地中海贫血基因型分布情
况［ Ｊ］ ．医药前沿，２０１８（２６） ：３９－４０．
作者简介：
朱林，三台县人民医院。
但输血治疗后的血液学检查会与实际结果有所不同。 所以
进行遗传学和分子生物学检查才能最后确诊。 遗传学检查
可确定为纯合子、杂合子以及双重杂合子等。
·１７４·
参考文献：
［１］ 陈建文，叶菀华，李颖清． 彩色多普勒在早孕期诊断
重度 α 地中海贫血胎儿中的应用［ Ｊ］ ． 中国继续医学教育，
２０１７（９） ：８６－８９．
列一种或数种方法给予治疗。 输血和去铁治疗，在目前仍是
散发病例，北方则少见。 它的医学专用名称是珠蛋白生成障
重要治疗方法之一。
碍性贫血又称海洋性贫血，是一组遗传性溶血性贫血疾病。
地中海贫血由于遗传的基因缺陷致使血红蛋白中一种
或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所导致的贫血或病理
（１） 注意休息和营养，积极预防感染，适当补充叶酸和维
基因检测技术在地中海贫血诊断中的意义
朱 林
地中海贫血病例广泛分布于世界许多地区，东南亚即为
轻型地贫无需特殊治疗。 中间型和重型地贫应采取下
β-地中海贫血基因检测(PCR-反向点杂交法)
pcr扩增
DNA提取
利用特定的试剂从血细胞中提取出DNA。
pcr扩增
使用聚合酶链式反应（PCR）技术对DNA进行扩增，使其数量增加，便于后续 的检测。反向点Fra bibliotek交制备探针
将目标基因序列设计成特定的探针，并固定在尼龙膜上。
杂交反应
将扩增后的DNA与固定在膜上的探针进行杂交，通过碱基互 补配对原则，将目标基因序列特异性地结合在膜上。
纳米技术
利用纳米材料和纳米技术提高检测的灵敏度和特异性，降 低检测误差。
要点二
基因组编辑技术
利用CRISPR-Cas9等基因组编辑技术，对β-地中海贫血基因 进行精确编辑和修复，从根本上治疗地中海贫血。
临床应用的拓展
早期筛查
将β-地中海贫血基因检测纳入新生儿筛查 计划，实现早期发现和干预，降低疾病对 患儿的影响。
β-地中海贫血基因检测(pcr反向点杂交法)
• β-地中海贫血基因检测介绍 • pcr-反向点杂交法介绍 • β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点
杂交法)流程 • β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点
杂交法)的临床意义
• β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点 杂交法)的未来发展
01
β-地中海贫血基因检测介绍
03
耗时长：需要进行PCR扩增和杂交反应， 整个过程需要一定时间。
04
对实验条件要求高：需要严格控制实验条 件，避免交叉污染和假阳性结果。
03
β-地中海贫血基因检测(pcr-反 向点杂交法)流程
样本采集和处理
血液样本采集
从患者静脉抽取适量血液，用于 后续的基因检测。
样本处理
将采集的血液进行离心，分离出 血浆和血细胞，保留血细胞用于 后续的DNA提取。
地中海贫血基因检测临床应用
流行情况
疾病概述
第一章
省份
携带率（%）
α-地贫
β-地贫
合计
广西
17.6
6.4
24.0
广东
13.3
4.5
16.8
云南
9.8
7.3
17.1
海南
12.7
2.7
15.4
贵州
4.2
5.1
9.3
香港
7.3
1.2
8.5
重庆
5.2
2.0
7.2
江西
3.5
2.9
6.4
地中海贫血基因检测临床应用
C O N T E N T S
目 录
地中海贫血疾病概述地中海贫血的分类及临床表现地中海贫血的筛查与诊断地中海贫血的遗传咨询与产前诊断
SECTION TITLE
疾病概述
01
地中海贫血
地中海贫血是由于珠蛋白基因缺失或突变导致血红蛋白中的某种珠蛋白链合成障碍，造成α链或β链合成失去平衡而导致的溶血性贫血。是一种典型的血红蛋白病。根据合成障碍的肽链不同，可将地中海贫血分为α-地贫和β-地贫。
疾病分类
第二章
α-地贫
a2
a1
a2
a1
1
Exon 1 Exon 2 Exon 3
CD125 (CTG>CCG or Leu>Pro )
CD142 (TAA>CAA or Thr>Gln)
CD122(CAC>CAG,or His>Gln)
鼓励县、市妇保院申请试点单位试点单位需具备血红蛋白电泳初筛能力试点单位筛查及诊断费用由省、市、县财政统一拨款
血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测对地中海贫血诊断价值
血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测对地中海贫血诊断价值1. 引言1.1 研究背景地中海贫血，又称地中海贫血症，是一种常见的遗传性血液疾病。
在地中海地区及其周边地区，地中海贫血患病率相对较高，因此被称为地中海贫血。
地中海贫血主要包括地中海贫血型、地中海贫血β地中海贫血及δ地中海贫血三种类型。
地中海贫血还包括地中海贫血E型和地中海贫血H型。
地中海贫血是由基因突变引起的血红蛋白合成障碍所致，患者通常表现为贫血、溶血、脾大等症状。
目前，常规的地中海贫血诊断方法主要包括临床表现、红细胞形态学、血清学检测和地中海贫血基因检测等方法。
单一的诊断方法存在一定局限性，对于一些特殊类型的地中海贫血可能无法准确诊断。
血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测成为了一种新的诊断方法，通过综合利用血红蛋白电泳和地中海贫血基因检测的优势，可以提高地中海贫血的诊断准确性和敏感性。
本研究旨在探讨血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测对地中海贫血的诊断价值，为临床地中海贫血的早期诊断和治疗提供参考依据。
1.2 研究目的地中海贫血是一种遗传性血液病，严重影响患者的健康和生活质量。
本研究旨在探讨血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测对地中海贫血的诊断价值，深入了解这一联合检测方法在临床实践中的应用情况，为地中海贫血的早期诊断和个体化治疗提供更准确的依据。
通过探究血红蛋白电泳和基因检测的原理与方法，我们希望能够揭示这两种检测技术的互补作用和优势，为临床医生提供更全面、准确的诊断结果。
我们还将研究地中海贫血的临床特征，探讨血红蛋白电泳与地中海贫血基因联合检测在诊断中的独特优势，为地中海贫血患者的个体化治疗和预防提供可靠的依据，希望通过本研究为地中海贫血的诊断和治疗进一步提升水平，为患者带来更好的医疗体验和生活质量。
1.3 研究意义地中海贫血是一种遗传性疾病，临床上表现为贫血、黄疸、脾大等症状，严重影响患者的生活质量。
随着基因检测技术的不断发展，血红蛋白电泳及地中海贫血基因检测联合应用在地中海贫血的诊断中具有重要意义。
地中海贫血基因检测研究进展
地中海贫血基因检测研究进展施建刚广西壮族自治区贵港市人民医院检验科，广西贵港 537100[摘要] 地中海贫血在临床上也称为“海洋性贫血”，是一组遗传性溶血性贫血疾病。
根据流行病学的相关调查数据显示，地中海贫血的高发区域为东南亚，在我国多分布于两广、四川等地。
目前，地中海贫血基因检测是预防地中海贫血胎儿活产的主要检测方法，也是诊断出地中海贫血疾病的重要手段。
而随着各类检测技术的快速发展，地中海贫血基因检测技术质量也在不断提高，逐渐应用于临床诊断中。
[关键词] 地中海贫血；基因；检测；进展[中图分类号] R556 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2020）23-50-04Research progress of thalassemia gene detectionSHI Jian'gangDepartment of Clinical Laboratory, Guigang City People's Hospital, Guangxi, Guigang 537100, China[Abstract] Thalassemia, also known as 'marine anemia', is a group of hereditary hemolytic anemia diseases. According to epidemiological survey data, the high incidence area of thalassemia is Southeast Asia, and it is mostly distributed in Guangdong, Guangxi and Sichuan, etc. of China. At present, thalassemia gene detection is the main detection method to prevent live birth of thalassemia fetus, and it is also an important method to diagnose thalassemia disease. With the rapid development of various detection technologies, the quality of thalassemia gene detection technology is also constantly improving and gradually applied to clinical diagnosis.[Key words] Thalassemia; Gene; Detection; Progress[基金项目] 广西壮族自治区卫生健康委员会科研课题（Z20190320）。
血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测对地中海贫血诊断价值
血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测对地中海贫血诊断价值地中海贫血是一种常见的遗传性血液病，主要发病于地中海沿岸地区。
这种疾病的特点是患者的红细胞中存在异常的血红蛋白，导致贫血等症状。
对于地中海贫血的确诊，血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测被认为是一种非常有价值的诊断方法。
本文将介绍血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测的原理、操作流程及其对地中海贫血诊断的价值。
血红蛋白是一种由蛋白质和铁组成的红色血液色素，它可以将氧气输送到人体各个组织和细胞中。
血红蛋白的结构是由四个亚基组成，其中包括两个α-链和两个β-链。
在地中海贫血患者中，由于这些链的基因突变，导致血红蛋白的正常结构发生变化，进而导致患者出现贫血等症状。
血红蛋白电泳是一种通过电泳法对血红蛋白的性质进行检测的方法。
其基本原理是根据血红蛋白在不同电场下的迁移速度不同，从而分离出不同类型的血红蛋白。
通过血红蛋白电泳检测，可以清晰地观察到患者血液中异常的血红蛋白类型，进而帮助医生进行地中海贫血的初步诊断。
除了血红蛋白电泳外，地中海贫血基因联合检测也是一种重要的诊断手段。
在地中海贫血患者中，常见的基因突变类型包括α-地中海贫血和β-地中海贫血。
通过对患者进行基因检测，可以直接发现患者体内的血红蛋白基因是否存在异常，从而确定患者是否患有地中海贫血。
这种基因检测方法可以帮助医生更加准确地进行地中海贫血的诊断，尤其是在一些症状不典型的患者中具有很大的价值。
需要注意的是，血红蛋白电泳及地中海贫血基因联合检测在一些特殊情况下可能会产生假阳性或假阴性的结果。
在进行这种检测时，需要结合临床症状和其他相关检查结果进行综合分析，以减少诊断错误的可能性。
由于这种检测方法的操作复杂性，需要专业的医疗人员进行操作，同时还需要配备相应的设备和试剂。
在开展这种检测时，需要具备一定的技术和设备条件，以保证检测结果的准确性和可靠性。
孕检地中海贫血3385例筛查结果分析及临床意义
轻型为 Ｈ ｂ Ａ ２介 于 ３ ． ５ ％～ ８ ％， Ｈｂ Ｆ正 常 或 轻 度增 加
地 贫基 因携带 率为 ８ ． ５ ３ ％， Ｂ 一 地 贫 基 因携 带 率 为 红蛋 白带 。若 Ｈ ｂ Ａ ２ ≤２ ． ０ ％， 或 出现 异常血 红 蛋 白带 ２ ． ５ ４ ％ｔ ” 。一方 面 由于 血红 蛋 白的珠 蛋 白肽 链合 成 障
碍， 另 一 方 面 由 于合 成 速率 降低 致 使 血 红 蛋 白的成 ３ ． ５ ％或 出现 异 常血红 蛋 白带 （ Ｈ ｂ Ｆ ＞ ２ ． Ｏ ％） ， 则判 为 Ｂ 一
（ 不超过 ５ ％） ； 中间 型为 Ｈｂ Ｆ介 于 ５ ％～ ３ ０ ％； 重 型 为 Ｈ ｂ Ｆ介 于 ３ ０ ％一 ９ ０ ％。 若 出现 其他 异 常血红 蛋 白区带 则判 为异 常 血红 蛋 白病阁 。 １ ． ３基 因诊 断 基 因诊 断是 地贫 诊 断 的金 标 准 ， 对 于 初 筛 可疑 阳性 标 本进 行 基 因检 测 ． 用 美 国应 用 生 物
布 于世 界 多地 ， 东 南亚 是 高发 地 之一 。我 国 以广 东 、 广西 、 海南 等 沿 海 地 区人 群 携 带率 最 高 ， 广东省 仪 一 的Ｇ ２ ６全 自动琼 脂糖 电泳 仪 。地 贫诊 断 Ｈｂ电泳标 准： 成人男 女 Ｈ ｂ Ａ ２为 ２ ． Ｏ ％～ ３ ． ５ ％， 并 且未 出现异常血 （ Ｈ ｂ Ｈ、 Ｈ ｂ Ｂ ａ ｒ ｔ ｓ ） ， 判为 ０ ｌ 地贫表 型 阳性 ； 若 Ｈ ｂ Ａ ２ ＞ 地贫 表 型 阳性 。Ｂ 一 地 贫 按 病情 轻 重 可 分 如下 ３型 ：
β-地中海贫血基因检测(PCR-反向点杂交法)
【原理】
PCR技术原理
DNA的半保存复制是生物进化和传代的重要途径。 双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链， 在DNA聚合酶的参与下，依据碱基互补配对原则复 制成同样的两分子挎贝。
PCR技术的根本原理类似于DNA的自然复制过程，其 特异性依靠于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
【原理】
PCR技术原理
【操作步骤】
1.DNA猎取〔已预备好了〕
2.PCR扩增〔承受试总体积25微升
参加 2ul DNA溶液
反响体系各组分的用量见理论课内容
PCR扩增条件
50℃， 95℃， 94℃， 55℃， 72℃， 72℃，
15min 10min 1min 30sec 30sec 7min
PCR由变性--退火--延长三个根本反响步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右肯定时间后， 使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为 单链，以便它与引物结合，为下轮反响作预备；
②模板DNA与引物的退火〔复性〕：模板DNA经加热变性成单 链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列 配对结合；
反向斑点杂交技术
反向斑点杂交(reverse dot blot，RDB)是Saiki等提 出的一种斑点杂交技术，该技术承受固化了多种特异 性探针的膜条与扩增靶序列杂交，使一次杂交即可同 时筛查被检DNA中的多种突变。这种以膜上固定探针取 代固定靶DNA的方式，转变了传统杂交法一次只能检测 一种突变的模式，具有快速、简便、高敏感度和特异 性强的特点，尤其在基因突变检测、基因分型、病原 体的检测等领域有其独特的优势。
71-72N 17N
βEN
71-72M 17M
βEM
HPLC与Zeta链蛋白检测在地中海贫血筛查中的临床应用价值
ＨＬ Ｐ ｃ对 Ｂ地 贫筛 查 有很 ・
高 临 床 价 值 ， ． 贫 筛 查 亦 有 一 定 作 用 ；ｅ 对 地 ｚｔ 蛋 白检 测 可 快 速 、 确 检 测 出 ａ地 贫 东 南 亚 缺 ａ链 准 ・
失型 。
关 键词 ： 效 液 相 色谱 法 ；ｅａ链 蛋 白检 测 ； 中海 贫 血 高 ｚｔ 地 ＨＰ Ｃ ａ ｄｚ ｔ ０ ｉ ｈ ｉｓＡｎ Ｉ ｉ ｉ ｈ ｌｓｅ ｌ ｉｇ ｏＩ Ｌ ｎ ｅａＧｌｂｎ Ｃ ａＩ ａｙ ｓ ｎＴ ａａｓＩｉ Ｄａ ｎ ｓ ｌ ｓ ｌａ ｓ
Ｃ￡ Ⅱ ￡ ｂ咖 ｏ ｌ眦 ｎ Ｍｅ 记 Ｃ ｌ ． ｏ １ １ ２． ａ ｔ ｚ ｎｒ ｎ ｆＨＩ ｄ ｏｋ Ｈ口ｋｕ５ ｏ ０ Ｃｈｎ
儿 ， ｍｆ ． ｎ ｍ 眦 Ｑ （ ｅ
Ａｂ ｔａ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ０ ｊ ｅ Ｔ ｖ ｌａ ｌ ｉａ ｖｌｅ０ Ｐ Ｃ ａ ｄｚｔ ｇ ｂｎｃ ａ ｓ ｎｔａａｓｍｉ ｄａ ｎ － ｓ ｃ ： ｂ ｅ ｖ ｂ ｅａｕ ｔ ｃｉ ｃ ｌ ａ ｆ Ｌ ｎ ｅ ｌ ｉ ｈ ｉ ｌ ｅ ａ ｉ ｏ ｒ ｃ ｅ ｎ ｕ Ｈ ａ ０ ｎｉ ｈ ｓ ｇ
二代基因测序技术在地中海贫血筛查中的应用
二代基因测序技术在地中海贫血筛查中的应用左欣曌;苏萍;于小雯;姚茜;徐竞;俞丽丽;张碧容;樊晓蓉;程丽历;胡珊;易萍【期刊名称】《实用妇产科杂志》【年(卷),期】2022(38)2【摘要】目的:了解重庆地区育龄人群地中海贫血基因携带率、基因类型及分布特征,探讨更全面准确的地中海贫血筛查方案。
方法:对2018年11月1日至2020年8月30在重庆医科大学附属第三医院行常规产前检查的孕妇及其配偶行常规血液学筛查及二代基因测序技术,并进行地中海贫血基因检测。
结果:1841例受检者中确诊为地中海贫血的110例,地中海贫血基因筛查阳性率约为5.98%(110/1841),其中α-地中海贫血占比64.55%,β-地中海贫血占比35.45%;检测出IVS-I-38(C>T)杂合,-50(G>A)β+杂合,5′UTR+43 to+40(-AAAC)β+杂合,Codon53(-T)杂合4种共6例不在23种常规检测范围内的突变型;新发现了HBB:c.-147G>A(5UTR)杂合,HBA2:c.301-6G>A(intron)杂合2例新基因突变病例。
结论:二代基因测序技术筛查地中海贫血准确和高效,可为地中海贫血相关诊断流程、遗传咨询、生育指导提供一部分有价值的理论依据。
【总页数】4页(P146-149)【作者】左欣曌;苏萍;于小雯;姚茜;徐竞;俞丽丽;张碧容;樊晓蓉;程丽历;胡珊;易萍【作者单位】重庆医科大学附属第三医院妇产中心【正文语种】中文【中图分类】R714.254【相关文献】1.半导体基因测序技术筛查地中海贫血的临床应用价值2.高通量测序技术在新生儿地中海贫血基因筛查中的应用3.高通量测序技术在新生儿地中海贫血基因筛查中的应用4.芯片捕获二代测序技术在新生儿疾病筛查中的应用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
地中海贫血的基因诊断与产前筛查
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ选择性终止妊娠
对于确诊患有严重地中海贫血的胎 儿，父母可以选择性终止妊娠，避 免患儿出生后面临的痛苦和负担。
优生优育
产前筛查有助于实现优生优育，提 高人口整体遗传素质。
产前筛查的策略
01
02
03
综合评估
结合家族遗传史、临床表 现、实验室检查等多方面 信息进行综合评估。
基因检测
采用先进的基因检测技术 ，如PCR、基因芯片等， 对孕妇及胎儿进行地中海 贫血相关基因检测。
地中海贫血的基因诊断与产前筛查
汇报人：XXX 2023-11-23
目 录
• 地中海贫血概述 • 基因诊断的原理与技术 • 产前筛查的策略与流程 • 案例分析与讨论 • 前景展望
01
地中海贫血概述
定义和类型
定义
地中海贫血是一种遗传性血液疾病， 主要表现为贫血、骨骼变形和发育不 良等症状。它是由基因突变导致血红 蛋白合成异常引起的。
4. 胎儿基因检测
在孕妇同意的前提下，通过无创产前检测（NIPT）或 羊膜腔穿刺等方式获取胎儿遗传物质，进行地中海贫血 基因检测。
5. 结果解读与遗传咨询
对检测结果进行解读，评估胎儿患病风险，为孕妇提供 针对性的遗传咨询和建议。
6. 后续跟进与关怀
对确诊患有地中海贫血的胎儿家庭，提供心理支持、生 育建议和后续治疗指导等综合关怀服务。
联合筛查
与其他遗传性血液病进行 联合筛查，提高筛查准确 性和效率。
地中海贫血的产前筛查流程
1. 遗传咨询
对孕妇进行遗传咨询，了解家族遗传史和个人病史，评 估地中海贫血风险。
2. 临床检查
对孕妇进行临床检查，观察是否有地中海贫血相关症状 。
地贫基因检测实验报告(3篇)
第1篇一、实验背景地中海贫血（Thalassemia）是一种由于珠蛋白基因缺陷引起的遗传性溶血性贫血病。
根据珠蛋白基因突变的不同，地中海贫血可分为α-地中海贫血和β-地中海贫血两大类。
本实验旨在通过分子生物学技术对疑似地中海贫血患者进行基因检测，以确定其基因型，为临床诊断和治疗提供依据。
二、实验目的1. 确定疑似地中海贫血患者的基因型。
2. 为临床诊断和治疗提供科学依据。
三、实验材料1. 样本：疑似地中海贫血患者的血液样本。
2. 试剂：DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、DNA测序试剂盒等。
3. 仪器：PCR仪、电泳仪、测序仪等。
四、实验方法1. 样本DNA提取：采用DNA提取试剂盒提取疑似地中海贫血患者的血液样本DNA。
2. PCR扩增：根据α-地中海贫血和β-地中海贫血的基因突变位点，设计特异性引物，进行PCR扩增。
3. PCR产物检测：通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，观察条带情况。
4. DNA测序：对扩增产物进行DNA测序，确定基因突变位点。
5. 基因型分析：根据测序结果，分析疑似地中海贫血患者的基因型。
五、实验结果1. 样本DNA提取：成功提取疑似地中海贫血患者的血液样本DNA。
2. PCR扩增：成功扩增出α-地中海贫血和β-地中海贫血的基因片段。
3. PCR产物检测：电泳结果显示，扩增产物大小与预期相符。
4. DNA测序：测序结果显示，疑似地中海贫血患者的基因存在突变。
5. 基因型分析：根据测序结果，确定疑似地中海贫血患者的基因型为α-地中海贫血杂合子。
六、讨论与分析1. α-地中海贫血是一种常染色体隐性遗传病，主要由于α-珠蛋白基因缺陷引起。
本实验通过PCR和DNA测序技术，成功检测出疑似地中海贫血患者的基因突变，为临床诊断提供了依据。
2. α-地中海贫血的基因型可分为纯合子和杂合子。
本实验结果显示，疑似地中海贫血患者的基因型为α-地中海贫血杂合子，提示其可能表现为轻型α-地中海贫血或无症状携带者。
全自动血红蛋白分析仪在地中海贫血筛查诊断中的应用
全自动血红蛋白分析仪在地中海贫血筛查诊断中的应用马升俊;肖永君;韦子斌;许成良【摘要】Objective To investigate the application of full-automatic hemoglobin analyzer using high performance liquid chromatography (HPLC) in the screening and diagnosis of thalassemia.Methods The hemoglobin of 5738 testing samples were analyzed by using full -automatic hemoglobin analyzer and its supplementary reagents.830 samples screened out with abnormal results were conducted gene detection of thalassemia by using multiplex polymerase chain reaction (PCR) and reverse dot blot (RDB), and its coincidence rate was compared.Results In the 5738 subjects, 830 cases were abnormal with a detectable rate of 14.46%, and 480 cases of them were suspected as α thalassemia (57.83%), 316 cases were suspected as β thalassemia (38.07%), 11 cases were suspected as β compound α tha lassemia (1.33%).13 cases detected abnormal zone with HbH, HbE in 8 cases, HbQ in 2 cases, respectively accounting for 1.57%, 0.96% and 0.24%.After thalassemia gene analysis, 743 patients were diagnosed with diagnosis rate of89.52%.413 eases were a thalassemia (55.59%), the coincidence rate was 86.04%.313 cases were β thalassemia (42.13%), the coincidence rate was 99.05%.17 cases were β compound a thalassemia (2.29%) with the coincidence rate of 90.91%.Conclusion The full-automatic hemoglobin analyzer using HPLC technology has a good compliance in the diagnosis of β thalassemia, and it has certain assistance in the diagnosis of αthalassemia.It can be used for the screening and diagnosis of thalassemia.%目的探讨采用高效液相色谱法(HPLC)的全自动血红蛋白分析仪在地中海贫血(简称地贫)筛查诊断中的应用.方法用全自动血红蛋白分析仪及其配套试剂对5738例受检样本进行血红蛋白分析,对筛查出的830例异常结果的样本采用多重聚合酶链反应(PCR)和反向斑点杂交法(RDB)进行地贫基因检测,比较其符合率.结果 5738例受检者中,共筛查出830例异常,检出率为14.46％；其中,拟诊α地贫480例,占57.83％;拟诊β地贫316例,占38.07％；拟诊β复合α地贫11例,占1.33％；检出异常区带HbH 13例,HbE 8例,HbQ2例,分别占1.57％、0.96％和0.24％.经地贫基因分析,确诊743例,确诊率为89.52％；其中,α地贫413例,占55.59％,符合率为86.04％;β地贫313例,占42.13％,符合率为99.05％;β复合α地贫17例,占2.29％,符合率为90.91％.结论采用HPLC技术的全自动血红蛋白分析仪对β地贫的诊断有良好的符合性,对α地贫有一定的提示作用,可用于地贫的筛查诊断.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2013(010)009【总页数】3页(P92-93,96)【关键词】地中海贫血;高效液相色谱法;血红蛋白分析;基因诊断【作者】马升俊;肖永君;韦子斌;许成良【作者单位】南宁市第二人民医院检验科,广西南宁530031【正文语种】中文【中图分类】R556.61地中海贫血简称地贫，是一种常染色体显性遗传性疾病，是由于珠蛋白基因缺失或突变导致珠蛋白肽链合成障碍引起的溶血性贫血。
全自动生化分析仪法测定红细胞脆性的性能研究及在地中海贫血筛查中的应用
全自动生化分析仪法测定红细胞脆性的性能研究及在地中海贫血筛查中的应用冯志刚;梁爱芬;雷亚利;华仙丽;隋洪【摘要】目的应用ADVIA 2400全自动生化分析仪和武汉市长立生物技术有限责任公司生产的红细胞脆性(EFT)测定试剂盒(直接比色法)组成的检测系统,测定红细胞渗透脆性,研究自动生化仪方法学参数并验证其对地中海贫血筛查的临床性能.方法选取2016年4月我院门诊、住院患者静脉血标本共计99例,以基因检测支持的临床诊断为金标准,同时用长立试剂与实验室现用的广州米基公司红细胞渗透脆性检测(一管法)的结果进行比较.结果长立直接比色法筛查地贫的敏感度、特异度、正确率分别为85.7％、77.6％、78.8％;米基一管法筛查地贫的对应结果分别为78.6％、94.1％、91.9％.两种方法对地贫的筛查Kappa检验值为0.54,结论为一致性中等.表明长立直接比色法与米基一管法均适用于临床对地贫的筛查.结论全自动生化分析仪长立直接比色法适用于地中海贫血筛查,性能指标符合临床要求,同时能提高工作效率,减少人为误差,简便易行,适宜向地中海贫血发病率高的广大地区推广使用.【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2017(035)006【总页数】3页(P893-895)【关键词】地中海贫血;红细胞脆性试验;比浊法;全自动生化分析仪【作者】冯志刚;梁爱芬;雷亚利;华仙丽;隋洪【作者单位】东莞康华医院检验科,广东东莞 523080;东莞康华医院检验科,广东东莞 523080;东莞康华医院检验科,广东东莞 523080;东莞康华医院检验科,广东东莞 523080;东莞康华医院检验科,广东东莞 523080【正文语种】中文【中图分类】R556.6+1;R446.11+2地中海贫血是人类最常见的单基因遗传病之一，全世界约有1亿以上人口携带地贫基因[1，2]。
我国南方尤其海南、贵州、广西、云南、广东、江西等地区为高发区[3-7]。
地中海贫血筛查及地贫基因分型在产前诊断中的应用
地中海贫血筛查及地贫基因分型在产前诊断中的应用摘要：目的探讨血常规筛查、血红蛋白电泳、地贫基因诊断在孕产妇中的应用。
方法随机抽取2018年1月至2018年6月来我院产检的1000名孕妇，以地贫基因诊断结果为金标准，对血常规指标（MCV、MCH）以及血红蛋白电泳对诊断地中海贫血的检出率进行比较，并且分析地中海贫血的基因类型。
结果 1000份标本中，确诊为地中海贫血的有71例，其中缺失型α地贫基因：-SEA缺失型杂合子31例，-α3.7缺失型杂合子19例，-α4.2缺失型杂合子2例；β地贫基因：CD41-42突变杂合子9例，IVS-Ⅱ-654突变杂合子3例，-28突变杂合子3例，CD17突变杂合子1例；非缺失型α地贫基因：QS突变杂合子1例，WS突变杂合子1例。
αβ复合型地中海贫血1例，为-SEA/CD41-42基因型。
血常规指标（MCV、MCH）异常，地贫检出率为63%；血红蛋白电泳异常，地贫检出率为49%；二者联合，地贫检出率为91%。
结论地中海贫血诊断在产前诊断中具有重要意义，血常规参数与血红蛋白电泳相结合，地贫的筛查率和检出率均会提高。
关键词地中海贫血；血常规参数；血红蛋白电泳；地贫基因地中海贫血是由于血红蛋白的珠蛋白链有一种或几种的合成受到部分或完全抑制所引起的一组遗传性溶血性贫血【1】。
其中，α珠蛋白基因缺失或缺陷，导致α珠蛋白链合成减少或缺乏，称为α地中海贫血。
β珠蛋白基因缺陷导致β珠蛋白链合成减少或缺乏，称为β地中海贫血。
α地中海贫血根据发生的不同程度分为静止型或标准型α地中海贫血、血红蛋白H(HbH)病、血红蛋白Bart胎儿水肿综合征。
β地中海贫血是常染色体显性遗传，可分为轻型、中间型、重型三种。
广东是地中海贫血的高发地区之一，因此，对孕妇进行地贫筛查，对地中海贫血的早期预防具有重要意义。
1资料、方法1.1对象 2018年1月-2018年6月来我院产检的1000名孕妇，年龄在21-40岁之间，平均年龄31岁，对其血常规参数(MCV、MCH)，血红蛋白电泳，地贫基因结果进行分析。
500例孕妇地中海贫血筛查与产前诊断分析
500例孕妇地中海贫血筛查与产前诊断分析1. 引言1.1 背景地中海贫血是一种常见的遗传性疾病，主要分布在地中海沿岸国家和相邻地区，如意大利、希腊、土耳其和中东地区。
这种疾病包括地中海贫血和地中海型地中海贫血。
地中海贫血是由血红蛋白合成障碍引起的一组遗传性血液病，主要表现为患者患有不同程度的贫血、黄疸、脾肿大等症状。
地中海贫血的发病率在地中海沿岸国家较高，而在其他地区也逐渐增加。
孕妇地中海贫血不仅会影响孕妇的健康，还会对胎儿造成一定风险，因此孕妇地中海贫血的筛查和诊断显得尤为重要。
通过对500例孕妇进行地中海贫血筛查和产前诊断的分析，可以更好地了解该疾病在孕妇中的发病情况和临床表现，为未来的预防和治疗提供重要参考。
【背景】部分结束。
1.2 目的【引言】孕妇地中海贫血是一种常见的遗传性血液病，对孕妇和胎儿的健康都会造成一定的影响。
本篇文章的目的在于分析500例孕妇地中海贫血的筛查与产前诊断结果，探讨地中海贫血在孕妇群体中的流行情况和影响，为临床医生提供更好的诊疗方案和预防措施。
通过对这些病例的统计和分析，我们希望能够揭示地中海贫血的流行病学特征，探讨目前筛查方法的有效性和局限性，以及探讨对孕妇和胎儿的风险评估与处理方法。
我们也将探讨产前诊断在预防地中海贫血中的重要作用，为未来临床研究提供参考方向和建议。
通过本研究的对比和分析，我们希望为改善孕妇地中海贫血的预防和诊疗提供更科学的依据，从而降低孕妇和胎儿受到地中海贫血影响的风险。
1.3 研究意义本研究的意义在于深入探讨孕妇地中海贫血筛查与产前诊断的重要性，旨在提高地中海贫血的早期发现率，减少患者和家庭的负担，降低孕妇和胎儿的风险，提高生育健康水平。
通过分析500例孕妇的筛查与产前诊断结果，可以为临床医生提供更准确的诊断依据，指导孕妇的治疗方案，并对未来地中海贫血的预防和管理提供参考。
研究还有助于拓展对地中海贫血患者的关注和关心，提高社会对该疾病的认知度，推动相关政策和措施的完善，为健康中国建设贡献力量。
地中海贫血诊治进展与我国现状
结论总的来说，地中海贫血的诊治进展为患者带来了新的希望和选择。然而， 在实际应用中仍需不断完善和提高。我们呼吁广大医务工作者、科研人员、政 策制定者和公众共同地中海贫血这一疾病，加强协作与交流，共同推进地中海 贫血诊治事业的发展。展望未来，随着科技的进步和研究的深入，我们有理由 相信，地中海贫血的治疗效果将越来越好，患者的生命质量也将得到显著提高。
研究不足
尽管中国南方地区地中海贫血的研究取得了一定的进展，但仍存在一些不足之 处。首先，在治疗方法方面，尽管基因治疗为地中海贫血的治疗提供了新的思 路，但其临床应用前景仍需进一步探索。目前，基因治疗仍存在安全性、有效 性等问题需要解决。此外，现有的治疗方法如输血和去铁治疗也面临着一些问 题，如铁过载等。
临床应用思考在实际应用中，地中海贫血的诊治仍面临诸多问题和挑战。首先， 由于地中海贫血的遗传特性，患者在出生时可能无法立即确诊，往往需要依靠 家族史和临床表现进行推断。其次，治疗方法的选择和疗效的评估需要综合考 虑患者的病情、年龄、性别、经济状况等多方面因素。针对这些问题，我们提 出以下解决方案：
3、优化治疗方案：对于地中海贫血患者，应根据其具体情况制定个体化的治 疗方案。例如，对于轻型患者，可采用补铁、祛铁等保守治疗；对于重型患者， 在条件允许的情况下，可考虑采用基因治疗、干细胞移植等先进治疗方法。
4、加强社会支持和心理辅导：地中海贫血是一种长期甚至终身性疾病，患者 需要长期治疗和。因此，社会各界应给予患者及其家庭更多的支持和关爱，同 时提供专业的心理辅导，帮助他们更好地应对疾病带来的心理压力。
广东省在防控地贫方面做了很多工作，首先就是婚前检查和产前诊断。通过对 准备结婚的男女进行地贫筛查，以及在怀孕期间进行基因检测，可以有效地预 防重型地贫患儿的出生。目前，广东省的婚前检查和产前诊断覆盖率已经达到 了95%以上。
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地区
地贫
携带率(%) β地贫 合计
广东 广西 四川
8.53 14.95
1.92
2.54 6.78 2.18
11.07 21.73
4.1
台湾
4.20
1.10
5.3
香港
5.02
3.41
8.43
Xu, et al. J Clin Pathol 2004, 57:517-22.
Cai, et al. Chi J Epidemiol 2002,23:281-5.
HbA2、 HbF
HbA2、 HbF
重型
中重度贫血
HbE、HbF
重型
中重度贫血
HbE、1H4bF
β地中海贫血血红蛋白组成
表现型 正常 静止型携带者 β THAL 轻型 β THAL 中间型 β THAL 重型
Hb A 正常 正常 降低 降低 降低
Hb A2 正常
Hb F 正常
.
正常
正常
正常或增加 正常或增加
16
.
地贫患者的困境
➢ 4000元：重型地贫患儿平均每月需4000元的治疗费用以维持生
命。成年人每月的治疗费用接近万元，每年治疗费用至少10万元，每例 重症地贫患儿出生给社会和家庭带来的经济负担高达100-300万元。
➢ 20岁：重型β地贫患儿需要终生输血治疗，平均存活年龄仅10岁左
右，得不有效治疗的重型地贫患儿很难活到20岁。
0.3～0.6 缺失3个或突变 α-/--，ααT/--
阳性
11
缺失4个 --/--
α-地贫血红蛋白比较
.
表型 Hb A Hb Bart’s Hb H
正常人
97-98%
静止型携带者 96-98%
轻型地贫症状 85-95%
Hb H 疾病
下降
0
0-2% (At birth)
2-8% (At birth)
正常或增加 增加
通常增加
增加
15
.
地贫的危害
➢ 轻度地贫患者无特别不良反应 ➢ 中、重度地贫患者有贫血症状，如浑身 无力、 肝脾肿大等，随着年龄增长会越来 越严重。 ➢ 重型α地贫患儿在出生24－48小时之内 死亡，而且产妇因胎儿水肿、大胎盘，极 易导致死产。 ➢ 重型β地贫以及部分中间型α地贫患者在 出生后半年左右出现进行性贫血，只能靠 输血维持生命，多在童年夭折。
点突变，病变基因 不成β肽链
点突变，仍可做成 β肽链
β肽链合成减少， βE肽链合成
β肽链合成减少， βS肽链合成
.
重型
重型或 中间型 重型或 中间型
轻型
轻型
重度贫血
取决于β基因缺失程 度和α基因代偿和度
一般重于β +/β+纯合子
无症状，偶然发现
无症状，偶然发现
HbF 99.6%
HbF、 HbA2
HbF、 HbA2
＜3个月
轻型或标准型 （α地贫1）
儿童，成人
中间型（HbH病 /CS 型HbH病）
儿童，成人
重型HbBart’s 胎儿水肿综合征）
胎儿
贫血程度
无
无或轻度
中度～重度
重度
.
黄疸
无
无
轻度～中度
无或轻度
肝脾肿大 血片RBC： 形态异常
血红蛋白电泳
HbF
无 正常 正常 正常
无或轻度 轻度 正常 正常
轻度～中度
重度
中度～重度
HbH带或伴 HbBart’s HbConstantSpring
正常或轻度减少
重度
大量HbBart’s 伴HbPortland
少量HbH
无
HbH包涵体 α/β
基因诊断
无
1∶1 缺失1个或突变 αα/α-，ααT/αα
无或可有
0.7～0.95 缺失2个或突变 αα/--或αα/αT-
强阳性
6
.
地中海贫血定义及分类
根据珠蛋白肽链基因（简称α基因或β基因）缺失、缺陷或 基因突变和珠蛋白肽链合成障碍的不同，可将地贫分为α型、 β型、δβ型和δ型四种，其中以α型和β型地贫较为常见。
7
人类血红蛋白的合成和演变
.
胚胎期
gower 1- ζ2ε2 gower 2- α2ε2 Portland- ζ2γ2
4
4
.
遗传性血红蛋白病三大类
♪地中海贫血 (地贫)（Thalassemias ）
常见为-地贫 和 -地贫
♪异常血红蛋白病
珠蛋白结构异常，绝大部分没有或有轻度临床诊断
♪遗传性持续性胎儿血红蛋白
珠蛋白的合成不随着胎儿的发育而发生改变，胎儿血 红蛋白持续表达。
5
.
地中海贫血定义及分类
地中海贫血（Thalassemia）简称地贫（Thal），是由于 血红蛋白的珠蛋白肽链基因突变或缺失，使某种珠蛋白肽 链合成障碍而致的一种遗传性慢性溶血性贫血。 血红蛋白分子是由珠蛋白+血红素组成，珠蛋白由两对（4 条）肽链构成。
Xβ Gene
Xβ Gene
13
β地中海贫血的基因型和临床类型
基因型
遗传型
β0/β0
纯合子
β+/β+
纯合子
β0/β+ 双重杂合子
β0/β
杂合子
β+/β
杂合子
β+/βE 双重杂合子
β+/βS 双重杂合子
分子遗传基础
临床类型
临床特点
Hb电泳
无β肽链合成
有少量β肽链合成
等位基因均有病 变，β肽链合成10%
➢ 造血干细胞：根治重型地贫患儿的唯一方法移植造血干细胞。费
2 1
2 1 2
2 1 2 1
2 1 2 1
2 1 2 1
.
血红蛋白正常
静止型： 1个 α缺失或 突变
轻型： 2个α基因 缺失或突 变
中间型（HbH 疾病）：3个 α 基因缺失或 突变
Hb Bart‘s： 3个 α 基 因缺失或 突变
10
α地中海贫血的临床特征
临床特点 发病年龄
静止型 （α地贫2）
.
1 地中海贫血基因检测的临床应用
.
一、地中海贫血
2
地中海贫血的地域分布
.
α-地贫分布
β-地贫分布
➢ 全球有3.5亿人为地中海贫血基因携带者（占总人口的2%） ➢ 中国南方高发地区人群携带率最高可达到24%
3
中国南方地贫基因携带率
在我国，地中海贫血主要在南方广东、广西、海南、四川、 重庆等省市发病率较高，以广西、广东最为严重。
<10% (At birth)
0 0 <2% 5-40%
Hb Bart‘s
0
70-80% (with 20% Hb Portland)
0-20%
12
β地中海贫血及基因型
两个基因正常 :纯合子 β Gene β Gene
一个正常，另一个 :杂合子 不正常
两个基因都不正常 :纯合子
.
β Gene
Xβ Gene
胎儿期
成人
HbF- α2γ2 HbA- α2β2
HbA- α2β2 HbA2- α2δ2 HbF- α2γ2
8
.
地贫血红蛋白的组成
正常成人血红蛋白（Hb）有三种：HbA(α2β2)( 2.5—3.5%)、 HbA2(α2δ2)(96.5-97.5%)、HbF(α2γ2)(0-1.0%)。
9
α地中海贫血及基因型